关键词： IMMUNOGLOBULINS   STRAW-colored fruit bat   BATS   VIRUSES   FLUORESCENT antibody technique  

摘要： To investigate the presence of Lagos bat virus (LBV)-specific antibodies in megachiroptera from West Africa, we conducted fluorescent antibody virus neutralization tests. Neutralizing antibodies were detected in Eidolon helvum (37%), Epomophorus gambianus (3%), and Epomops buettikoferi (33%, 2/6) from Ghana. These findings confirm the presence of LBV in West Africa.

关键词： SARS病毒   蝙蝠   美国俄亥俄州立大学   毒源   科研人员   传播途径   基因组   人类  

摘要： 经过对SARS病毒进行基因组研究，美国俄亥俄州立大学的科研人员获得相关病毒比较研究提供的证据，表明感染人类的SARS病毒起源于蝙蝠。该分析对引起SARS的病毒在人类及动物宿主中的传播途径进行了迫踪，其结论与SARS在2004年已被根除的主张相左。

关键词： 病毒   蝙蝠   宿主  

摘要： 国内外的许多研究证实，自然界蝙蝠中存在着新发病毒的感染，如从蝙蝠中分离到亨德拉病毒、尼帕病毒、梅南高病毒、埃博拉病毒和类SARS病毒或检测到病毒核酸。现场和实验室研究表明，蝙蝠在新发现病毒的储存和扩散中起重要作用。此文就蝙蝠自然和实验感染新发现病毒及其宿主作用等方面的研究进展作了综述。

关键词： rabies virus   hematophagous bat   rabies outbreak   molecular epidemiology   Augusto Correa municipality  

摘要： We genetically characterize rabies virus (RABV) strains isolated from human cases, domestic and wild animals during a human outbreak of bat-transmitted rabies in Augusto Correa municipality, Para state, Brazilian Amazon in 2005. Partial nucleotide sequences of the N gene (491 bp) were obtained for all strains, and phylogenetic analysis grouped these into two major clades (Para and Central-Southeast) and identified them as bat-related viruses genotype 1, Desmodus rotundus antigenic variant 3 (AgV3). A molecular clock was used to estimate the time of emergence for each RABV isolate. The molecular data from this study suggest the association of vampire bats with human and domestic animal cases reported in the outbreak, the circulation of at least two predominant lineages in the Para state, and also a geographic association to lineages dispersion. (c) 2007 Elsevier Inc. All rights reserved.

关键词： PARAMYXOVIRUSES   FEVER   IMMUNOGLOBULINS   LYMPHOCYTES   SECRETION  

摘要： Disease manifestation, pathology, and tissue tropism following infection with Tioman virus (TioPV), a newly isolated, bat-derived paramyxovirus, was investigated in subcutaneously (n = 12) and oronasally (n = 4) inoculated pigs. Pigs were either asymptomatic or developed pyrexia, but all of the animals produced neutralizing antibodies. The virus (viral antigen and/or genome) was detected in lymphocytes of the thymus, tonsils, spleen, lymph nodes and Peyer's patches (ileum), tonsillar epithelium, and thymic epithelioreticular cells. Virus was isolated from oral swabs but not from urine. Our findings suggest that the pig could act as an intermediate or amplifying host for TioPV and that oral secretion is a possible means of viral transmission.

关键词： 蝙蝠   登革病毒   流行性乙型脑炎病毒   西尼罗病毒   调查  

摘要： 研究背景 蝙蝠属于哺乳动物中的翼手目(Chiroptera),其数量在哺乳乳类中仅次于啮齿目,全世界蝙蝠大约有17科180属,约960种,其中我中有7科29属107种。翼手目分两个亚目:大蝙蝠亚目(Megachiroptera),又称狐蝠,我国有1科5属7种;小蝙蝠亚目(Microchiroptera),即通常所说的蝙蝠,我国有6科24属100种。大蝙蝠类分布于东半球热带和亚热带地区,体形较大,身体结构也较原始,只有狐蝠科1个科。小蝙蝠类分布于东、西半球的热带、温带地区,体型较小,包括菊头蝠科、蹄蝠科、叶口蝠科、吸血蝠科、蝙蝠科等十余科。 蝙蝠对人类而言是有益的动物,部分种类与人类接触密切,是一个可以与人类和谐共处的重要物种。然而,研究发现蝙蝠是多种人类病毒性疾病病原体的储存宿主。已知有25个病毒科能够感染脊椎动物,其中有10个科和蝙蝠有关,且主要是RNA病毒。在感染脊椎动物的16个RNA病毒科中,至少有9个科可感染蝙蝠。迄今为止,已在蝙蝠体内分离到80多种病毒,其中一些是多种重大人兽其患疾病的传染源,对人类健康构成了巨大威胁。近年来,一些新病毒病的暴发、老病毒病4的重燃都与蝙蝠有关,如1994年澳大利亚爆发的亨德拉病毒(Hendra virus)病,1997年澳大利亚爆发的梅南高病毒(Menangle virus)病,1998年马来西亚爆发的尼巴病毒(Nipah virus)病,以及Tioman病毒(Tiomanvirus)病等。 虫媒病毒(Arbovirus)是导致人类传染病的重要病原体,我国主要有5种虫媒病毒传染病:流行性乙型脑炎(乙型脑炎)、登革热、肾综合征出血热、新疆出血热和森林脑炎。其中,乙型脑炎与登革热经蚊子传播,这两种传染病的病原体(乙型脑炎病毒和登革病毒)都属于黄病毒科黄病毒属(Flavivirus)病毒。黄病毒属中的西尼罗病毒导致西尼罗热,也经蚊子传播。西尼罗热自1999年后,在过去没有报告过该病的西半球的许多国家发生爆发和流行,病死率较高,引起了全球的关注。我国虽然迄今尚没有报告发生过西尼罗热,但地理纬度与美洲流行区相似,加上日益全球化的问题,存在着发生该病流行的条件。国外已经有研究报道蝙蝠能携带乙型脑炎病毒和西尼罗病毒。国内学者从云南蝙蝠检测到乙型脑炎病毒血清抗体,更有人从海南登革热疫区蝙蝠中检测到登革病毒,但都因证据不足还不足以证实蝙蝠是此两种病毒的宿主。此外,在我国湖南地区也从没有检测到蝙蝠携带乙型脑炎病毒与登革病毒的报道。 因此,了解不同地区蝙蝠携带人类病毒性疾病病原体的本底情况,对于深入认识有关病毒在人与动物进化中的关系,对于科学预防和应对可能爆发的人兽共患病具有重要的理论和实用意义。本研究拟以湖南省部分地区为现场,调查该地区蝙蝠是否能携带乙型脑炎病毒、登革病毒和西尼罗病毒这三种蚊媒病毒(mosquito-borne virus)。 研究目的 在湖南部分地区开展蝙蝠携带登革病毒、西尼罗病毒与乙型脑炎病毒的调查研究,探讨蝙蝠作为这些病毒的自然贮存宿主和相关疾病传染源的可能性。 研究方法 1.调查地区的选择选择条件为:①便利开展蝙蝠调查与标本采集:②既往有相关疾病流行。 2.蝙蝠的收集与标本制备 2.1蝙蝠收集在调查地区开展现场调查,了解是否有蝙蝠的栖息、栖息类型以及种类等情况。在不影响蝙蝠活动以及生态变化的情况下,根据蝙蝠的栖息地特点采用相应的方法捕捉少量蝙蝠进行研究。 2.2标本制备:收集的蝙蝠经鉴定种类后无菌解剖取脑组织。所取得的标本放入1.5ml含RNAlater的冻存管中4℃运输。脑组织标本用0.1%DEPC水浸泡后高压消毒过的5ml研磨器加DEPC水无菌研磨至匀浆,3000r/min离心15min,上清即为检测标本,-70℃保存待检。 3.病毒分离与鉴定方法 3.1登革病毒 ①参考文献并引用已得到证实和公认的登革病毒特异性引物和探针,采用Taqman real-time RT-PCR方法对蝙蝠脑组织进行分子生物学检测。 ②将Taqman real-time RT-PCR判定为登革病毒阳性或可疑为阳性的脑组织上清液接种C6/36细胞,逐日观察细胞病变并盲传3代,分离病诲。 ③取细胞液或脑组织上清液脑腔接种1～3d龄的BALB/c乳鼠,观察乳鼠发病情况,有可疑发病者,取脑组织继续盲传3代,如出现规律发病者再进行Taqman real-time RT-PCR鉴定。 3.2西尼罗病毒 ①参考文献并引用已得到证实和公认的西尼罗病毒特异性引物和探针,采用Taqman real-time RT-PCR方法对蝙蝠脑组织进行分子生物学检测。 ②将Taqman real-time RT-PCR判

关键词： 单引物扩增技术   呼肠孤病毒   基因组克隆  

摘要： 1994年～1999年,澳大利亚和马来西亚等地区所暴发了3种人兽共患病—亨德拉病毒(Hendra virus)、尼帕病毒(Nipah virus)和梅南高病毒(Menangle virus)—造成了生命和财产的巨大损失,随后的研究证实这3种病毒的自然宿主都是蝙蝠。这一重要发现引起了病毒学家对调查蝙蝠携带病毒的巨大兴趣。蝙蝠,这一独特的哺乳动物在我国分布广泛,因此对中国境内蝙蝠所携带的病毒进行监测和研究,对于我国人兽共患病毒性传染病的预防及预警具有重要意义。 因此,本实验室采集我国各个地区大量的蝙蝠样品,对这些蝙蝠样品所携带病毒情况进行了大量研究。在对广东西江地区的蝙蝠样品进行病毒分离过程中,分离到一株病毒,暂命名为XJV。该病毒能使Vero-E6细胞产生细胞病变,经电镜观察初步鉴定为呼肠孤病毒。为进一步鉴定及明确该病毒所处的分类地位,本研究采用单引物扩增技术(Single primer amplication technique, SPAT)对该株病毒含有10个dsRNA基因组节段的全基因组进行了克隆和测序。并将其结构和非结构蛋白与同属的其它病毒进行了同源性比较和进化关系关系分析,明确了XJV的病毒分类地位。 目前,由于dsRNA病毒基因克隆存在着技术难题而导致其基因信息十分匮乏,但在本研究中应用SPAT成功对XJV全基因组序列进行破译,克服了无基因信息来设计引物以扩增XJV全基因组序列的瓶颈。XJV全基因组序列的成功破译填补了正呼肠孤病毒属的纳尔逊海湾病毒种在全基因组序列的测定上的空白。

关键词： endocrine cells   immunohistochemistry   gastrointestinal tract   Artibeus cinerius   Sturnira lilium  

摘要： The purpose of the present study was to examine the serotonin (5-hydroxytryptamine, 5-HT), gastrin (GAS), cholecystokinin (CCK) and gl ucagon (GLUC) endocrine cells in the gastrointestinal tract of frugivorous Phillostomidae bats, Sturnira lilium and Artibeus cinerius, to clarify the correlation between distribution of cell types and their relative frequency, with feeding habits. Five portions of the gastrointestinal tract - fundus, pilorus, and three parts of the intestine, I, II and III - were examined. Most of the immunoreactive coils in the stomach and intestine were of triangular, oval or piriform shape. Serotonin-immunoreactive cells were most commonly found in the S. lilium intestine I (66.6 +/- 9.9) and the A. cinerius intestine III (35 +/- 18). Gastrin-immunoreactive cells were the most abundant cell type in the pyloric glands of both species. They were more numerous in A. cinerius (126.9 +/- 27.4) than in S. lilium (75.8 +/- 1.8). CCK-immunoreactive cells were found in the alimentary tract epithelia at moderate frequencies in both species. GLUC-immunoreactive cells were detected at very tow or low frequencies. This study suggests that there is a correlation between endocrine cell distribution and frequency, and the feeding habits of the bats. (C) 2007 Elsevier GmbH. All rights reserved.

关键词： 蝙蝠   呼肠孤病毒   分离   鉴定  

摘要： 我们对采自我国广东省西江的150只蝙蝠进行了病毒的分离鉴定工作,本研究采用Vero-E6细胞和BHK-21细胞培养的方法进行病毒分离。在150只蝙蝠共30组样品中,从肺脏组织样品中分离出2株病毒,50只蝙蝠共10组肠道组织样品中分离出1株病毒,对其中一株从棕果蝠( Rousettus leschenaulti)肺脏组织中分离出的病毒进行了鉴定工作。该病毒命名为XJ ,XJ株引起的细胞病变迅速,形态学观察,病毒粒子呈圆球形,直径约为75nm,正二十面体对称,无囊膜,有双层衣壳,病毒具有典型的正呼肠孤病毒科成员的特性。随后对该病毒进行了克隆纯化、滴度测定、形态发生学观察、动物实验,动物实验显示XJ株对老鼠有致病性,为进一步明确其分类学地位,我们将XJ株与兔抗NBV、Pulau Virus全病毒和Melaka VirusσC蛋白阳性血清进行间接免疫荧光试验,结果显示病毒和兔抗Pulau Virus全病毒阳性血清有较特异免疫学反应。本研究对阐明我国呼肠孤病毒的病原生态学具有重要的参考价值,同时丰富了我国蝙蝠携带病原种类数据。对开展蝙蝠的病原监测,有效的预防蝙蝠作为病毒宿主可能导致的疾病传播具有重要的意义。

关键词： 蝙蝠   冠状病毒   乙脑病毒   宿主   协同进化   宿主转移   流行  

摘要： 蝙蝠能够携带多种病毒,病毒种类包括了疱疹病毒科(Herpesviridae),副粘病毒科(Paramyxoviridae)、弹状病毒科(Rhabdoviridae)、黄病毒科(Flavaviridae)、布尼亚病毒科(Bunyaviridae)和披膜病毒科(Togaviridae)等至少10多个病毒科。许多与蝙蝠传播有关的病毒都是新生的传染性极强的病毒。 本研究分两部分:第一,关于蝙蝠携带冠状病毒与宿主进化关系的研究;第二,蝙蝠携带乙型脑炎病毒做流行病调查。 第一部分研究结果证实,冠状病毒与宿主之间有很强的依赖性,二者之间的关系包括协同进化以及宿主转移两种。本研究根据冠状病毒RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)和蝙蝠线粒体细胞色素b(Cyt b)的基因序列数据,分析了蝙蝠冠状病毒与宿主的进化关系。系统进化分析表明菊头蝠和及其携带的冠状病毒,在种系发生上有多种关联,这提示该组研究对象在近期进化史上曾发生宿主转移。这些转移可能是由于病毒生物学特征或宿主行为特征造成的。该结果提示爆发SARS和将出现的SARS冠状病毒或相关病毒之间有联系。 另一部分研究证实了蝙蝠能够作为载体携带乙型脑炎病毒。本研究通过ELISA方法检测蝙蝠血清中的乙脑抗体,并且辅助以中和抗体实验进一步验证ELISA的准确性,得出蝙蝠能够携带乙脑病毒的事实。遗憾的是,即使使用Real-Time PCR也未在蝙蝠组织中并未找到乙脑病毒序列,因此不能确定蝙蝠在乙脑病毒的流行中所起的作用。从有限的研究数据可推测蝙蝠在乙脑病毒过冬中可能起到了病毒保存的作用。本文做出以下两个假设:蝙蝠作为自然宿主,使得乙脑病毒传递到新的宿主如蚊子等;蝙蝠作为中间宿主,在乙脑的传播中起到暂时存储病毒的作用。