关键词： 蛋白质组学   糖尿病肾病   微型癥瘕   足细胞自噬  

摘要： 糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)是糖尿病的常见微血管并发症,也是导致终末期肾病的重要病因。糖尿病肾病的发病机制复杂,目前认为其发病与足细胞的自噬障碍存在密切联系。早期干预对于糖尿病肾病的防治而言尤为重要,而中医药治疗糖尿病肾病有一定优势。赵进喜教授基于“微型癥瘕”病机学说治疗早期糖尿病肾病取得了良好的疗效,但其具体的作用机制仍然不明确。本研究旨在通过对赵进喜教授诊治早期糖尿病肾病的医案进行数据挖掘,揭示其用药特点,并通过动物和细胞实验探讨其可能作用机制,通过非标记(Label Free)定量蛋白质组学对其可能的作用机制进行全面预测,以期为基于“微型癥瘕”病机学说治疗糖尿病肾病提供数据支持与科学依据。目的1.通过对赵进喜教授诊治早期糖尿病肾病的临床医案进行数据挖掘,梳理赵进喜教授诊治早期糖尿病肾病的用药特点与用药规律,揭示“微型癥瘕”病机学说指导下的益气活血消癥法临床诊治糖尿病肾病的具体特点。2.通过非标记定量技术蛋白质组学对db/db小鼠肾脏皮质组织进行鉴定,以期能够对益气活血消癥方治疗糖尿病肾病的作用机制进行较为全面的分析。3.通过动物实验和细胞实验,基于PI3K/Akt信号通路介导的足细胞自噬,探讨益气活血消癥方调节足细胞自噬治疗糖尿病肾病的作用机制。方法1.采用描述性统计、k均值聚类算法对赵进喜教授诊治早期糖尿病肾病的临床医案进行数据挖掘,总结其学术思想和用药特点,揭示益气活血消癥法在早期糖尿病肾病治疗中的重要地位。2.通过非标记定量技术蛋白质组学对db/db小鼠肾脏皮质组织进行鉴定,采用质谱DDA扫描模式,将复杂混合物样本进行蛋白提取、酶切后进行串联质谱分析,所得质谱数据利用蛋白数据库进行检索匹配,使用M axQuant软件raw文件进行搜库比对,统计分析获得差异蛋白,并通过生信分析进一步较为全面地研究益气活血消癥方治疗糖尿病肾病可能的靶点的通路。3.通过免疫组化、蛋白质印迹法、免疫荧光等技术方法,研究益气活血消癥方对db/db小鼠足细胞自噬上游调节通路PI3K/Akt信号通路相关蛋白:PI3K、p-Akt、PTEN,足细胞自噬相关标记蛋白LC3、p62,以及足细胞标志蛋白Nephrin、Podocin的表达影响;通过免疫荧光、蛋白质印迹法研究益气活血消癥方对MPC5足细胞PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-Akt、PTEN,足细胞自噬相关标记蛋白LC3、p62表达水平的影响,从而探讨益气活血消癥方调节足细胞自噬治疗糖尿病肾病可能的作用机制。结果1.①研究共纳入304例医案,在用药的四气方面以寒性药、温性药最为多见;五味方面苦味药、甘味药最为多见;用药归经方面以归肝、肺、脾经最为多见;常用药物有鬼箭羽、黄芪、白芍、茯苓、当归、葛根、牛蒡子、赤芍、黄芩、川芎、土茯苓、萆薢、丹参等。②常用药物组合有“当归、川芎”、“黄芪、当归”、“鬼箭羽、牛蒡子”、“黄芪、川芎”、“黄芪、当归、川芎”、“土茯苓、萆薢”、“黄芪、土茯苓”、“白芍、赤芍”、“土茯苓、穿山龙”、“黄芪、鬼箭羽”等。③基于k均值聚类得出了治疗早期糖尿病肾病的三个核心处方,分别为“鬼箭羽,赤芍,白芍,黄芪,葛根”、“茯苓,鬼箭羽,黄芩,黄芪,白芍”以及“鬼箭羽,黄芪,牛蒡子,当归,丹参”。2.①基于卡值范围为1.5倍变化倍数筛选P≤0.05的蛋白质筛选出模型组与空白组之间差异蛋白625种,中药组和模型组之间差异蛋白151种。②G0富集结果提示模型组和空白组的差异蛋白在生物作用方面的主要以代谢功能为主,而中药组和模型组在生物作用方面则主要体现在应激、凝血、纤溶等方面;在分子功能方面,模型组和空白组的差异蛋白主要体现在能量代谢方面酶活性的异常,而中药组与模型组的差异主要体现在能量的传输与代谢方面。③KEGG分类结果,模型组与空白组直接共分类通路113个,中药组与模型组直接共分类通路78个。KEGG富集共富集模型组和空白组之间差异表达通路63个,中药组与模型组之间差异表达的通路22个,其中模型组与空白组之间的差异通路共有13个可被中药组干预后回调。3.①动物实验以db/db小鼠作为2型糖尿病导致糖尿病肾脏疾病的动物模型,以db/m小鼠为空白对照,给予益气活血消癥方灌胃10周,益气活血消癥方还能够改善db/db小鼠肾小球肥大、系膜基质扩张等病理改变。自噬标志蛋白:免疫荧光和Western Blot结果表明,中药组提高肾脏皮质的自噬标志蛋白LC3表达水平(P<0.05),减少p62表达(P<0.05)。足细胞标志蛋白:免疫组化和Western Blot结果表明,中药组Nephrin、Podocin表达较模型组升高(P<0.05);PI3K/Akt通路相关蛋白:免疫组化和Western Blot结果表明,中药组PI3K(P<0

摘要： 《中医学报》是国家新闻出版广电总局第一批认定的科技类学术期刊,以探讨中医理论,报道中医药科学实验和临床研究成果,促进学术交流为宗旨。读者对象为中医、中药、中西医结合临床、科研、教学工作者及中医药院校师生。本刊设有"本刊特稿""新冠肺炎中医防治研究""论著""述评""名医心法""学术争鸣""实验研究""临床研究""思路与方法""标准与规范""流派研究""方药研究""中医文献"等栏目。

摘要： 《中医学报》(ISSN 1674-8999,CN 41-1411/R)是由河南中医药大学与中华中医药学会联合主办的国家级中医药学术期刊,注重学术品味,兼顾科研和临床,是我国中医药界具有较高美誉度、广受读者好评的知名学术期刊。为中国科技论文统计源期刊(中国科技核心期刊)、RCCSE中国核心学术期刊。被中国学术期刊网络出版总库(CNKI)、美国化学文摘(CA)、美国乌里希期刊指南(UPD)、波兰哥白尼索引(IC)等国际知名数据库收录。

摘要： 《中医学报》是国家新闻出版广电总局第一批认定的科技类学术期刊,以探讨中医理论,报道中医药科学实验和临床研究成果,促进学术交流为宗旨。读者对象为中医、中药、中西医结合临床、科研、教学工作者及中医药院校师生。本刊设有"本刊特稿""新冠肺炎中医防治研究""论著""述评""名医心法""学术争鸣""实验研究""临床研究""思路与方法""标准与规范""流派研究""方药研究""中医文献"等栏目。1.基本要求来稿要符合科学性、先进性和实用性的原则,名词术语规范,标点符号正确。凡涉及临床研究、实验研究的文稿,均应由单位签章以证明内容属实,并提供原始数据;临床研究类论文需提供伦理学审查相关文件。

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关键词： 中医学   养阴生津法   中药单体   结直肠癌  

摘要： 目的:结直肠癌(CRC)是一类临床上较为常见的恶性肿瘤。近些年来,其发病率显著提升并已跃升为全球恶性肿瘤第三位。在我国,该病的发病率亦较为显著,同时,其较广泛的危害性严重影响着我国人民的生产生活。目前,对于本病的治疗仍以外科手术为主,并辅以化学治疗,此外亦有生物免疫以及分子靶向等治疗方法。然而,由于免疫、靶向疗法的不甚成熟以及外科手术、化学治疗较高的复发率和诸多的不良反应,使得新型辅助疗法的开发和使用较为必要。中医药疗法具有毒副作用较低、患者依从性与耐受性良好等综合优势。其在本病的应用具体体现在以联合结直肠癌切除/根治手术治疗、联合化学药物治疗以及针对并发症状,减轻患者不良反应等方面。在众多关于恶性肿瘤的治法中,养阴生津法具有悠远的应用历史以及较高的临床地位。因大肠与肺相表里,共同调节体内阴津的输布,故大肠癌发生发展对于阴津的影响更为显著,同时,肠道内阴津的输布失调亦可为肿瘤的发生发展提供重要条件。养阴生津法不但可对肿瘤的生长起到抑制作用,亦可改善手术、放化疗所造成的机体津亏以及疾病易进展的病理状态。石斛属中医学“养阴生津法”的常用药物之一,历代医家总结出其最主要的作用在于“养阴生津”,并列其为“养阴圣品”。对于大肠癌的治疗,无论是在养阴生津法、清热生津法还是益气养阴法中,石斛均可作为主要的中药配伍。毛兰素(Erianin)作为中药石斛发挥功效的主要活性成分,具有抗血管生成、杀菌以及灭活病毒的多重生物学作用。近年来随着对于本单体实验研究的增加,发现了其在抗癌方面具有较高的价值以及前景。现有的资料表明,在抗癌方面,毛兰素具有抑制肿瘤细胞增殖、促进凋亡、防止转移和抑制血管生成等综合作用。本实验的主要目的为探究毛兰素对SW480、HCT116两种结直肠癌细胞生长增殖、周期、凋亡的调控作用及其相关机制,同时亦进行了免疫缺陷小鼠移植瘤实验以评估其在生物体内的作用。主要研究意义是在中医学“养阴生津法”的指导之下,通过对中药石斛提取物单体抗肿瘤的机制研究,为结直肠癌的治疗开拓一种全新、疗效显著、无毒副作用且经济、便捷的中医药辅助疗法。方法与结果:为探究本药物对于肠癌细胞以及人正常结直肠上皮细胞增殖的影响,应用不同浓度的毛兰素处理SW480、HCT116、NCM460三种细胞,并在不同的时间节点采用CCK8法测定细胞活性,应用集落形成实验评估肠癌细胞的长期生存能力。结果显示,高浓度、长时间的毛兰素的刺激作用可明显抑制肿瘤细胞增殖并减弱其活性(P<0.05)。此外,NEM460细胞在药物刺激后的增殖活性未发生明显改变。为探究本药物对于肠癌细胞周期的调控作用,应用不同浓度的毛兰素处理肿瘤细胞48小时,在流式细胞仪上观测各组细胞的周期分布情况。结果显示,毛兰素组在经药物刺激后,G2/M期的细胞占比出现了不同程度的提升(P<0.05),相反,G0/G1以及S期细胞占比随药物浓度增高呈现下降趋势(P<0.05)。为探究本药物对于肠癌细胞凋亡的影响,我们应用荧光法测定Caspase3/7活性、免疫印迹法测定剪切PARP以及Bcl-2家族蛋白的表达情况,并应用Annexin V-FITC流式细胞术以及DAPI染色法直接观测毛兰素对细胞凋亡的影响。结果显示,高浓度毛兰素显著提升了肿瘤细胞Caspase3/7的活性以及裂解PARP、Bak、Bax的蛋白含量,并减少了Bcl-2以及Bcl-xl的表达(P<0.05)。此外,染色实验显示随着药物浓度的增加,死亡细胞数占比逐渐提升,提示毛兰素显著提升了肠癌细胞凋亡率。为探究本药物对于Wnt/β-catenin信号通路的作用影响及相关机制,我们进行了对β-catenin磷酸化、核浆易位、转录活性、热稳定性、靶基因表达情况以及与信号通路阻断剂WNT974的联合效应研究。结果显示,毛兰素可在不改变β-catenin磷酸化水平的情况下显著增加细胞浆内、减少细胞核内的β-catenin表达,同时亦降低了β-catenin对其下游T细胞因子的转录活性,提升了β-catenin的热稳定性(P<0.05)。此外,毛兰素显著降低了两种靶基因C-myc、Cyclin D1的m RNA水平以及其蛋白表达(P<0.05),且在与WNT974联合应用后,该效应未发生显著变化。为探究本药物对于CD47的表达以及巨噬细胞吞噬效率的影响,我们应用QRT-PCR法、免疫印迹法以及流式细胞术观测CD47的表达情况,并采用离体巨噬细胞实验测定其对于两种肠癌细胞的吞噬效率。结果显示,高浓度的毛兰素减少了肿瘤细胞表面CD47的分布水平以及CD47的m RNA水平、蛋白含量(P<0.05)。同时,两种细胞被毛兰素处理后,巨噬细胞对其吞噬效率显著提升(P<0.05)。在体内实验中,我们予NOD/SCID免疫缺陷小鼠皮下接种SW480肿瘤细胞的方式构建免疫缺陷小鼠

ISBN: (纸本)9787520377799

摘要： 在中华传统文化里,儒家文化一直作为主干,对中国历史的进程产生过久远而重要的影响,中医学以其切合民生日用的特性,与兵、农、艺一起,被列为中国四大实用文化之一。在漫长的历史长河中,儒家文化与中医学是相互影响、彼此渗透的。从儒家文化作为中华文化的主干这一点而论,其最典型的体现,莫过于"儒医"这个特殊的传统医生角色类型。从社会规范层次看,情形则比较复杂,因为它本身还包括不同层次。所谓规范,就是人们行为的准则、做事的方法和行动的蓝图。其中有正式规范,如政治规范、法律规范等,也有非正式规范,如道德、习俗、信仰等。

摘要： 《中医学报》(ISSN 1674-8999,CN 41-1411/R)是由河南中医药大学与中华中医药学会联合主办的国家级中医药学术期刊,注重学术品味,兼顾科研和临床,是我国中医药界具有较高美誉度、广受读者好评的知名学术期刊。为中国科技论文统计源期刊(中国科技核心期刊)、RCCSE中国核心学术期刊。被中国学术期刊网络出版总库(CNKI)、美国化学文摘(CA)、美国乌里希期刊指南(UPD)、波兰哥白尼索引(IC)等国际知名数据库收录。

关键词： 信息化教学   中医学基础   教学  

摘要： 伴随着科技的迅速发展,信息化越来越普遍地应用到教育教学领域,越来越多信息化手段的出现为一线教师的课堂教学提供了更多的选择。主要介绍了在中医学基础这门课程中,课堂教学中常用的信息化教学手段及实际应用情境,并且通过这些教学手段的应用,分析了信息化教学在中医课堂教学中的应用优势,证明了合理使用信息化教学对提高中医学基础课程的教学效果有着积极的促进作用,也可以为其他相关课程的信息化教学开展提供示范。