关键词： 竹节参   配方颗粒   成型工艺   物理指纹图谱  

摘要： 基于物理指纹图谱考察竹节参配方颗粒的成型工艺.采用单因素实验,以吸湿性(H)为指标考察稀释剂种类,以成型率、卡尔指数(IC)、休止角(α)和H为综合指标考察润湿剂的种类和用量;采用Box-Behnken响应面法优化成型工艺,以堆积性、流动性、稳定性、均一性和可压性作为竹节参配方颗粒物理指纹图谱的一级指标,以松密度(Da)、振实密度(Dc)、α、豪斯纳比(IH)、干燥失重(HR)、H、相对均齐度指数(Iθ)、颗粒间空隙率(Ie)和IC作为二级指标;以上述二级指标对成型工艺进行验证,并建立物理指纹图谱后,进行相似度评价.结果表明,最佳稀释剂种类为微晶纤维素,稀释剂用量为50%～100%(占原料百分比),润湿剂为75%～85%乙醇,用量为20～25 mL/100 g(原辅料);物理指纹图谱相似度评价显示,按照上述工艺制备的竹节参配方颗粒性质稳定,相似度均在0.90以上.物理指纹图谱相关指标能够稳定可控地表征竹节参配方颗粒的物理属性,为其他配方颗粒的成型工艺考察提供参考.

关键词： 二陈汤   2型糖尿病   网络药理学   分子对接  

摘要： 基于网络药理学及分子对接探讨二陈汤治疗2型糖尿病的作用机制。方法 从TCMSP数据库中筛选二陈汤的主要活性成分及其作用靶点，在GeneCards、OMIM数据库中获取与2型糖尿病相关的疾病靶点。构建二陈汤和2型糖尿病作用靶点韦恩图，获得其共有靶点。通过STRING数据库生成二陈汤治疗2型糖尿病的蛋白互作网络（PPI），导出核心靶点，并通过Cytoscape3.10.2软件绘制“有效成分-共同靶点-途径-疾病网络”网络图。结合R4.4.1软件，对二陈汤与2型糖尿病的交集基因进行基因本体和京都基因与基因组百科全书富集分析。采用分子对接技术进一步验证药物与靶点之间的相互作用关系。结果 经过筛选，成功识别了93个二陈汤的主要活性成分，1492个与疾病相关的靶点基因，840个药物靶点，238个疾病和药物共有靶点，核心靶点主要涵盖肿瘤坏死因子（TNF）、蛋白激酶B1（Akt1）、白介素1β（IL1B）、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARG）、沉寂信息调节因子（SIRT1）等关键蛋白。GO富集结果显示有1640个生物过程、90个分子功能、38个细胞组成。KEGG富集分析得到156条通路。分子对接结果显示，二陈汤主要活性成分为柚皮素、(3S，6S)-3-(苄基)-6-(4-羟基苄基)哌嗪-2，5-醌、山柰酚，与疾病核心靶点TNF、Akt1、IL1B、PI3K、PPARG、SIRT1对接情况良好。结论 二陈汤可能通过主要活性成分皮素、(3S，6 S)-3-(苄基)-6-(4-羟基苄基)哌嗪-2，5-醌、山柰酚调节TNF、Akt1、IL1B、PI3K、PPARG、SIRT1等靶点治疗2型糖尿病，初步阐明了二陈汤治疗2型糖尿病可能的作用机制，为2型糖尿病的临床治疗及预防提供理论依据。

关键词： 4-苯基丁酸   机械通气相关性肺损伤   内质网应激   炎症因子   缺氧诱导因子1α  

摘要： 目的 探讨内质网应激抑制剂4-苯基丁酸对机械通气相关性肺损伤（VILI）小鼠的肺组织内质网应激（ERS）的影响。方法 24只SPF级雄性BALB/C小鼠，随机数字法分为正常对照组（NC组）、VILI组、VILI+4-PBA治疗组（VILI+4-PBA组），每组8只。采用大潮气量机械通气的方法建立VILI模型。VILI+4-PBA组，机械通气前1h通过腹腔注射4-PBA（200mg/kg）。机械通气结束后，取心室血清、肺泡灌洗液（BALF）和肺组织。采用ELISA试剂盒检测血清和肺组织中的IFN-γ、TNF-α、IL-1β、ICAM-1的水平；使用ELISA试剂盒检测BALF中VEGF的水平，BCA法检测总蛋白的含量；HE染色观察肺组织形态学变化；qRT-PCR检测肺组织中GRP78、CHOPmRNA的相对表达量；Westernblot检测肺组织中NF-κB、HIF-1α和内质网应激相关蛋白（GRP78、CHOP、XBP-1、ATF-6、ATF-4、p-eIF2α）的相对表达量。结果 与NC组比，VILI组小鼠血清及肺组织中IFN-γ、TNF-α、IL-1β、ICAM-1明显升高（P<0.05），BALF中VEGF和总蛋白浓度显著增加（P<0.05），肺组织中GRP78和CHOP的蛋白和mRNA表达明显增加（P<0.05），肺组织中NF-κB、HIF-1α、XBP-1、ATF-6、ATF-4及p-eIF2α的蛋白表达量均显著增加（P<0.05）。和VILI组相比，VILI+4-PBA组小鼠血清及肺组织中IFN-γ、TNF-α、IL-1β、ICAM-1均显著下降（P<0.05），肺组织有明显的改善，BALF中VEGF和总蛋白浓度显著下降（P<0.05），肺组织中GRP78和CHOP的蛋白和mRNA表达显著下降（P<0.05），肺组织中NF-κB、HIF-1α、XBP-1、ATF-6、ATF-4及p-eIF2α的蛋白表达量均显著下降（P<0.05）。结论 ERS在机械通气相关性肺损伤的过程中发挥着重要的作用，4-PBA可能是通过抑制ERS改善VILI，其机制可能与HIF-1α或NF-κB的表达有关。

关键词： 中药软膏   肛瘘术后   创面修复   网状Meta分析   随机对照试验  

摘要： 目的：基于网状Meta分析方法，系统评价七种不同中药软膏促进肛瘘术后创面的临床疗效。方法：通过计算机检索中国知网（CNKI）、万方数据库（CSPD）、维普数据库（CCD）、中国生物医学文献数据库（CBM）、PubMed、Embase、Web of Science及Cochrane Library 数据库，搜集与研究目的相关的随机对照试验（randomized controlled trial，RCT），检索时限均为建库至2023年7月。由2名研究者独立筛选文献、提取资料并评价纳入研究的偏倚风险后，采用Stata 17.0和RevMan 5.3软件进行网状分析。结果：本研究共纳入28项RCT，包括2762例患者，涉及7种中药软膏干预措施。网状Meta分析结果显示：在缩短创面愈合时间方面，疗效排名前3名的干预措施依次为三黄珍珠膏>九华膏>紫草生肌膏；在提高治愈率方面，疗效排名前3名的软膏为九华膏>生肌创愈膏>三黄珍珠膏；在改善疼痛积分方面，疗效排名前3名的软膏为三黄珍珠膏>当白生肌膏>九华膏；在改善分泌物积分方面，疗效排名前3名的干预措施依次为紫草生肌膏>当白生肌膏>象皮生肌膏。结论：现有证据表明，相较于常规换药处理，中药软膏能够不同程度地缩短肛瘘术后创面愈合时间，提高临床治愈率，并有效改善术后疼痛及减少创面分泌物等临床症状。然而，受纳入研究数量和文献质量限制，上述结论尚需开展更多高质量研究予以验证。

关键词： 牛肠病毒   重组腺病毒   结构蛋白VP1   细胞免疫  

摘要： 构建表达牛肠病毒（bovine enterovirus，BEV）结构蛋白VP1的重组腺病毒，并对其进行免疫原性和安全性的初步验证。首先，应用PCR扩增BEV VP1基因，并将其克隆至腺病毒载体pDC316-CMV-copGFP，获得的重组质粒pDC316-VP1-copGFP与pBHGlox-△E1，3cre共转染至293细胞后，进行病毒滴度测定及RT-PCR鉴定；其次，构建pET-32a-BEV-VP1原核表达质粒，优化诱导时间和温度后纯化BEV VP1蛋白；同时，将阴性对照腺病毒rAdv-copGFP、重组腺病毒rAdv-VP1及空白对照PBS分别肌注免疫BALB/c小鼠，观察小鼠临床症状；随后于免疫21 d后感染BEV，并于攻毒第0、5、10、15天采集小鼠肝、肺、脾、肾、小肠，分别提取组织RNA并制作病理切片，检测各组织中病毒载量并观察组织病理变化；最后，使用ELISA检测免疫血清中总IgG抗体、特异性抗体、细胞因子IFN-γ和IL-4水平。结果显示：成功构建腺病毒载体pDC316-VP1-copGFP；筛选出最优VP1原核表达条件为37 ℃诱导8 h，成功纯化出pET-32a-BEV-VP1蛋白；腺病毒免疫小鼠血清能够识别纯化后的VP1蛋白；重组腺病毒免疫能使小鼠产生特异性抗体，从而提高体液免疫与细胞免疫水平。本研究成功构建表达BEV VP1蛋白的重组腺病毒，在免疫小鼠后能够较好地诱导小鼠体内产生体液免疫应答和细胞免疫应答，从而对BEV感染起到了一定的保护作用，为进一步研发BEV新型疫苗奠定基础。

关键词： antibodies   p53   peptide synthesis   phosphorylation   post-translational modifications   protein modifications  

摘要： The tumor suppressor protein p53, known as the "guardian of the genome," is regulated by a complex network of post-translational modifications. Phosphorylations at 7 Ser/Thr residues within the N-terminal transactivation domain 1 (TAD1) play a role in p53 activation, yet their precise mechanisms of action remain elusive due to challenges in accessing well-defined phosphorylated isoforms. To address this limitation, this study harnesses a recently developed approach for the semisynthesis of site-specifically phosphorylated p53 to generate a comprehensive library of singly phosphorylated p53 including all TAD1 sites: Ser6, Ser9, Ser15, Thr18, Ser20, Ser33, and Ser37. The library was then used to probe the specificity of common p53 antibodies in western blot analysis. This study's results confirm the specificity of the target site of most phosphorylation-specific anti-p53 antibodies, but also reveal wide-spread epitope masking by phosphorylation, which has implications for p53 research and diagnostics. This "designer" p53 library thus provides a toolkit to study the function of p53 phosphorylation directly and indirectly as a quality control agent for some of the most widely used reagents in the field.

关键词： 纳米载体   RNA干扰   RNA农药   基因沉默   递送系统  

摘要： RNA干扰技术在农业生物技术领域展现出巨大的应用潜力，尤其在病虫害防控领域具有重要的应用价值。然而，RNA分子本身易降解、难以突破递送屏障，这些问题制约了RNA农药的研发与应用，纳米载体技术的发展为解决RNA递送瓶颈提供了重要途径。本文综述了近年来RNA递送纳米载体的研究进展，系统介绍了各类核酸载体的结构特点和递送机制。结合当前在植物保护与害虫防治中的应用实例，重点探讨了其在提高RNA稳定性、细胞摄取效率及靶向释放方面的优势。通过总结纳米递送平台研发的创新趋势与面临挑战，旨在为RNA农药的开发与实践应用提供理论支持与技术参考。