关键词：
脊髓损伤
减重步行训练
运动训练
精子质量
康复护理
摘要：
背景:脊髓损伤(SCI)严重影响患者的生理、心理和社会健康。SCI多发生在处于生育高峰的年轻男性,其中90%存在生殖功能障碍,精子质量下降是重要原因之一。SCI男性患者具有独特的精液特征,即浓度正常,而活力、活率下降,形态异常。但损伤后精子质量开始下降的确切时间点、慢性期精子质量是否会随时间持续下降及精子质量特征性变化的原因尚不完全清楚。运动训练是SCI患者不可替代的康复手段。有研究表明,运动训练能够减轻非SCI男性不育症患者精液中促炎性细胞因子和氧化标志物水平,增强抗氧化防御系统,提高精液质量和精子DNA完整性。而运动训练对SCI男性患者精子质量的影响未见研究。运动训练是否对SCI这一特殊男性群体精子质量也有改善作用?不同强度运动训练作用效果如何?以上问题的解决可以帮助临床康复护理人员更全面的了解SCI患者的生理变化,明晰精子质量的时间变化特征及影响因素;进一步认识运动训练对SCI男性患者的康复影响;对康复护理人员为有生育需求的SCI男性患者开展全面评估,选择有针对性的干预措施及更好地制订康复策略,促进患者全面康复具有重要临床意义。精子的发生、成熟涉及到多个器官、组织,过程复杂,受到取材等因素的限制,本研究选择以雄鼠为研究对象,对SCI及SCI运动训练引起的精子质量变化及影响因素做深入探讨。目的:建立规范的SCI大鼠模型,明确SCI后雄鼠精子质量的时间变化特征,分析其影响因素;在此基础上研究不同强度减重步行训练(BWSTT)对SCI雄鼠精子质量的影响。方法:1.大鼠建模方法的研究设计一种新型椎板移除辅助器(LAD),并进行应用效果评估。雄鼠24只,随机均分为N组(正常对照)、CONV组(常规椎板移除)、LAD组(LAD椎板移除)。从切口大小、成功率、手术时长、体重、运动功能(BBB评分、RRMPS步态分析)、脊髓神经功能(tce MEPs)、机体氧化应激(ELISA方法测定血清SOD活力、MDA含量)方面评估LAD的应用效果。***椎板移除对雄鼠精子质量影响的评估雄鼠12只,随机均分为N组(正常对照)、LAD组(LAD椎板移除)。于术后1周使用血细胞计数板测定附睾精子质量;ELISA方法测定血清FSH、LH、T水平,睾丸组织匀浆SOD活力、MDA含量,精浆IL-1β、IL-6、TNF-α浓度;HE染色观察睾丸组织结构;TUNEL染色观察睾丸生精细胞凋亡。***雄鼠精子质量的时间变化特征及影响因素雄鼠60只,随机均分为Sham组(只开椎板,不打击脊髓)、SCI组(打击脊髓)。两组大鼠分别于SCI后1、2、3、4、5周各处死6只,测定指标及方法同“方法2”。4.不同强度BWSTT对SCI雄鼠精子质量的影响雄鼠30只,随机均分为Sham组(只开椎板,不打击脊髓)、Sedentary组(打击脊髓,但不进行运动训练)、BWSTT-A组(低强度,7cm/s)、BWSTT-B组(中强度,15cm/s)、BWSTT-C组(高强度,21cm/s)。BWSTT于SCI后14天开始,为期3周。测量指标及方法同“方法2”,此外增加大鼠后肢功能BBB评分及下丘脑Gn RH蛋白表达测定(免疫组化染色法)。结果:1.大鼠建模方法的研究(1)一般情况:与CONV组相比,LAD组手术切口小(1.3cm vs.2.2cm)、操作时间短(4.82±0.67min vs.14.64±1.62min)、成功率高(100%vs.88.89%)。(2)体重:术后1周,CONV组和LAD组体重增长幅度差异无统计学意义,但均低于N组(均有P<0.01)。术后2周、3周,三组大鼠体重增长幅度差异均无统计学意义。(3)后肢运动功能:手术当天麻醉清醒后,与N组相比,CONV组步高降低(左:P<0.01,右:P<0.05),LAD组无显著变化;三组大鼠步长差异无统计学意义。术后1周,三组大鼠步高、步长差异均无统计学意义。(4)脊髓神经传导功能:术后1天、1周,三组大鼠脊髓神经传导潜伏期、波幅差异均无统计学意义。(5)血清SOD活力、MDA含量:术后1周,与N组相比,CONV组、LAD组SOD活力均降低(均有P<0.01);CONV组MDA含量升高(P<0.05),LAD组无显著变化。术后2周、3周,三组大鼠SOD活力、MDA含量差异均无统计学意义。***椎板移除对雄鼠精子质量影响的评估(1)精子质量:LAD组、N组精子计数、活率、快速前向运动率及异常形态发生率差异均无统计学意义。(2)下丘脑-垂体-睾丸(HPT)轴功能:LAD组、N组血清LH、FSH、T水平差异均无统计学意义。(3)睾丸组织结构、生精细胞凋亡:LAD组、N组睾丸组织生精小管结构均完整,细胞排列有序;生精细胞凋亡指数(AI)差异无统计学意义。(4)睾丸氧化损伤、精浆炎症反应:LAD组、N组睾丸SOD活力、
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