关键词： 人参皂苷   2型糖尿病   肝脏病变  

摘要： 2型糖尿病是一种以慢性高血糖和胰岛素相对不足为特征的代谢性疾病。随着病程的进展,2型糖尿病患者肝脏常出现炎性水肿、脂肪变性及肝纤维化等病理变化,严重时可发展为肝硬化乃至肝癌。人参皂苷作为人参类植物的主要生物活性成分,在改善2型糖尿病血糖紊乱和肝脏损伤方面展现出显著的药理效应。其作用机制主要涉及调控肝脏糖脂代谢,增强胰岛素敏感性,并通过减轻氧化应激反应和抑制炎症反应减少肝细胞凋亡,从而有效缓解肝脏损伤,促进肝脏功能恢复。本文对人参皂苷在改善2型糖尿病肝脏损伤方面的作用及其机制进行系统综述,并简要概述2型糖尿病肝脏病变的发病机制,旨在为人参皂苷降糖机制的深入研究和降糖护肝药物的研发提供理论依据和实践参考。

关键词： 多克隆抗体   Omicron   核衣壳蛋白   γ干扰素(IFN-γ)   白细胞介素1β(IL-1β)  

摘要： 目的旨在研究新型冠状病毒Omicron(BA.1、BA.2)N蛋白的免疫学功能,并评估不同新冠病毒突变株N蛋白的免疫原性差异。方法运用序列比对确定Omicron(BA.1、BA.2)N蛋白相对新冠病毒原型株(Wuhan-Hu-1)的突变位点,以pET-28a-N-Wuhan-Hu-1质粒为模板经单点突变或同源重组构建pET-28a-BA.1/BA.2-N。利用原核系统分别表达上述三种N蛋白,经Ni-NTA亲和层析柱纯化后免疫小鼠。运用间接ELISA和Western blot法检测多克隆抗体的效价和反应性以及免疫小鼠脾脏细胞中白细胞介素1β(IL-1β)和γ干扰素(IFN-γ)的表达水平。结果成功利用构建的原核表达质粒在*** BL21(DE3)中表达了Wuhan-Hu-1 N、BA.1 N和BA.2 N蛋白,表达条件为37℃,4 h。间接ELISA试验测得三种N蛋白制备的多克隆抗体效价均为1∶51200。三种N蛋白均可使IFN-γ和IL-1β两种细胞因子表达升高,但是Omicron N蛋白较Wuhan-Hu-1 N蛋白激活两种细胞因子的效果更为明显。结论研究获得了三种新冠病毒N蛋白及多克隆抗体,并证实了N蛋白发生氨基酸位点的突变会对其免疫原性产生影响。这为开发针对不同新冠变异株N蛋白的快速诊断方法提供了依据。

关键词： COL12A1   猪乳腺上皮细胞   蛋白组学   细胞增殖   细胞凋亡  

摘要： 12型α1链胶原蛋白(COL12A1)是I型胶原蛋白纤维的辅助胶原,主要参与细胞外基质(ECM)的组装和细胞-基质的相互作用。为探索干扰COL12A1基因对猪乳腺上皮细胞增殖和凋亡的影响,试验通过构建猪COL12A1基因shRNA干扰载体,转染猪乳腺上皮细胞,TMT定量蛋白组学筛选差异表达蛋白,Annexin V/PI、CCK-8和流式细胞术检测细胞周期、细胞增殖和细胞凋亡。结果显示,干扰组(shRNA-COL12A1-1784,1784表示COL12A1 mRNA参考序列上的靶向起始碱基位置)与对照组相比,共筛选到差异表达蛋白1742个,其中上调蛋白831个,下调蛋白911个。GO富集发现,差异表达蛋白主要富集在细胞外区域、核糖体、胞外区部分。KEGG通路富集发现,差异表达蛋白主要富集在核糖体、缺氧诱导因子-1、铁死亡信号通路。COL12A1基因沉默后,48 h和72 h时干扰组细胞在450 nm处的OD值极显著低于对照组,提示细胞增殖能力明显下降;干扰组G1期细胞占比均极显著高于对照组,干扰组G2期和S期细胞百分比显著低于对照组;干扰组细胞凋亡率极显著高于对照组。说明干扰COL12A1基因可抑制细胞增殖和增加细胞凋亡,诱导细胞周期G1/S期阻滞,并受多个信号通路调控。

关键词： 半乳糖凝集素3   牙龈成纤维细胞   细胞增殖   细胞迁移分析   细胞凋亡   活性氧   炎症因子  

摘要： 目的探究半乳糖凝集素3(Gal-3)表达对脂多糖(LPS)诱导的人牙龈成纤维细胞(GF)增殖、迁移、凋亡以及活性氧和炎症因子产生的影响并探索其机制,为深入探讨Gal-3在牙周炎中的调控作用及其机制奠定基础。方法2022年12月至2023年12月于山东大学齐鲁医学院口腔医学院·口腔医院牙周病科收集6例需行牙冠延长术牙周健康者的牙龈组织,应用酶消化法提取并培养GF。设置感染复数(MOI)为15、20、30、40、50、60、70、80的慢病毒用以实现GF中Gal-3基因的敲低和过表达,利用免疫荧光实验、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)及蛋白质印迹法检测Gal-3基因的敲低及过表达效率;分别设置Gal-3敲低阴性对照(shNC)+LPS组、Gal-3敲低(shGal-3)+LPS组、Gal-3过表达阴性对照(oeNC)+LPS组和Gal-3过表达(oeGal-3)+LPS组,通过5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)、Ki67染色,划痕迁移实验,原位末端转移酶标记(TUNEL)技术,免疫荧光实验和RT-qPCR分别探究Gal-3对LPS诱导的GF增殖、迁移、凋亡以及活性氧和白细胞介素(IL)-6、IL-8基因表达的影响;通过RNA测序(RNA-seq)技术探究敲低Gal-3对LPS诱导的GF中差异基因表达及信号通路富集的影响。结果shGal-3 MOI 40及oeGal-3 MOI 70的慢病毒即可使80%以上的GF成功实现转染,免疫荧光结果显示慢病毒转染后GF形态正常,绿色荧光可分布于细胞质、细胞核及细胞膜。RT-qPCR和蛋白质印迹法结果显示,shGal-3组Gal-3在基因和蛋白水平上的表达(0.26±0.01、0.26±0.03)均显著低于shNC组(1.00±0.03、1.00±0.09)(P<0.001);oeGal-3组Gal-3在基因和蛋白水平的表达(4.26±0.05、3.94±0.34)均显著高于oeNC组(1.00±0.00、1.00±0.24)(P<0.001)。EdU、Ki67实验结果显示,shGal-3+LPS组GF的增殖比例[(16.99±1.79)%、(13.48±0.95)%]均显著低于shNC+LPS组[(33.86±3.84)%、(35.63±1.62)%](P<0.05),oeGal-3+LPS组GF的增殖比例[(45.36±1.56)%、(45.83±1.50)%]均显著高于oeNC+LPS组[(34.47±1.02)%、(33.66±3.14)%](P<0.05)。划痕迁移实验结果显示,shGal-3+LPS组GF迁移率[(25.07±0.01)%]显著低于shNC+LPS组[(57.84±0.00)%](P<0.001),oeGal-3+LPS组GF迁移率[(74.70±0.03)%]显著高于oeNC+LPS组[(53.36±0.01)%](P<0.001)。TUNEL结果表明,LPS刺激下,shGal-3显著促进了GF的凋亡(P<0.05),而oeGal-3显著抑制了GF的凋亡(P<0.001)。免疫荧光实验及RT-qPCR结果显示,敲低Gal-3显著降低了GF中活性氧的产生及IL-6和IL-8在基因水平的表达(均P<0.001),而过表达Gal-3显著增加了GF中活性氧的产生及IL-6和IL-8在基因水平的表达(均P<0.001)。RNA-seq结果显示,LPS条件下Gal-3敲低引起的差异基因显著富集到基因本体数据库中细胞对Ⅰ型干扰素反应等生物过程,并富集于京都基因与基因组数据库中NOD样受体及RIG-I样受体等信号通路中。结论下调Gal-3的表达能抑制LPS诱导的GF增殖、迁移以及活性氧、IL-6、IL-8的产生,促进GF凋亡;过表达作用则与之相反,此过程可能与JAK-STAT信号转导途径密切相关。

关键词： 肺动脉平滑肌细胞   肺动脉高压   miR-107   整合素α2  

摘要： 目的探究miR-107和整合素α2(integrin alpha-2,ITGA2)对肺动脉平滑肌细胞的作用以及其在肺动脉高压(pulmonary arterial hypertension,PAH)中的影响及相关机制。方法正常和低氧条件培养小鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMC),qRT-PCR检测细胞miR-107和ITGA2表达,流式细胞术检测细胞周期和凋亡。荧光素酶报告基因实验检测miR-107和ITGA2靶向性。将si-NC和si-miR-107转染至PASMC,低氧条件饲养并分组为:si-NC组和si-miR-107组,检测细胞miR-107和ITGA2表达、细胞周期和凋亡。将30只C57BL/6小鼠分为:对照组、模型组和si-miR-107治疗组。模型组和miR-107治疗组低氧诱导PAH模型后分别尾静脉注射si-NC和si-miR-107。检测小鼠右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index,RVHI)、右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)和平均肺动脉压(mean pulmonary artery pressure,mPAP)。qRT-PCR和蛋白质印迹检测小鼠肺组织miR-107和ITGA2表达,以及小鼠肺组织磷酸化组蛋白H2AX(phosphorylated histone H2AX,γH2AX)表达。结果细胞实验中,与正常组比较,低氧组细胞中miR-107表达升高,ITGA2表达降低,细胞G_(1)期比例升高,S期比例降低,细胞凋亡率升高。miR-107靶向ITGA2。与si-NC组比较,si-miR-107组细胞中miR-107表达降低,ITGA2表达升高,细胞G_(1)期比例降低,S期比例升高,细胞凋亡率降低。小鼠实验中,与对照组相比,模型组小鼠RVHI、RVSP和mPAP升高,miR-107表达升高,ITGA2表达降低,γH2AX蛋白表达升高。与模型组相比,si-miR-107治疗组小鼠RVHI、RVSP和mPAP降低,miR-107表达降低,ITGA2表达升高,γH2AX蛋白表达降低。结论miR-107通过ITGA2抑制肺动脉平滑肌细胞周期进展,促进细胞凋亡,从而影响PAH进展。

关键词： 高脂性重症胰腺炎   生长抑素   血必净   脂肪酶   淀粉酶  

摘要： 目的研究血必净联合生长抑素治疗高脂性重症胰腺炎对患者血清炎症指标、脂肪酶、淀粉酶含量的影响,为今后临床治疗该疾病提供依据。方法选取2023年1月至2025年1月红安县人民医院收治的高脂性重症胰腺炎患者,共计90例,以随机数字表法分组,分别为对照组(45例,使用血液净化、营养支持、液体复苏、抗生素等常规治疗联合生长抑素治疗)和观察组(45例,使用常规治疗、生长抑素联合血必净治疗),均治疗14 d,并于治疗后随访1周。比较两组患者治疗后临床疗效,临床症状改善情况,治疗前后血清炎症因子、淀粉酶、脂肪酶含量。结果治疗后观察组患者临床疗效优于对照组;与对照组比,观察组患者临床症状(恶心呕吐、腹胀、腹痛、腹膜刺激征)消失时间均缩短;与治疗前比,两组患者治疗后血清降钙素原(PCT)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-6(IL-6)、脂肪酶、淀粉酶及外周血白细胞计数(WBC)水平均降低,观察组均低于对照组(均P<0.05)。结论血必净联合生长抑素治疗高脂性重症胰腺炎患者,能促进临床症状改善,减轻炎症反应程度,调节淀粉酶、脂肪酶水平,提高患者临床疗效。

关键词： 糖尿病前期   炎症   生物学标志物   干预策略  

摘要： 本综述旨在探讨糖尿病前期(pre-diabetes mellitus,PDM)与炎症之间的关系,包括其潜在机制、生物学标志物以及可能的干预策略。通过分析最新的研究文献,总结了炎症在PDM发展中的作用,并讨论了炎症标志物在早期诊断和治疗中的重要性。此外,还探讨了针对炎症途径的潜在干预措施,旨在预防或延缓糖尿病的发展。

关键词： 抗炎活性   靶向筛选   双荧光素酶报告基因   核因子-κB  

摘要： 为快速筛选获得具有抗炎活性的益生菌,构建一种双荧光素酶报告基因系统筛选方法。将含有核因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)响应元件的双荧光素酶质粒转染至293T细胞,通过优化转染条件以及脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导浓度等条件,建立筛选系统。采用该系统对筛选得到的86株菌株抗炎活性进行评价,同时采用巨噬细胞RAW264.7炎症模型进行对比。结果表明,最佳转染条件为:pNF-κB-luc质粒与pRL-TK质粒比50∶1、质粒与转染试剂比1∶1、转染时间24 h、LPS诱导质量浓度100 ng/mL。对比结果显示,本实验建立的双荧光素酶报告系统具有可靠性(Z’=0.6632)与稳定性(R^(2)=0.74699),菌株筛选结果与RAW264.7炎症模型筛选结果一致。通过本方法最终获得植物乳植杆菌x30、发酵粘液乳杆菌x58与融合魏斯氏菌x83共3株具有良好抗炎活性的菌株,可有效抑制NF-κB通路的激活,显著降低白细胞介素(interleukin,IL)-1β、肿瘤坏死因子-α、NF-κB p65炎症因子的表达,提高IL-10的表达。本系统为靶向筛选具有抗炎活性的益生菌提供了新思路。

关键词： 血糖管理   姿势   膝盖疼痛   运动损伤   糖尿病   骑行  

摘要： 自行车运动是广受欢迎的休闲运动,糖尿病群体中,不少糖尿病患者都喜欢通过骑行作为辅助方式来管理血糖。然而骑行姿势不仅影响体验,还可能导致健康问题。在骑行中,不良姿势可能导致一系列运动损伤,如膝盖疼痛、下背痛、颈部不适以及手腕麻木。以下4种骑行姿势,每种都有其相应的使用场景,糖尿病患者中的骑行爱好者可根据骑行状态合理选择。

关键词： 大豆小分子肽   糖尿病足   患足愈合  

摘要： 目的:探讨大豆小分子肽在糖尿病足治疗中对营养不良、抗氧化、抗炎和患足愈合的改善作用。方法:选取2022年11月至2024年07月期间收治的90例糖尿病足患者作为研究对象,采用对比法进行研究。将研究对象随机分为两组,对照组接受常规治疗,实验组接受常规治疗加大豆小分子肽治疗。比较两组患者的营养状况、氧化应激指标、炎症指标和足部愈合情况。结果:与对照组相比,实验组在治疗后表现出更好的营养状况,包括体重增加、血红蛋白水平提高和血清白蛋白水平增加。实验组的氧化应激指标,如丙二醛和超氧化物歧化酶活性,明显降低,而抗氧化指标,如谷胱甘肽过氧化物酶活性,明显增加。此外,实验组的炎症指标,如白细胞计数和C-反应蛋白水平,显著降低。最重要的是,在治疗结束时,实验组的足部愈合情况明显好于对照组。结论:大豆小分子肽在糖尿病足治疗中具有改善营养不良、抗氧化、抗炎和促进患足愈合的作用。