关键词： 重楼皂苷Ⅲ   结肠癌   增殖   细胞周期   凋亡   HCT116细胞  

摘要： 目的观察重楼皂苷Ⅲ对结肠癌细胞HCT116增殖、周期、凋亡的影响,探讨其治疗结肠癌作用机制。方法体外培养结肠癌HCT116细胞,将细胞分为对照组和重楼皂苷Ⅲ低、中、高剂量组,分别用不含药培养基和低、中、高浓度重楼皂苷Ⅲ进行干预,采用CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期与凋亡,RT-PCR、Western blot分别检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4、CDK6、视网膜母细胞瘤蛋白(RB)、p-RB、Bax、Bcl-2、Bcl-xl mRNA及蛋白表达。结果与对照组比较,重楼皂苷Ⅲ各剂量组HCT116细胞活力降低(P<0.01),G0~G1期细胞比例升高(P<0.01),S期、G2~M期细胞比例降低(P<0.01),细胞凋亡率升高(P<0.01),cyclinD1、CDK4、CDK6、Bcl-2、Bcl-xl mRNA及cyclinD1、CDK4、CDK6、p-RB、Bcl-2、Bcl-xl蛋白表达降低,Bax mRNA及蛋白表达升高,且呈剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论重楼皂苷Ⅲ可抑制体外培养的结肠癌细胞增殖并促进细胞凋亡,将细胞阻滞在G0~G1期,其机制可能与抑制细胞周期相关蛋白及凋亡相关蛋白表达有关。

关键词： 猫传染性腹膜炎病毒   遗传进化分析   刺突蛋白   3c蛋白   免疫原性  

摘要： 猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)属于冠状病毒属成员,是引起猫传染性腹膜炎(FIP)发生的病原体。FIPV感染给猫健康造成巨大威胁,阐明FIPV遗传变异特征及主要抗原蛋白免疫原性对FIP防控具有重要意义。扩增4株FIPV山西株S和3c基因,分析FIPV山西株同源性和遗传进化特征。结果显示,4株FIPV山西株间S基因相似性为89.6%~91.9%,与已公布的Ⅰ型猫冠状病毒(FCoV)相似性为85.9%~92.7%。FIPV山西株间3c基因相似性为91.5%~95.3%,与公布的Ⅰ型FCoV参考株相似性为90.9%~95.9%。S、3c基因遗传进化分析显示,4株FIPV山西株均属于Ⅰ型FCoV。将表达、纯化的FIPV S蛋白免疫Balb/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清S蛋白抗体水平,结果显示FIPV S蛋白具有良好的免疫原性,为FIPV感染的诊断与防控提供了重要科学依据。

关键词： 非小细胞肺癌   中药   Meta分析   用药规律   网络药理学   分子对接   生物学验证  

摘要： 中药不论在直接抑制肿瘤生长,还是辅助西医治疗肿瘤方面都发挥着不容忽视的作用.本文经检索中国知网、万方、维普、Pubmed、Web of Science等数据库,纳入中药汤剂联合化疗治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的随机对照试验,通过Meta、用药规律、网络药理学和细胞实验等分析方法系统评价中药联合化疗治疗NSCLC的疗效、安全性及作用机制,最终纳入56篇文献进行统计分析,共4992例患者、57首处方、172味中药.结果显示,中药联合化疗治疗组的1年生存率、肝功能损伤、总有效率、胃肠道不良反应等方面均优于单纯化疗组.用药频次>20的有7味:药味以甘苦为主,药性以寒温为主,主要归为肺经和肝经.得到5个高频药物聚类,关联规则分析得到置信度最高的4条药物组合为:天花粉-麦冬、玉竹-麦冬、北沙参-玉竹-麦冬、白术-黄芪-党参.收集到核心中药成分潜在作用靶点与NSCLC交集靶点126个;PPI分析得到3个核心靶点:AKT1、EGFR、SRC;KEGG分析表明关键通路为PI3K-Akt信号通路;筛选得到3个关键成分:木犀草素、槲皮素、山柰酚;分子对接结果表明关键成分和核心靶点均能稳定结合.细胞实验结果表明,木犀草素可有效抑制A549细胞的增殖、活力和迁移,诱导其发生凋亡,并使其形态发生变化.本文结果表明,中药联合化疗治疗NSCLC可以提高其临床疗效、降低化疗的毒副作用;黄芪、麦冬、党参、北沙参等核心中药多种成分可通过多靶点、多途径协同治疗NSCLC;关键中药的核心成分木犀草素可抑制A549细胞的增殖、活力和迁移,并可诱导其发生凋亡.

关键词： 骨骼肌   炎性因子   肿瘤坏死因子α   核因子κB   工程化细胞因子   工程化组织构建  

摘要： 背景:研究发现不同时间长度按压点刺激正常肌肉,将产生不同的生理反应。目的:探讨在不同时间机械压力按压下,大鼠骨骼肌内炎性因子肿瘤坏死因子α及核因子κB表达的变化。方法:健康SPF级SD雄性大鼠20只,随机分为空白对照组、10 s按压组、20 s按压组及30 s按压组,每只大鼠的单侧右腿用于实验。空白对照组不予干预,各按压组大鼠经2%戊巴比妥钠(35 mg/kg)腹腔注射麻醉后,使用自制机械压力装置,将压强固定在200 kPa,分别持续按压大鼠股薄肌10,20,30 s,随后即刻取右后肢按压处肌肉组织。苏木精-伊红染色观察骨骼肌组织形态学变化及肌纤维横截面积的变化,免疫组织化学检测骨骼肌肿瘤坏死因子α及核因子κB表达水平。结果与结论:①苏木精-伊红染色结果显示,各按压组大鼠骨骼肌肌纤维排列松散,肌纤维横截面积和直径变小,骨骼肌间隙变大。与空白对照组相比,各按压组骨骼肌肌纤维的横截面积显著减小(P<0.05),3个按压组之间骨骼肌肌纤维的横截面积差异无显著性意义(P>0.05)。10 s按压组肌纤维间隙中未见明显红细胞,20 s按压组间隙中出现少量红细胞,30 s按压组骨骼肌肌纤维间毛细血管扩张,间隙中出现红细胞。②30 s按压组的骨骼肌肿瘤坏死因子α的表达水平显著高于空白对照组(P<0.05)。③各组间的骨骼肌核因子κB的表达水平比较差异无显著性意义(P>0.05)。④结果说明,压强固定在200 kPa时,骨骼肌经过按压会发生形态学变化,肌纤维横截面积减少,但按压10,20,30 s骨骼肌形态学及骨骼肌纤维横截面积无显著差异。随着时间点的变化,按压骨骼肌至30 s时,炎性因子肿瘤坏死因子α启动,但对核因子κB没有影响,推测短时间内炎性因子可出现表达,而转录因子未见明显变化。

关键词： 丹皮酚   糖尿病视网膜病变   血管功能障碍   TGF-β1/JNK信号通路   血管形成  

摘要： 目的研究丹皮酚对糖尿病视网膜血管功能的保护作用及其作用机制。方法2021年10月至2023年7月,50只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、糖尿病视网膜病变(DR)组、低剂量丹皮酚组、中剂量丹皮酚组和高剂量丹皮酚组,每组各10只。DR组和3个丹皮酚组大鼠腹腔注射链脲佐菌素构建DR动物模型。丹皮酚组大鼠经100、200和400 mg/kg丹皮酚连续灌胃12周,每天1次。对照组和DR组大鼠灌胃等量生理盐水。视网膜电图,荧光素眼底血管造影术,视网膜消化铺片,伊文思蓝和苏木精-伊红(HE)染色评价视网膜结构损伤和血管功能障碍。用高糖(35 mmol/L)处理人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)构建DR细胞模型。HRMECs分为五组:正常糖组、高糖组、低剂量丹皮酚组、中剂量丹皮酚组和高剂量丹皮酚组。正常糖组加入5.5 mmol/L葡萄糖,高糖组和3个丹皮酚组加入35 mmol/L葡萄糖。丹皮酚组分别用10、20和40μmol/L丹皮酚处理。以噻唑蓝(MTT)、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、划痕、Transwell和成管实验分别检测细胞活性、增殖、迁移和血管形成。转化生长因子β1(TGF-β1)含量及其mRNA水平用酶联免疫吸附试验和实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测。蛋白质印迹法检测TGF-β1、c-Jun氨基端激酶(JNK)和磷酸化(p)-JNK蛋白表达水平。结果与对照组相比,DR组大鼠血糖含量显著增加,体质量明显减少;a波振幅、a波潜时和b波潜时明显增加,而b波振幅显著降低;视网膜中血管分支数、无细胞血管数和伊文思蓝含量显著增多;视网膜组织结构松散,神经纤维层伴水肿,内外核层细胞排列不规则,有大量新生血管生成(P<0.001)。与DR组比较,丹皮酚组糖含量显著降低,体质量明显增加;a波振幅、a波潜时和b波潜时明显降低,而b波振幅显著增加;视网膜中血管分支数、无细胞血管数和伊文思蓝含量显著减少;网膜组织结构较为完整,内外核层细胞排列较整齐,新生血管生成较模型组明显减少(P<0.001)。与正常糖组比较,高糖组HRMECs细胞活性和EdU阳性细胞数明显减少,细胞迁移率、迁移细胞数、血管样结构数和血管分支点数明显增多;与高糖组比较,丹皮酚组细胞活性和EdU阳性细胞数明显增加,细胞迁移率、迁移细胞数、血管样结构数和血管分支点数明显减少(P<0.001)。与对照组[(121.53±10.78)ng/L]和正常糖组[(299.87±15.39)ng/L]比较,DR组大鼠血清[(602.87±10.14)ng/L]及高糖组细胞上清中TGF-β1含量[(1002.66±16.53)ng/L]显著增加(均P<0.001)。与对照组(1.00±0.03)和正常糖组(1.00±0.02)比较,DR组大鼠视网膜组织(3.01±0.23)和高糖组HRMECs中(4.52±0.23)TGF-β1的mRNA表达显著增加,低、中、高剂量丹皮酚处理组视网膜组织中(2.62±0.19、1.81±0.19、1.51±0.16)和HRMECs中(3.50±0.19、2.03±0.21、1.51±0.12)TGF-β1的mRNA表达则呈剂量依赖性降低(P<0.001)。与对照组(0.54±0.09、0.14±0.04)和正常糖组(0.15±0.04、0.29±0.07)比较,DR大鼠视网膜组织(0.95±0.11、1.07±0.06)和高糖组HRMECs中(1.16±0.11、0.98±0.07)TGF-β1、p-JNK蛋白表达显著增加,低、中、高剂量丹皮酚处理组视网膜组织中(0.45±0.05、0.46±0.06、0.41±0.08;0.84±0.05、0.48±0.08、0.19±0.06)和HRMECs中(0.75±0.11、0.56±0.11、0.42±0.08;0.77±0.04、0.25±0.07、0.27±0.06)TGF-β1、p-JNK蛋白表达则呈剂量依赖性降低(P<0.001)。结论丹皮酚通过抑制TGF-β1/JNK通路保护糖尿病视网膜血管功能。

关键词： 黄芪   活性成分   NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3   糖尿病肾病   肾间质纤维化   炎症  

摘要： 糖尿病肾病(DN)是糖尿病常见的微血管并发症,表现为进行性肾脏功能下降,以终末期肾病为主要结局。炎症反应-纤维化是DN进展的关键环节,NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体被认为是导致该过程的重要原因。黄芪是治疗DN的常用中药,其中多种活性成分可靶向干预NLRP3炎症小体的启动与激活,延缓DN进展。本文就NLRP3炎症小体在DN炎症反应-纤维化中的关键作用及黄芪活性成分通过干预NLRP3炎症小体缓解DN机制的研究进展进行综述,旨在为DN靶向治疗提供新的思路。

关键词： 内质网应激   多囊卵巢综合征   中药成分   中医药  

摘要： 多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)的病因复杂且尚不能完全明确,临床特征主要是无排卵、胰岛素抵抗和高雄激素血症,其表现形式多样,包括月经不规则、痤疮、不孕、肥胖、多毛等。内质网是重要的细胞器,可以维持体内钙离子平衡,参与糖、脂、类固醇的转化,与细胞内的信号转导也有紧密联系。内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)通过激活氨基末端激酶信号通路,使细胞ERS相关蛋白质表达异常,进而影响PCOS患者的卵巢颗粒细胞、糖脂代谢、激素水平等,使卵泡发育异常和卵巢纤维化加速,导致排卵障碍,进一步加重病情。作者检索近年来国内外相关文献,全面归纳了ERS与PCOS发病机制之间的联系,进而从中药单体入手进行分类归纳,总结出大量中药可通过调节ERS来改善PCOS。同时还简述了中药复方以及中医治法通过调节ERS对PCOS病的影响,发现中医药可以通过整体观念、多成分、多靶点、多通路来达到治疗PCOS的目的,以期为中医药治疗PCOS提供新思路和支撑点。

关键词： 湿润烧伤膏   血府逐瘀汤加减   负压封闭引流   糖尿病足   潜腔   坏疽  

摘要： 给予2023年7月安徽中医药大学第二附属医院收治的1例右足糖尿病性坏疽足趾截趾术后潜腔形成伴感染患者在控制血糖、抗感染、营养神经、改善微循环基础上口服血府逐瘀汤加减,同时应用湿润烧伤膏+负压封闭引流序贯治疗局部潜腔,治疗第60天潜腔明显缩小,患者出院;出院1个月后随访,潜腔愈合,右足形态及功能恢复良好。

关键词： 久坐间断   久坐行为   碎片化运动   血流介导的血管舒张功能   血管功能   血流量   剪切应力   中枢血管功能   荟萃分析   Meta分析  

摘要： 目的:持续性地久坐行为会急性降低外周与中枢血管功能,进而加剧罹患心血管疾病风险。久坐间断可能是预防持续久坐对血管功能危害的潜在实用策略,但目前关于其急性功效的已有研究结论并不一致,也尚未得出具体的应用建议。文章旨在对久坐间断对成人外周与中枢血管功能的急性影响进行荟萃分析,并探究其调节因素。方法:基于PRISMA报告规范,以“interrupting”“sedentary”与“vascular function”等为文献检索特征词,于2024年3月检索Web of Science核心合集、PubMed和中国知网数据库。纳入久坐间断对成人外周与中枢血管功能的急性影响的急性随机交叉试验文献。基于Cochrane开发的Risk of Bias 2评估偏倚风险,并基于GRADE系统评价证据等级。使用R语言(版本4.2.0)中的“meta”与“metafor”包进行主效应合并(Hedge’s g作为效应量指标)、发表偏倚检验、亚组与回归分析。结果:纳入22篇随机交叉试验,共364例受试者(年龄21-70岁)。相比于持续不间断久坐,久坐间断急性提升外周血管血流量(Hedge’s g=0.48,95%CI:0.14-0.82,P<0.01,I2=63%,低证据等级)、剪切应力(Hedge’s g=0.65,95%CI:0.37-0.93,P<0.01,I^(2)=54%,中等证据等级)与血流介导的血管舒张功能(Hedge’s g=0.43,95%CI:0.15-0.72,P<0.01,I2=61%,中等证据等级)。疾病(亚组间P=0.01)与性别(亚组间P=0.01)对血流量的主效应合并有显著调节作用(亚组间P=0.01),间断方式(亚组间P=0.01)与频率(亚组间P=0.02)对剪切应力的主效应合并有显著调节作用。久坐间断改善外周血管剪切应力受年龄(β=-0.02,95%CI:-0.03-0.01,P=0.09)与体质量指数(β=-0.10,95%CI:-0.18至-0.02,P<0.01)影响。久坐间断改善血流介导的血管舒张功能受总间断次数(β=-0.09,95%CI:-0.17至-0.01,P=0.03)与试验期间久坐控制时长影响(β=-0.21,-0.34至-0.09,P<0.01);每增加1 h久坐时长与久坐间断对血流介导的血管舒张功能的急性提升效果降低0.67%相关(P<0.01),当久坐控制时间>6 h时,久坐间断的急性收益消失。定性系统综述发现,久坐间断对各类人群血管脉搏波速度无显著影响,但可能预防老年人因持续久坐引起的中枢血管功能下降。结论:久坐间断急性提升成人外周血管血流量(低证据强度)、剪切应力(中证据强度)与血流介导的血管舒张功能(中证据强度),并可能预防、保护老年人因持续久坐引起的中枢血管功能下降(非常低证据等级)。受试者特征(疾病因素、性别、年龄与体质量指数)、间断干预方案(方式、频率、总间断次数)与久坐控制时长均会影响久坐间断对血管功能的急性改善效果。建议各类成人通过爬楼等大肌肉群参与的运动方式,以较高频率(如,每40 min进行1次)进行单次至少5 min的中低强度运动间断久坐,且每日持续久坐的累积时长不要超过6 h。

关键词： 巢寄生   卵识别机制   Meta分析   寄生历史  

摘要： 鸟类巢寄生是寄生性鸟类将卵产于宿主巢中并转嫁育雏成本的行为,宿主为应对寄生压力进化出多重防御策略,其中卵识别机制是防御成功的关键。本文通过综述与Meta分析得出以下结论:宿主主要采用模板识别机制(基于自身卵特征建立认知模板),部分物种如大苇莺Acrocephalus arundinaceus兼具模板识别与不一致性识别机制;拟鹂科Icteridae和杜鹃科Cuculidae宿主以模板识别为主导;寄生历史显著影响识别机制的选择,无被寄生历史的物种可能缺乏该机制。现有研究已阐明卵色、斑纹等形态特征的关键作用,但对卵特征变异动态及宿主认知能力(脑容量)、学习能力(年龄与经验)等内在因素的协同效应仍缺乏系统研究。未来需构建多维度分析框架,整合形态特征变异规律与宿主认知行为机制,这将为解析宿主-寄生者协同进化提供新视角,并为认知生态学理论发展提供实证依据。