关键词： 2型糖尿病   糖尿病视网膜病变   环氧合酶-2(COX-2)   晚期糖基化终产物受体(RAGE)  

摘要： 目的:评估血清环氧合酶-2(COX-2)、晚期糖基化终产物受体(RAGE)对2型糖尿病(T2DM)患者发生糖尿病视网膜病变(DR)的诊断价值。方法:以2022年1月至2024年8月于本科室就诊的T2DM发生DR的患者118例118眼为DR组,未发生DR的T2DM患者75例75眼为T2DM组,另选取同期体检健康成人50例50眼为对照组。酶联免疫法检测血清COX-2、RAGE水平并进行比较;Logistic回归分析影响T2DM患者发生DR的因素;受试者工作特征曲线(ROC)评估血清COX-2、RAGE诊断T2DM患者发生DR的价值。结果:与对照组及T2DM组相比,DR组患者血清COX-2、RAGE水平显著升高,且T2DM组高于对照组(均P<0.05);相较于T2DM组患者,DR组患者T2DM病程较长,糖化血红蛋白及空腹血糖升高,高血压史占比增多(均P<0.05);T2DM病程长、有高血压史以及糖化血红蛋白、COX-2、RAGE水平升高是T2DM患者发生DR的危险因素(均P<0.05);血清COX-2、RAGE及二者联合诊断T2DM患者发生DR的AUC分别为0.828、0.819、0.907,联合诊断优于单独检测(Z二者联合-COX-2=3.220,P=0.001;Z二者联合-RAGE=2.734,P=0.006)。结论:T2DM发生DR患者血清COX-2、RAGE水平显著升高,其作为血清学指标诊断T2DM患者发生DR有较高的临床应用价值。

关键词： 钩藤   癫痫   MAPK信号通路   TLR信号通路   NF-κB信号通路   炎症反应   细胞凋亡  

摘要： 钩藤及其活性成分可调控丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)、Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、RAGE、SIRT1/p53/Caspase-3、SIRT1/Nrf2等多种信号通路,具有减轻炎症反应、抗氧化应激、抑制小胶质细胞活化、抑制细胞凋亡、抑制NMDA受体和神经元兴奋性等作用,防治癫痫疗效较好,应用前景广阔,可为特效药物研发和创新治疗思路提供一定的参考。目前,钩藤防治癫痫的研究仍存在一些局限,如钩藤靶向信号通路治疗癫痫的研究多集中于经典通路,对RAGE、SIRT1/p53/Caspase-3等通路尚未充分探索,钩藤调控上述通路治疗癫痫的机制缺乏靶向研究;动物模型相对单一,亟须从癫痫不同的发病机制出发,开展犬类、无脊椎动物等多样化模型的构建;临床研究较少,钩藤的安全有效剂量、潜在分子毒理学机制及不良反应有待验证;需进一步探索不同信号通路之间的作用机制,发挥中药多靶点、多途径、多层次优势,为钩藤防治癫痫提供更有力的支持依据和新的研究思路。

关键词： Potato tuberization   Calcium   Calmodulin   Membrane transporter   Stress adaptation   Immune response  

摘要： Potato tuberization is a complex developmental process influenced by environmental factors, such as light and temperature, as well as genetic and biochemical factors. Tuber formation is responsive to day length, with shorter days inducing tuberization more effectively than longer days. Potato tuber yield is regulated by signaling networks involving hormones, transcriptional regulators, and sugars. Calcium plays a pivotal role in this process. Elevated cytoplasmic calcium is detected by calcium sensors, including calmodulins (CaMs), calmodulin-like proteins (CMLs), Ca2+-dependent protein kinases (CDPKs), and calcineurin-B-like proteins (CBLs), promoting tuberization and growth. This review provides mechanistic insights into calcium signaling in potato tuberization, emphasizing its role in stress adaptation. This review further explores the role of calcium/calmodulin in stress response mechanisms and the membrane transporters that facilitate adaptation to environmental challenges like drought, cold, flooding, and heat stress, which are significant threats to potato production globally. Additionally, calcium signaling helps develop tolerance to both abiotic stresses and pathogens, ultimately enhancing plant immune responses to protect potato tubers.

关键词： Calmodulin  

摘要： The Ca2+/CaM-dependent protein kinase II alpha (CaMKIIα) is a highly important synaptic protein, which comprises a unique holoenzyme structure organized via the central hub domain. Recently, a distinct binding pocket in the CaMKIIα hub domain was identified for the endogenous neuromodulator γ-hydroxybutyric acid (GHB) and related synthetic analogs. Intriguingly, of the four native CaMKII isozymes, only CaMKIIα accommodates GHB ligands. Key interacting residues in CaMKIIα were revealed, but their involvement in selectivity toward the alpha variant of CaMKII has remained unresolved. Aimed at elucidating the molecular determinants for this selectivity, we here conducted binding studies to CaMKII-HEK whole-cell homogenates using two different in-house–developed GHB-related radioligands, 3-hydroxycyclopent-1-enecarboxylic acid ([3H]HOCPCA) and [3H]O-5-hydroxydiclofenac, in combination with site-directed mutagenesis. Binding to CaMKIIα with the smaller type radioligand [3H]HOCPCA validated key involvement of the four known residues (His395, Arg433, Arg453, and Arg469), but also revealed a role for the upper hub flexible loop containing the CaMKIIα-specific residue Trp403 (Leu in all other CaMKII isozymes) previously suggested to be involved in holoenzyme stability. Insertion of the corresponding residues (L467W/C533R) into CaMKIIβ failed to induce [3H]HOCPCA binding. However, with the larger type radioligand, [3H]O-5-hydroxydiclofenac, specific binding in CaMKIIβ (L467W/C533R) was achieved. Thus, the study confirms involvement of central binding residues and identifies the CaMKIIα flexible pocket loop as a distantly located allosteric factor in determining selectivity of GHB analogs for CaMKIIα. It sheds light on a remarkable interplay of the entire hub cavity for accommodation of ligands and corroborates GHB analogs as CaMKIIα-selective. © 2025 The Authors

关键词： 糖尿病肾病   中医辨证施膳   益气养阴通络汤   肾功能   营养状况  

摘要： 目的探讨益气养阴通络汤辅助中医辨证施膳对DN气阴两虚兼血瘀证患者肾功能、炎症因子及营养状况的影响。方法回顾性临床研究。选取2022年1月-2024年1月北京中医药大学东方医院152例DN气阴两虚兼血瘀证患者，依据治疗方法分为观察组83例和对照组69例，进一步采取倾向性评分匹配（PSM）法，按1∶1比例均衡治疗前易混杂因素，最终2组各有46例配对成功。对照组予以西医常规疗法干预，观察组在对照组基础上联合益气养阴通络汤+中医辨证施膳治疗。2组均治疗3个月。分别于治疗前后进行中医证候评分，采用生化分析法检测SCr、BUN、β2微球蛋白（β2-MG）水平，ELISA法检测IL-1β、TGF-β1、TNF-α水平。采用体成分分析仪检测上臂三头肌肌围（AMC）、肱三头肌皮褶厚度（TSF）；采用微型营养评分法（MNA）评估营养不良的风险或营养不良状态。记录不良反应，评价临床疗效。结果观察组总有效率为91.3%（42/46）、对照组为69.7%（32/46），2组比较差异有统计学意义（χ2=4.84，P=0.028）。观察组治疗后腰膝酸软、倦怠乏力、五心烦热、舌紫黯脉沉细积分低于对照组（t值分别为4.23、3.86、3.68、4.62，P<0.001）；血清SCr［（221.53±23.40）mmol/L比（261.92±25.48）mmol/L，t=7.92］、BUN［（21.74± 4.13）mmol/L比（25.12±4.50）mmol/L，t=3.75］、β2-MG［（2.88±0.71）mg/L比（4.54±0.93）mg/L，t=9.62］水平及IL-1β［（47.21±5.48）μg/L比（51.92±5.63）μg/L，t=4.07］、TGF-β［（67.84±8.03）μg/L比（73.29±8.88）μg/L，t=4.75］、TNF-α［（29.74±4.13）μg/L比（33.12±4.98）μg/L，t=3.54］水平低于对照组（P<0.001）；MNA评分［（24.89±4.48）分比（21.02±4.16）分，t=4.29］及AMC［（24.34±2.83）mm比（22.19± 2.88）mm，t=3.61］、TSF［（8.34±2.13）mm比（7.12±1.98）mm，t=2.85］高于对照组（P<0.001或P<0.05）。治疗期间，观察组不良反应发生率为13.0%（6/46）、对照组为8.7%（4/46），2组比较差异无统计学意义（χ2=0.45，P=0.503）。结论益气养阴通络汤联合中医辨证施膳可有效减轻DN患者临床症状，改善患者肾功能及营养健康状况，抑制炎症反应，提高疗效且安全性良好。

关键词： 吉林白鹅   TGF-β/Smad信号通路   羽毛毛囊发育  

摘要： TGF-β/Smad信号通路是经典的跨膜信号传递通路，影响了细胞增殖、分化和凋亡。该通路基因在哺乳动物毛囊形态发育中的作用已被广泛地研究，但其在禽类皮肤毛囊发育过程中的作用机制尚未明晰。本研究以吉林白鹅为研究对象，利用染色与定量定位表达相结合的方式，观察了毛囊形态发育过程中TGF-β/Smad信号通路基因的表达。结果表明，鹅胚皮肤毛囊发育早期TGF-β信号通路下游转录因子Smad3表达在包括表皮和真皮的整个皮肤组织中。毛囊出现经典结构后，Smad3集中于毛囊内外根鞘位置。WesternBlot结果表明，Smad3的磷酸化蛋白P-Smad3在胚胎发育后期的表达显著高于前期，暗示TGF-β/Smad信号通路基因在胚胎发育后期的活性高于前期。向胚蛋卵黄囊内注射TGF-β/Smad信号通路激活剂，发现激活TGF-β/Smad 信号通路对毛囊的发育产生了抑制作用。综上所述，TGF-β/Smad 信号通路基因能够对鹅毛囊的发生发育造成一定影响。

关键词： 黄精   当归   糖尿病前期   糖尿病   2型   糖代谢   网络药理学  

摘要： 目的基于网络药理学及动物实验验证探讨黄精-当归药对治疗糖尿病前期的作用机制。方法利用TCMSP检索黄精和当归的活性成分，在Swiss Target Prediction数据库预测活性成分靶点，借助Cytoscape 3.10软件构建“药物-活性成分-靶点”网络。结合OMIM、GeneCards、TTD、美国国家医学图书馆获得疾病靶点，利用Venny 2.1.0平台筛选药物与疾病交集靶点，导入STRING数据库构建PPI网络。采用DAVID数据库对交集靶点进行GO功能和KEGG信号通路富集分析。采用高脂饲料喂养C57BL/6J小鼠制备糖尿病前期模型，将造模成功的24只小鼠按随机数字表法分为模型组、黄精组、当归组、黄精-当归药对组（药对组），每组6只，另设正常组6只。黄精组灌胃黄精颗粒溶液2.055 g/kg，当归组灌胃当归颗粒溶液2.055 g/kg、药对组灌胃黄精-当归药对溶液4.11 g/kg，1次/d，模型组和正常组灌胃等体积去离子水，持续10周。定期检测空腹血糖和口服葡萄糖耐量；灌胃给药10周后，检测血清TC、TG、HDL-C、LDL-C、空腹胰岛素（FINS）水平；采用过碘酸-雪夫染色观察肝组织糖原沉积情况；采用Real-time PCR法检测肝组织成纤维细胞生长因子1（FGF1）、成纤维细胞生长因子2（FGF2）、胎盘生长因子（PGF）、激酶插入区受体（KDR）；Igf1r：胰岛素样生长因子1（IGF1R）、胰岛素受体（INSR）、PI3K催化亚基α（PI3Kca）、PI3K催化亚基β（PI3Kcb）、PI3K催化亚基γ（PI3Kcg）、Akt1、Akt2、GSK-3β基因水平；采用Western blot法检测小鼠肝组织PI3K、p-Akt、Akt、p-GSK-3β、GSK-3β蛋白表达。结果获得黄精-当归药对治疗糖尿病前期核心靶点205个；KEGG富集分析显示，该药对可能通过激活PI3K-Akt信号通路等发挥降糖作用。与模型组比较，药对组空腹血糖水平、曲线下面积（AUC）降低（P<0.05），血清LDL-C、HDL-C水平降低（P<0.01），药对组FINS和HOMA-IR降低（P<0.05），小鼠肝组织FGF1、FGF2、PGF、KDR、IGF1R、INSR、PI3Kca、PI3Kcb、PI3Kcg、Akt1、Akt2、GSK-3β的mRNA水平升高（P<0.01），药对组小鼠肝组织PI3K/β-actin、p-Akt/Akt及p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达升高（P<0.01）。结论黄精-当归药对可能通过上调FGF1、FGF2、PGF等激活PI3K/Akt/GSK-3β信号通路，影响胰岛素抵抗和糖原合成等过程，对糖尿病前期进行治疗。

关键词： 人乳头瘤病毒   动物模型   感染   疫苗  

摘要： 人乳头瘤病毒(human papillomaviruses，HPV)可引起女性子宫颈癌等多种肿瘤。由于HPV具有较强的宿主特异性和组织亲和力，加之体外培养困难和缺乏动物感染模型，限制了HPV感染和致病机制研究以及疫苗和抗肿瘤药物的快速研发。为更好地研究HPV感染及其致病机制，以及采取更好的防治措施，建立一种与人类感染、致病途径相似的动物模型至关重要。本文对既往采用小鼠、家兔、猕猴、果蝇等用于HPV相关动物模型的研究工作进行了综述，包括感染性模型、肿瘤模型、转基因模型，以期为HPV相关研究选择适宜的动物模型提供参考。

关键词： 类风湿关节炎   二妙散   白三烯B4   白三烯B4受体1  

摘要： 目的 探讨二妙散干预白三烯B4（leukotriene B4，LTB4）/白三烯B4受体1（Leukotriene B4 receptor 1，BLT1）通路促进中性粒细胞凋亡治疗类风湿关节炎的作用及机制。方法 建立胶原诱导性关节炎（collagen-induced arthritis，CIA）小鼠模型，将20只DBA/1小鼠随机分为正常组、模型组、二妙散低剂量（2 g/kg）组、二妙散高剂量（4 g/kg）组，每组5只；采用关节炎评估法观察小鼠的足爪肿胀、关节炎评分、关节肿胀数、足趾肿胀率；ELISA法检测LTB4、白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）水平；CCK-8法检测小鼠胸腺、脾脏指数，T淋巴细胞、B淋巴细胞增殖率。将24只昆明小鼠随机分为正常组、脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）组、LPS+二妙散组、LPS+二妙散+LTB4组，每组6只，采用1 μg/mL LPS诱导中性粒细胞形成炎症模型；采用流式细胞术检测中性粒细胞凋亡率；ELISA法检测中性粒细胞LTB4、IL-1β炎症因子表达水平；Western blot法检测中性粒细胞Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果 二妙散能够显著降低关节炎评分，关节肿胀数，，足趾肿胀率，胸腺、脾脏指数，T淋巴细胞、B淋巴细胞增殖，LTB4、IL-1β水平及Bcl-2蛋白表达水平（P＜0.05）；升高中性粒细胞凋亡率以及Bax蛋白表达表达水平（P＜0.05）。结论 二妙散可能是通过抑制LTB4/BLT1通路促进中性粒细胞凋亡发挥抗类风湿关节炎的作用。

摘要： Na1.9 is a voltage-gated Na channel subtype with unique gating properties that are poorly understood, partly due to the lack of reliable heterologous expression systems. Here, we present a transient expression protocol that produces robust mouse Na1.9 currents, enabling direct electrophysiological comparisons with native dorsal root ganglion neurons. To further understand the low current density observed in human Na1.9, we created chimeras with Na1.5 and identified a role for the C-tail-specifically the IQ motif and EF-hand-in regulating current densities, likely due to a weak affinity for calmodulin. Isothermal titration calorimetry experiments indicated that, unlike other Na channel subtypes, calmodulin binding to the C-tail is likely too weak to occur under physiological conditions. Markedly, the pre-IQ region did not influence channel expression but was responsible for conferring the characteristic depolarized voltage dependency of inactivation of Na1.9. Our findings provide insights into the unique gating mechanisms of Na1.9 and demonstrate the robustness of this platform for structure-function studies.