关键词： 蝙蝠流感病毒   H9N2亚型禽流感病毒   重组特性   M基因  

摘要： 人类历史上数次流感大流行,都与不同流感病毒之间的基因重组有关,为了研究新发现的蝙蝠流感病毒与禽流感病毒的重组可能性,本研究利用反向遗传操作技术对嵌合蝙蝠流感病毒(Bat09:mH9mN2)与禽流感病毒(A2093/H9N2)进行替换重组,研究发现仅H9病毒的M基因可单向替换Bat病毒的M基因获得重组嵌合蝙蝠流感病毒,命名为Bat09:mH9mN2-A2093(M),其他基因均不能互换拯救。该重组病毒可以在鸡胚上、MDCK细胞上复制良好,但在禽源LMH细胞上几乎不复制。本研究发现蝙蝠流感病毒与H9N2亚型禽流感病毒之间的基因兼容性并不强,仅有禽源病毒M基因可以单向替换重组,这与之前的研究报道一致,关于M基因的重组兼容性及重组病毒生物学特性还有待进一步研究。

关键词： 吸血节肢动物   尼帕病毒   呼肠孤病毒科   负链RNA病毒   病毒组   蝙蝠   布尼亚病毒   单分子  

摘要： 蝙蝠是尼帕病毒和严重急性呼吸综合征冠状病毒等人畜共患病毒的重要宿主。然而,蝙蝠体表的吸血节肢动物是否也携带这些病毒,以及吸血节肢动物携带的病毒与蝙蝠携带的病毒之间的关系尚未报道。本研究于2012—2015年在中国云南省收集了蝙蝠体表686只吸血节肢动物,其中包括蝠蝇、蛛蝇、蜱、螨和跳蚤。采用宏转录组学方法对这些节肢动物携带的病毒进行分析,发现了144种高度多样性的单股正链RNA、单股负链RNA和双链RNA病毒,其中138种是潜在的新病毒。这些病毒分属14个不同的病毒科或目,包括布尼亚病毒目、单分子负链RNA病毒目、呼肠孤病毒科和小核糖核酸病毒目。

关键词： 肯科伊病毒   蛛蝇   蝙蝠   系统进化分析  

摘要： 目的了解云南省蝙蝠体表寄生蛛蝇中肯科伊病毒(Kaeng Khoi virus,KKV)的感染情况。方法2014年在保山市和2017年在瑞丽市采集蝙蝠体表寄生蛛蝇标本并进行鉴定,应用细胞组织培养法进行病毒分离,对阳性分离物进行序列扩增测序,对病毒全基因序列进行同源性和系统进化分析。结果用蛛蝇标本研磨上清液接种BHK-21细胞,从瑞丽市和保山市蛛蝇标本分离到3株阳性分离物(WDBC1704、WDBC1710和BSBC1406),均能使BHK-21细胞出现圆缩、脱落的细胞病变。经RT-PCR和高通量测序扩增后,获得3株阳性分离物的全基因组序列。系统进化分析显示3株阳性分离物的S、M、L基因均与泰国分离的KKV原型株PSC-19在同一进化支。本次分离的3株KKV与云南省既往分离株WDBC1403亲缘关系最近,其中BSBC1406株又形成一个独立的小分支。序列对比显示3株分离株之间在M基因上存在较大差异,BSBC1406与其他2株相似度仅为78.0%~78.1%,开放阅读框区中Gc蛋白的氨基酸相似度均为85.3%。结论从云南蝙蝠寄生蛛蝇中新分离的3株KKV与原型株有较大差异,特别是BSBC1406株与其他分离株存在一定差异,可能已发生了变异,应加强云南省媒介昆虫携带KKV的监测及其与人类疾病关系的研究。

关键词： 灵芝提取物   蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉   富硒酵母   增强免疫  

摘要： 目的:考察灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物对正常小鼠免疫功能的影响。方法:480只SPF级Balb/c小鼠,随机分到8个试验中,分别从细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞功能、NK细胞活性及生化水平考察灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物对小鼠免疫功能的影响,每个试验随机分为5组,每组12只。分别为:空白对照组、金水宝胶囊组及灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物低、中、高剂量组。每天灌胃给药1次,持续30 d。喂食结束后,检测各指标。结果:细胞免疫方面:二硝基氟苯诱导小鼠DTH耳肿胀法试验结果为阳性,ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验结果为阴性,灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物低、中剂量组CD8^(+)细胞比例降低,CD4^(+)/CD8^(+)升高。体液免疫方面:血清溶血素为阳性结果,抗体生成细胞检测(Jerne改良玻片法)为阳性结果。单核-巨噬细胞功能方面:小鼠碳廓清为阴性结果,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞为阳性结果。NK细胞活性检测为阳性结果。灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物中、高剂量组小鼠IgM、IgA、TNF-α水平显著升高,高剂量组IgG显著升高。结论:灵芝蝙蝠蛾拟青霉菌丝体复合物具有增强免疫功能的作用,其机制可能与增强体液免疫作用及部分细胞免疫作用有关。

关键词： 蝙蝠蛾拟青霉   蛹虫草   毒理学   调节免疫   安全性评价  

摘要： 目的:评价蝙蝠蛾拟青霉-蛹虫草复方安全性与免疫增强活性。方法:采用小鼠急性毒性试验、骨髓细胞微核试验、精子畸形试验、微粒体酶(Ames)试验、迟发型变态反应试验、血清溶血素滴度检测和脾细胞抗体生成细胞试验,观察受试物的安全性和免疫功能。结果:蝙蝠蛾拟青霉-蛹虫草复方对小鼠急性毒性最大耐受量>20.0 g/kg bw,属无毒级物质,且小鼠骨髓细胞微核试验、精子畸形试验及Ames试验呈阴性;细胞免疫试验中,中剂量(0.33 g/kg bw)、高剂量(0.99 g/kg bw)复方能显著提高小鼠足跖厚度差值(中剂量:p<0.05;高剂量:p<0.01);体液免疫试验中,高剂量复方能极显著提高小鼠溶血空斑数与半数溶血值(p<0.01),说明复方能增强小鼠细胞免疫与体液免疫。结论:该复方在试验剂量内安全无毒,且具有增强免疫功效。

关键词： 新型冠状病毒   蝙蝠   稳态调节   核心素养  

摘要： 通过探讨蝙蝠为何能携带大量病毒而不发病,引导学生体会生物体内环境和生态系统的稳态与平衡、适应与调节,提高生物学学科核心素养.

关键词： NeoCoV   PDF-2180   中东呼吸综合征病毒   受体   血管紧张素转化酶2  

摘要： 中东呼吸综合征病毒(MERS-CoV)以及一些蝙蝠冠状病毒利用二肽基肽酶-4(DPP4)作为它们的进入受体。然而,NeoCoV是目前已发现的与MERS-CoV在基因组水平上最接近的蝙蝠冠状病毒,其受体仍然未知。在本论文的研究中,我们意外地发现NeoCoV以及它的近亲PDF-2180可以高效地利用特定蝙蝠的血管紧张素转化酶2(ACE2)作为受体进入细胞,并能较弱地识别人的ACE2。这两种病毒利用它们刺突蛋白S1亚基上的C末端结构域作为受体结合域(RBD)与ACE2相互作用。冷冻电镜分析结果显示这两种病毒以一种新颖的方式结合ACE2。SARS-CoV,SARS-CoV-2以及NL63的RBD在ACE2上具有相似的足迹,与NeoCoV的RBD在ACE2上的足迹几乎没有重叠。通过结构分析,我们发现人的ACE2的338位的天门冬酰胺附近序列是限制其支持NeoCoV高效感染的种属决定因子。此外,我们还发现NeoCoV仅通过其受体结合基序(RBM)上的T510F单点突变就可以实现有效地利用人的ACE2;PDF-2180虽然在对应氨基酸上已经是苯丙氨酸,但其在RBD区域另外两处与NeoCoV的氨基酸差异使其尚不能高效地利用人的ACE2。值得一提的是,SARS-CoV-2疫苗接种者的血清以及特异性识别MERS-CoV的纳米抗体都不能有效地阻断含有NeoCoV和PDF-2180刺突蛋白的假病毒入侵。我们的研究首次报道了一类重要的MERS-CoV相关的蝙蝠冠状病毒可以利用ACE2作为受体。这一发现使我们更加深入地了解了冠状病毒的感染入侵机制,并对防范与应对潜在的人畜共患病毒威胁具有重要指导意义。

关键词： 蝙蝠   人畜共患病毒   免疫系统   病毒  

摘要： 蝙蝠是多种人畜共患病毒的主要宿主,其对病毒的耐受/应答机制受到越来越多关注。本文就蝙蝠携带病毒概况,蝙蝠特殊生理组成与携带病毒的关系,蝙蝠的固有免疫和适应性免疫系统对病毒耐受/应答的可能机制等进行综述,鉴于目前对蝙蝠的生物学系统研究较少,对蝙蝠免疫系统进一步研究方向进行展望。