关键词： 兽医科学   新型冠状病毒   德尔塔变异株   S基因优化   DNA疫苗   免疫原性  

摘要： 新型冠状病毒(SevereAcuteRespiratorySyndromeCoronavirus2,SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒肺炎(CoronaVirusDisease2019,COVID-19)是一种急性呼吸道传染病，疫苗是应对COVID-19有效且经济的措施之一。现有疫苗大多针对原始毒株设计，对德尔塔(Delta)等变异株保护能力下降。DNA疫苗可诱导均衡的细胞和体液免疫反应，具有研发快、安全性和稳定性好等优点。因此，本研究针对新型冠状病毒Delta变异株S蛋白，通过优化表达载体、不同S基因优化方式和S蛋白结构，比较S蛋白体外表达效率和小鼠体内免疫效果，筛选出新型冠状病毒Delta变异株DNA候选疫苗。　　1小鼠抗新型冠状病毒IgG抗体间接ELISA检测方法的建立　　使用SARS-CoV-2Delta变异株S蛋白作为包被抗原，通过对ELISA检测方法中各个反应条件进行优化，建立了小鼠抗新冠病毒IgG抗体间接ELISA检测方法。结果显示:抗原最优包被浓度为4μg/mL;血清最优稀释度为1∶3200;最优封闭条件为5％脱脂乳室温封闭2h;血清最优孵育时间为45min;二抗最优稀释度为1∶5000、最优孵育时间为45min;最优的显色条件为37℃TMB显色15min。方法的批内和批间变异系数均小于10％,重复性良好。与常见小鼠病原体无交叉反应，特异性良好。上述研究表明成功建立了小鼠抗新型冠状病毒IgG抗体间接ELISA检测方法，可用于后续疫苗效价评估。　　2新型冠状病毒重组DNA疫苗表达载体的优化与筛选　　为评价不同表达载体对S蛋白的表达效果的影响，筛选出S蛋白最佳表达载体。以SARS-CoV-2Delta变异株S-2P基因设计为基础，分别使用pVAX1、pCAGGS、pcDNA3.4和pSN表达载体成功构建了4种重组质粒pVAX1-S、pCAGGS-S、pcDNA3.4-S和pSN-S。将4种重组质粒分别转染HEK293细胞，并进行小鼠免疫，通过WesternBlot方法和小鼠免疫效果比较，筛选最佳表达载体。结果表明，pSN-S重组质粒体外表达效率和体内免疫效果最好，体外表达效率较pVAX1-S重组质粒提高2.5倍，小鼠体内免疫效果较pVAX1-S重组质粒提高7.1倍。因此，使用pSN表达载体作为DNA疫苗的候选表达载体。　　3新型冠状病毒S基因的优化与筛选　　为评价不同S基因优化方式对S蛋白表达效果的影响，筛选出最佳S基因优化方式。在S-2P基因基础上，共设计了5种不同优化方式的S基因，使用pSN载体成功构建了5种重组质粒pSN-S-1、pSN-S-2、pSN-S-3、pSN-S-4和pSN-S-5。将5种重组质粒分别转染HEK293细胞，并进行小鼠免疫，通过WesternBlot方法和小鼠免疫效果比较，筛选最佳S基因优化方式。结果表明，pSN-S-3重组质粒体外表达效率和体内免疫效果最好，体外表达效率是较其他重组质粒的1.1-1.6倍，小鼠体内免疫效果是其他重组质粒的1.7-2.8倍。因此，使用S-3基因作为S基因的最佳优化方式。　　4新型冠状病毒S蛋白的结构优化与筛选　　为筛选出最佳的S蛋白优化方式，在pSN-S-3的基础上，参照Hexpro设计,进行817、892、899、942脯氨酸替换（S-6P）,S-6P蛋白进行了缺失胞内区的设计（S-6P-ΔCT）、缺失胞内区和跨膜区的设计（S-6P-ΔTM）,成功构建了3种重组质粒pSN-S-6P、pSN-S-6P-ΔCT、pSN-S-6P-ΔTM。体外表达效率和小鼠体内免疫效果结果表明，pSN-S-6P效果最好，表达量是pSN-S-3的1.3倍;针对S蛋白的特异性IgG抗体是pSN-S-3的3倍，是pSN-S-6P-ΔCT、pSN-S-6P-ΔTM的2.2倍和5.4倍;针对SARS-CoV-2Delta变异株的中和抗体是pSN-S-3的2倍，是pSN-S-6P-ΔCT、pSN-S-6P-ΔTM的1.9倍和1.6倍。因此，将pSN-S-6P作为候选DNA疫苗进一步评价细胞免疫效果。pSN-S-6P候选DNA疫苗免疫小鼠后可产生较好的细胞免疫效果，与对照组pSN空载体免疫相比，产生了明显的CD3+CD4+IL-4和CD3+CD8+INF-γ升高，差异显著，表明pSN-S-6P重组质粒免疫小鼠后能产生Th1/Th2混合型的细胞免疫应答。　　综上所述，本研究成功建立了小鼠抗新型冠状病毒IgG抗体间接ELISA检测方法，成功筛选出具有良好体外表达效率和小鼠体内免疫效果的新型冠状病毒Delta变异株DNA候选疫苗。为针对SARS-CoV-2变异株的DNA疫苗的进一步研究奠定基础。

关键词： 运营商参与   突发公共卫生事件   新冠肺炎  

摘要： 人类自21世纪以来,全球多次出现了重大突发公共卫生事件,如2003年SARS、2009年的H1N1流感及2014年的埃博拉病毒疫情等。而运营商在参与突发公共卫生事件中具有重要作用,他们不仅是信息传播的主要承载者,还可以通过技术手段收集,分析和处理海量数据,为公众提供疫情等公共卫生事件的信息并形成预警,也可以在疫情时期通过提供电子支付、远程医疗等多种服务为人们生活提供便利。本文旨在探究运营商在新冠肺炎疫情防控中的角色与作用,并提出相关的建议和措施。通过对现有文献的综合分析和实证研究,本文得出了以下结论:首先,运营商在新冠肺炎疫情防控中发挥了重要作用。一方面,运营商的数字化技术和信息平台为疫情信息的收集、传递和分析提供了支持;另一方面,运营商的通讯网络为疫情期间的远程医疗、在线教育等服务提供了基础设施支持。同时,运营商还通过开展公益活动和捐赠物资等方式参与到疫情防控中,发挥了社会责任的作用。其次,运营商在新冠肺炎疫情防控中存在一些问题和挑战。其中,运营商在信息公开、隐私保护、网络安全等方面的不足成为了疫情防控管理工作的瓶颈。此外,运营商在集决策、预警为一体的信息协调能力有待进一步提高。为了解决这些问题和挑战,本文提出了一系列建议和措施。首先,政府应加强对运营商的监管和引导,建立健全的法律法规体系,规范运营商的行为。其次,政府需要集合自身及周边的主体了解运营商,深入运营商,并借运营商拓宽其数字化能力,在学习了解运营商相关数字化应用的基础上倡导多主体协作,诸如勇于尝试云办公等一类的数字化工具。此外,还提及了运营商应发挥其信息枢纽的特点,扩大影响,积极宣传正能量,强化其信息协调能力的作用。本文的研究结论对于加强运营商参与突发公共卫生事件防控管理具有一定的指导意义。未来的研究可以进一步深入探究运营商在公共卫生事件中的角色和作用,拓展多元主体协同防控的研究,探索数字化技术在疫情防控中的应用等方面,以期为公共卫生事件防控管理提供更加有效的支持和指导。

关键词： 温和灸   新冠肺炎   寒湿郁肺证   清肺排毒汤   疗效  

摘要： 目的: 本研观察清肺排毒汤联合温和灸疗法对照单用清肺排毒汤对新冠肺炎寒湿郁肺证的临床疗效。 方法: 本研究于2022年2月至2022年8月期间,在印度尼西亚,西爪哇,万隆市的DARMABAKTI CENTER诊疗所门诊招募符合要求的新冠肺炎寒湿郁肺型患者。依据患者的就诊顺序对其从1到60进行编号,根据诊断及纳入标准,采用简单随机方法,选取60例寒湿郁肺型新冠肺炎患者,将其按1:1的比例分为对照组与治疗组,每组各30例。对照组患者采用清肺排毒汤治疗。治疗组是在使用清肺排毒汤基础上联合温和灸治疗。本研究选的穴位:大椎、肺俞、足三里、合谷等。方法:选择18x200mm纯艾灸条(南阳医乐嘉艾草制品有限公司),医生把艾条的一头点着,对以上穴为圆心,以3cm作为半径的区域划圈,以局部肌肤产生温热感但无灼痛为宜。温和灸每日1次,2天为1次疗程;中药水煎早晚各1次,3天为1次疗程。在治疗前后分别记录病人的抑郁自评量表(Self-rating depression scale,SDS)评分、焦虑自评量表(Self-rating anxiety scale,SDA)评分。同时记录治疗前、治疗后第3天、第6天的中医症状评分,最后统计疗效指数。两组间各指标结果的比较使用SPSS 20.0软件进行分析。 结果: 本次研究选取60例研究对象,将分为两组,分别为清肺排毒汤组和清肺排毒汤结合温和灸组各30例,其中男生29例,女性31例;年龄30-60岁。统计学分析结果表明,两组患者性别、年龄等一般资料及治疗前抑郁自评量表评分和焦虑自评量表评分比较显示无统计学意义(P＞0.05)。统计结果显示,治疗组患者治疗后抑郁自评量表评分和焦虑自评量表评分均低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05),说明清肺排毒汤结合温和灸疗法对患者的焦虑及抑郁证具有一定的疗效。治疗2个疗程后,治疗组咳嗽咳痰、乏力,恶心呕吐,酸痛,纳呆症状中医症状评分均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组发热,胸闷症状中医症状评分与对照组比较显示无统计学意义(P＞0.05),说明清肺排毒汤结合温和灸疗法可以改善患者的症状。两组间的转阴时间比较显示无统计学意义(P＞0.05)。两组未发现均有不良反应。 结论: 治疗组与对照组均可在一定程度上缓解寒湿郁肺型新冠肺炎的症状。虽然两组的转阴时间没有太大区别,但两组患者的抑郁自评量表评分、焦虑自评量表评分及中医症状评分在治疗后均见下降,且治疗组缓解程度高于对照组。据此可见,清肺排毒汤联合温和灸治疗新冠肺炎寒湿郁肺证可以更好的可以减轻患者的不适症状,减轻患者的临床症状,值得临床推广及运用。

关键词： 新型冠状病毒感染   医疗管控   避孕药具   发放模式   意外妊娠  

摘要： 目的：探究新型冠状病毒感染医疗管控下的避孕药具创新发放模式与辖区意外妊娠的相关性。方法：选取中山市南区街道社区卫生服务中心2021年1—12月纳入的200例育龄且有性生活史的妇女作为对照组，选取2022年1—12月纳入的200例育龄且有性生活史的妇女作为观察组。在新型冠状病毒感染医疗管控下，对照组采用传统避孕药具发放模式，观察组采用避孕药具创新发放模式。评估两组避孕药具领取的覆盖率、在线发放率、人工流产发生率、避孕药具认知得分、满意度。结果：观察组避孕药具领取覆盖率（24.00%）、在线发放率（8.50%）均明显高于对照组（15.50%、2.50%）(P<0.05)；观察组人工流产发生率（6.50%）明显低于对照组（12.50%）(P<0.05)；观察组避孕药具认知得分明显高于对照组（P<0.05）；观察组满意度为99.00%，高于对照组的95.00%(P<0.05)。结论：新型冠状病毒感染医疗管控下的避孕药具创新发放模式可有效提高育龄妇女避孕药具领取覆盖率、在线发放率，降低人工流产发生率，提高育龄妇女对避孕药具的认知及满意度。

关键词： 新冠疫情   社区居民   中医药需求   中医药认知度  

摘要： 目的:在新冠疫情背景下对长春市社区居民中医药认知度及需求进行调查研究,了解调查对象对中医药认知度现状及其需求现状。根据研究结果,进一步分析社区居民中医药认知度及需求程度的可能影响因素,为提高社区居民中医药认知度、满足其需求提出对策建议,从而提高社区居民对中医药的认知度以及利用中医药知识处理健康问题的能力,促进提高长春市社区中医药服务能力,不断满足基层民众对中医药的服务需求,为提高长春市社区居民中医药认知度水平及满足其中医药需求提出建议对策,为政府部门制定中医药政策提供依据,助力发挥中医药基层作用。方法:本次研究属于横断面研究,选取长春市十个社区,采用线上线下相结合的方式进行问卷调查。对有关理论进行全面的梳理和总结;咨询相关专家设计调查问卷。形成《新冠疫情背景下长春市社区居民对中医药的认知度调查及其需求分析调查问卷》。评分标准采用Likert5级评分法,并将最终得分折算为百分制,得分越高说明居民对中医药的认知度越好。运用spss20.0进行统计分析,用频数、百分比描述计数资料;用均数、标准差描述计量资料;采用独立样本T检验或单因素方差分析进行组间比较;采用多元线性回归分析进行危险因素分析,以P<0.05为差异具有统计学意义。结果:本次调查共发放问卷645份,回收问卷631份,问卷回收率97.82%,其中有效问卷597份,问卷有效率为92.6%。(1)该问卷总Cronbach'sα系数为0.956,各维度系数为0.922～0.954,量表内部一致性较好。(2)长春市社区居民中医药认知情况得分折算为百分制为76.03±11.81,长春市社区居民对中医药的需求总分为72.35±12.63。(3)单因素分析结果显示,不同年龄、最高学历、收入、中医药对疾病的治疗周期、中医药的宣传力度、中医药的价格、中医的技术水平、中医药的服用口感、中医药的煎煮方法是中医药认知度的影响因素(P<0.05);是否确诊慢性病是中医药需求情况的影响因素(P<0.05)。(4)多因素分析结果显示,是否确诊慢性病(β=-4.457,P=0.001)、年龄(β=-2.956,P<0.001)与中医药认知程度呈负相关关系。受中医药对疾病的治疗周期的影响情况(β=5.919,P<0.001)、受中医药的宣传力度的影响情况(β=2.952,P<0.001)、受中医的技术水平的影响情况(β=2.544,P=0.001)与中医药认知程度呈正相关关系。而受中医药对疾病的治疗周期的影响情况(β=2.611,P=0.049)、受中医药的宣传力度的影响情况(β=2.240,P=0.043)、受中医的技术水平的影响情况(β=4.681,P<0.001)与中医药需求程度呈正相关关系。结论:(1)长春市社区居民对中医药的认知度处于中等水平,仍然有待提升,应进一步加大宣传科普力度,促使社区居民对中医药有更为深入的了解;中医药对疾病的治疗周期、中医的技术水平、中药的服用口感、中药的煎煮方法等因素对社区居民中医药的认知度有影响,应当从以上方面提高中医药的服务能力和中药的现代化水平。(2)长春市社区居民对中医药的需求从高到低依次为中医医疗服务、中医药健康教育服务、中医药保健服务、中医药预防服务和慢病管理服务、中医药康复服务,依据以上情况应当加强广泛传播科普,满足居民的养生保健需求;提升基层卫生机构的中医人才质量,形成健全的考核制度,增加中医药人才储备,以满足民众需求;还应加快推进中医的创新技术,缩短治疗周期,优化中药口感,进一步提高居民对中医药的好感程度满足其需求。

关键词： 新冠肺炎   纪实文学   彼得·纽马克   语义翻译   交际翻译  

摘要： 2020年新冠疫情爆发,导致众多人员死亡,世界上很多国家因此遭到了重创。本翻译实践报告中的源文本材料为两位医学专家布莱恩·泰森和乔治·法里德所著的《驱散新冠的阴霾:看两位医生如何成功治疗7000名患者》一书的前四章。该书为纪实文学文本。 “语义翻译”和“交际翻译”是英国著名翻译理论家彼得·纽马克提出的翻译理念。语义翻译更强调原文,要尽可能准确地再现原文的上下文意义;交际翻译更在乎效果,即译作对译文读者产生的效果应尽量等同于原作对原文读者产生的效果。本文以纽马克的翻译理论为指导,根据材料的文本特征,从词汇、句法和语篇层面分析了翻译过程中所遇到的难点和挑战。此次报告主要分为翻译项目介绍、翻译过程描述、理论框架、案例分析与总结五个部分。其中,案例分析部分为本报告的重点,展示了笔者在纽马克的语义翻译和交际翻译理论的指导下所选取的灵活多变的翻译方法和技巧,这些方法和技巧一方面是为了实现译文的准确性和科学性,另一方面是为了让译文符合汉语的表达习惯,从而实现交际效果。 本次翻译实践能为大众认识新冠疫情提供新的视角,也能为发展公共卫生事业提供参考,同时还能为今后此方向的翻译实践提供帮助,从而不断提高纪实类文学作品的翻译质量。

关键词： 居民消费   公共卫生治理措施   精准防控   基础设施建设  

摘要： 21世纪以来,诸如非典、甲型H1N1流感、埃博拉病毒以及新冠病毒等“黑天鹅”事件的频繁发生给世界各国的居民健康和经济发展带来了严重的冲击。以新冠感染为例,我国政府为了及时有效的限制病毒的传播采取了精准化的公共卫生治理措施,在极短的时间内有效控制了病毒的扩散。但是由于采取了诸如“封城”等较为严格的公共卫生治理措施,反而造成了地区企业关闭,居民收入下降等更为严重的负面经济影响。而作为推动经济发展的“三驾马车”之一的消费,自然而然也受到了公共卫生治理措施的负面冲击。如何平衡新冠病毒感染防控和经济发展成为了各国政府所面临的棘手问题。 本文首先采用数理推导分析讨论公共卫生治理措施和居民消费的关系,随后采用我国2020年1月至2022年10月的新冠病毒感染防控和经济发展的数据,应用双向固定效应模型,从居民消费的角度探究与证实实施公共卫生治理措施的经济影响,并做了相关稳健性检验。研究主要问题有:1)公共卫生治理措施对居民消费的直接影响如何;2)不同地区采取的公共卫生治理措施的经济影响是否存在不同;3)是否存在可以减轻公共卫生治理措施对经济影响的因素;4)精准化公共卫生治理措施是否有利于经济恢复。探究和回答以上问题有助于厘清公共卫生治理措施的成本及收益,从而为在常态化突发性公共卫生事件下的政策制定以及平衡区域经济发展提供依据。 本文主要研究结果有以下几点:1)公共卫生治理措施的实施和确诊病例均对居民消费产生了负面影响,并且公共卫生治理措施显著降低了确诊病例对居民消费的影响,更为严格的社交距离防控措施会导致更严重的消费下滑;2)异质性研究结果表明,拥有更多确诊病例数的地区可能由于受到较多外部援助以及内部互助行为的影响,公共卫生治理措施的负面影响相对于较少确诊病例数的地区更小,经济相对发达地区则可能由于基础设施建设水平较高,相对于经济不发达地区,居民消费下降较少;3)调节效应结果表明地区的基础设施建设有利于缓解公共卫生治理措施带来的负面影响;4)我国大部分地区在绝大多数时间内实施了精准化的公共卫生干预措施,有效控制了病毒传播,无论是短期还是长期来看,根据“动态清零”采取精准化的公共卫生治理措施有利于居民消费的恢复。针对以上结果,本文认为地区政府应该重视各地发展的差异性,实施区域差异化的公共卫生治理措施,注重病毒传播的动态管理,避免防控政策“一刀切”,增大对受灾较轻地区的援助力度,切实保障地区居民日常生活消费。在此基础上,加大基础设施建设,提高地区抵御风险的能力,为居民健康和日常生活提供坚实的保障。 本文的主要创新在数据层面,首先在数据上应用牛津大学新冠疫情政策追踪数据库(OXCGRT)中的社交距离严格程度对我国公共卫生治理措施进行了定量处理,证实了该指标的合理性和严谨性。其次基于此指标,本文进一步构建了社交距离防控措施精准度这一新指标来衡量地区公共卫生治理措施实施的精确性,论证了精准化公共卫生事件防控的必要性。

关键词： 新型冠状病毒   纳米抗体   动物模型   双特异性抗体  

摘要： 新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease2019,COVID-19)是由新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus2,SARS-CoV-2)引起的一种严重危害人类健康的传染病。自2020年以来,SARS-CoV-2不断发生变异,从最初的Alpha(阿尔法)、Beta(贝塔)、Gamma(伽马)、Delta(德尔塔)再到目前的主流变异株Omicron(奥密克戎),疫情防控不断面临新挑战。2023年3月,经中国疾病预防控制中心官网通报显示最新发现的SARS-CoV-2 Omicron变异株亚系有CH.1.1、CH.1.1.1、EA.1,XBB.2.3。SARS-CoV-2变异株特别是具有免疫逃逸能力的变异株的出现,严重影响了 COVID-19疫苗和抗体的保护效力。因此,开发广谱SARS-CoV-2的中和抗体药物具有重要意义。本研究利用噬菌体展示技术,构建纳米抗体噬菌体文库,并从文库中筛选具有交叉中和活性与高亲和力的纳米抗体。进一步将纳米抗体单体与人IgGFc结构域融合以获得长效纳米抗体。利用SARS-CoV-2小鼠感染模型与金黄地鼠感染模型对候选纳米抗体的体内保护效果进行评价。此外,经过随机肽库鉴定出具有不同抗原表位的抗体进行双特异性抗体的构建并进行初步评价。本研究为新冠疫情防控提供了新的具有交叉中和活性的中和抗体候选株。***-CoV-2纳米抗体噬菌体文库的构建和纳米抗体的筛选本研究利用SARS-CoV-2S-trimer蛋白和SDNA疫苗作为特异性免疫原免疫羊驼,每间隔3周免疫一次,共免疫6次,同时监测免疫羊驼血清中和抗体水平。在第6次加强免疫后采血并分离PBMC,提取总RNA,反转录形成cDNA;经过两轮PCR扩增,扩增出重链抗体可变区基因即VHH序列,大小为450 bp;将VHH与噬菌粒载体pComb3XSS酶切后连接构建重组质粒,并将重组质粒电转至TG1感受态细胞;加入辅助噬菌体,经PEG/NaCl沉淀后成功制备SARS-CoV-2纳米抗体噬菌体文库,经鉴定其库容量可达8 × 1013 pfu/mL,阳性率为96%。以纯化的SARS-CoV-2受体结合域(Receptor Binding Domain,RBD)蛋白作为包被抗原,经三轮筛选后随机挑取192个单克隆菌落进行Phage-ELISA鉴定与假病毒中和抗体检测,结果表明单克隆菌落的阳性率为86.46%,其中有20个单克隆噬菌体上清的中和抑制率≥97%。测序后通过序列分析共挑选出3株具有高结合力与中和能力的候选纳米抗体。***-CoV-2纳米抗体的表达、鉴定和评价本研究利用获得的3株SARS-CoV-2候选纳米抗体单体与人IgG Fc结构域融合表达,命名为 aVHH-11-Fc、aVHH-13-Fc 和 aVHH-14-Fc。经SDS-PAGE 鉴定,结果表明纯化后的蛋白大小均在37 KD左右;间接ELISA和竞争ELISA试验结果表明三株纳米抗体均可以特异性结合RBD蛋白并竞争性抑制ACE2受体与RBD的结合。经假病毒中和抗体检测,aVHH-11-Fc,aVHH-13-Fc和aVHH-14-Fc可以不同程度的中和 SARS-CoV-2 WT-D614G,Alpha,Beta,Gamma,Delta 和 Omicron亚系BA.1,BA.2,BA.4和BA.5假病毒。进一步利用SARS-CoV-2小鼠适应性致死感染模型评价候选纳米抗体的攻毒保护作用,结果表明以滴鼻的方式分别于攻毒后 0.5 h、1h、2h 给予 aVHH-11-Fc、aVHH-13-Fc 和 aVHH-14-Fc 均可有效保护小鼠免受病毒的致命攻击,并能够显著降低上呼吸道和下呼吸道中的病毒载量,其中aVHH-13-Fc相较另外两株纳米抗体效果更好。SARS-CoV-2金黄地鼠模型体内攻毒保护评价结果表明,以滴鼻的方式分别于攻毒后0.5 h、1 h、2h给予aVHH-13-Fc可有效地保护金黄地鼠免受SARS-CoV-2 WT、Delta、Omicron BA.1和BA.2的攻击,并能有效降低肺部病毒载量,缓解肺部病理损伤。此外,分子对接模拟结构分析结果显示aVHH-13与SARS-CoV-2不同变异株的RBD的结合位点相似,从而发挥广谱中和作用。***-CoV-2双特异性抗体的构建、表达和初步评价本研究利用Ph.D.-12噬菌体展示肽库对aVHH-13-Fc与aVHH-14-Fc的抗原表位进行了鉴定,结果表明上述两种纳米抗体识别不同的抗原表位。基于此,进一步设计了 3种不同构型的双特异性抗体分别命名为13-14-Fc、13-Fc-14和13-14-His。间接ELISA检测结果表明13-14-Fc的结合活性

关键词： 和解渗湿汤   新冠病毒感染   临床回顾性研究及动物实验   炎症反应   黏液分泌  

摘要： 第一部分:临床研究——和解渗湿汤治疗新冠病毒感染的临床回顾性研究目的:对华中科技大学同济医学院附属同济医院(光谷院区)63例重症患者的临床资料进行回顾性分析,探讨和解渗湿汤治疗COVID-19的临床疗效。方法:按照纳入、排除标准将筛选后的63例重症COVID-19患者分为和解渗湿汤组和常规治疗组,常规治疗组接受常规治疗(抗病毒治疗、对症治疗、营养支持等),和解渗湿汤组在常规治疗组基础上加用和解渗湿汤,整理两组间的临床资料,对两组间COVID-19患者住院天数、发热咳嗽持续时间、核酸转阴时间及肺部病灶开始收吸收时间进行比较以评价临床疗效。结果:经统计学分析,和解渗湿汤组、常规治疗组通过比较,入院后两组咳嗽持续时间有显著差异性(P<0.05),和解渗湿汤组咳嗽持续时间短于常规治疗组;两组患者的肺部病灶开始吸收时间、核酸转阴时间均有显著差异性(P<0.05),和解渗湿汤组肺部病灶开始吸收时间、核酸的转阴时间均比常规治疗组短;两组在住院时间上有明显的差异性(P<0.05),和解渗湿汤组住院时间明显短于常规治疗组。两组中无转为危重型患者,63名患者均康复出院。结论:和解渗湿汤治疗新冠病毒感染,可明显缩短临床症状持续时间,促进核酸转阴,加速肺部病变的吸收,减少住院天数,疗效相对于常规治疗组有较好的优势。第二部分:动物实验研究——和解渗湿汤治疗病毒性肺炎的机制研究目的:探讨和解渗湿汤治疗病毒性肺炎可能的作用机制。方法:将60只C57BL/6雄性小鼠按随机数字表法分为正常组、模型组、阳性药组、和解渗湿汤低剂量组、和解渗湿汤中剂量组、和解渗湿汤高剂量组,每组10只。采用Poly(I:C)诱导病毒性肺炎小鼠模型。造模后,阳性药组灌胃地塞米松1.56mg/kg,和解渗湿汤低、中、高剂量组灌胃和解渗湿汤10.14、20.28、40.56g/kg,正常组和模型组接受等体积的0.9%氯化钠溶液。干预一周后,测量各组小鼠的肺部干/湿重比和肺泡灌洗液的蛋白含量,进行HE染色观察肺部的组织病理学变化,并进行ELISA检测肺泡灌洗液中的IL-6、IL-1β和TNF-α水平。结果:与模型组比较,和解渗湿汤各剂量组小鼠肺组织气管壁、肺泡壁损伤明显减轻。与模型组比较,和解渗湿汤中、高剂量组小鼠的干/湿重比升高(P<0.05),和解渗湿汤各剂量组肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α水平下降(P<0.05),和解渗湿汤中、高剂量组肺泡灌洗液中的蛋白含量降低(P<0.05),且具有一定的剂量依赖性。结论:和解渗湿汤可有效改善病毒性肺炎模型小鼠的肺部损伤,其作用机制可能与减轻炎症反应、减少病毒黏液分泌有关。