关键词： 燥热怫郁   2型糖尿病   脂代谢紊乱   理论探讨  

摘要： 糖脂代谢紊乱为核心机制的代谢性疾病的患病率不断攀升，加速心脑血管等疾病的发生发展，临床上，积极有效地控制疾病的进展，对提高患者生活质量具有重要意义。刘完素在《三消论》中针对消渴病机提出的“燥热怫郁”理论，认为消渴病以燥热内蕴化火、气机怫郁为疾病核心病机，两者相合致脾肾两虚、痰瘀互结而发消渴，与现代医学胰岛素抵抗、氧化应激、慢性炎症及肠道菌群失调等机制及发展过程高度契合。病机演变以“脾肾两虚”为始动基础，“燥热怫郁”为关键诱因，“痰瘀互结”为病理产物，三者交互形成恶性循环，三焦气化失司贯穿病程始终，致使糖脂代谢紊乱。治疗以“滋阴清热、健脾益肾、化痰祛瘀”为法，通过恢复三焦气化功能实现多层次干预。现代药理研究表明，清热益气活血类中药可多靶点调节糖脂代谢通路。深化了中医对代谢性疾病的认识，为2型糖尿病合并脂代谢紊乱提供了“以燥论治”、“三焦同治”的理论依据，对开发中西医结合疗法及优化临床干预策略提供新方向，从而提高患者生活质量。

关键词： H1N1流感病毒   上感颗粒   炎症反应   氧化应激   TLR4/NF-κB信号通路  

摘要： 目的 探究上感颗粒对流感病毒感染小鼠肺部炎症反应的作用机制。方法 经鼻腔接种H1N1流感病毒建立流感病毒肺部感染小鼠模型。实验分为正常对照组、模型组、阳性对照组和低、中、高剂量上感颗粒组，治疗7天 d。记录小鼠的死亡情况，试验结束后检测小鼠测定体质量和肺湿重。苏木精/伊红（HE）染色观察小鼠肺组织的病理组织形态，酶联免疫吸附试验检测肺组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-6、IL-8和转化生长因子-β（TGF-β）水平，试剂盒法检测肺组织超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和丙二醛（MDA），实时荧光定量PCR检测toll样受体4（TLR4）/核因子-κB（NF-κB）炎症信号通路。蛋白质免疫印迹检测TANK结合激酶1（TKB1）/干扰素调节因子（IRFs）信号通路。结果 与模型组相比，上感颗粒和磷酸奥司他韦均降低了流感病毒H1N1感染小鼠肺湿重（P<0.05，P<0.001），减少了肺组织炎性细胞浸润，降低了炎症因子TNF-α、IL-6、IL-8和TGF-β的水平（P<0.05，P<0.01，P<0.001），降低了肺组织SOD和GSH-Px的水平（P<0.05，P<0.01），提高了MDA水平（P<0.05，P<0.01）。此外，抑制了TLR4、MyD88和p38的mRNA水平（P<0.05，P<0.01）和TKB1/IRF3/7/NF-κB信号通路的蛋白表达（P<0.05，P<0.01，P<0.001）。结论 上感颗粒能有效减轻流感小鼠肺损伤、肺部炎症和氧化应激，其机制可能与下调TLR4/NF-κB炎症信号通路有关。

关键词： 藏红花素   多囊卵巢综合征   炎症反应   HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路  

摘要： 目的:探讨藏红花素对多囊卵巢综合征(PCOS)大鼠炎症反应的作用及其机制。方法:通过灌胃来曲唑及高脂饲料喂养建立PCOS大鼠模型,以喂养基础饲料及灌胃羧甲基纤维素钠的10只大鼠为正常对照组,将成模大鼠随机分为模型组、盐酸二甲双胍(100 mg/kg)阳性对照组、藏红花素低剂量(10 mg/kg)组、藏红花素高剂量(50mg/kg)组、藏红花素高剂量+rHMGB1(8μg/kg)组,予相应药物治疗后,评估胰岛素抵抗指数;ELISA检测血清激素(LH、T、FSH)和炎症因子IL-6、CRP、TNF-α水平;HE检测卵巢组织病理学变化;免疫组化检测卵巢组织中HMGB1蛋白表达;qRT-PCR检测卵巢组织TLR4、NF-κB p65 mRNA表达;Western Blot检测卵巢组织HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠胰岛素抵抗指数和血清LH、T、IL-6、CRP、TNF-α水平显著升高,血清FSH水平显著降低(P<0.05),卵巢组织出现大量闭锁卵泡,细胞层增厚,卵巢组织TLR4、NF-κB p65 mRNA和HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,藏红花素高、低剂量组和盐酸二甲双胍组胰岛素抵抗指数和血清LH、T、IL-6、CRP、TNF-α水平显著降低,血清FSH水平显著升高(P<0.05),卵巢组织病理形态改善,卵巢组织TLR4、NF-κB p65 mRNA和HMGB1、TLR4、p-NF-κB p65蛋白表达显著降低(P<0.05)。rHMGB1可逆转藏红花素的作用(P<0.05)结论:藏红花素可通过调节HMGB1/TLR4/NF-κB信号通路抑制PCOS大鼠炎症反应,减轻病理损伤。

关键词： Bcl-2   细胞凋亡   灵长类体型   进化分析  

摘要： 不同灵长类物种中存在体型上的显著差异，为探究影响灵长类体型演化的相关基因，选取6种体型差异显著的灵长类物种，通过比较基因组、分子进化和转录组学的分析手段筛选到Bcl-2基因对灵长类体型有显著的影响。结果显示，Bcl-2基因表达量与体型大小呈正相关，并且其在不同体型物种中经历了差异化的自然选择。群体遗传分析发现，Bcl-2特定SNP位点与体型进化相关，细胞实验证实该基因通过调控Wnt/β-catenin和BMP等通路影响成骨细胞增殖。多组学综合分析还表明，Bcl-2表达水平随体型增大而升高，在体型差异大的物种间表现出显著的选择信号和理化性质差异。基因功能研究表明，Bcl-2通过调控骨骼发育相关通路在体型演化中发挥关键作用。本研究揭示了Bcl-2作为关键调控因子，通过影响细胞凋亡、骨骼发育和代谢等过程参与灵长类体型适应性进化。本研究从进化遗传学角度揭示了导致灵长类体型差异的分子机制，为理解灵长类体型演化提供了新见解。

关键词： 麻杏苦甘汤   急性肺损伤   PI3K/AKT/Fox O1   细胞凋亡   炎症反应  

摘要： 目的:探讨麻杏苦甘汤缓解LPS诱导的急性肺损伤(ALI)的作用机制。方法:以LPS诱导构建RAW264.7细胞炎症模型,ELISA检测炎性因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)水平,CCK-8检测细胞存活率,筛选各药物作用浓度及处理时间。流式细胞仪检测细胞凋亡、细胞周期和ROS水平;ELISA法检测TNF-α、IL-1β、IL-6水平;采用q RT-PCR技术检测PI3K、AKT、FoxO1 m RNA表达;Western Blot检测p-PI3K、p-AKT、FoxO1蛋白表达;免疫荧光法检测RAW264.7细胞内Fox O1蛋白核移位情况。结果:与模型组比较,麻杏苦甘汤可降低LPS作用下RAW264.7细胞凋亡率、G0/G1期细胞比例、ROS水平和培养上清中TNF-α、IL-1β、IL-6水平,并能升高LPS作用下RAW264.7细胞PI3K、AKT、FoxO1 m RNA和p-PI3K、p-AKT、FoxO1蛋白表达,并可促进Fox O1出核。LY294002可减弱麻杏苦甘汤的作用。结论:麻杏苦甘汤可抑制LPS诱导的RAW264.7细胞凋亡、氧化应激和炎症反应,可能与调节PI3K/AKT/Fox O1信号通路促进Fox O1蛋白核易位有关。

关键词： hsa＿circ＿0004535   has-miR-1827   2型糖尿病   代谢相关脂肪性肝病  

摘要： 目的 探讨hsa＿circ＿0004535对2型糖尿病（T2DM）合并代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）模型小鼠的影响。方法 选取SPF级48只健康Balb/c小鼠进行建模并分组，每组6只，对照组：正常饲料喂养；T2DM组：2型糖尿病高糖高脂饲料诱导的糖尿病模型；T2DM合并MAFLD组：非酒精性脂肪肝高糖高脂饲料，诱导糖尿病合并脂肪肝模型；T2DM合并MAFLD+hsa＿circ＿NC组：建模4周后，尾静脉注射10nmol/只hsa＿circ＿NC；T2DM合并MAFLD+hsa＿circ＿0004535组：建模4周后，尾静脉注射10nmol/只circ＿0004535；T2DM合并MAFLD+miRNA＿NC组：建模4周后，尾静脉注射10nmol/只miRNA空白对照；T2DM合并MAFLD+miR-1827agomir组：建模4周后，尾静脉注射10nmol/只miR-1827agomir；T2DM合并MAFLD+miR-1827antagomir组：建模4周后，尾静脉注射10nmol/只miR-1827antagomir。给与干预措施后每周测量体质量并记录；进行葡萄糖耐量和胰岛素耐受实验；测血脂、肝功能；计算肝指数、胰岛素抵抗指数；病理学指标检（HE和油红O染色、免疫组化、TUNEL染色、Masson染色）测肝炎症、脂肪沉积及纤维化程度。结果 （1）注射hsa＿circ＿0004535组的动物体质量、肝重量、肝指数、胰岛素抵抗指数及生化指标均显著低于注射hsa＿circ＿NC组与T2DM合并MAFLD组（P<0.05）。（2）HE染色显示，T2DM合并MAFLD+circ＿0004535组，脂肪变性空泡减少变小，炎性细胞浸润减少。油红O染色结果和HE染色结果相一致。（3）TUNEL染色显示，T2DM合并MAFLD+hsa＿circ＿0004535组TUNEL阳性细胞明显减少（P<0.05）。（4）Masson染色显示，T2DM合并MAFLD+hsa＿circ＿0004535组胶原纤维沉积显著减少（P<0.05）。结论 在T2DM合并MAFLD的动物模型中，hsa＿circ＿0004535和miRNA-1827的表达在调控脂质代谢、胰岛素敏感性、炎症通路、肝细胞凋亡、肝纤维化相关通路方面发挥着重要作用。

关键词： 2型糖尿病   焦虑   抑郁   行为学评价   食蟹猴  

摘要： 目的 评价分析2型糖尿病 (type 2 diabetes mellitus， T2DM) 食蟹猴是否存在焦虑抑郁样行为，并在此基础上探讨生化指标与焦虑抑郁样行为的相关性。方法 筛选3只空腹血（fasting plasma glucose， FPG）≥ 5.6 mmol/L的食蟹猴纳入T2DM组和3只FPG < 4.2 mmol/L食蟹猴纳入正常组。检测各组年龄、性别、体质量、身体质量指数（body mass index， BMI）、FPG、血脂、动脉粥样硬化指数（atherosclerosis index， AI）、肿瘤坏死因子α（tumour necrosis factor α， TNF-α）水平；采用人类入侵者测试（human intrude test， HIT）评估食蟹猴的焦虑样行为，冷漠喂养测试（apathy feeding test， AFT）评价食蟹猴的抑郁样行为。通过Pearson分析焦虑抑郁样行为与血生化指标、炎症因子水平的关联。结果 （1）T2DM组FPG、AI、TNF-α水平高于正常组（均P < 0.05），T2DM组高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol， HDL-C）水平低于正常组（P < 0.05）。（2）HIT实验中，T2DM组在焦虑行为-正面、笼后-正面的行为持续时长高于正常组（P < 0.05）；T2DM组在运动-基线、运动-侧面、运动-背面的行为持续时间显著短于正常组（P < 0.05）。（3）AFT实验中，T2DM组对食物的拿取时间显著高于正常组（P < 0.05）。（4）Pearson相关分析显示：HIT实验中，笼后-正面的持续时长与AI水平呈正相关（r = 0.828， P = 0.042）；运动-背面的持续时长与AI水平呈负相关（r = -0.842， P = 0.035）。结论 T2DM食蟹猴表现出焦虑抑郁样行为，AI与焦虑样行为密切相关，为 T2DM与焦虑抑郁行为的关联机制研究提供新的证据。

关键词： 藏药   糖尿病   疗效   机制  

摘要： 糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一种由血糖异常升高引发的代谢疾病,管理DM的一般目标包括正常化血糖水平和预防短期及长期并发症。寻找安全、有效、廉价的治疗DM的药物一直是人们密切关注的领域。传统藏药有着近4 000年的悠久历史,对DM的认识基于整体,且将其病因分为内因和外因两大类。目前对于传统藏药治疗DM的记载大多是分散的,缺乏系统的总结和归纳,从机制角度对传统藏药治疗DM的系统综述的报道较少。该文对在传统藏药中应用于DM较多频次的藏药材前6位及疗效较为确定的3个方剂进行分析。传统藏药如诃子、余甘子、灰兜巴、小檗皮、姜黄、滇结香、三果汤、十八味诃子利尿丸等藏药及复方在治疗DM等相关的慢性病方面积累了丰富的经验,有很大的潜力被开发成新的抗DM药物。

关键词： 加味清络饮   类风湿关节炎   脂代谢   脂肪细胞因子  

摘要： 目的:研究清络饮优化方加味清络饮对佐剂诱导关节炎(AIA)大鼠的治疗作用及潜在机制。方法:SD大鼠左后足爪皮内注射约0.1 m L完全弗氏佐剂建立AIA模型,实验设正常对照组、模型组、甲氨蝶呤(0.5 mg/kg)阳性对照组和加味清络饮低(15 g/kg)、中(30 g/kg)、高(45 g/kg)剂量组。灌胃给药45 d。治疗过程中记录大鼠体质量和关节平分指数;大鼠处死后称量脏器计算脏器指数;HE染色观察关节、脂肪和肝脏组织病理学;免疫组化观察关节组织Visfatin、CD68水平;使用ELISA法检测血浆RF、TNF-α、IL-1β、IL-6、AST、ALT、AKP、TG、HDL-C、脂联素、瘦素、Visfatin水平;生化法检测血常规及糖脂代谢物。结果:低剂量加味清络饮可降低AIA大鼠关节炎评分,增加大鼠体质量,减轻关节病理损伤,降低血浆中IL-1β水平和血液中间细胞比率,提高血浆SOD水平,降低脂肪组织的分解代谢,增加脂肪组织细胞体积,降低脂肪组织Visfatin、VEGF水平和关节中TNF-α、IL-1β、IL-6水平及Visfatin表达。而中、高剂量加味清络饮表现出明显肝毒性。结论:加味清络饮能有效抑制脂肪分解代谢进程,降低血浆Visfatin含量和单核细胞浸润,下调关节内炎性细胞因子,对AIA动物模型具有一定的治疗作用。

关键词： 肝纤维化   巨噬细胞   氯膦酸二钠脂质体   CCl   转录组学  

摘要： 目的 观察氯膦酸二钠脂质体（CL）耗竭巨噬细胞对四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化小鼠模型的特征，并分析转录组学特点。方法 将32只C57BL/6小鼠随机分为空白脂质体（PL）组和CL组，每组16只，分别腹腔注射CL或PL。第5天，各组再分为对照组（-N）和模型组（-M），每亚组8只。模型组腹腔注射10%CCl4诱导肝纤维化，对照组注射橄榄油。4周后检测血清ALT、AST水平；HE和天狼猩红染色观察肝脏炎症及胶原沉积；提取肝组织RNA进行转录组测序并分析差异基因表达。结果PL-M组血清ALT、AST水平显著升高，病理染色提示纤维化分期以S3期为主；CL-M组纤维化分期以S1期为主。筛选差异基因（|logFC|>2且P<0.05），PL组1462个，CL组2119个。GO分析结果显示两种模型在多个生物学过程、细胞组分和分子功能方面均表现出显著富集；KEGG分析发现29条信号通路显著富集（P<0.05）。RT-qPCR验证了Lgals7、Timp1等基因的上调和Mup-ps16、Mup15等基因的下调趋势一致（P<0.05）。结论 本研究揭示了巨噬细胞耗竭对CCl4诱导肝纤维化模型的特征及转录组学特点，为肝纤维化免疫机制研究提供了理论参考。