关键词:
电针
运动训练
缺血性脑卒中
Wnt/β-catenin通路
NSCs分化
摘要:
目的:观察电针结合运动训练对改善缺血性脑卒中损伤的影响,并探究其可能的作用机制。方法:对成年雄性SD(Sprague Dawley)大鼠进行左侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型建造,假手术(Sham)组除不插入线栓外其余操作步骤相同。将造模成功的大鼠随机分成模型(MCAO)组、电针(EA)组、运动(Exercise)组和电针结合运动(EA+Exercise)组。造模后24 h,对EA组百会、大椎、偏瘫侧曲池和内关穴位进行电针治疗,30 min/次,连续治疗9天。Exercise组进行相应的跑台训练,30 min/天,持续9天。EA+Exercise组进行电针治疗后对其进行运动训练,持续治疗9天。9天治疗完成后使用神经功能缺损评分(neurological severity scores,NSS)、Foot-Fault测试和转棒疲劳实验测试大鼠神经功能及平衡、协调能力改善情况;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-triphenyltetrazolium chloride,TTC)染色检测大鼠脑梗死体积;免疫荧光观察缺血区及附近双肾上腺皮质激素(double cortex,DCX)和神经元核抗原(neural nuclei,Neu N)细胞数目;Western blot检测大鼠脑缺血侧皮层中DCX及Wnt/β-catenin通路相关蛋白表达情况。结果:1.与MCAO组比较,EA、Exercise、EA+Exercise组NSS得分明显降低(P<0.001)。与EA组和Exercise组比较,EA+Exercise组NSS得分稍有降低(P=0.286,P=0.590);与MCAO组比较,EA、Exercise、EA+Exercise组大鼠Foot-Fault测试得分增加(P<0.05)。与EA组、Exercise组比较,EA+Exercise组Foot-Fault测试得分稍有增加(P=0.101,P=0.222);与MCAO组比较,EA、Exercise、EA+Exercise组转棒疲劳测试停留时间明显增加(P<0.01)。与EA组和Exercise组比较,EA+Exercise组转棒疲劳测试时间有所增加(P=0.181,P=0.308)。***、Exercise、EA+Exercise组脑梗死体积显著低于MCAO组(P<0.01)。EA+Exercise组脑梗死体积稍低于EA组和Exercise组,但差异不明显(P=0.936,P=0.875)。3.与MCAO组比较,EA、Exercise组缺血区及周围DCX、Neu N、DCX/Neu N细胞数目有所增加(P>0.05),EA+Exercise组脑缺血区及附近DCX、Neu N、DCX/Neu N细胞数量明显增多(P<0.05)。与EA组和Exercise组比较,EA+Exercise组缺血区及周围DCX细胞数目稍有增加(P=0.070,P=0.616)、Neu N细胞数目轻微增多(P=0.120,P=0.513)、DCX/Neu N细胞数目略有增加(P=0.445,P=0.938)。4.与MCAO组相比,EA、Exercise、EA+Exercise组脑缺血侧皮层中DCX(P<0.05)、Wnt3a(P<0.001)、P-GSK-3β(ser9)/GSK-3β(P<0.01)、Cyclin D1(P<0.05)和Ngn1(P<0.05)蛋白表达显著增加。与EA组比较,EA+Exercise组缺血皮层Wnt3a和Ngn1蛋白表达稍有增加(P=0.537,P=0.472)。与Exercise组比较,EA+Exercise组缺血皮层中Wnt3a蛋白表达略有增加,但差异不显著(P=0.269)。结论:1.电针治疗、运动训练以及二者联合治疗都能改善脑缺血大鼠平衡、协调能力、增强运动耐力,减轻脑梗死体积,减轻神经功能缺损。且电针结合运动治疗稍优于单纯电针或单纯运动训练,但差异不显著。2.电针治疗、运动训练以及二者联合治疗都能促进脑缺血大鼠神经干细胞(neural stem cells,NSCs)分化为DCX,并迁移至梗死区域及附近、进一步向成熟神经元方向分化,且电针结合运动发挥出更好的疗效,但差异不显著。3.电针治疗、运动训练以及二者联合治疗可能通过激活Wnt/β-catenin通路,促进该通路中相关蛋白表达,从而促进脑缺血大鼠NSCs分化,且电针结合运动训练对增加Wnt3a配体蛋白表达,激活Wnt/β-catenin通路作用略强于单纯电针或单纯运动,但无显著性差异。总之,电针结合运动训练能减小脑梗死体积,减轻脑缺血大鼠神经功能损伤,促进脑缺血区及附近NSCs分化为DCX并进一步向成熟神经元分化、上调Wnt/β-cat