关键词： 超声联合微泡   乳腺癌   凋亡   内质网应激   Ca^(2+)  

摘要： 目的:探讨超声联合微泡(ultrasound combined with microbubbles,USMB)促进乳腺癌细胞(MCF-7)凋亡的过程中,机械离子通道蛋白Piezo1的相关作用及其可能机制。方法:体外培养人乳腺癌细胞MCF-7,设置对照组、USMB组、Piezo1-siRNA+USMB组。流式细胞术检测各组细胞凋亡率。Western blot检测各组细胞中的Piezo1蛋白、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase 3及内质网应激相关蛋白GRP78、Caspase 12的相对表达量。Ca^(2+)荧光探针检测细胞内Ca^(2+)含量。结果:USMB组MCF-7细胞凋亡率显著增高,Piezo1-siRNA+USMB组凋亡率较USMB组明显下调(P<0.000 1)。与对照组相比,USMB组凋亡相关蛋白Bax、Caspase 3及内质网应激相关蛋白GRP78、Caspase 12相对表达量上调,凋亡相关蛋白Bcl-2相对表达量下调,组间差异均有统计学意义(P<0.001)。与USMB组相比,Piezo1-siRNA+USMB组凋亡相关蛋白Bax、Caspase 3及内质网应激相关蛋白GRP78、Caspase 12蛋白相对表达量下调,凋亡相关蛋白Bcl-2相对表达量上调,组间差异均有统计学意义(P<0.01)。与USMB组相比,Piezo1-siRNA+USMB组细胞内Ca^(2+)荧光强度明显减低。结论:USMB通过激活离子通道蛋白Piezo1,进而诱导内质网应激,并促进细胞内Ca^(2+)水平增加,从而促进乳腺癌细胞(MCF-7)的凋亡。

关键词： 细粒棘球绦虫   脂肪酸结合蛋白   分子特征   原核表达   免疫原性   抗体水平  

摘要： 为了解细粒棘球绦虫脂肪酸结合蛋白1(EgFABP1)的分子特征、遗传进化及免疫原性,试验对EgFABP1的核苷酸序列进行分子特征和遗传进化分析,EgFABP1序列经密码子优化后合成核苷酸序列;构建pET32a(+)-EgFABP1原核表达载体,将其转化至BL21(DE3)感受态细胞中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得重组蛋白EgFABP1(rEgFABP1蛋白),分析rEgFABP1蛋白的分子特征;将45只Balb/c雄性小鼠随机分为rEgFABP1组(rEgFABP1蛋白与弗氏佐剂1∶1混合)、PBS组(PBS)和FA组(完全弗氏佐剂),每组15只,每只小鼠皮下注射200μL,首次免疫后间隔14 d进行1次加强免疫,共进行3次加强免疫,免疫结束后第14天经心脏采血,利用间接ELISA法检测免疫小鼠是否产生抗体,以分析rEgFABP1蛋白的免疫原性。结果表明:EgFABP1包括133个氨基酸,无跨膜区和信号肽,属脂质运载蛋白/胞质脂肪酸结合蛋白家族,包含1个保守的脂质运载蛋白结构域,抗原表位集中在第9~24、28~37、46~82、88~102、107~122位氨基酸,与EgFABP(AY804245.1)、EgFABP(AY024340.1)、EgFABP1(AF321119.1)亲缘关系较近,均属于EgFABPs家族蛋白;rEgFABP1蛋白能以包涵体和可溶性两种形式表达,可被小鼠感染细粒棘球绦虫的标准阳性血清特异性识别,具有较强的反应原性。与PBS组和FA组相比,免疫后第14,28,42天,rEgFABP1组抗FABP1蛋白的特异性血清IgG水平极显著升高(P<0.0001),且免疫结束14 d后rEgFABP1组抗FABP1蛋白的特异性血清IgG水平极显著升高(P<0.0001)。说明试验成功构建了pET32a(+)-EgFABP1-DE3表达菌株,获得了可溶性表达的rEgFABP1蛋白,且该蛋白能够刺激机体产生抗体,具有良好的免疫原性。

关键词： NKX3.1   人乳头瘤病毒   免疫组化   肿瘤起源  

摘要： 目的本研究旨在对宫颈腺样基底细胞癌(ABC)的临床病理特征进行深入探讨,并着重分析NKX3.1在肿瘤细胞内呈现的分层表达模式,挖掘其对肿瘤起源方面所蕴含的提示价值。方法对2020年1月至2024年9月厦门大学附属中山医收治的6例宫颈ABC患者的临床病理资料展开回顾性分析。借助组织学评估手段,联合免疫组化检测(涵盖P16、P63、P40、NKX3.1、CK5/6、Ki-67等指标)以及分子检测技术(涉及高危型HPV分型、MYB荧光原位杂交检测),综合文献进行梳理,进而剖析肿瘤存在的双向分化特征。结果在纳入研究的6例患者当中,有5例为绝经后女性,仅1例为育龄期女性,且整体中位年龄为61岁。经检测发现,所有患者HPV均呈阳性反应,具体为HPV16、18型。术前影像学检查结果均为阴性;肿瘤标志物筛查中,1例鳞状细胞癌抗原检测(SCC)呈阳性,其余结果均为阴性。从病理层面观察,肿瘤结构主要由基底样细胞巢构成,其外周细胞呈现出栅栏状的排列方式,而在中央区域,则形成了具有腺样分化的结构;免疫组化显示P16弥漫强阳性(6/6),基底标志物P63、P40、CK5/6均阳性(6/6),NKX3.1核阳性局限于腺腔内层细胞,外层基底样细胞阴性,Ki-67指数≤10%,MYB基因无重排。中位随访20个月无复发或转移。结论NKX3.1的腔缘特异性表达(内层+,外层-)提示宫颈ABC可能起源于具有多向分化潜能的宫颈储备细胞,其内层细胞向腺腔表型(NKX3.1+)分化,外层保留基底/鳞状特征(P63+)。该分子表达模式为ABC的诊断及组织起源研究提供了关键依据,联合HPV检测可避免过度治疗。

关键词： 糖尿病视网膜病变   机器学习   疾病预测   比较研究  

摘要： 目的 分析比较逻辑回归(LR)、线性判别分析(LDA)、决策树(DT)、随机森林(RF)、CatBoost和LightGBM 6种机器学习模型对2型糖尿病患者视网膜病变风险的预测效能。方法 利用国家人口健康科学数据中心的糖尿病并发症预警数据集,基于不同算法构建2型糖尿病患者视网膜病变风险预测模型,清洗数据后按照7:3划分训练集和测试集,采用十折交叉验证法对6种模型的预测性能(准确度、召回率、精确度、F1-Score、AUC)进行比较。结果 在测试集上使用6种模型对2型糖尿病患者视网膜病变进行风险预测,LightGBM的准确度(0.773 8)、召回率(0.825 1)、精确度(0.762 0)、F1-Score(0.792 3)和AUC(0.843 4)均最高,CatBoost的准确度(0.744 1)、召回率(0.787 8)、精确度(0.729 1)、F1-Score(0.757 3)和AUC(0.828 0)均次之。结论 对于2型糖尿病患者视网膜病变风险预测,LightGBM在6种模型中综合表现最好,此外集成学习分类器(LightGBM、CatBoost、RF)的预测效能优于弱学习分类器(DT、LR、LDA),可为2型糖尿病患者视网膜并发症的临床辅助诊断及发病风险预测提供便捷可靠参考。

关键词： 胸腰段不完全性脊髓损伤   核心稳定性康复训练   不稳定支撑面  

摘要： 目的探讨不稳定支撑面核心稳定性康复训练(CST)对胸腰段不完全性脊髓损伤(ISCI)患者康复效果的影响,为制定科学的胸腰段ISCI康复方案提供参考依据。方法选取68例胸腰段ISCI患者作为研究对象,按照1 GA6FA 1比例配对原则,将在稳定支撑面上(训练床)进行CST训练的34例患者纳入稳定支撑组,在不稳定支撑面上(悬吊绳、训练球)进行CST训练的34例患者纳入不稳定支撑组。训练3个月后,比较2组患者脊髓功能改善情况[脊髓独立性评价量表Ⅲ(SCIMⅢ)、功能独立性量表(FIM)]、平衡能力[Brunel平衡量表(BBA)]、躯体控制能力[躯干控制能力量表(TCT)]、下肢运动功能[Fugl-Meyer运动功能量表(FMA)]、步行能力(跨步长、舒适步速、步频)。结果训练3个月后,不稳定支撑组SCIMⅢ评分、FIM评分、BBA评分、TCT评分、FMA评分分别为(83.41±4.55)分、(103.23±5.44)分、(9.10±0.91)分、(85.38±4.59)分、(26.56±2.90)分,高于稳定支撑组的(75.53±4.45)分、(92.41±5.15)分、(7.41±0.89)分、(78.62±4.10)分、(20.65±2.84)分,差异均有统计学意义(P<0.05);不稳定支撑组跨步长、舒适步速、步频分别为(0.61±0.12)m、(22.46±2.23)m/min、(66.29±4.69)步/min,均高于稳定支撑组的(0.53±0.10)m、(18.46±2.14)m/min、(57.56±4.59)步/min,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论与稳定支撑面CST比较,不稳定支撑面CST可进一步改善ISCI患者的脊髓功能、独立性、平衡能力和躯体控制能力,强化患者的下肢运动功能和步行能力。

关键词： 神经干细胞   人神经母细胞瘤   神经元   铁死亡   帕金森病蛋白7  

摘要： 目的:研究神经干细胞分泌组(neural stem cell secretome,NSC-S)对人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞铁死亡的影响及其潜在机制。方法:采用人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞建立体外神经元铁死亡模型,将细胞分为3组:对照组、Erastin组、Erastin+NSC-S组,分别用DMEM、含10μmol/L Erastin的DMEM、含10μmol/L Erastin的NSC-S处理细胞;采用试剂盒检测各组细胞上清液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)活性、细胞内活性氧和丙二醛含量,采用荧光探针检测游离亚铁离子含量,采用免疫印迹法测定细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)蛋白表达水平。采用液相色谱串联质谱(liquid chromatography tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)检测NSC-S成分并进行生物信息学分析筛选。另将SH-SY5Y细胞分为对照组、Erastin组、Erastin+NSC-S组和Erastin+帕金森病蛋白7(PARK7)组,分别用DMEM、含10μmol/L Erastin的DMEM、含10μmol/L Erastin的NSC-S、含200μg/L PARK7+10μmol/L Erastin的DMEM处理细胞;采用CCK-8实验检测SH-SY5Y细胞活力,并检测细胞内活性氧、丙二醛、亚铁离子含量以及GPX4蛋白表达水平。结果:与Erastin组相比,Erastin+NSC-S组SH-SY5Y细胞上清液中LDH活性明显减少(P<0.001),细胞内活性氧、丙二醛和亚铁离子含量显著降低(P<0.001或P<0.05),GPX4蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05)。LC-MS/MS分析发现,NSC-S中含有PARK7蛋白。与Erastin组相比,Erastin+PARK7组SH-SY5Y细胞活力显著增强(P<0.001),细胞内活性氧、丙二醛和亚铁离子含量显著降低(P<0.001),且GPX4蛋白相对表达水平显著升高(P<0.05)。结论:NSC-S可抑制Erastin诱导的人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞的铁死亡,其可能与NSC-S中PARK7的介导有关。

关键词： 2型糖尿病   糖尿病周围神经病变   抑郁   注意偏向   反应时间   返回抑制效应  

摘要： 目的 探讨2型糖尿病(T2DM)合并糖尿病周围神经病变(DPN)伴抑郁情绪患者的注意偏向特点。方法 选取就诊于我院的50例T2DM-DPN伴抑郁情绪患者作为研究组,50例单纯T2DM-DPN患者作为对照组。两组患者均参加注意力抑制测试,记录其反应时间,同时对抑制效应进行评估。结果 研究组对高兴面孔、中性面孔的有效、无效提示反应时间长于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);研究组对悲伤面孔的有效、无效提示反应时间显著短于对照组,差异具有统计学意义(P=0.012、0.006)。多因素重复测量方差分析结果显示,组别主效应显著(P=0.011),研究组反应时间长于对照组;线索类型的主效应显著(P=0.001);组别×面孔性质×线索类型的交互作用显著(P=0.003)。两组对高兴面孔、中性面孔均表现出返回抑制效应;对照组对悲伤面孔表现出返回抑制效应;研究组对悲伤面孔表现出线索效应。两组对高兴面孔和中性面孔的返回抑制效应无显著差异(P=0.900、0.120);两组对悲伤面孔的返回抑制效应差异显著(P=0.008)。结论 T2DM-DPN伴抑郁情绪患者表现出对负性情绪刺激的注意转移偏向,且对该类刺激的注意解除存在困难。

关键词： 阴火论   补中益气汤   人乳头状瘤病毒感染   宫颈病变  

摘要： 高危型人乳头状瘤病毒(high risk human papillomavirus,HR-HPV)的持续感染是宫颈癌发生的最主要危险因素。李东垣提出阴火是因内伤所引起的一切本虚标实的火热邪气,阴火产生过程为因虚致实,从阴火论探讨宫颈HPV感染,其病机为本虚标实,在内为脏腑失调、机体正气不足,在外有湿毒侵袭、损伤冲任带脉。补中益气汤是脾胃内伤学说和阴火理论的核心方。应用补中益气汤治疗宫颈HPV感染,重视脾胃、顾护中焦,升发清阳、寄消于升,加以甘寒、清泻阴火。并结合临床验案对基于阴火理论运用补中益气汤治疗宫颈HR-HPV感染进行阐述。

关键词： 不同侧卧护理   重症肺炎   糖尿病   肺功能状况   呼吸频率  

摘要： 目的 分析不同侧卧护理对重症肺炎伴糖尿病患者的影响。方法 选取2021年2月—2023年8月于我院治疗的57例重症肺炎伴糖尿病患者,根据单双号法将其分为对比组28例和研究组29例。两组均在常规护理的基础上采用不同的侧卧护理,对比两组护理效果。结果 研究组护理后的肺功能指标水平、生活质量评分、护理满意度均优于对比组(均P<0.05)。结论 重症肺炎伴糖尿病患者采用左侧45~60°半坐卧位和右侧45~60°卧位的体位护理效果确切,能有效调节呼吸频率、改善氧合指数并提升生活质量。

关键词： 新生儿糖尿病   INS基因   纯合变异  

摘要： 目的探讨INS基因纯合变异致新生儿糖尿病(neonatal diabetes mellitus,NDM)的临床特征及基因测序结果。方法回顾性分析深圳市宝安区妇幼保健院新生儿科2024年8月确诊的1例NDM患儿的临床资料和基因测序结果。以“INS”“neonatal diabetes”“neonatal diabetes mellitus”“NDM”“homozygous”“胰岛素基因”“新生儿糖尿病”“纯合”为关键词,分别检索PubMed、Embase、Cochrane,以及中国知网、万方、中华医学期刊全文数据库和维普数据库收录的NDM文献(检索时限截至2024年12月31日),总结INS纯合变异致NDM患儿的临床特点和基因变异类型。结果本例患儿出生体重1700 g(

T(***46*)纯合变异,父母为该基因杂合子,诊断NDM,为常染色体隐性遗传。国内尚未见INS纯合变异所致NDM的病例报道,共纳入15篇国外文献报道的41例患儿,结合本例,累计报道42例。42例患儿中,男26例(61.9%),女16例(38.1%),40例(95.2%)为低出生体重儿,25例(59.5%)存在近亲婚配和糖尿病家族史。不同变异位点患儿诊断时血糖差异较大,治疗后血糖控制效果因变异位点不同差异也较大,提示基因变异位点可能与代谢异常程度相关。39例(92.9%)存活,36例(85.7%)需终身胰岛素治疗。结论对于新生儿期或婴儿期出现顽固性糖尿病、需依赖胰岛素治疗且父母为近亲婚配的患儿,应考虑NDM可能,尽早完善全外显子组测序可明确诊断。