关键词：
复方多维辅酶Q10泡腾片
运动性疲劳
AMPK/PGC-1α通路
摘要：
目的:探究复方多维辅酶Q10泡腾片的急性毒性作用以及通过建立小鼠运动训练动物模型,阐述复方多维辅酶Q10泡腾片对小鼠的抗疲劳作用和分子机制,为复方多维辅酶Q10泡腾片用于防治运动性疲劳提供实验依据。方法:第一部分:复方多维辅酶Q10泡腾片急性毒性实验,10只KM小鼠,雌雄各半,用于预实验,随机分为三组,每组三只,采用10 mg/kg、100 mg/kg及1000mg/kg,按小鼠灌胃能允许的最大体积(0.4m L/10g),分别给小鼠灌胃,观察小鼠出现的症状并记录死亡数,连续观察14天。根据小鼠死亡的情况,改良简化剂量设计,选择正式试验剂量。选择体重为22±2g的KM小鼠10只/组,雌雄各半,经口灌胃给药,连续观察小鼠14天,记录小鼠的反应和死亡数,测定LD50,确定给药剂量。第二部分:复方多维辅酶Q10泡腾片抗运动疲劳实验,将60只KM小鼠随机分为5组,每组12只,即生理盐水空白(C组)、复方多维辅酶Q10泡腾片低剂量(L组)、复方多维辅酶Q10泡腾片中剂量(M组)、复方多维辅酶Q10泡腾片高剂量(H组)、肌酸对照组(P组),持续给药,每天给药一次,上午灌胃给药,下午负重游泳训练。负重游泳训练从第2周至第6周(第一周进行游泳适应性训练),每周训练6天,每次训练至小鼠力竭时停止负重由1%逐渐增加至体重的10%。每天测量体重,相应增减负荷。依次检测相关指标,观测负重游泳实验、爬杆实验、前肢握力实验以及转棒实验时间;在第40天处死并取材,通过化学比色法检测小鼠血清中LA、BUN、MDA、SOD,肝脏中的LG;采用HE染色法评价复方多维辅酶Q10泡腾片对小鼠腓肠肌组织的病理学影响;荧光定量PCR检测AMPK、PGC-1α基因表达;Western blot法检测Bcl-2、Bax蛋白,AMPK、P-AMPK、PGC-1α蛋白表达水平。结果:(1)复方多维辅酶Q10泡腾片急性毒性实验后,通过小鼠死亡情况计算出LD50的值为137.824mg/kg,进而确定复方多维辅酶Q10泡腾片低、中、高给药剂量。(2)与C组相比,L组小鼠负重游泳时间显著提高,具有显著性差异(p<0.01)。与L组相比,H组负重游泳时间具有显著性差异(P<0.05);L组小鼠爬杆时间显著提高;L组小鼠转棒的时间显著提高,具有显著性差异(p<0.01)。L、M、H、P组小鼠的前肢握力显著增强,具有显著性差异(p<0.01)。(3)与C组相比,L、M、H、P组LA、BUN含量显著降低,具有显著性差异(p<0.01)。与L组相比,P组BUN含量有显著性差异(P<0.01)。与M组相比,P组BUN含量有显著性差异(P<0.05)。与H组相比,P组BUN含量有显著性差异(P<0.05);L、M、H剂量组LG含量显著提高,P组LG含量显著提高,具有显著性差异(p<0.01或p<0.05)。与L组相比,H组LG含量有显著性差异,P组LG含量有显著性差异(P<0.01)。与M组相比,H组LG含量有显著性差异,P组LG含量有显著性差异(P<0.01)。(4)与C组相比,L组MDA含量显著降低,具有显著性差异(p<0.05)。与L组相比,M、H组MDA含量有显著性差异(P<0.01);L、M组SOD含量显著提高,具有极显著性差异(p<0.05)。与L组相比,H组SOD含量有显著性差异(P<0.01),与M组相比,H组SOD含量有显著性差异(P<0.01)。(5)C组小鼠骨骼肌出现轻度损伤,肌纤维排列破坏,与C组相比,复方多维辅酶Q10泡腾片L、M、H剂量组、肌酸对照组骨骼肌损伤得到明显改善,纤维排列均匀。(6)与C组相比,H组AMPK m RNA、PGC-1αm RNA基因表达水平显著提高,具有显著性差异(p<0.05)。(7)与C组相比,H组AMPK、p-AMPK蛋白表达水平显著提高,具有显著性差异(p<0.05)。(8)与C组相比,H组上调Bcl-2蛋白表达水平,M剂量组抑制Bax蛋白表达,具有显著性差异(p<0.05);H、P组Bcl-2/Bax比值增大,结果表明,复方多维辅酶Q10泡腾片对小鼠骨骼肌具有抗凋亡的作用。结论:复方多维辅酶Q10泡腾片显著提高小鼠运动耐力,增加能量存储、具有抗氧化作用;此外,复方多维辅酶Q10泡腾片可能通过调节骨骼肌组织中AMPK/PGC-1α以及Bcl-2/Bax通路相关蛋白、基因的表达而发挥抗疲劳作用。
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