关键词： 和中消痞颗粒   慢性萎缩性胃炎   胃癌前病变   内质网应激   细胞凋亡   尼卡林(Ncln)/C/EBP同源蛋白(CHOP)轴  

摘要： 目的：探讨和中消痞颗粒（HZXPG）对N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍（MNNG）诱导的人胃黏膜细胞凋亡的影响，以及对Ncln/CHOP轴及其介导的内质网应激作用机制。方法：利用细胞增殖与活性检测法（CCK-8）检测MNNG对GES-1细胞增殖的抑制情况，择选MNNG最优有效剂量。将GES-1人胃黏膜细胞分为空白组、模型组(MNNG 1.5625 mmol·L-1)、HZXPG低、高剂量组（5%、10%含药血清），通过鬼笔环肽染色检测MNNG诱导的人胃黏膜细胞形态变化，通过原位末端标记法（TUNEL）染色检测细胞凋亡情况，磷脂结合蛋白V/碘化丙啶（Annexin Ⅴ/PI）流式细胞术检测人胃黏膜细胞凋亡周期改变，Western blot检测凋亡、内质网应激及Ncln/CHOP轴相关蛋白的表达情况。结果：与空白组比较，模型组GES-1细胞表面积显著减少，内质网扩张，胃黏膜细胞早期、晚期凋亡率均显著升高，tBid、Bax、cleaved-Caspase-3和cleaved-Caspase-8蛋白表达水平均显著升高，Bcl-2蛋白表达水平显著降低（P<0.01），BiP、Ncln、CHOP蛋白表达水平明显升高（P<0.01），Ncln在内质网表达量升高，CHOP蛋白在细胞核表达量升高。与模型组比较，给药干预后HZXPG高剂量组胃黏膜细胞表面积显著升高，两剂量组胃黏膜细胞的内质网扩张程度被抑制，凋亡率显著降低，早期凋亡率和晚期凋亡率均显著降低（P<0.01），HZXPG低剂量组可明显降低tBid、Bax表达（P<0.05，P<0.01），促进Bcl-2表达（P<0.01）；HZXPG高剂量组可明显降低tBid、Bax、cleaved-Caspase 3和cleaved-Caspase-8表达水平（P<0.05，P<0.01），升高Bcl-2表达水平（P<0.05）。HZXPG高剂量组BiP、Ncln、CHOP蛋白表达水平均明显降低（P<0.05，P<0.01），且CHOP入核水平降低。结论：HZXPG可通过抑制Ncln/CHOP轴，减轻MNNG引起内质网应激介导的胃黏膜细胞凋亡，进一步缓解胃癌前病变所致的胃黏膜细胞损伤。

关键词： 中医药   核转录因子-κB(NF-κB)相关信号通路   糖尿病视网膜病变(DR)   研究现状  

摘要： 糖尿病视网膜病变（Diabetic Retinopathy，DR）是糖尿病常见的微血管并发症，其特征性病理改变涵盖微动脉瘤生成、出血灶形成、渗出物沉积以及新生血管增殖等表现。长期高血糖状态可诱发炎症反应、氧化应激及血管内皮生长因子（VEGF）过表达，进而破坏血-视网膜屏障，促进DR进展。目前临床治疗手段u（如激光光凝、抗VEGF药物）虽有一定效果，但仍存在局限性，亟需探索更安全、多靶点的干预策略。近年研究发现，核转录因子-κB（NF-κB）信号通路在DR的病理进程中发挥关键作用，其通过调控炎症因子释放、氧化应激反应及血管生成，影响DR的发生发展。中医药凭借多成分、多靶点、整体调节的优势，在DR防治中展现出独特潜力，尤其是其对NF-κB通路的精准调控，成为研究热点。本文系统综述了NF-κB相关信号通路在DR中的作用机制，并聚焦中药单体及有效成分、中成药、复方制剂通过调控NF-κB通路改善DR的研究进展，旨在为开发新型DR防治药物提供理论依据和转化方向。

关键词： 桂枝茯苓丸   肝纤维化   线粒体损伤   焦亡  

摘要： 目的：探讨桂枝茯苓丸（GFW）抗肝纤维化的作用机制，重点解析其对线粒体DNA（mtDNA）/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）/胱天蛋白酶1（Caspase-1）/消皮素D（GSDMD）信号通路的调控作用。方法：将42只雄性SD大鼠随机分为6组（n=7）：空白组（Control）、模型组（Model）、桂枝茯苓丸低/中/高剂量组(GFW-L、GFW-M、GFW-H，0.14、0.28、0.56 g·kg-1·d-1)及大黄?虫丸组(DZW，1.8 g·kg-1·d-1)，采用四氯化碳(CCl4)腹腔注射诱导肝纤维化大鼠模型。观察大鼠一般情况；检测血清丙氨酰氨基转移酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平；苏木素-伊红（HE）染色、马松三色（Masson）染色评估肝组织病理形态及胶原沉积；透射电镜（TEM）观察线粒体等微观细胞结构改变及损伤；流式细胞术检测线粒体膜电位(ΔΨm)；酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定血清白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-18（IL-18）水平；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠肝组织mtDNA及NLRP3 mRNA的表达水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肝组织NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路相关蛋白的表达。结果：与Control组相比，Model组大鼠体质量显著降低（P<0.01）；肝脏脏器系数显著升高（P<0.01）；血清ALT、AST水平显著升高（P<0.01）；肝组织呈现肝细胞结构紊乱伴炎性浸润，胶原沉积面积增加等典型纤维化特征；TEM显示核膜变性、线粒体肿胀、内质网扩张、细胞器外溢等；ΔΨm显著降低（P<0.01）；肝组织mtDNA、NLRP3 mRNA水平显著升高（P<0.01），NLRP3、Caspase-1、GSDMD显著升高（P<0.01），IL-1β、IL-18表达显著增多（P<0.01）。与Model组相比，GFW-L组、GFW-M组和DZW组大鼠体质量明显升高（P<0.05），GFW-H组体质量显著升高（P<0.01）；GFW各组和DZW组肝脏脏器系数显著下降（P<0.01）；GFW-L组血清ALT明显下降（P<0.05），GFW-M组、GFW-H组和DZW组血清ALT、AST显著降低（P<0.01）；肝组织病理损伤及纤维化不同程度减轻；TEM显示线粒体自噬，线粒体肿胀、内质网扩张等超微结构损伤不同程度减轻；GFW各组ΔΨm升高但差异无统计学意义；GFW-M组mtDNA mRNA明显下降（P<0.05），GFW-H组和DZW组mtDNA mRNA显著降低（P<0.01），GFW-M组、GFW-H组和DZW组NLRP3 mRNA显著降低（P<0.01）；WB结果显示GFW各剂量组和DZW组NLRP3蛋白表达显著下调（P<0.01），GFW-H组和DZW组cleaved Caspase-1蛋白表达显著下调（P<0.01），GFW-M组GSDMD-N蛋白表达明显下调（P<0.05），GFW-H组和DZW组GSDMD-N蛋白表达显著下调（P<0.01）；GFW-H组和DZW组IL-1β、IL-18表达水平显著下调。结论：GFW能够通过抑制细胞焦亡改善CCl4诱导的肝纤维化，其机制可能与减轻线粒体损伤、抑制炎症小体组装及活化、阻止炎症因子释放有关。

关键词： α-突触核蛋白   寡聚体   多巴胺能神经元   黑质   肠脑轴  

摘要： 帕金森病（Parkinson’s disease，PD）的核心病理特征是α-突触核蛋白（α-synuclein）的异常聚集及其引发的神经元损伤，α-突触核蛋白在形成寡聚体或原纤维的形式时具有毒性作用，通过线粒体功能障碍、囊泡转运障碍、多巴胺自发氧化以及神经炎症等多重途径导致神经元死亡。此外，α-突触核蛋白可以在细胞间传播，通过外泌体、胞吞胞吐、隧道纳米管（tunneling nanotube， TNT）或迷走神经轴突运输扩散，形成级联病理效应。以α-突触核蛋白为关键病理特征的PD动物模型作为致病机制的阐明、以及PD相关治疗药物的研发的模拟工具，目前利用转基因、BAC、病毒介导过表达及基因编辑等多种策略已开发的α-突触核蛋白过表达动物模型助推了PD与α-突触核蛋白的探索研究。本文系统地综述了α-突触核蛋白的结构功能、毒性作用机制、细胞间传播途径、过表达动物模型以及其作为治疗靶点的研究进展。

关键词： 橙皮素   阿霉素   AMPK/NLRP3   炎症反应   H9c2细胞  

摘要： 目的 探讨橙皮素（Hes）通过调控AMP依赖的蛋白激酶（AMPK）/NOD热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号减轻炎症反应改善阿霉素（DOX）诱导的心肌损伤。方法 采用DOX处理C57/bl6小鼠和H9c2细胞，并随机分为：对照组/假手术组（Control/Sham）、DOX处理组、Hes干预DOX组（DOX+Hes）以及Hes联合AMPK抑制剂Compound c干预DOX组（DOX+Hes+CC）。观察细胞形态变化，采用CCK-8法检测细胞活力，超声检测心脏功能，ELISA法检测培养基和心肌组织中LDH活性，TUNEL染色法检测细胞凋亡，RT-PCR检测TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平，Western blotting法检测Cleaved caspase-3、Bcl2、Bax、IL-1β、IL-18、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、NLRP3、ASC和Caspase-1的表达。结果 与Control组相比，DOX组细胞肿胀，活力降低，培养基中LDH活性增加（P<0.01）;Cleaved caspase-3表达和TUNEL染色阳性细胞数增加，Bcl2/Bax比值降低（P<0.01）。与Sham组相比，DOX组心肌纤维肿胀并出现炎性浸润，心脏功能降低，LDH活性增加；同时TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平以及IL-1β和IL-18的蛋白表达增加（P<0.01）,p-AMPK和p-mTOR蛋白表达降低，NLRP3、ASC和Caspase-1的表达增加（P<0.01）。与DOX组相比，DOX+Hes组细胞肿胀减轻，活力增加，培养基中LDH活性降低（P<0.01）;Cleaved caspase-3表达和TUNEL染色阳性细胞数减少，Bcl2/Bax比值增加（P<0.01）;TNF-α、IL-6和IL-1β的mRNA水平以及IL-1β和IL-18的蛋白表达降低（P<0.01）;p-AMPK和p-mTOR蛋白表达增加，NLRP3、ASC和Caspase-1的表达降低（P<0.01）。与DOX+Hes组相比，Compound c可以阻断Hes对DOX诱导的细胞损伤、心脏功能、炎症反应和AMPK/NLRP3通路的作用。结论 Hes通过调控AMPK/NLRP3通路抑制炎症反应减轻DOX诱导的心脏毒性。

关键词： 核因子红细胞2相关因子2   铁死亡   右美托咪定   糖尿病   心肌缺血/再灌注损伤  

摘要： 目的 探讨右美托咪定（DEX）对糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注（MIRI）保护作用及机制。方法 采用高糖高脂饮食联合链脲佐菌素（STZ）注射建立糖尿病大鼠模型，随机分为S组、I/R组、DEX组、DM-S组、DM-I/R组、DM-DEX组，每组6只；通过HE和TTC染色评估心肌病理损伤及梗死面积；ELISA检测各组大鼠血清心肌损伤标志物cTnI、CK-MB、AST、LDH的表达水平，Western Blot检测各组大鼠心肌组织Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11蛋白表达，透射电镜观察心肌组织铁死亡特征。结果 DEX显著减小糖尿病大鼠心肌梗死面积，改善心肌细胞形态，减少坏死及水肿，提高大鼠心肌组织Nrf2、HO-1、GPX4、SLC7A11表达，并降低大鼠血清cTnI、CK-MB、AST、LDH水平，减轻心肌铁死亡，改善心功能。结论 DEX通过激活Nrf2/GPX4通路，抑制铁死亡，减轻糖尿病MIRI心肌损伤。

关键词： 绿茶末   多糖   理化特性   抗氧化活性   抗糖尿病活性  

摘要： 为探究绿茶末多糖的理化性质及其体外抗氧化和抗糖尿病活性，以绿茶末为实验材料通过水提醇沉法提取绿茶末多糖，对其化学组成、流变学特性、热稳定性、微观结构等理化性质进行表征，并通过铁离子还原能力、DPPH自由基清除能力和亚铁离子螯合能力以及糖基化与α-葡萄糖苷酶抑制能力评价其体外抗氧化和抗糖尿病活性。结果表明，绿茶末多糖的得率以及总糖、糖醛酸、蛋白质和总酚含量分别为6.50%、44.73%、22.58%、2.92%和4.35%，主要含有3种不同分子质量分布的多糖组分，其中含量最大的组分其相对分子质量为88.88 kDa，单糖组成主要包括葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、甘露糖、葡萄糖醛酸和木糖，其摩尔质量比分别为31.59:27.11:22.73:8.26:6.29:1.91:1.24:0.87。绿茶末多糖呈现无定形片状结构，具有多糖的特征吸收基团和良好的热稳定性，其多糖溶液为剪切稀化型假塑性非牛顿流体并呈现弱凝胶型黏弹性特征行为。绿茶末多糖对DPPH自由基清除能力、铁离子还原能力（FRAP）和亚铁离子螯合能力（FIC）的半抑制浓度(IC50)分别为90.85 mg/L、473.37 mg/L和1159.68 mg/L，对α-葡萄糖苷酶抑制作用的IC50值为0.42 mg/mL，其活性相当于阿卡波糖的2.21倍。1 mg/mL的绿茶末多糖对晚期糖基化终产物抑制率为56.55%，约为氨基胍抑制能力的63%。本研究可为绿茶末资源综合利用及其多糖在天然抗氧化剂和抗糖尿病或功能食品开发或药物中的潜在应用提供理论依据。

关键词： 膜腠三焦   内质网应激   糖尿病周围神经病变   机制   中医药治疗  

摘要： 糖尿病周围神经病变（diabetic peripheral neuropathy，DPN）是糖尿病常见并发症之一，病程长且迁延不愈，严重影响患者的生存质量，内质网应激已被研究证明是DPN重要的致病机制之一，现以“膜腠三焦”理论为基础，以三焦通行气血精液及内质网参与蛋白合成与代谢为主线，论述三焦壅滞与内质网应激促进DPN发生发展有相通之处。深入探究“膜腠三焦”与内质网的关联性，以此得出内质网应激引起细胞凋亡与钙离子失衡可能是三焦功能失调的现代科学内涵，为中医以疏利三焦、化痰祛瘀的标本同治之法治疗DPN提供新的科研方向。

关键词： 急性肝衰竭   解毒化瘀颗粒   IRE1信号通路   细胞凋亡  

摘要： 目的 本实验旨在通过IRE1/JNK/Caspase-3信号通路探讨解毒化瘀颗粒（JDHY）调控急性肝衰竭（ALF）细胞凋亡发挥保护肝细胞的潜在作用机制。方法 实验采用D-氨基半乳糖（D-GalN）联合脂多糖（LPS）腹腔注射诱导C57BL/6小鼠急性肝衰竭模型，将60只小鼠随机分为正常组（Control）、模型组（Model）和解毒化瘀颗粒组（JDHY），每组20只。JDHY组小鼠在造模前72小时开始给予JDHY灌胃（一天两次，0.4ml/次），模型组及正常组给予同体积双蒸水灌胃，造模后6小时眼眶采血并留取肝组织样本，采用全自动生化分析仪检测血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）以及总胆红素（TBIL），苏木素-伊红（HE）染色观察肝组织病理变化，免疫组化（IHC）检测IRE1的表达，原位末端转移酶标记法（TUNEL）检测肝细胞凋亡率，蛋白免疫印迹法（WB）检测肝组织中IRE1、JNK及Caspase-3蛋白表达，反转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析肝组织中IRE1、JNK及Caspase-3mRNA表达，ELSIA法检测TNF-α、IL-6水平表达。结果 与模型组相比，JDHY组小鼠血清ALT、AST和TBIL水平下降（P<0.05），肝组织坏死和炎症细胞浸润减少，肝细胞凋亡率低（P<0.01），WB结果表明，JDHY组小鼠肝组织中IRE1、JNK及Caspase-3的表达明显下调（P<0.05）。PCR检测结果提示JDHY组肝组织中IRE1和JNKmRNA表达降低（P<0.05），Caspase-3mRNA表达也降低（P<0.01）。同时ELSIA检测炎症因子TNF-α、IL-6水平表达亦显著下降（P<0.05）。研究结果表明，JDHY通过抑制IRE1/JNK/Caspase-3信号通路的过度激活，有效减轻了肝细胞的凋亡和炎症反应，改善了急性肝衰竭的肝功能损伤。结论 解毒化瘀颗粒能够通过调控内质网应激与凋亡密切联系的IRE1/JNK/Caspase-3信号通路，抑制肝细胞凋亡，可缓解D-GalN/LPS诱导的急性肝衰竭炎症损伤，为ALF的治疗提供了潜在的中药干预机制和理论支持。

关键词： 槐花   银屑病   网络药理学   分子对接   PI3K/AKT信号通路  

摘要： 目的 采用网络药理学、分子对接技术及实验验证，探讨槐花治疗银屑病的作用机制。方法 通过TCMSP、GeneCards、OMIM、DisGeNET以及String数据库获得槐花活性成分、作用靶点以及银屑病相关疾病靶点，采用Cytoscape 3.8.0软件绘制“药物—有效成分—关键靶点—信号通路—疾病”网络图以及GO、KEGG通路富集分析；使用Discovery Studio 2019软件进行分子对接。体外实验采用咪喹莫特（IMQ）诱导的银屑病BALB/c小鼠模型，分为正常组、模型组、槐花高剂量组（3.00 g/kg）、中剂量组（1.50 g/kg）、低剂量组（0.75 g/kg）和阳性药组，6只/组。提前给药1周并于造模期间给药物干预。通过体质量变化、脾脏系数、银屑病皮损面积及严重程度指数（PASI）评分和皮肤病理变化进行效果评价；运用免疫组化和Western blotting技术检测p-PI3K、p-AKT蛋白水平。结果 共筛选出10个活性成分和110个关键靶点，GO和KEGG通路富集分析显示槐花可能通过调控PI3K/AKT信号通路、TNF信号通路、IL-17信号通路等改善银屑病。分子对接结果显示，槲皮素和山奈酚均与AKT1、TNF等位点结合紧密。动物实验结果显示，槐花低剂量组小鼠体质量增加，PASI评分下降，改善银屑病病理症状（P<0.05），降低PI3K、AKT蛋白的磷酸化水平（P<0.05）。结论 槐花能够通过多成分、多靶点、多通路治疗银屑病，其作用机制可能与下调p-PI3K、p-AKT蛋白的表达，进而影响PI3K/AKT信号通路有关。