关键词:
补中益气汤
间歇性低氧
内质网应激
肺表面活性蛋白C
摘要:
目的:探讨补中益气汤干预对慢性间歇性低氧(CIH)致肺表面活性蛋白C(SFTPC)表达异常及肺损伤的改善作用及机制研究。方法:选取40只健康成年雄性SPF级C57BL/6小鼠随机将其分为5个实验组:常氧组,CIH组,补中益气汤低、中、高剂量组,每组8只。造模期间,常氧组小鼠置于标准氧浓度的环境中,CIH组,补中益气汤低、中、高剂量组小鼠则被放置于低氧舱中,每天持续上舱8 h,共计35 d。每日上舱前给予低、中、高剂量组补中益气汤小鼠灌胃相应剂量的汤药(生药量分别为8.1、16.2、32.4 g·kg^(-1)·d^(-1)),同时常氧组、CIH组小鼠每日上舱前给予等剂量的生理盐水灌胃。记录小鼠实验前及实验结束后的一般状态,使用小鼠无创肺功能检测系统检测各组小鼠肺功能。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清中SFTPC含量,苏木素-伊红(HE)染色检测肺组织病理形态学变化,原位末端标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠肺组织中SFTPC、凋亡蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸化蛋白激酶R样内质网激酶(p-PERK)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化真核翻译起始因子2α(p-eIF2α)、真核翻译起始因子2α(eIF2α)、活化转录因子4(ATF4)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)蛋白表达,免疫荧光染色检测小鼠肺组织中SFTPC、CHOP蛋白表达情况。结果:与常氧组比较,CIH组小鼠肺功能有明显损伤情况,肺组织病理损伤评分升高(P<0.05,P<0.01),血清中SFTPC水平增加、肺组织中SFTPC表达下调(P<0.05,P<0.01),肺组织细胞凋亡阳性率增多,内质网应激相关因子p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP表达增加(P<0.05,P<0.01),与CIH组比较,补中益气汤干预可改善其受损的肺功能指标,肺组织病理损伤评分降低(P<0.05,P<0.01)。渗入血清中SFTPC减少、肺组织中SFTPC表达恢复(P<0.05,P<0.01),肺组织细胞凋亡阳性率明显下降,促凋亡因子Bax表达下调、抗凋亡因子Bcl-2表达上升(P<0.05,P<0.01),p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP活化及表达下调(P<0.05,P<0.01)。结论:补中益气汤减少肺组织细胞凋亡,改善肺泡表面活性物质的分泌,减轻肺损伤,改善肺功能,可能与PERK/eIF2α/ATF4/CHOP通路相关。