关键词： 蛋白激酶类   mTOR调节相关蛋白   心肌梗死   自噬   细胞凋亡  

摘要： 目的探讨甲基莲心碱对急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)大鼠细胞自噬和凋亡及沉默信息调节因子2相关酶1(silent mating type information regulation 2 homolog-1,SIRT1)/腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)信号通路的影响。方法选取72只8月龄(200+20)g SPF级健康雄性SD大鼠,构建AMI大鼠模型,将造模成功大鼠随机分为模型组、甲基莲心碱低剂量组、甲基莲心碱高剂量组、甲基莲心碱高剂量+SIRT1抑制剂(EX-527)组,每组18只,另取18只正常大鼠作为对照组;观察各组大鼠心肌组织病理情况、检测心肌梗死面积、心肌组织细胞自噬相关蛋白表达、心肌细胞凋亡情况、SIRT1/AMPK/mTOR信号通路相关蛋白表达情况。结果甲基莲心碱低剂量组、甲基莲心碱高剂量组较模型组心肌病理损伤减轻,左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)、微管相关蛋白1轻链3(microtubule associated protein 1 light chain 3,LC3)Ⅱ、自噬关键分子酵母Atg6同系物(Beclin-1)光密度及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、SIRT1、p-AMPK/AMPK表达显著升高(P<0.05),左心室收缩末期内径、心肌梗死面积、细胞凋亡率、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)、p-mTOR/mTOR表达显著降低(P<0.05);甲基莲心碱高剂量+EX-527组较甲基莲心碱高剂量组心肌病理损伤加重,LVEF、LVFS、LC3Ⅱ、Beclin-1光密度及LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1、Bcl-2、SIRT1、p-AMPK/AMPK表达显著降低(P<0.05),左心室收缩末期内径、心肌梗死面积、细胞凋亡率、Bax、p-mTOR/mTOR表达显著升高(P<0.05)。结论甲基莲心碱可抑制AMI大鼠细胞凋亡并促进自噬,发挥心肌保护作用,其作用机制与激活SIRT1/AMPK/mTOR信号通路有关。

关键词： 和中降浊调糖颗粒   2型糖尿病   肠道屏障   肠道炎症  

摘要： 目的探讨和中降浊调糖颗粒(HZJZ颗粒)对2型糖尿病(T2DM)小鼠肠屏障的保护作用及缓解炎症的机制。方法利用高脂高糖饮食+链脲佐菌素构建T2DM小鼠模型,随机分为对照组、T2DM组、HZJZ颗粒低剂量组(6 g/kg)、HZJZ颗粒高剂量组(12 g/kg)和二甲双胍组(200 mg/kg)。给药5周后,检测小鼠空腹血糖(FBG)和口服葡萄糖耐量(OGTT),利用ELISA法检测血清和肠道中LPS及炎症因子的水平,采用HE和AB-PAS染色观察小鼠结肠组织结构变化,利用Western Blot和免疫荧光染色检测肠屏障完整性和炎症相关蛋白的表达水平。结果HZJZ颗粒能显著降低T2DM小鼠FBG并改善糖耐量异常;同时,给药组小鼠结肠组织杯状细胞和隐窝数目增加,肠屏障相关蛋白ZO-1、Occludin和Claudin-1表达增加,结肠组织细胞凋亡受抑制;进一步研究发现HZJZ颗粒降低T2DM小鼠LPS、IL-6和TNF-α水平,增加IL-10含量,降低TLR4、NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1、IL-18和IL-1β蛋白表达。结论HZJZ颗粒能通过TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路抑制T2DM小鼠肠道过度的炎症反应,增强肠道屏障的完整性,从而改善T2DM。

关键词： BDNF/Trkb/p38/JNK”信号通路   肌筋膜疼痛综合征   电针   细胞凋亡  

摘要： 目的基于“BDNF/Trkb/p38/JNK”信号通路,研究电针针刺激痛点治疗肌筋膜疼痛综合征(myofascial pain syndrome,MPS)的机制。方法将SD大鼠随机分为正常组、模型组、电针组、西药组,采用打击结合离心运动方式建立MPS大鼠模型后予以电针针刺激痛点、塞来昔布灌胃给药干预。实验结束后,通过苏木精-伊红染色法(hematoxylin-eosin,HE)和马松染色(masson's trichrome,Masson)观察各组大鼠肌肉组织的形态,普鲁士蓝染色观察各组大鼠肌肉组织的肥大细胞脱颗粒情况,TUNEL荧光染色观察各组大鼠肌肉组织的细胞凋亡水平,逆转录聚合酶链式反应(Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)检测各组大鼠肌肉组织的BCL2-Associated X的蛋白质(Bcl-2 associated X protein,Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(cysteine aspartate-specific protease,Caspase-3)和脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、酪氨酸激酶受体B(tropomyosin receptor kinase B,TrkB)、丝裂原活化蛋白激酶p38(P38 MAPK,p38)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)的mRNA表达水平,Wes检测各组大鼠肌肉组织的Bax、Bcl-2、Caspase-3和BDNF、磷酸化酪氨酸激酶受体B(Phospho-tropomyosin receptor kinase B,p-TrkB)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白激(phospho-p-P38MAPK,p-p38)、磷酸化c-Jun氨基末端激酶(phospho-c-Jun N-terminal kinases,p-JNK)的蛋白表达水平。结果HE和Masson染色提示电针和塞来昔布干预均可以改善因MPS造成的肌肉病理损伤,并能够抑制肥大细胞脱颗粒和细胞凋亡水平,电针和塞来昔布干预能升高Bcl-2和降低Bax、Caspase-3、BDNF、p-TrkB、p-p38、p-JNK的m RNA表达水平,升高Bcl-2和降低Bax、Caspase-3、BDNF、p-TrkB、p-p38、p-JNK的蛋白表达水平,电针的疗效优于塞来昔布。结论电针可通过抑制BDNF/Trkb/p38/JNK信号通路进而降低MPS病变肌肉组织的细胞凋亡水平以治疗MPS,在中医理论上可用电针恢复体内气血阴阳失衡解释,相应机制尚需要进一步探索。

关键词： 心肌梗死   缺血再灌注损伤   三七总皂苷   炎症反应   作用机制   中药研究  

摘要： 目的探讨三七总皂苷(PNS)通过腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)-核因子κB(NF-κB)通路调控大鼠心肌缺血再灌注损伤(MIRI)炎症反应的作用机制。方法82只雄性SD大鼠随机分成:假手术(Sham)组(n=11)、模型(I/R)组(n=15)、模型+PNS(I/R+PNS)组(n=12)、模型+AMPK激活剂(I/R+AICAR)组(n=15)、模型+PNS+AMPK抑制剂(I/R+PNS+CC)组(n=14)、模型+NF-κB抑制剂(I/R+BAY)组(n=15)。通过结扎冠状动脉左前降支40 min、再灌注60 min制备大鼠心肌缺血再灌注(I/R)模型。Sham组与I/R组于结扎前40 min、30 min分别腹腔注射0.9%的氯化钠溶液;I/R+PNS组、I/R+AICAR组、I/R+BAY组于结扎前40 min腹腔注射0.9%的氯化钠溶液,结扎前30 min分别腹腔注射50 mg/kg PNS、10 mg/kg AICAR、10 mg/kg BAY-117082;I/R+PNS+CC组于结扎前40 min颈静脉注射0.25 mg/kg Compound C,结扎前30 min腹腔注射50 mg/kg PNS。检测血流动力学指标、心肌组织病理及髓过氧化物酶(MPO)活性;实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)法和酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测心肌组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)蛋白与mRNA表达;Western blot法测定心肌组织磷酸化AMPK(p-AMPK)、胞浆磷酸化NF-κB抑制蛋白激酶α/β(p-IKKα/β)、磷酸化NF-κB抑制蛋白α(p-IκBα)及细胞核内磷酸化NF-κB(p-NF-κB)蛋白表达;免疫荧光染色法观察p-NF-κB入核水平。结果与Sham组相比,I/R组大鼠心脏收缩与舒张功能降低(P<0.05),心肌组织病理损伤加重,MPO活性、炎症因子(TNF-α和MCP-1)表达量升高(P<0.05),p‐AMPK表达量降低(P<0.05),NF-κB通路相关蛋白(p-IKKα/β、p-IκBα及p-NF-κB)表达量升高(P<0.05)。与I/R组相比,I/R+PNS组心功能改善(P<0.05),心肌组织病理损伤减轻,MPO活性及炎症因子表达量降低(P<0.05),p-AMPK表达量升高(P<0.05),NF‐κB通路蛋白表达量减少(P<0.05)。与I/R+PNS组相比,I/R+PNS+CC组心功能下降(P<0.05),病理损伤加重,MPO活性、炎症因子及NF-κB通路蛋白表达量升高(P<0.05),p‐AMPK表达量降低(P<0.05)。结论PNS可通过抑制炎症反应发挥抗MIRI的作用,其机制可能与调控AMPK-NF-κB信号通路有关。

关键词： 2型糖尿病   干眼   危险因素   列线图  

摘要： 目的:观察2型糖尿病(T2DM)继发干眼的危险因素,并构建适用于早期筛查的列线图风险预测模型。方法:收集2020年3月至2024年4月就诊本院的T2DM患者347例,按照7∶3比例分为训练集(242例)、验证集(105例)。观察训练集的无干眼患者(对照组,86例)与糖尿病继发干眼患者(干眼组,156例)的人口学资料、血糖指标、临床治疗情况。取其中存在统计学意义的指标纳入多因素Logistic回归分析中筛选继发干眼的危险因素,并将相关危险因素代入R软件构建列线图模型并结合验证集数据加以验证。结果:T2DM患者242例中继发干眼患者占比为64.5%(156/242)。多因素Logistic回归分析发现,血糖变异度、糖化血清蛋白、视网膜病变、睑板腺功能状况、T2DM病程、睑板腺开口堵塞是T2DM继发干眼的危险因素(均OR>1,P<0.05)。基于上述6项指标构建列线图预测模型,训练集和验证集受试者工作特征(ROC)曲线下面积分别为0.994(95%CI:0.989-0.999)、0.990(95%CI:0.977-0.999)。训练集和验证集校准曲线斜率相近,经Hosmer-Lemeshow检验:χ^(2)=1.461、1.566,P=0.993、0.992。列线图模型能够提供良好的临床决策效用。结论:血糖变异度、糖化血清蛋白、视网膜病变、睑板腺功能状况、T2DM病程、睑板腺开口堵塞均会增加T2DM继发干眼风险,构建列线图模型能够为临床提供评估T2DM患者干眼风险的有力工具,有助于早期诊断和干预,提升患者生活质量。

关键词： 加味小陷胸汤   2型糖尿病   阻塞性睡眠呼吸暂停   异病同治   网络药理学   分子对接  

摘要： 【目的】采用网络药理学与分子对接探讨加味小陷胸汤对2型糖尿病(T2DM)和阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)“异病同治”的作用机制。【方法】在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索及筛选加味小陷胸汤(黄连、半夏、瓜蒌、柴胡、丹参、赤芍、黄芪)中7味中药的活性成分及相关靶点,利用Swiss Target Prediction对活性成分进行靶点预测,其后运用UniProt数据库进行靶点基因标准化。利用DisGeNET、OMIM、Gene Cards等数据库获得T2DM和OSA的主要致病靶点,利用韦恩图对疾病相关靶点与活性成分作用靶点取交集,获得加味小陷胸汤“异病同治”T2DM和OSA的潜在作用靶点。借助STRING数据库及Cytoscape 3.10.2软件分别构建潜在作用靶点的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络和“药物-成分-靶点”网络,通过网络拓扑分析筛选出核心活性成分和核心靶点。通过Metascape数据库对潜在作用靶点进行基因本体论(GO)功能及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。利用AutoDock软件对筛选出的核心靶点与化合物进行分子对接验证。【结果】157个加味小陷胸汤活性成分可作用于1043个蛋白靶点,与1798个OSA疾病相关靶点和3466个T2DM疾病相关靶点比对后,得到253个潜在作用靶点。GO功能富集分析显示,潜在作用靶点核心化学成分主要参与了磷代谢的上调、细胞迁移的调节、循环系统过程、激素水平的调节等生物过程。KEGG通路富集分析得到Rap1、AGE-RAGE、cAMP、阿尔茨海默病等通路。PPI和“药物-成分-靶点”网络拓扑分析筛选出IL-6、TNF、Akt1、IL-1β、EGFR等39个核心靶点以及丹酚酸B、丹参醛、黄芩苷、姜黄素等核心活性成分,分子对接显示上述成分受体与核心蛋白配体能稳定对接。【结论】加味小陷胸汤“异病同治”T2DM和OSA的共性药效物质基础为丹酚酸B、黄芩苷、姜黄素等,其共同作用机制可能与IL-6、TNF、Akt1等关键靶点,调控Rap1、AGE-RAGE、cAMP等信号通路相关。

关键词： 益景汤   糖尿病视网膜病变   液相色谱-质谱联用(LC-MS)   网络药理学  

摘要： 目的:基于液相色谱-质谱联用(LC-MS)及网络药理学探讨益景汤治疗早期糖尿病视网膜病变的主要活性成分和潜在机制。方法:采用LC-MS技术对益景汤的活性成分进行定性。根据ADME属性明确益景汤中的主要活性成分,结合网络药理学的方法,得到益景汤潜在治疗糖尿病视网膜病变的靶点,进一步通过疾病蛋白靶点之间蛋白质相互作用(PPI)、基因本体论(GO)富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析,预测益景汤治疗糖尿病视网膜病变的核心靶点与网络。最后,对核心靶标及通路进行Western blot实验验证。结果:益景汤中的主要活性成分与疾病靶点互作的核心靶点有TNF、Alb、EGFR、STAT3、PTGS2、ESR1、PPAR、MMP9、TLR4、MAPK等;益景汤治疗糖尿病视网膜病变主要与癌症信号通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化、神经退行性变的途径等相关,并集中于炎症反映的调节、程序性细胞死亡的正调控、细胞迁移的正向调节等生物过程。Western blot实验结果显示益景汤可抑制体外高糖环境下大鼠视网膜微血管内皮细胞P-STAT3/STAT3、P-ERK/ERK的表达水平,即抑制STAT3、ERK磷酸化。结论:本研究揭示了益景汤的药效学物质基础及其潜在的多组分、多靶点、多途径的药理作用,益景汤可能通过调节多信号通路,抑制眼底炎症反应,从而保护视网膜血管内皮细胞、维护血-视网膜屏障、促进视网膜神经血管损伤的修复,进而发挥治疗糖尿病视网膜病变的作用。

关键词： 湿疹   瘙痒   中药外治法   Meta分析  

摘要： 目的 使用Meta分析评价中药外治法治疗湿疹引起的皮肤瘙痒症的临床疗效。方法 通过检索国内的中国知网、维普、万方数据、Sinomed和国外的Pubmed、Embase、Lilacs、Cochrane等文献数据库,搜索中药外治法治疗湿疹引起的皮肤瘙痒的随机临床试验。检索时间为各数据库建库至2024年12月,由2名评价员分别筛选录入统计学数据,使用Cochrane系统评价手册5.1.0进行偏倚风险评估,应用RevMan5.4.1进行Meta分析。结果 最终纳入14篇文献,共计1 788例患者。与对照组相比,中药外治法(治疗组)对瘙痒评分改善效果更佳(Z=11.88,P<0.000 01)、对湿疹面积和严重程度指数(EASI)评分改善效果更佳(Z=23.15,P<0.000 01)、其临床总有效率更高(Z=6.21,P<0.000 01)、对中医症状的改善效果更佳(Z=5.49,P<0.000 01)、其临床复发率更低(Z=2.88,P=0.004),纳入文献中有3篇提及不良反应,治疗组的不良反应低于对照组。结论 中药外治法治疗湿疹引起的皮肤瘙痒效果优于对照组。由于纳入的文献存在偏倚及异质性,此结论还需更多大样本、多中心、随机、对照、双盲研究加以论证。

关键词： 癌症   失志综合征   检出率   Meta分析  

摘要： 目的:针对中国癌症患者失志综合征检出率进行系统回顾和Meta分析,为制定公共卫生战略提供循证依据。方法:系统检索Web of Science、Cochrane Library、PubMed、EMbase、Scopus、中国知网、中国生物医学文献服务系统、万方数据库、维普数据库,检索时限自建库至2024年3月12日,采用Stata 17.0软件进行Meta分析,敏感度分析、亚组分析寻找异质性来源,采用漏斗图、egger′s检验识别发表偏倚。结果:共纳入24篇包括6580例研究对象。Meta分析结果显示,我国癌症患者失志综合征检出率为61.9%(95%CI=0.525~0.708),亚组分析结果显示,东部、中西部、台湾地区癌症患者失志综合征检出率分别为47.2%、82.4%、41.6%。妇科癌症、其他消化道癌症、肺癌、肝癌失志综合征检出率分别为67.9%、60.1%、86.6%、99.9%(均P<0.05)。结论:在我国癌症患者失志综合征检出率普遍较高,在某种疾病及部分地区表现更为突出,肺癌、肝癌以及中西部地区癌症患者失志综合征检出率更高。临床医务人员应注意早期识别,并进行针对性地干预,以避免患者进一步的身体或心理的伤害,进而提高患者整体生活质量。

关键词： 糖尿病患者   糖化血红蛋白监测  

摘要： 按照惯例,我们的“爱心小屋”近日免费为北京市朝阳区西坝河西里社区52位糖尿病患者进行了糖化血红蛋白监测、为54位患者进行了尿液监测,结果汇报如下。糖化血红蛋白监测结果5 2位糖尿病患者在监测糖化血红蛋白后,按照监测结下;第三组:10名患者,糖化血红蛋白在7.5%以下;第四组:10名患者,糖化血红蛋白在8.0%以上。