关键词： 糖尿病   成纤维细胞   细胞凋亡   辣椒素   创面修复   真核mRNA测序  

摘要： 目的探讨辣椒素对糖尿病小鼠全层皮肤缺损的影响及其机制。方法该研究为实验研究。取36只6~8周龄雄性db/db小鼠,在其背部制作直径6 mm圆形全层皮肤缺损创面。按照随机数字表法(分组方法下同),将小鼠分为注射生理盐水的对照组及分别注射10、20μmol/L辣椒素溶液的低浓度辣椒素组与高浓度辣椒素组(每组12只),造模后即刻及第2天均于创面局部注射30μL相应溶液。伤后4、8、12 d,大体观察小鼠创面愈合情况并计算残余创面面积百分比。伤后12 d,采用苏木精-伊红染色、Masson染色和免疫组织化学染色分别观测小鼠创面中炎症细胞、胶原纤维、CD31阳性表达面积的占比,采用蛋白质印迹法检测小鼠创面中瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)的蛋白表达情况。取上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科于2024年10月收治的5例患者(男2例、女3例,年龄20~45岁)正常皮肤组织,制备人原代成纤维细胞,取第2~5代处于对数生长期的细胞用于下述实验。取细胞,分为对照组和高浓度辣椒素组,分别采用不含辣椒素的完全培养基和含有20μmol/L辣椒素的完全培养基进行培养。培养24 h后,通过DESeq2 R包鉴定2组细胞的差异表达基因(DEG),并对DEG进行基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。取细胞,分为对照组、低浓度辣椒素组、高浓度辣椒素组,分别用不含辣椒素的完全培养基和含10、20μmol/L辣椒素的完全培养基进行培养。培养48 h后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用蛋白质印迹法检测细胞中蛋白激酶B(Akt)、磷酸化Akt(p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和磷酸化mTOR(p-mTOR)的蛋白表达水平并计算p-Akt与Akt、p-mTOR与mTOR的比值。伤后12 d,采用蛋白质印迹法检测对照组和高浓度辣椒素组糖尿病小鼠创面中Akt、p-Akt、mTOR和p-mTOR的蛋白表达水平并计算p-Akt与Akt、p-mTOR与mTOR的比值。以上动物实验的样本数均为6,细胞实验的样本数均为3。结果伤后4 d,3组糖尿病小鼠创面均逐渐开始愈合,且低浓度辣椒素组与高浓度辣椒素组小鼠残余创面面积百分比均明显低于对照组(t值分别为2.31、2.87,P<0.05)。伤后8 d,低浓度辣椒素组与高浓度辣椒素组小鼠残余创面面积百分比均明显低于对照组(t值分别为2.55、5.38,P<0.05)。伤后12 d,低浓度辣椒素组与高浓度辣椒素组小鼠残余创面面积百分比均明显低于对照组(t值分别为3.31、6.24,P<0.05),且高浓度辣椒素组小鼠残余创面面积百分比明显低于低浓度辣椒素组(t=3.42,P<0.05)。伤后12 d,高浓度辣椒素组小鼠创面中炎症细胞面积的占比为(6.2±1.8)%,显著低于对照组的(15.5±3.0)%,t=6.45,P<0.05;高浓度辣椒素组小鼠创面中胶原纤维面积的占比、CD31阳性表达面积的占比、TRPV1的蛋白表达量均明显高于对照组(t值分别为5.48、7.11、15.41,P<0.05)。培养24 h后,与对照组相比,从高浓度辣椒素组细胞中检测到51个差异表达显著的DEG(P<0.05),其中31个基因显著上调,20个基因显著下调;GO分析显示,显著上调和显著下调的DEG主要参与了细胞外基质(ECM)聚合、细胞外结构聚合、胶原代谢过程调控、ECM成分分泌调节等生物学过程;KEGG分析显示,显著上调和显著下调的DEG主要参与了磷脂酰肌醇3-激酶/Akt通路、肿瘤坏死因子信号通路等细胞凋亡相关通路。培养48 h后,与对照组相比,低浓度辣椒素组和高浓度辣椒素组的细胞凋亡率均显著下降(t值分别为6.38、9.09,P<0.05);低浓度辣椒素组细胞中p-mTOR与mTOR的比值显著高于对照组(t=2.74,P<0.05),高浓度辣椒素组细胞中p-Akt与Akt、p-mTOR与mTOR的比值均分别显著高于对照组(t值分别为4.43、3.33,P<0.05)。伤后12 d,高浓度辣椒素组糖尿病小鼠创面中p-Akt与Akt、p-mTOR与mTOR的比值分别为0.470±0.044、0.549±0.106,均分别明显高于对照组的0.189±0.058、0.241±0.120(t值分别为6.67、3.36,P<0.05)。结论辣椒素可通过激活成纤维细胞中的Akt/mTOR信号通路,抑制细胞凋亡,从而促进糖尿病小鼠全层皮肤缺损创面的愈合。

关键词： 人乳头瘤病毒基因分型   宫颈液基细胞学检测   妇科   宫颈病变   病理学检测  

摘要： 目的 探讨人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)基因分型联合宫颈液基细胞学检测(thinprep cytologic test,TCT)在妇科宫颈病变患者中的应用价值。方法 选取2024年1月—2025年1月本院324例妇科宫颈病变筛查的患者作为研究对象,针对上述患者分别给予HPV基因分型检测、TCT及病理检查(阴道镜下宫颈活检组织)。以病理结果作为金标准,探讨HPV基因分型、TCT及两者联合检测在妇科宫颈病变患者的诊断价值。结果 通过病理学检测发现,共检出宫颈炎症患者297例、低级别子宫颈不典型增生(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)Ⅰ级3例、高级别CIN(Ⅱ、Ⅲ级)7例、宫颈癌17例。在324例患者中,共检出HPV阳性患者177例,真阳性105例,共检出17种基因亚型,分别有13种高危及4种低危基因感染。以病理学检测结果作为金标准,相比于HPV、TCT单一检测,HPV联合TCT检测的灵敏度、特异度更高(P<0.05);HPV、TCT及两者联合检测方式的特异度对比无统计学意义(P>0.05)。结论 HPV联合TCT检测妇科宫颈病变的诊断价值优于单一检测,有利于患者妇科宫颈病变的检出。

关键词： 血清miR-425-5p   糖尿病   认知功能障碍  

摘要： 目的:探讨血清miR-425-5p与2型糖尿病(T2DM)患者认知功能障碍(CI)的相关性,以期为CI的早期防治提供参考。方法:选取2024年1月~2024年12月院内收治的135例T2DM患者,根据评估结果分为CI组和无CI组,分析血清miR-425-5p与CI的相关性。结果:135例T2DM患者中有51例合并认知功能障碍,发生率为37.78%,CI组内女性、年龄 ≥ 60岁、文化程度为大专以下的患者比例高于无CI组(P < 0.05);CI组的miR-425-5p水平低于无CI组(P < 0.05),且中度组低于轻度组(P < 0.05);miR-425-5p与MMSE评分呈正相关(P < 0.05);多因素Logistic分析中女性(OR = 2.976)、年龄 ≥ 60 (OR = 3.483)、病程 ≥ 10年(OR = 3.847)为T2DM患者合并CI危险因素(P < 0.05),血清miR-425-5p升高(OR = 0.028)和文化程度为大专及以上(OR = 0.173)为T2DM患者合并CI保护因素(P < 0.05)。结论:T2DM合并CI患者的血清miR-425-5p水平异常降低,且与CI病情严重程度有关,性别、年龄、文化程度、病程和miR-425-5p均为T2DM患者合并CI的独立影响因素。

关键词： 中药载体水凝胶   糖尿病溃疡   信号通路   治疗应用  

摘要： 糖尿病溃疡是糖尿病患者常见的并发症之一,严重影响患者的生活质量和预后。随着全球糖尿病患者数量的增加,治疗糖尿病溃疡的有效方法亟待开发。近年来,中药载体水凝胶因其优良的生物相容性、可控释放药物能力以及促进伤口愈合的特点,逐渐成为糖尿病溃疡治疗的研究热点。现有研究表明,中药载体水凝胶不仅能够提供局部药物释放,还能通过多种信号通路促进组织再生和修复。然而,在临床应用中仍面临药物配方、载体材料选择及其生物相互作用等问题。文章综述了中药载体水凝胶在糖尿病溃疡治疗中的应用现状,探讨了其作用机制及相关信号通路的最新研究进展,以期为临床应用提供理论基础,并为未来的研究方向提供参考。

关键词： 胰腺钙化   外分泌胰腺糖尿病   糖尿病,1型   突变   SPINK1基因   c.194+2T>C   c.-215G>A  

摘要： 对2024年6月天津医科大学总医院空港医院诊治的1例1型糖尿病合并胰腺纤维钙化性糖尿病患者进行临床及遗传特征分析。收集先证者的临床资料和外周血,全外显子组测序筛选出致病基因,通过Sanger测序家系验证并进一步行生物信息学分析。先证者血糖升高,酪氨酸磷酸酶抗体阳性,考虑1型糖尿病;同时有胰腺多发钙化,基因检测发现其携带丝氨酸蛋白酶抑制剂Kazal 1型(SPINK1)基因c.194+2T>C及c.-215G>A变异,考虑胰腺纤维钙化性糖尿病。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)指南,c.194+2T>C突变初步判定为致病性变异,c.-215G>A为意义未明变异。生物信息学分析表明c.194+2T>C突变产生了截短的蛋白质。SPINK1基因c.194+2T>C突变影响蛋白质的三维结构和活性,其与c.-215G>A突变处于完全连锁不平衡状态,c.-215G>A突变可能具有保护功能,影响临床表型。患者同时合并1型糖尿病及胰腺纤维钙化性糖尿病,应提高对同时合并两种糖尿病的认识,避免误诊及漏诊。

关键词： 肺结核   糖尿病   临床护理路径   营养支持   白蛋白   36条目健康调查简表  

摘要： 目的探讨基于临床护理路径的营养支持对肺结核合并糖尿病患者营养状况及生活质量的影响。方法选取2023年1月—2024年4月六盘水市第三人民医院收治的80例肺结核合并糖尿病患者,按照随机数字表法分为观察组和对照组各40例。对照组采取常规护理,观察组在对照组的基础上采取基于临床护理路径的营养支持。比较两组护理前后营养状况、生活质量及护理满意度。结果护理后,两组总蛋白和白蛋白水平及36条目健康调查简表各维度评分均高于护理前,且观察组高于对照组(P<0.05);观察组护理总满意度高于对照组(P<0.05)。结论基于临床护理路径的营养支持能够有效改善肺结核合并糖尿病患者营养状况,提高其生活质量和护理满意度。

关键词： 肝纤维化   诊断   直接标志物   间接标志物  

摘要： 肝纤维化是肝脏对各种慢性损伤的病理性修复反应。早期诊断和干预能够延缓甚至逆转肝纤维化。目前,临床上仍缺乏特异性的肝纤维化诊断标志物。现有的直接(血清)标志物和间接标志物(基于血液指标等参数建立的模型)在排除性诊断方面具有方便、安全、可重复等优势。基于国内外相关指南共识和多中心研究结果以及上海地区的质量调查结果,上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院等机构制定《肝纤维化非创伤性实验诊断专家共识》,就肝纤维化非创伤性实验诊断的临床意义、适用人群、结果解读、检测方法、质量控制和前沿进展等提出建议,以期科学、合理地应用非创伤性肝纤维化标志物,从而更好地辅助临床进行多种肝病相关肝纤维化的诊断、病程监测和疗效评估。

关键词： 肺结核   糖尿病   肠道菌群   白细胞介素-6  

摘要： 目的探讨肺结核合并糖尿病(PTB-DM)患者肠道菌群特征及与外周血微炎症因子的相关性。方法选取2022年9月至2024年9月该院收治的162例PTB-DM患者作为PTB-DM组,另选取该院150例同期体检的健康受试者作为对照组。收集所有研究对象的临床资料。采用16S rRNA基因测序技术分析研究对象的肠道菌群组成。检测所有研究对象外周血微炎症因子[干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]水平。PTB-DM组与对照组临床资料、肠道菌群组成和微炎症因子水平进行比较。Spearman相关性分析PTB-DM患者肠道菌群相对丰度与外周血微炎症因子水平之间的相关性。结果PTB-DM组患者的拟杆菌目、梭菌目的相对丰度显著低于对照组,而肠杆菌目和放线菌目相对丰度则显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PTB-DM组患者IFN-γ、IL-6和TNF-α均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。PTB-DM组患者的拟杆菌目和梭菌目的相对丰度与IFN-γ、IL-6、TNF-α水平均呈负相关;肠杆菌目和放线菌目的相对丰度与IFN-γ、IL-6、TNF-α水平均呈正相关(均P<0.05)。结论PTB-DM患者存在明显的肠道菌群失衡,并且外周血微炎症因子IFN-γ、IL-6和TNF-α水平显著升高,且与特定菌群的相对丰度密切相关。

关键词： 重症急性胰腺炎   急性肺损伤   危险因素   Meta分析  

摘要： 背景急性肺损伤是重症急性胰腺炎病程中除胰腺外最易发生的器官损伤,主要表现为呼吸功能不全伴呼吸急促、发绀、肺顺应性降低等,其具体发病机制尚不完全清楚。虽然经过保护性治疗,重症急性胰腺炎并发急性肺损伤患者的生活质量仍受到不利影响。目的系统评价重症急性胰腺炎并发急性肺损伤的危险因素。方法计算机检索中国知网、万方数据知识服务平台、维普网(VIP)、PubMed、Web of Science、EBSCO数据库中有关重症急性胰腺炎并发急性肺损伤危险因素的相关研究,检索时限为建库至2023年10月。由2位研究者独立筛选文献、提取资料、评价文献质量以及证据等级,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析并使用Stata 17.0中的Begg's检验进行发表偏倚分析。结果共纳入10篇文献,均为病例对照研究,包括1053例重症急性胰腺炎患者。Meta分析结果显示,年龄增大(SMD=0.58,95%CI=0.03~1.14,P=0.04)、空腹血糖升高(SMD=0.45,95%CI=0.27~0.64,P<0.00001)、呼吸频率增加(>30次/min)(OR=6.18,95%CI=3.20~11.94,P<0.00001)、合并发热(OR=12.92,95%CI=4.41~37.84,P<0.00001)、合并胸腔积液(OR=7.19,95%CI=3.25~15.91,P<0.00001)、白蛋白降低(SMD=-0.77,95%CI=-0.98~-0.56,P<0.00001)、合并肥胖(OR=3.11,95%CI=1.94~4.98,P<0.00001)、钙离子降低(SMD=-0.63,95%CI=-0.85~-0.42,P<0.00001)、合并酸中毒(OR=2.15,95%CI=1.03~4.49,P=0.04)、C反应蛋白升高(SMD=0.79,95%CI=0.56~1.03,P<0.00001)、血红蛋白降低(SMD=-0.77,95%CI=-1.10~-0.43,P<0.00001)、血清淀粉酶升高(SMD=0.21,95%CI=0.01~0.42,P=0.04)、尿淀粉酶升高(SMD=0.40,95%CI=0.03~0.77,P=0.03)、Ranson评分增加(SMD=0.87,95%CI=0.66~1.08,P<0.00001)、急性生理与慢性健康状况评分(APACHEⅡ评分)增加(SMD=0.77,95%CI=0.58~0.96,P<0.00001)、CT严重指数评分升高(SMD=0.39,95%CI=0.19~0.59,P<0.00001)、BISAP升高(SMD=0.62,95%CI=0.37~0.88,P<0.00001)、高脂血症性急性胰腺炎(OR=1.68,95%CI=1.05~2.67,P=0.03)、合并全身炎症反应综合征(SIRS)(OR=9.57,95%CI=4.03~22.72,P<0.00001)、器官损伤数目增加(≥2个)(OR=6.94,95%CI=3.34~12.59,P<0.00001)、合并感染(OR=4.59,95%CI=2.42~8.71,P<0.00001)为重症急性胰腺炎并发急性肺损伤的危险因素。发表偏倚分析结果显示,进行分析的14项因素(年龄、肥胖、空腹血糖、白蛋白、钙离子、C反应蛋白、血清淀粉酶、呼吸频率、Ranson评分、APACHEⅡ评分、CT严重指数评分、BISAP、高脂血症性、胸腔积液)未见明显发表偏倚(P>0.05)。GRADE证据评价结果显示,共有11项危险因素(年龄、呼吸频率、胸腔积液、肥胖、血红蛋白、血清淀粉酶、尿淀粉酶、Ranson评分、BISAP、高脂血症性急性胰腺炎、器官损伤数目)为中等质量,10项(空腹血糖、发热、白蛋白、钙离子、酸中毒、C反应蛋白、APACHEⅡ评分、CT严重指数评分、SIRS、感染)为低质量。结论年龄增大,血糖、C反应蛋白、血清淀粉酶、尿淀粉酶升高,白蛋白、血红蛋白、钙离子浓度降低,呼吸频率增加(>30次/min),Ranson评分、APACHEⅡ评分、CT严重指数评分、BISAP评分高,高脂血症性急性胰腺炎,合并发热、酸中毒、肥胖、胸腔积液、SIRS、器官受累(≥2个)、感染是SAP患者并发ALI的危险因素。未来需要进一步开展高水平研究,对上述研究成果加以论证。

关键词： 蟾宝痔疮栓   痔疮   花生四烯酸代谢   环氧合酶2   Myc原癌基因蛋白   细胞色素P4501B1   炎症反应   代谢组学   网络药理学  

摘要： 目的通过网络药理学和代谢组学探讨蟾宝痔疮栓(CBZCS)对痔疮大鼠的改善作用机制。方法利用浸吸巴豆油致肛门肿胀建立大鼠痔疮模型。将SD大鼠分为空白组(NC组,0.32 g/kg凡士林),模型组(Model组,0.32 g/kg凡士林),CBZCS低、中、高剂量组(分别记为CBZCS-L、CBZCS-M、CBZCS-H组,给药剂量分别为0.16、0.32、0.64 g/kg),马应龙麝香痔疮栓组(Positive组,0.32 g/kg),每组9只;分别于造模后6、12、24、48、72 h进行肛门给药。末次给药后,观察大鼠肛门组织病理变化,检测大鼠血清中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。通过代谢组学的方法进行差异代谢物分析和通路富集分析,运用网络药理学获得CBZCS治疗痔疮的靶点蛋白,联合差异代谢物和靶点蛋白进行交互和富集分析以筛选核心代谢通路,并对核心蛋白进行实验验证。结果与NC组比较,Model组大鼠肛门组织出现明显病变,血清中IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05);与Model组比较,给药组大鼠肛门组织病理损伤均有不同程度缓解,CBZCS-H组、CBZCS-M组、Positive组大鼠血清中IL-6水平和CBZCS-H组大鼠血清中TNF-α水平均显著降低(P<0.05)。代谢组学结果显示,从大鼠的肛门组织中共筛选出34个差异代谢物,经CBZCS给药后共有22个出现回调。回调的差异代谢物主要富集于花生四烯酸代谢、组氨酸代谢和甘油磷脂代谢通路。通过网络药理学的方法确定了138个CBZCS抗痔疮的交集基因。差异代谢物和靶点蛋白主要富集于花生四烯酸代谢通路,该通路的调控可能与环氧合酶2(COX-2)、Myc原癌基因蛋白(c-MYC)、细胞色素P4501B1(CYP1B1)、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6的蛋白表达有关。实验验证结果显示,Model组大鼠肛门组织中关键蛋白(COX-2、c-MYC、CYP1B1、IL-1β、IL-6)的表达水平均较NC组显著升高(P<0.05),CBZCS-H组和Positive组大鼠肛门组织中上述蛋白水平均较Model组显著降低(P<0.05)。结论CBZCS抗痔疮机制可能是抑制COX-2、c-MYC、CYP1B1蛋白的表达,进而抑制花生四烯酸代谢,减少炎症因子IL-6、IL-1β的释放。