关键词:
Jurkat细胞
人体免疫系统
肌丝
收缩作用
生化检测
流体状态
免疫反应
基底膜
摘要:
目的T细胞是人体免疫系统的主要组分之一。在维护健康的免疫反应中,许多T细胞会经历显著的力学微环境变化,如从循环系统的流体状态到黏附在血管壁,穿过血管在组织中迁移并到达效应靶区。本研究旨在探索力学环境变化对T细胞活性的影响。方法基于FRET活细胞观测和ERK磷酸化抗体的生化检测,研究不同力学微环境条件下Jurkat T细胞中的ERK活性,其可作为T细胞生长发育的一种指标性分子。结果FRET探针或磷酸化抗体检测显示,当Jurkat细胞从悬浮培养转为贴壁状态,胞浆和核中的ERK活性快速下降。模拟在体内组织中的状态,细胞包埋在基底膜或I型胶原水凝胶中,ERK活性也快速下降。通过ATP瞬间激活或异丙肌苷处理长时间上调ERK活性,或抑制胞内收缩作用或肌丝骨架的动态组装,不能阻止物理黏附对ERK活性的下调作用。抑制胞内或胞外钙离子浓度或激活整合素,ERK活性下调趋势得到逆转。基因转录组测序分析证实细胞从悬浮转为黏附状态10 h后,多组基因出现了表达水平的上升或下降。结论Jurkat细胞中的ERK激酶活性对力学微环境变化有高度的敏感响应,并受钙信号和整合素调节。本研究提示,T细胞从循环系统进入组织中发挥免疫功能时,可能受力学微环境改变的影响而出现生化活性的转换。