关键词： Theta   间歇性Theta刺激   脑卒中   下肢   Meta分析   平衡   日常活动能力   运动功能  

摘要： 目的:通过Meta分析系统性评估间歇性Theta刺激改善脑卒中患者下肢运动功能、平衡功能以及日常活动能力的效果。方法:检索Cochrane Library、Scopus、PubMed、Embase、ProQuest、Web of Science、中国知网、中国生物医学、维普和万方数据库,选择各数据库建库至2024年11月期间间歇性Theta刺激治疗脑卒中的随机对照试验。其中,试验组接受小脑/M1区间歇性Theta刺激,对照组进行常规康复治疗。采用RevMan 5.3和Stata 16.0进行Meta分析。结果:共纳入12篇文献,444例患者。Meta分析表明,间歇性Theta刺激有助于提高脑卒中患者下肢Fugl-Meyer量表评分[WMD=2.87,95%CI(1.77,3.98),P<0.00001]、Berg平衡量表评分[WMD=5.79,95%CI(3.80,7.79),P<0.00001]以及改良Barthel指数[WMD=6.32,95%CI(4.02,8.44),P<0.00001]。亚组分析结果显示,相较于600脉冲刺激,1200脉冲刺激更有利于改善下肢Fugl-Meyer量表评分[WMD=4.31,95%CI(2.91,5.71),P<0.00001]、Berg平衡量表评分[WMD=8.12,95%CI(5.27,10.98),P<0.00001]和改良Barthel指数[WMD=8.50,95%CI(6.55,10.45),P<0.00001]。结论:间歇性Theta刺激能够提高脑卒中患者的下肢运动能力、平衡功能及日常生活能力评分。其中,1200脉冲间歇性Theta刺激在改善下肢运动能力、平衡功能和日常生活能力方面,可能具有更大益处。

关键词： 跑台运动   沉默信息调节因子1   糖原合成酶激酶3β   糖尿病小鼠   昼夜节律紊乱   代谢异常   认知功能障碍  

摘要： 背景:昼夜节律紊乱加剧胰岛素抵抗和糖脂代谢异常,成为糖尿病及其并发症的重要诱因。规律的有氧运动可通过激活AMPK信号通路增强胰岛素敏感性,同时上调沉默信息调节因子1表达以稳定核心时钟基因的节律性振荡。目的:探究跑台运动对糖尿病小鼠昼夜节律紊乱诱导的代谢异常及认知功能障碍的改善作用,并分析其潜在分子机制。方法:实验分为6组,8周龄野生型C57BL/6J小鼠与糖尿病db/db小鼠分别为正常对照组和糖尿病对照组,通过间歇性光照法(8 h光照/4 h黑暗,持续6周)建立昼夜节律紊乱模型,分别为模型组,糖尿病+模型组,并在建模的基础上实施6周跑台运动,分别为模型+运动组,糖尿病+模型+运动组。干预0,3,6周后检测小鼠体质量、血清褪黑素、空腹血糖、胰岛素抵抗的稳态模型评估(HOMA-IR)、葡萄糖耐量测试和胰岛素耐量测试、脂肪质量、三酰甘油、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇和Morris水迷宫行为学表现,以及胰腺组织BMAL1、CLOCK、Nrf2、超氧化物歧化酶2、沉默信息调节因子1和糖原合成酶激酶3β的mRNA表达水平。结果与结论:①昼夜节律紊乱显著加剧db/db小鼠体质量增长、血清褪黑素水平降低、空腹血糖升高及脂质代谢异常,而运动干预使上述指标降低,并改善昼夜节律紊乱小鼠的糖耐量和胰岛素敏感性,显著降低白细胞介素4和升高干扰素γ水平(P<0.01);②运动能下调昼夜节律紊乱小鼠昼夜节律核心基因BMAL1、CLOCK表达,激活Nrf2-超氧化物歧化酶2抗氧化通路,并调控沉默信息调节因子1-糖原合成酶激酶3β信号轴;③运动干预使db/db小鼠逃逸潜伏期降低、穿越平台次数增加(P<0.01);④结果表明,跑台运动通过调控沉默信息调节因子1-糖原合成酶激酶3β信号轴及抗氧化通路,有效改善糖尿病小鼠昼夜节律紊乱引发的代谢异常、免疫失衡与认知损伤。

关键词： IRF9   脊髓损伤   生物信息学   PC12细胞   炎症反应   免疫调控   细胞凋亡   继发性损伤   工程化组织构建  

摘要： 背景:脊髓损伤后炎症的具体调控机制尚不清楚。研究表明干扰素调节因子9(IRF9)在多种炎症相关疾病中发挥关键作用,但IRF9在脊髓损伤中的具体作用尚未被系统性研究。目的:结合生信分析与体外实验系统探讨IRF9在脊髓损伤后炎症反应中的作用及其潜在的分子机制。方法:①通过整合GEO数据库的基因芯片数据,采用差异基因分析、GO和KEGG功能富集分析、基因集富集分析及蛋白互作网络分析探讨脊髓损伤后差异基因的功能及通路,筛选与炎症相关的关键基因。②将第3代PC12细胞分4组培养:空白对照组不进行任何处理,损伤对照组加入脂多糖干预24 h,IRF9过表达组转染IRF9过表达慢病毒72 h后加入脂多糖干预24 h,IRF9敲低组转染IRF9敲低表达慢病毒72 h后加入脂多糖干预24 h。脂多糖干预结束后,CCK-8法检测细胞增殖,Elisa检测细胞培养基中脑源性神经生长因子和神经营养因子3水平,Western blot检测细胞内Bcl-2、Bax、Cleaved-Caspase3蛋白表达,划痕实验检测细胞迁移能力。结果与结论:①生物信息学分析显示,脊髓损伤后显著激活了炎症和免疫相关通路,筛选出IRF9为潜在核心调控因子,IRF9高表达可能上调Toll样受体和核因子κB信号通路,同时抑制环磷酸腺苷和钙信号通路及谷氨酸能突触功能,参与炎症反应和神经功能障碍的调控;②细胞实验结果显示,与空白对照组比较,损伤对照组细胞增殖、迁移能力及Bcl-2蛋白表达降低,脑源性神经生长因子和神经营养因子3水平降低,Bax与Cleaved-Caspase-3蛋白表达升高;与损伤对照组比较,IRF9敲低组细胞增殖、迁移能力及Bcl-2蛋白表达升高,脑源性神经生长因子和神经营养因子3水平升高,Bax与Cleaved-Caspase-3蛋白表达降低;③结果表明,IRF9可能是脊髓损伤后继发性损伤的重要调控因子和潜在治疗靶点。

关键词： α-突触核蛋白   轴突导向因子   帕金森病   多巴胺能神经元   Netrins   Ephrins   Semaphorins   Slits  

摘要： 背景:轴突导向因子可能在α-突触核蛋白相关神经退行性疾病中发挥重要作用。目的:探讨轴突导向因子在α-突触核蛋白相关神经退行性疾病中的作用及机制。方法:由第一作者系统检索中国知网、万方数据库、PubMed、Nature、Embase、Web of Sciense、JAMA、BMJ等数据库,中文检索词为“帕金森病,轴突导向因子,路易体痴呆,多系统衰竭,单纯性自主神经功能衰竭”,英文检索词为“Parkinson’s disease,axon guidance molecules,Netrin,Ephrin,Semaphorin,Slit,Dementia with Lewy Bodies,Multiple System Atrophy,Pure Autonomic Failure”,全面收集并整理近年来有关轴突导向因子与α-突触核蛋白相关神经退行性疾病的文献,最终纳入89篇文献进行综述分析。结果与结论:轴突导向因子蛋白家族包括Netrins、Ephrins、Semaphorins和Slits。Netrins通过影响肠道因子、依赖DCC受体调节多巴胺能神经元活力,进而影响神经退行性疾病进程。在Ephrins家族中,EphrinA/EphA参与介导神经元再生信号,EphA1借CXC趋化因子配体12/CXC趋化因子受体4通路调节炎症与神经病理,影响疾病发展。Semaphorins家族中的Semaphorins-3通过引导多巴胺能神经元轴突从黑质向纹状体生长,进而改善神经退行性疾病的行为学症状。在多巴胺能神经元轴突传导通路上,Slits经Slit/Robo等信号协作调控轴突定位与寻路过程,确保神经元信号传导路径的准确性,对神经元连接的维持与修复具有重要意义。

关键词： 阿霉素   心肌损伤   炙甘草汤   细胞凋亡   氧化应激   线粒体损伤   工程化组织构建  

摘要： 背景:临床研究显示甘草汤可有效改善阿霉素导致的心肌损伤症状和体征,保护心功能,但其具体作用机制尚不明确。目的:探讨炙甘草汤保护阿霉素诱导心肌损伤的作用及机制。方法:①在PharmMapper、TCMSP、PubChem和BATMAN-TCM数据库中获得炙甘草汤的靶点,通过MitoCarta 3.0获取线粒体相关基因,通过GEO数据库筛选心肌损伤相关靶点,筛选交集基因。②细胞实验:取30只SD大鼠,给予12.15 g/(kg·d)炙甘草汤灌胃(分2次给药),连续给药3 d。末次给药2 h后腹主动脉采血,分离血清,即得含药血清。将第10代大鼠心肌细胞(H9C2细胞)分5组干预:对照组不进行任何干预,模型组添加阿霉素干预48 h,低、中、高剂量含药血清组分别添加5%,10%,20%含药血清干预6 h,再添加阿霉素干预48 h。干预结束后,检测细胞上清乳酸脱氢酶与肌酸激酶水平、Caspase-7蛋白表达、细胞线粒体超微结构、细胞凋亡、活性氧水平及α-actinin的定位和分布。③动物实验:将30只C57BL/6小鼠随机分5组干预,每组6只:对照组皮下注射生理盐水,模型组及低、中、高剂量炙甘草汤组腹腔注射阿霉素(每周1次,连续注射4周)建立心肌损伤模型,同时,低、中、高剂量炙甘草汤组分别给予8.775,17.55,35.12 g/kg炙甘草汤灌胃(每天1次,连续给药4周),对照组与模型组给于生理盐水灌胃。末次给药结束后,检测小鼠左室射血分数、血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶水平、心肌组织结构变化、心肌细胞凋亡与心肌组织Caspase-7蛋白表达。结果与结论:①炙甘草汤靶点、心肌损伤靶点、线粒体相关基因韦恩图显示,Caspase-7为交集基因;②细胞实验:与模型组比较,中、高剂量含药血清组细胞上清乳酸脱氢酶与肌酸激酶水平、活性氧水平、细胞凋亡及Caspase-7、α-actinin蛋白表达显著降低,细胞线粒体超微结构损伤明显减轻;③动物实验:与模型组比较,中、高剂量炙甘草汤组血清乳酸脱氢酶和肌酸激酶水平、心肌细胞凋亡与Caspase-7蛋白表达显著降低,左室射血分数升高,心肌组织结构明显改善;④结果表明,炙甘草汤可在一定程度上防治阿霉素诱导的心肌损伤,主要表现在减轻氧化应激和线粒体损伤、抑制心肌细胞凋亡、保护心功能和改善心肌组织结构,在抑制内源性凋亡途径方面,Caspase-7可能是炙甘草汤的作用靶点。

关键词： 瓜蒌   类外泌体囊泡   NLRP3炎症小体   动脉粥样硬化   炎症反应   高效液相色谱-质谱   网络药理学   冠心病  

摘要： 背景:瓜蒌具有抗氧化功能和抗炎作用,常用于治疗心血管疾病。然而,瓜蒌的疗效往往受到成分复杂和生物利用度低的限制。目的:探讨瓜蒌类外泌体囊泡防治动脉粥样硬化的生物学机制。方法:①采用密度梯度离心法从瓜蒌中提取细胞外囊泡,通过透射电镜、纳米粒径检测仪与纳米颗粒追踪分析仪鉴定,共聚焦扫描显微镜观察THP-1来源巨噬细胞摄入瓜蒌类外泌体囊泡情况。②THP-1来源巨噬细胞随机分为空白组、模型组及瓜蒌类外泌体囊泡低、中、高剂量组,其中空白组正常培养,模型组加入50 mg/L氧化低密度脂蛋白,瓜蒌类外泌体囊泡低、中、高剂量组加入50 mg/L氧化低密度脂蛋白和5,10,20 mg/L瓜蒌类外泌体囊泡,干预24 h,采用Western blot检测细胞NLRP3和Cleaved-Caspase-1表达水平。③33只Apoe^(-/-)小鼠随机分为空白组、模型组和瓜蒌类外泌体囊泡组,其中空白组小鼠喂养普通饲料,其余2组小鼠喂养高脂饲料16周后,瓜蒌类外泌体囊泡组小鼠腹腔注射瓜蒌类外泌体囊泡,空白组与模型组小鼠腹腔注射生理盐水,隔日给药1次,连续4周,采用油红O染色检测主动脉斑块面积,苏木精-伊红染色观察主动脉组织病理变化,ELISA检测血清白细胞介素1β、白细胞介素18水平,试剂盒检测血脂水平,免疫组化检测主动脉NLRP3和Cleaved-Caspase-1表达水平。④高效液相色谱-质谱联用技术与网络药理学预测瓜蒌类外泌体囊泡治疗冠心病的潜在靶点。结果与结论:①瓜蒌类外泌体囊泡呈茶托状,粒径在50-150 nm之间,能被THP-1来源巨噬细胞有效摄入;②细胞实验显示,与模型组相比,瓜蒌类外泌体囊泡低、中、高剂量组NLRP3和Cleaved-Caspase-1表达水平呈浓度依赖型降低;③小鼠实验显示,与模型组相比,瓜蒌类外泌体囊泡组小鼠主动脉斑块面积减少,炎症细胞浸润较少,三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇水平下降,高密度脂蛋白胆固醇水平升高,NLRP3及Cleaved-Caspase-1蛋白表达降低;血清白细胞介素1β、白细胞介素18水平降低;④筛选并富集到的关键通路有HIF-1信号通路、PI3K-Akt信号通路、代谢通路、脂质和动脉粥样硬化通路等。结果表明,瓜蒌类外泌体囊泡可有效缓解小鼠动脉粥样硬化,作用机制可能与抑制NLRP3炎症小体介导的炎症反应有关。

关键词： 间充质干细胞   动脉粥样硬化   下肢动脉硬化闭塞症   溃疡愈合   外泌体   临床疗效   Meta分析   随机对照试验  

摘要： 目的:系统评价间充质干细胞治疗下肢动脉硬化闭塞症的临床疗效。方法:计算机检索PubMed、Embase、Web of Science、Cochrane Library、Scopus、Google Schola、中国知网、万方、维普、中国生物医学文献数据库,检索间充质干细胞治疗下肢动脉硬化闭塞症的随机对照试验,检索时限均从各数据库建库至2024年7月。按照制定的纳入和排除标准进行文献筛选、提取相关资料。使用RevMan 5.3软件对纳入文献进行Meta分析,包括截肢率、无截肢生存率、溃疡愈合率、踝肱指数、经皮氧分压以及无痛行走距离。结果:共纳入9个随机对照试验。Meta分析结果显示:与对照组比较,间充质干细胞治疗组患者无截肢生存率[RR=1.23,95%CI(1.07,1.42),P=0.004]、截肢率[RR=0.55,95%CI(0.35,0.85),P=0.007]、溃疡愈合率[RR=1.95,95%CI(1.51,2.52),P<0.001]、踝肱指数[MD=0.16,95%CI(0.13,0.19),P<0.001]、经皮氧分压[SMD=1.62,95%CI(0.87,2.37),P<0.001]以及无痛行走距离[MD=131.81,95%CI(3.56,260.06),P=0.04]均有显著改善,但死亡率[RR=1.13,95%CI(0.62,2.06),P=0.68]差异无显著性意义。结论:间充质干细胞对下肢动脉硬化闭塞症的部分临床指标有改善趋势。但由于纳入文献的局限性,未来尚需更多高质量、多中心、大样本的随机对照试验验证。

关键词： MXene   柔性电子传感器   生物传感器   糖尿病足   糖尿病   创面监测  

摘要： 背景:MXene材料具有良好的抗菌性、导电性、光热转换活性及生物相容性,可用于制备柔性电子传感器,在实时监测糖尿病足创面领域具有巨大的应用潜能。目的:综述基于MXene柔性电子传感器的优势及在糖尿病足创面监测中的应用现状与未来发展前景。方法:检索PubMed数据库、Web of Science数据库、中国知网、万方数据库中已发表的相关文献,以“MXene,柔性电子传感器,糖尿病足,创面监测”为中文检索词,以“MXene,flexible electronic sensor,diabetic foot,wound detection”为英文检索词,最终纳入55篇文章进行综述分析。结果与结论:对于与创面预后息息相关的pH值、温度、尿酸、血糖、超氧化物阴离子、过氧化氢等生理参数,MXene柔性电子传感器呈现出实时监测能力,具有广阔的发展前景。根据MXene材料的固有特性,通过对传统柔性传感器进行创造性的表面改性,不仅能够赋予传感器良好的抗菌能力,还可提升传感器的综合性能,通过增强对病理信号变化的敏感度展现出更高的氧化还原电流响应,实现精确、稳定的动态监测。尽管MXene柔性电子传感器在糖尿病足创面监测中取得了较大进展,但目前大多数研究仍处于初始阶段,长期生物安全性及系统性验证有待深入研究。

关键词： 红黄白凝胶   红景天   黄柏   白及   正交实验   处方配比   糖尿病足溃疡   愈合率   工程化皮肤材料  

摘要： 背景:中药外治法在促创面愈合方面有着悠久的历史,开发有效的中药外用制剂治疗糖尿病足溃疡具有重要意义。“红黄白(红景天、黄柏、白及)”组方药材具有去腐生肌、活血通络和解毒疗疮等功效,可有效促进糖尿病足溃疡愈合,但实际应用中存在久置易分层、换药时不易清理等缺陷。目的:优选“红黄白”凝胶的处方配比,开发稳定性良好、具有促糖尿病足溃疡愈合作用的凝胶型制剂。方法:通过腹腔注射链脲佐菌素的方法建立C57BL/6J小鼠糖尿病模型,造模成功4周后在小鼠背部制作直径8 mm的全层皮肤缺损创面,以“红黄白”凝胶组方药材(白及6-15 g、红景天3-6 g和黄柏3-12 g)的用量为考察因素,以创面愈合率及其曲线下面积为评价指标进行L_(9)(3^(4))正交实验,优选“红黄白”凝胶处方的配比。将30只C57BL/6J小鼠随机分为正常对照组、模型对照组和最佳处方配比药物治疗组(平行3组),每组6只,正常对照组制作全层皮肤缺损,模型对照组制作糖尿病全层皮肤缺损,最佳处方配比药物治疗组制作糖尿病全层皮肤缺损,创面造模3 d后,正常对照组、模型对照组创面涂抹灭菌水,最佳处方配比药物治疗组创面涂抹最佳处方配比“红黄白”凝胶处方,1次/d,连续治疗12 d,以创面愈合率及其曲线下面积为评价指标验证正交实验结果。结果与结论:正交实验结果显示,“红黄白”凝胶的最佳处方配比为白及6 g、红景天4.5 g、黄柏12 g;验证实验结果显示,最佳处方配比药物治疗组小鼠第4,6天的创面愈合率及其曲线下面积均高于模型对照组。结果表明“红黄白”凝胶的最佳处方配比为白及6 g、红景天4.5 g、黄柏12 g,此处方可有效促进糖尿病小鼠皮肤创面愈合。

关键词： 血红素氧合酶1   髓核间充质干细胞   脂多糖   炎症   椎间盘退变   核因子κB  

摘要： 背景:研究表明,血红素氧合酶1具有抗炎、抗凋亡作用,但它能否在髓核间充质干细胞中发挥抗炎保护作用尚不明确。目的:探讨血红素氧合酶1对炎症微环境下髓核间充质干细胞的保护作用及机制。方法:①从SD大鼠尾椎椎间盘中提取原代髓核间充质干细胞,通过流式细胞术、三系分化进行鉴定。②采用血红素氧合酶1过表达慢病毒感染髓核间充质干细胞,通过荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达以及Western blot检测血红素氧合酶1蛋白表达水平评估感染效率。③髓核间充质干细胞分为4组:对照组用DMEM/F-12完全培养基培养24 h,模型组、空载体组、血红素氧合酶1过表达组分别为未感染细胞、感染LV-Ctrl细胞、感染LV-HO-1细胞,3组均用添加5μg/mL脂多糖的DMEM/F-12完全培养基培养24 h。采用Western blot、免疫荧光检测炎症相关蛋白表达,Western blot检测核因子κB信号通路蛋白水平。结果与结论:①大鼠髓核间充质干细胞排列紧密,呈贴壁生长,多为纺锤形或梭形,通过流式细胞术检测髓核间充质干细胞具有较高的纯度,三系分化鉴定髓核间充质干细胞具有向脂肪细胞、骨细胞、软骨细胞分化的能力;②血红素氧合酶1过表达慢病毒感染的髓核间充质干细胞表达绿色荧光蛋白,血红素氧合酶1蛋白表达显著升高;③与模型组相比,血红素氧合酶1过表达组NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3、基质金属蛋白酶13、基质金属蛋白酶3、肿瘤坏死因子α蛋白表达均明显降低(P<0.05);④与模型组相比,血红素氧合酶1过表达组磷酸化核因子κB/核因子κB比值显著下降(P<0.05),磷酸化核因子κB抑制蛋白/核因子κB抑制蛋白也显著下降(P<0.05)。以上结果表明,血红素氧合酶1通过抑制核因子κB信号通路的激活,有效减少了脂多糖诱导的髓核间充质干细胞炎症反应。