关键词:
血管性痴呆
涤痰益智汤
活性氧
动力蛋白相关蛋白1
糖代谢
线粒体
大鼠
摘要:
目的基于ROS/Drp1轴观察涤痰益智汤对血管性痴呆(VaD)大鼠线粒体动力学介导的糖代谢的影响,探讨其治疗VaD的作用机制。方法从70只雄性SD大鼠中随机选取10只作为假手术组,其余大鼠采用改良双侧颈总动脉永久性结扎法制备VaD模型。将造模成功大鼠随机分为模型组、阳性药组(盐酸多奈哌齐)、抑制剂组(Mdivi-1)和涤痰益智汤低、中、高剂量组(12.86、25.725、51.45g/kg),分别予相应干预,连续4周。Morris水迷宫实验评估大鼠学习记忆能力,HE染色和尼氏染色观察海马组织形态,透射电镜观察海马神经元线粒体超微结构,DHE荧光探针检测海马CA1区活性氧(ROS)含量,Westernblot检测海马组织动力蛋白相关蛋白(Drp)1、p-Drp1、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、视神经萎缩蛋白1(Opa1)、己糖激酶(HK)1、丙酮酸激酶同工酶2(PKM2)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、乳酸脱氢酶(LDH)A蛋白表达,ELISA检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),穿越平台次数减少(P<0.01);海马CA1区神经元间隙增大,细胞形态不规则、边界模糊,神经元固缩,尼氏体溶解破碎、数量减少,线粒体肿胀变形,嵴紊乱,双层膜结构破坏;海马CA1区ROS含量显著升高,Mfn2、Opa1蛋白表达显著降低(P<0.01),p-Drp1、HK1、PKM2、GLUT1、LDHA蛋白表达显著升高(P<0.01),血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01)。与模型组比较,涤痰益智汤各剂量组、阳性药组和抑制剂组逃避潜伏期缩短(P<0.01),穿越平台次数增加(P<0.05,P<0.01);海马CA1区神经元数量增多、形态正常、排列整齐,尼氏体丰富,线粒体形态恢复、破裂减少;海马CA1区ROS含量降低(P<0.01),Mfn2、Opa1蛋白表达升高(P<0.01),p-Drp1、HK1、PKM2、GLUT1、LDHA蛋白表达降低(P<0.01),血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量降低(P<0.05)。结论涤痰益智汤可改善VaD大鼠认知障碍及神经元形态,其机制可能与介导ROS/Drp1轴调控线粒体动力学,进而改善糖代谢紊乱,减轻炎症反应有关。