关键词： 缺血性脑卒中   G蛋白偶联受体78   TUG-891   内质网应激   细胞凋亡  

摘要： 目的:探讨TUG-891对缺血缺氧诱导的缺血性脑卒中(IS)的保护作用,并阐明其可能的作用机制。方法:将60只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组、模型组[远端大脑中动脉闭塞(dMCAO)组]和dMCAO+TUG-891组(dMCAO+TUG-891组),每组20只,造模后连续3 d给予小鼠腹腔注射TUG-891溶液(35 mg·kg^(-1)·d^(-1))。采用改良神经功能缺损评分(mNSS)和转棒实验评估各组小鼠神经功能情况,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法观察各组小鼠脑梗死体积,生化法检测各组小鼠脑组织上清液中丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性,苏木精-伊红(HE)和尼氏(NISSL)染色观察各组小鼠脑组织病理形态表现,末端脱氧核苷酸转移酶dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色检测各组小鼠脑组织中神经细胞凋亡指数,Western blotting法检测各组小鼠脑组织中G蛋白偶联受体78(GPR78)、PKR样内质网激酶(PERK)和磷酸化PERK(p-PERK)和CHOP蛋白表达水平。结果:mNSS和转棒实验,与假手术组比较,dMCAO组小鼠mNSS明显升高(P<0.01),在棒时间明显减少(P<0.01);与dMCAO组比较,dMCAO+TUG-891组小鼠mNSS降低(P<0.05),在棒时间增加(P<0.05)。TTC染色法,与假手术组比较,dMCAO组小鼠脑梗死体积增大(P<0.01);与dMCAO组比较,dMCAO+TUG-891组小鼠脑梗死体积明显减小(P<0.01)。HE染色,与假手术组比较,dMCAO组小鼠大脑皮层严重受损,表现为梗死区神经细胞排列紊乱及细胞核明显固缩。dMCAO+TUG-891组小鼠脑梗死区神经细胞形态损伤得到明显改善。NISSL染色,dMCAO组小鼠大脑皮层梗死区尼氏小体变细拉长,脱失增多;dMCAO+TUG-891组小鼠脑组织病理损伤均得到明显改善。与假手术组比较,dMCAO组大鼠脑组织中MDA水平明显升高(P<0.01),SOD活性降低(P<0.01);与dMCAO组比较,dMCAO+TUG-891组小鼠脑组织中MDA水平明显降低(P<0.01),SOD活性明显升高(P<0.01)。TUNEL染色,与假手术组比较,dMCAO组小鼠脑组织中神经细胞凋亡指数升高(P<0.01);与dMCAO组比较,dMCAO+TUG-891组小鼠脑组织中神经细胞凋亡指数降低(P<0.01)。与假手术组比较,dMCAO组小鼠脑组织中GRP78、p-PERK和CHOP蛋白表达水平升高(P<0.05);与dMCAO组比较,dMCAO+TUG-891组小鼠脑组织中GRP78、p-PERK和CHOP蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论:TUG-891可以减轻IS引起的神经损伤,其作用机制可能与TUG-891抑制内质网应激和细胞凋亡有关。

关键词： 老年缺血性脑卒中   长链非编码RNA X染色体失活特异性转录本   微小RNA-140-3p   血管性痴呆  

摘要： 目的 探究老年缺血性脑卒中(CIS)患者血清长链非编码RNA X染色体失活特异性转录本(lncRNA XIST)、微小RNA-140-3p(miR-140-3p)表达与血管性痴呆(VD)发生的关系。方法 选择2021年11月至2023年12月我院收治的198例老年CIS患者作为CIS组,134例体检健康老年人作为对照组。根据治疗后6个月随访情况将老年CIS患者分成:VD组(6个月内发生VD)和非VD组(6个月内未发生VD);VD组患者根据VD严重程度分为:轻度VD组、中度VD组、重度VD组。收集老年CIS患者临床资料;荧光定量PCR法测定血清lncRNA XIST、miR-140-3p表达。比较非VD组和VD组临床资料,对照组和CIS组、非VD组和VD组、不同严重程度VD组患者血清lncRNA XIST、miR-140-3p表达水平。分析老年CIS后发生VD患者血清lncRNA XIST、miR-140-3p与梗死部位、梗死灶数目、入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分的相关性,影响老年CIS患者发生VD的因素,血清lncRNA XIST、miR-140-3p预测老年CIS患者发生VD的价值。结果 CIS组血清lncRNA XIST表达水平显著高于对照组,miR-140-3p表达水平显著低于对照组(P<0.001)。与非VD组比较,VD组梗死部位位于基底节区患者比例、梗死灶数目>1个患者比例、入院时NIHSS评分、血清lncRNA XIST表达水平显著升高,miR-140-3p表达水平显著降低(P<0.05)。轻度、中度、重度VD组血清lncRNA XIST表达水平依次升高,miR-140-3p表达水平依次降低(P<0.05)。老年CIS后发生VD患者血清lncRNA XIST与miR-140-3p呈负相关(P<0.05),与入院时NIHSS评分呈正相关(P<0.05);miR-140-3p与入院时NIHSS评分呈负相关(P<0.05)。梗死部位位于基底节区、入院时NIHSS评分、lncRNA XIST是老年CIS患者发生VD的独立危险因素,miR-140-3p是独立保护因素(P<0.05)。血清lncRNA XIST、miR-140-3p两者联合预测老年CIS患者发生VD的曲线下面积(AUC)(0.961)较血清lncRNA XIST、miR-140-3p单独预测的AUC(0.862、0.874)更高(P<0.05)。结论 老年CIS后发生VD患者血清lncRNA XIST呈高表达,miR-140-3p呈低表达,二者与CIS后发生VD密切相关,可用于预测CIS后VD的发生。

关键词： 糖脂清颗粒   肥胖2型糖尿病   痰瘀阻络证   糖脂代谢   微炎症状态  

摘要： 目的:探讨糖脂清颗粒对肥胖2型糖尿病(痰瘀阻络证)患者糖脂代谢及微炎症状态等方面的影响。方法:选取80例肥胖2型糖尿病(痰瘀阻络证)患者作为研究对象,按照随机数字表法分为对照组、观察组各40例。在基础治疗的同时对照组接受二甲双胍治疗,观察组在对照组基础上联合糖脂清颗粒治疗。比较两组中医证候疗效、肥胖程度、糖脂代谢水平、胰岛功能指标、炎症因子水平以及安全性。结果:观察组中医证候疗效总有效率90.00%,对照组67.50%,两组疗效比较,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后,两组体质量指数(BMI)、腰臀比(WHR)、糖化血红蛋白(HbA1c)、游离脂肪酸(FFA)、空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(PBG)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)水平均低于治疗前,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后两组胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)高于治疗前,且观察组高于对照组(P<0.05)。治疗后两组不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:糖脂清颗粒能够降低肥胖2型糖尿病(痰瘀阻络证)患者的肥胖程度,改善糖脂代谢紊乱和胰岛素抵抗,促进胰岛功能恢复,减轻炎症反应,疗效优于单纯西药治疗。

关键词： 胫骨横向骨搬移术   糖尿病足溃疡   免疫球蛋白   创面愈合机制   截肢率  

摘要： 目的探讨胫骨横向骨搬移术(tibial transverse transport,TTT)治疗Wagner 3~4级2型糖尿病足溃疡的临床疗效以及免疫球蛋白水平变化趋势。方法回顾分析2022年5月—2023年9月采用TTT治疗的68例(73足)Wagner 3~4级2型糖尿病足溃疡患者临床资料。其中男49例,女19例;年龄44~91岁,平均67.3岁。糖尿病足溃疡Wagner分级为3级40例、4级28例。2型糖尿病病程5~23年,平均10年。观察并记录创面愈合例数、愈合时间、截肢例数、死亡例数及并发症发生情况。收集TTT治疗糖尿病足的6个关键时间点[术前1 d及术后3 d、7 d(向上横搬移第1天)、14 d(向下横搬移第1天)、21 d(搬移结束后第1天)、36 d(搬移装置去除后第1天)]血清标本,采用流式细胞术检测血清免疫球蛋白水平,包括免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)、IgA、IgM、IgE、补体C3(complement C3,C3)、C4、免疫球蛋白轻链κ(immunoglobulin light chainκ,KAP)、免疫球蛋白轻链λ(immunoglobulin light chainλ,LAM)。结果术后68例患者均随访至6个月。术后发生钉道感染3例、切口感染2例。其中5例患者(7.4%)于术后59~103 d截肢、8例患者(11.8%)于术后49~77 d死亡;余55例患者(80.9%)创面均愈合,愈合时间48~135 d,平均80 d。随访至6个月无溃疡复发、截骨周围骨折及截骨区域皮肤坏死发生。55例创面愈合患者血清免疫球蛋白水平检测示,与术前比较,术后3、7 d IgG、IgM水平显著下降(P<0.05),14 d后逐渐恢复至术前水平,36 d达峰值。IgA水平随时间延长持续下调,各时间点与术前比较差异均有统计学意义(P<0.05)。IgE水平变化表现出显著的时间异质性,术后21 d较术前明显下降(P<0.05);其他时间点均高于术前,但差异无统计学意义(P>0.05)。C3水平呈现明确的治疗相关性升高,术后7、14、21 d较术前显著提升(P<0.05),峰值出现在14 d。C4水平变化趋势与C3基本一致但变化幅度较小,术后7、14 d与术前比较差异有统计学意义(P<0.05)。KAP/LAM水平手术前后各时间点差异均无统计学意义(P>0.05)。结论TTT可加速创面愈合,有效治疗糖尿病足溃疡,降低截肢率,临床疗效确切。初步发现TTT治疗糖尿病足溃疡的潜在机制包括,通过动态调控IgG、IgA、IgM和IgE水平平衡炎症与修复过程,C3、C4水平的阶段性升高可能促进组织清理、血管再生和抗感染防御。

关键词： 糖尿病足   糖尿病足溃疡   免疫相关基因   特征基因   免疫浸润  

摘要： 目的基于转录组联合单细胞分析法筛选糖尿病足溃疡(DFU)免疫相关特征基因,并在动物模型中进行验证。方法从基因表达综合数据库(GEO)中搜索表达矩阵数据集,下载4个包含DFU与正常组织样本的转录组数据集(GSE68183、GSE37265、GSE80178、GSE83286)和1个单细胞数据集(GSE165816)。将转录组数据GSE68183和GSE37265合并为训练集,GSE80178和GSE83286合并为验证集。借助差异分析和加权基因共表达网络分析(WGCNA)获取与免疫相关的差异基因;运用随机森林(RF)算法、最小绝对收缩和选择算子(LASSO)算法、支持向量机-递归特征消除(SVM-RFE)算法对免疫相关差异基因进行筛选,从而获得特征基因;以特征基因为参数构建诊断列线图,并通过训练集和验证集的校准曲线及受试者工作特征(ROC)曲线验证其诊断效能并计算ROC曲线的曲线下面积;应用CIBERSORT算法分析DFU中的免疫浸润情况。通过单细胞分析技术进一步确认筛选特征基因的准确性。收集成年健康清洁级雄性SD大鼠12只(8周龄,体重180~200 g),按照随机数字表法将其分为DFU组(高蔗糖、高脂肪饮食持续喂养10周,制作直径为1.0 cm的全层皮肤)和对照组(正常饲养,不进行创面造模)。分别通过实时定量PCR(qPCR)法和Western blotting法测定特征基因的mRNA和蛋白相对表达。采用两独立样本t检验、Mann-Whitney U检验、χ^(2)检验进行组间比较。结果通过差异基因分析和WGCNA分析共筛选出80个免疫相关差异基因。通过RF、LASSO、SVM-RFE 3种算法筛选出了DFU的2个特征基因细胞因子信号转导抑制因子-3(SOCS3)和趋化因子配体18(CCL18)。以特征基因为参数构建诊断列线图,校准曲线结果显示,训练集和验证集的C指数分别为0.982和1.000;ROC曲线结果显示,训练集中,SOCS3和CCL18的AUC分别为0.973和0.929,验证集中SOCS3和CCL18的AUC均为0.972。CIBERSORT分析表明,在训练集和验证集中的人DFU样本中的M1型巨噬细胞、中心粒细胞浸润程度均高于正常样本,而CD8+T细胞和静息期肥大细胞在人DFU样本中的浸润程度均低于正常样本(P<0.05)。单细胞分析进一步证实了转录组分析结果,发现特征基因在DFU样本中的表达水平均高于正常样本,其中CCL18主要在DFU样本的巨噬细胞中表达,SOCS3主要在DFU样本中的成纤维细胞、基质细胞和巨噬细胞中表达。Western blotting结果显示,DFU组大鼠中特征基因的表达量高于正常组,与前述转录组和单细胞分析所得的结果趋势一致。结论该研究筛选出了DFU中2个与免疫相关的特征基因SOCS3和CCL18,并通过单细胞分析技术和动物实验对2个特征基因进行了验证。

关键词： 康复机器人   下肢骨折   2型糖尿病   功能恢复  

摘要： 目的:分析平衡障碍康复机器人辅助训练对老年下肢骨折合并2型糖尿病患者肢体功能恢复和生活质量的影响。方法:选取2021年7月-2024年12月南京市第一医院的150例下肢骨折合并2型糖尿病的老年患者为研究对象,根据不同康复训练方式分为对照组(n=75)和观察组(n=75),对照组接受常规康复训练,观察组在对照组的基础上联合平衡障碍康复机器人辅助训练。比较两组患者训练前后的平衡能力、步行能力、步行功能等级、下肢功能和生活质量。结果:训练后,与对照组相比,观察组平衡能力评分更高,3 m直行步速更快且步长更长,双足跨步时间更短(P<0.05)。训练后,两组患者的步行功能等级评分、下肢功能评分和生活质量评分均提高,且观察组评分高于对照组(P<0.05)。结论:平衡障碍康复机器人辅助康复训练可提高老年下肢骨折合并2型糖尿病患者的平衡能力、步行能力及下肢功能,并改善其生活质量。

关键词： 罗沙司他   重组人促红素   尿毒症维持性血液透析   肾性贫血   炎症反应  

摘要： 目的分析罗沙司他联合重组人促红细胞生成素(rHuEPO)治疗尿毒症维持性血液透析(MHD)肾性贫血患者对贫血指标的影响。方法2023年3月至2024年3月诊治的96例MHD肾性贫血患者,采用随机数字表法分为罗沙司他组47例和联合组49例,罗沙司他组采用罗沙司他治疗,联合组采用罗沙司他+rHuEPO治疗。比较治疗后两组临床疗效,治疗前、治疗3个月后,比较两组贫血指标[血红蛋白(Hb)、红细胞压积(HCT)、红细胞计数(RBC)]、铁代谢[铁蛋白(SF)、总铁合力(TIBC)]、炎症因子[可溶性白介素-2受体(SIL-2R)、白介素-6(IL-6)、超敏C反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)],并观察治疗期间两组药物不良反应事件。结果联合组治疗总有效率高于罗沙司他组(P<0.05);治疗后,两组Hb、HCT、RBC、SF、TIBC均上升,且联合组高于罗沙司他组(P<0.05);两组SIL-2R、IL-6、CRP及TNF-α水平均下降,且联合组低于罗沙司他组(P<0.05);两组患者药物不良反应总发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论罗沙司他联合rHuEPO治疗可明显改善MHD肾性贫血患者的贫血指标,减少炎症反应,且安全性较高。

关键词： 2型糖尿病   六味地黄汤加减   二甲双胍缓释片  

摘要： 目的分析六味地黄汤加减联合二甲双胍缓释片治疗2型糖尿病的效果。方法选择2023年1月1日至12月30日收治的76例2型糖尿病患者作为研究对象,根据治疗方案将其分为对照组和试验组,各38例。对照组给予二甲双胍缓释片治疗,试验组在对照组治疗基础上增加六味地黄汤加减治疗。比较两组的治疗效果。结果试验组的治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05)。治疗后,试验组的空腹血糖(FBG)、餐后2 h血糖(2 h PBG)水平及糖化血红蛋白(HbA1c)低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组的空腹胰岛素(FINS)、胰岛β细胞功能指数(HOMA-β)高于对照组,胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗后,试验组的平均血糖波动幅度(MAGE)、日间血糖平均绝对差(MODD)、最大血糖波动幅度(LAGE)、平均血糖(MBG)及其标准差(SD)低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。试验组的不良反应总发生率显著低于对照组(P<0.05)。结论六味地黄汤加减联合二甲双胍缓释片治疗2型糖尿病的效果显著,可以改善血糖、胰岛功能、动态血糖指标,且安全性较高,倡导临床应用。

关键词： 血管性痴呆   心力衰竭   单细胞转录组   叉头框转录因子C1   青黛酮  

摘要： 目的 揭示心力衰竭(HF)与血管性痴呆(VaD)的共病机制,挖掘跨器官治疗靶点及心脑协同保护的天然化合物。方法 使用Seurat对GEO数据库中8例单细胞数据进行聚类及注释,利用CellChat构建器官通讯网络并筛选前95%高置信配体-受体对进行KEGG富集分析,同时结合limma与CIBERSORT对70例常规转录组进行差异基因分析和免疫浸润评估。利用AutoDock Vina筛选TCMbank库31186种天然化合物,经分子动力学模拟验证其稳定性。结果单细胞图谱显示HF成纤维细胞占比43.75%(7亚群),VaD少突胶质细胞占76.57%(6亚群)。跨疾病分析表明HF成纤维细胞通过COLLAGEN信号、VaD胶质细胞通过SPP1信号驱动病理进程,共享PI3K-Akt和ECM-受体交互通路。鉴定出HF特征基因TNXB/THBS4/COL1A2,VaD特征基因SPP1/PDGFC/TGFA,联合分析得出FOXC1为共病核心转录因子。免疫微环境显示B细胞普遍激活。筛选出的8种FOXC1抑制剂中,青黛酮(Qingdainone)的结合最优[亲和力:-9.0 kcal/mol, RMSD:(0.2±0.06)nm]。结论 该研究阐明HF与VaD的纤维化-神经炎症共病机制,发现了靶向FOXC1的天然抑制剂青黛酮,为共病治疗药物研发提供了理论依据。

关键词： 妊娠期糖尿病   同型半胱氨酸   超敏C反应蛋白   胱抑素C   胰岛素抵抗   不良妊娠结局  

摘要： 目的探讨血清同型半胱氨酸(Hcy)、超敏C反应蛋白(Hs-CRP)、胱抑素C(Cys-C)与妊娠期糖尿病(GDM)患者胰岛素抵抗(IR)及不良妊娠结局的相关性。方法回顾性选取2022年1月至2023年12月濮阳市妇幼保健院收治的98例GDM患者作为研究组,同期选取80例健康孕妇作为对照组。比较两组孕妇的血清Hcy、hs-CRP、Cys-C水平、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及妊娠结局。采用Spearman秩相关分析法分析MHD患者血清Hcy、hs-CRP、Cys-C及HOMA-IR与GDM患者不良妊娠结局的相关性。结果研究组患者的血清Hcy、hs-CRP、Cys-C水平及HOMA-IR分别为(11.12±2.59)μmol/L、(7.53±1.41)mg/L、(1.16±0.35)mg/L、2.92±0.34,明显高于对照组的(7.60±1.50)μmol/L、(2.94±0.25)mg/L、(0.72±0.14)mg/L、1.48±0.26,差异均有统计学意义(P<0.05);研究组患者的不良妊娠结局总发生率为24.49%,明显高于对照组的10.00%,差异有统计学意义(P<0.05);妊娠结局不良组患者的血清Hcy、hs-CRP、Cys-C水平及HOMA-IR分别为(15.72±3.20)μmol/L、(8.52±1.24)mg/L、(1.50±0.43)mg/L、3.84±0.41,明显高于妊娠结局良好组的(8.55±1.91)μmol/L、(4.32±0.65)mg/L、(0.92±0.22)mg/L、1.82±0.20,差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,血清Hcy、hs-CRP、Cys-C及HOMA-IR与GDM患者不良妊娠结局均呈正相关(r=0.804、0.910、0.631、0.959,P<0.05)。结论Hcy、Hs-CRP、Cys-C水平及HOMA-IR与GDM不良妊娠结局密切相关,监测这些指标可有效监测患者的病情进展,以及时为治疗提供参考。