关键词： 非酒精性脂肪性肝病   2型糖尿病   肝纤维化   剪切波弹性成像   天冬氨酸氨基转移酶/血小板比率指数   诊断  

摘要： 目的探讨应用剪切波弹性成像检测联合天冬氨酸氨基转移酶/血小板比率指数(APRI)诊断2型糖尿病(T2DM)合并非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)患者肝纤维化程度的价值。方法2021年1月~2023年12月我院诊治的T2DM合并NAFLD患者73例,使用瞬时弹性成像(TE)行肝硬度检测(LSM),使用超声剪切波弹性成像检查获得杨氏模量值。常规临床检测,计算APRI。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析指标的诊断效能,采用Kappa一致性分析评估剪切波弹性成像联合APRI与TE诊断的一致性。结果以LSM>7.4 kPa诊断为进展期肝纤维化,本组发现进展期肝纤维化患者19例(26.0%);存在进展期肝纤维化患者体质指数、合并糖尿病肾病比率、血清AST、ALT水平、LSM、APRI和杨氏模量值分别为(30.7±2.8)kg/m 2、42.1%、(92.3±10.5)U/L、(120.5±9.6)U/L、(12.7±3.1)kPa、(1.2±0.4)和(10.7±3.1)kPa,均显著高于非进展期肝纤维化患者[分别为(25.2±2.4)kg/m 2、20.4%、(49.8±8.1)U/L、(47.8±7.3)U/L、(6.1±1.6)kPa、(0.8±0.3)和((5.1±1.6))kPa,P<0.05];ROC分析显示杨氏模量值联合APRI诊断T2DM合并NAFLD患者进展期肝纤维化的AUC为0.891,其敏感度为94.7%,特异度为74.1%,显著优于两指标单独预测(P<0.05);剪切波弹性成像联合APRI诊断T2DM合并NAFLD患者进展期肝纤维化与TE检测诊断的Kappa值为0.563(P<0.05),一致性中等。结论剪切波弹性成像联合APRI对T2DM合并NAFLD患者肝纤维化具有一定诊断价值。

关键词： 糖尿病   骨骼肌萎缩   PI3K/AKT   运动  

摘要： 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(phosphoinositide 3-kinase/protein kinase B,PI3K/AKT)通路在代谢调节中起核心作用,胰岛素抵抗引起PI3K/AKT通路激活受损诱发代谢性疾病。糖尿病胰岛素抵抗抑制PI3K/AKT信号通路进而抑制骨骼肌蛋白质合成,引起骨骼肌萎缩。运动通过激活PI3K/AKT信号通路促进骨骼肌细胞葡萄糖转运蛋白4(Glucosetransporter4,GLUT4)移位,抑制肌肉环指蛋白1(muscle RING-finger 1,MuRF1)和萎缩蛋白-1(Atrogin-1),诱导骨骼肌蛋白质合成,抑制肌肉萎缩。运动能有效改善胰岛素抵抗激活PI3K/AKT信号通路级联反应改善氧化应激,降低全身低级别炎症,激活的PI3K/AKT信号通路还可以保护骨骼肌线粒体功能,抑制骨骼肌线粒体氧化应激和自噬过度,增加骨骼肌蛋白质合成,改善糖尿病诱发的骨骼肌萎缩;运动激活的PI3K/AKT上调VEGF,诱导血管生成,促进血管内皮细胞损伤修复,改善糖尿病骨骼肌肌细胞功能,促进骨骼肌生长。通过对运动激活PI3K/AKT通路改善糖尿病骨骼肌萎缩相关机制进行综述,旨在为运动改善糖尿病骨骼肌萎缩提供理论依据。

关键词： 蚕沙   糖尿病肾病   1-脱氧诺吉霉素   AMP活化的蛋白质激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)-叉头框蛋白O1(FoxO1)通路   肾纤维化   糖脂代谢  

摘要： 目的基于AMP活化的蛋白质激酶(AMPK)/沉默信息调节因子1(SIRT1)-叉头框蛋白O1(FoxO1)通路探讨蚕沙提取物deoxynojirimycin(DNJ)对糖尿病小鼠肾纤维化和糖脂代谢的影响。方法2022年3月至2023年3月,将12只健康雄性C57BL/KsJ糖尿病(db/db)小鼠按照随机数字表法分为糖尿病组和DNJ治疗组(10 mg·kg-1·d-1,口服,6周),各6只;另外3只相同条件的非糖尿病C57野生型小鼠作为对照组(对照组小鼠和糖尿病小鼠口服同等剂量的生理盐水)。监测小鼠血糖、脂质代谢以及肾功能标志物水平。收集小鼠肾组织用于组织学染色,包括苏木精-伊红(HE)染色,过碘酸希夫(PAS)染色和Masson三色染色。高糖诱导体外细胞模型并用免疫荧光检测平滑肌肌动蛋白α(α-SMA)/纤连蛋白(FN)表达评估纤维化,噻唑蓝(MTT)检测细胞活性。另外,蛋白质印迹法检测AMPK/SIRT1-FoxO1通路水平与自噬水平。结果相比糖尿病小鼠的血糖水平(21.79±0.90)mmol/L,经DNJ治疗6周后,血糖水平降低至(15.02±0.61)mmol/L,肾损伤程度得到改善。病理学切片可以观察到由细胞外基质沉积过多引起的肾纤维化的缓解。与糖尿病小鼠的肾功能指标血尿素氮(5.24±0.62)mmol/L、血清肌酐(27.68±2.51)mmol/L,尿蛋白/肌酐(29.57±2.71)mg/g相比,DNJ治疗组小鼠的肾功能指标降低至血尿素氮(3.73±0.45)mmol/L、血清肌酐(14.72±1.66)mmol/L、尿蛋白/肌酐(21.49±2.18)mg/g。其次,糖尿病组小鼠脂质代谢中总胆固醇(3.63±0.07)mmol/L以及甘油三酯(3.40±0.04)mmol/L也在DNJ治疗6周后降低至(2.54±0.10)mmol/L、(2.01±0.04)mmol/L。在体内和体外实验中,对照组磷酸化AMPK(p-AMPK)/AMPK、SIRT1、Ac-FoxO1/FoxO1、p62、LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ分别为1.01±0.02、1.00±0.01、1.01±0.01、0.99±0.02、0.65±0.08,糖尿病组的p-AMPK/AMPK、SIRT1和LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ分别降低至0.41±0.07、0.52±0.06、0.31±0.09,AcFoxO1/FoxO1、p62分别升高至1.83±0.11和1.57±0.09;但与糖尿病组相比,DNJ治疗组p-AMPK/AMPK、SIRT1和LC3-Ⅰ/LC3-Ⅱ分别逆转至0.81±0.08、0.84±0.09和1.79±0.11,Ac-FoxO1/FoxO1、p62分别降低至0.82±0.09和1.18±0.11。结论DNJ治疗通过激活AMPK促进SIRT1-FoxO1通路缓解糖尿病小鼠的肾纤维化并降低糖脂代谢水平,AMPK可能是DNJ在糖尿病中发挥肾脏保护作用的有效靶点。

关键词： 糖尿病肾病   益气养阴消癥方   肾功能   IL-1β   IL-6   大鼠  

摘要： 目的:探讨益气养阴消癥方对糖尿病肾病(diabetic kidney disease,DKD)大鼠肾功能及相关炎症因子的影响。方法:SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组(缬沙坦8 mg/kg)和益气养阴消癥方高(8 g/kg)、中(4 g/kg)、低(2 g/kg)剂量组,每组10只大鼠。除正常组外,其他各组大鼠采用链脲佐菌素腹腔注射(50 mg/kg)建模,成模后各组大鼠给予相应药物灌胃,连续给药8周。观察各组大鼠一般状况,检测各组大鼠24 h尿蛋白定量及血尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)水平,ELISA检测血清IL-1β(白介素-1β)和IL-6(白介素-6)含量。结果:与正常组比较,模型组大鼠一般状况差,24 h尿蛋白定量和血BUN、SCr及血清IL-1β、IL-6水平明显升高(均P<0.05或P<0.01);各给药组一般状况较模型组明显改善,24 h尿蛋白定量和血BUN、SCr及血清IL-1β、IL-6水平明显降低(均P<0.05);益气养阴消癥方高剂量组效果与阳性对照组相当(均P>0.05)。结论:益气养阴消癥方可保护DKD大鼠肾功能,抑制炎症因子分泌。

关键词： 糖尿病肾脏病   自噬   肾主气化  

摘要： 自噬通过溶酶体降解途径将受损的细胞器及蛋白质进行清除和再利用,是细胞进行自我代谢及更新的一种程序性死亡方式,可参与糖尿病肾脏病(diabetic kidney disease,DKD)多种发病机制。肾主气化是对肾脏生理功能的高度概括。从肾主气化理论切入,本文提出自噬是肾主气化功能的重要体现,自噬通过“自食”降解受损的细胞器及蛋白质,进行能量更新,维持细胞正常的新陈代谢及稳态平衡,与中医肾主气化协调机体气血津液的相互资生、输布及转化过程不谋而合。DKD自噬不足与肾失气化病机相契合,自噬不足导致的异常蛋白质、细胞器的堆积与氧化应激、炎症及纤维化等病理变化是肾失气化、痰湿瘀毒内结在微观层面的体现。

关键词： 妊娠期糖尿病   妊娠期增重   空腹血糖水平   甘油三酯  

摘要： 目的探索妊娠期糖尿病(GDM)发病的危险因素,以期对GDM高危孕妇早期管理提供依据。方法选取2021年1月到2023年4月在本院建档并产检的孕妇,于建档时记录孕妇年龄、身高、孕前体重等信息,于孕早期采集孕妇静脉血,检测血脂血糖水平,记录孕早期体重,于口服葡萄糖糖耐量试验(OGTT)记录空腹体重,OGTT前孕中期每周体重增长为以上两个体重之差除以间隔孕周。采用巢式病例对照方法,以年龄、孕前体质量指数(BMI)为匹配因素进行1∶1配对选择对照组。分析GDM发病的影响因素。结果与对照组相比,GDM组孕前BMI较高、糖尿病家族史比例较高、妊娠期糖尿病史比例较高、孕中期每周体重增长较多,孕早期TG、FPG水平较高,以上差异均具有统计学意义。多因素logistic回归分析结果显示,家族史(OR=3.09)、GDM史(OR=3.58)、孕早期FBG升高(OR=3.00)、孕早期TG升高(OR=2.63)、孕中期每周体重增长过多(OR=1.85)是GDM发病的危险因素,孕中期每周体重增长不足(OR=0.56)是GDM发病的保护因素。结论家族史、GDM史、孕早期FBG升高、孕早期TG升高为GDM发病的高危人群,应予早期管理,使孕中期每周体重增长在适宜范围内。

关键词： 马齿苋生物碱   溃疡性结肠炎   Toll样受体4   核因子kappa-B   Nod样受体蛋白3  

摘要： 目的探讨马齿苋生物碱(purslane alkaloids,PA)对小鼠溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的治疗作用及调节机制。方法将35只小鼠随机分为空白对照组、模型组、药物治疗组(马齿苋生物碱低、中、高剂量组,美沙拉嗪组,马齿苋生物碱联合美沙拉嗪组)。前7 d空白对照组小鼠给予纯净水,模型组及药物治疗组给予3%硫酸葡聚糖钠盐(dextran sulfate sodium salt,DSS)溶液,构建UC动物模型。从第8天起,空白对照组及模型组给予生理盐水,药物治疗组小鼠开始接受固定剂量药物灌胃处理,持续14 d。在此期间,每日对小鼠健康状况、体质量、粪便特征及是否有血便进行详细记录。试验结束后计算各组小鼠疾病活动指数(disease activity index,DAI),测量结肠长度;采用苏木素-伊红染色观察结肠组织病理变化;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清及结肠组织中促炎因子白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量;蛋白印迹试验(Western blot)、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)测定结肠组织Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)、核因子kappa-B(nuclear factor kappa-B,NF-κB)及Nod样受体蛋白3(Nod-like receptor3,NLRP3)蛋白及mRNA表达。结果与模型组比较,马齿苋生物碱治疗组及联合组能缓解小鼠症状,增加体质量(P<0.05,P<0.01);降低DAI评分(P<0.05,P<0.01);缓解结肠组织缩短(P<0.01)及病理损伤;降低小鼠血清和结肠组织中IL-1β、IL-6、TNF-α炎症水平(P<0.05,P<0.01),显著下调结肠组织中TLR4、NF-κB和NLRP3蛋白及mRNA表达水平(P<0.05,P<0.01)。结论马齿苋生物碱对小鼠急性UC有明显治疗作用,能降低UC小鼠结肠组织促炎细胞因子水平,明显缓解病理损伤,其抗炎机制可能与抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路有关。

关键词： 金银花   乙酸乙酯萃取   湿疹治疗   免疫调节   细胞凋亡  

摘要： 针对金银花治疗湿疹的作用机理尚未被科学证实的问题,采用2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导C57BL/6小鼠产生湿疹反应的方法,给予金银花乙酸乙酯部位对湿疹小鼠进行治疗,研究了湿疹小鼠疾病相关的免疫因子、皮肤病理切片、皮肤细胞凋亡等指标,得出来金银花清除了湿疹小鼠血清中的IgE、IL-4和IL-17等细胞因子的水平,提高了免疫因子CD4^(+)水平,减轻小鼠湿疹引起的棘层过度增生、减少炎性细胞的浸润和组织水肿,促进角质层细胞的凋亡,湿疹小鼠的症状得到了一定的改善。实验结果显示:金银花乙酸乙酯部位通过抑制炎症细胞的产生、调节免疫因子等方式来治疗湿疹。

关键词： 多巴胺能神经元   黑质致密部   诱导多能干细胞   高纯度体外分化   实时定量聚合酶链反应   免疫荧光   人  

摘要： 目的探索一种从人诱导多能干细胞(iPSCs)分化出高纯度中脑黑质致密部(A9)多巴胺(DA)能神经元的实验方法。方法通过优化小分子化合物和重组人源生长因子配方,诱导iPSCs分化为中脑腹侧底板多巴胺能祖细胞,进一步诱导其成熟为黑质致密部DA能神经元。分化过程中使用Real-time PCR和免疫荧光进行有效的标记物检测。结果iPSCs首先分化为多巴胺能前体细胞,再逐渐分化为表达酪氨酸羟化酶(TH)的DA能神经元。结论应用该方法可成功分化出高纯度的TH阳性DA能神经元,该分化技术为深入研究帕金森病的病理生理机制提供了一种有效的细胞模型。