关键词： 新冠肺炎   高校   心理危机   危机管理  

摘要： 自2020年“新冠肺炎”疫情爆发以来,常态化疫情防控持续两年多,2022年12月26日,国家卫健委发布《关于印发对新型冠状病毒感染实施“乙类乙管”总体方案的通知》,意味着感染新冠肺炎不再采取严格的管理措施。“新冠肺炎”传播速度之快、感染规模之广和防控难度之大,是自新中国成立以来,最为重大突发公共卫生事件,甚至对于全世界来说都是一次重大公共卫生危机,深刻影响着社会生产及人们的生活方式。广东地处沿海,经济活动活跃,人员流动性强,在常态化疫情封控期间,常呈零星散发状态,为更好地保障师生健康与正常教学秩序,高校实施封闭管理,学生心理危机问题较之前更加突出。通过对广东省高校进行抽样调查,向大学生及学校相关管理人员发放调查问卷及访谈发现,新冠肺炎疫情常态化防控下广东省高校大学生心理波动较大,封闭管理带来的负面影响诸如生活枯燥,内心压力无法排解等,大学生对于如何寻找心理咨询的了解也有限,高校虽对疫情下学生的心理给予更多关注,但仍存在如管理组织混乱、危机排查预警不到位等问题和不足。为此,利用4R理论完善危机处理流程,实行缩减力、预备力、反应力、恢复力管理,明确学校领导在心理危机管理中的领导职责,加强宣传和构建心理危机管理保障体制,提高应对心理危机的能力,从而更好地化解危机,减少危机,同时也为今后的心理危机管理提供经验。

关键词： SARS-CoV-2冠状病毒   非结构蛋白Nsp10   非结构蛋白Nsp16   原核表达   RNA加帽  

摘要： 目的新型冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)隶属于冠状病毒,是一种有具有包膜包裹的正义单链RNA病毒,可引起新型冠状病毒肺炎(Corona Virus Disease 2019,COVID-19)。本研究通过对SARS-CoV-2非结构蛋白Nsp10和Nsp16的基因序列进行克隆,通过原核表达载体系统对两种蛋白进行表达,并成功制备了Nsp10和Nsp16和Nsp10/Nsp16融合蛋白,并通过体外转录的方法对RNA进行加帽,获得Nsp10和Nsp16功能检测所用的底物。方法(1)根据Genebank公布的SARS-CoV-2冠状病毒非结构蛋白Nsp10(NCBI:YP＿009725306.1)和Nsp16(NCBI:YP＿009725311.1)的基因序列设计引物,用PCR的方法把Nsp10和Nsp16基因从SARS-CoV-2冠状病毒的c DNA片段中扩增出来,将目标基因融合His基因标签后利用限制性内切酶双酶切的方法连接到原核表达载体PET15b和PET30a中,构建重组质粒。重组质粒经PCR和酶切反应进行初步鉴定,并将初步鉴定后的质粒进行测序。如果克隆的Nsp10和Nsp16基因序列与发表基因完全一致,说明成功构建了原核表达载体。(2)重组质粒PET15b-Nsp10和PET30a-Nsp16的优化诱导表达。将成功构建的原核表达重组质粒PET15b-Nsp10和PET30a-Nsp16转化到大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中,经菌液PCR鉴定后,通过对时间、IPTG浓度诱导优化后进行蛋白表达。(3)利用SDS-PAGE电泳和蛋白免疫印迹法(Western Blot,Wb)验证目的蛋白是否在成功表达。通过SDS-PAGE电泳和Wb验证Nsp10和Nsp16蛋白质是否以可溶形式存在,为得到纯度较高的Nsp10和Nsp16蛋白质,对非结构蛋白Nsp10和Nsp16的表达和纯化条件进行了优化,利用镍层析柱对非结构蛋白Nsp10、Nsp16和Nsp10/Nsp16融合蛋白进行纯化。(4)对RNA加帽底物进行制备。通过KOD酶对SARS-CoV-2冠状病毒进行UTR的c DNA片段的克隆,利用体外转录试剂盒进行体外转录获得RNA,通过Capped RNA Synthesis加帽系统对RNA进行加帽,以得到RNA加帽底物。结果(1)将SARS-CoV-2冠状病毒非结构蛋白Nsp10的复制子和PET15b质粒通过限制性内切酶Bam HI和Xho I进行酶切连接构建,命名重组质粒为PET15b-Nsp10。将SARS-CoV-2冠状病毒非结构蛋白Nsp16的复制子和PET30a质粒通过限制性内切酶Nde I和Xho I进行酶切连接构建,命名重组质粒为PET30a-Nsp16。测序结果显示成功构建了PET15b-Nsp10和PET30a-Nsp16重组质粒。(2)将重组质粒PET15b-Nsp10和PET30a-Nsp16通过蓝白筛选后将克隆正确测序的PET15b-Nsp10和PET30a-Nsp16表达质粒转化到大肠杆菌中,种在带有抗性的LB培养板上,37℃下培养12-14小时后,挑取单克隆菌株通过优化培养条件,选择0.1m M IPTG培养16 h将PET15b-Nsp10和PET30a-Nsp16重组质粒进行大量目的蛋白的表达。(3)通过SDS-PAGE电泳和Wb发现Nsp10和Nsp16蛋白质大量表达并以可溶形式存在,对非结构蛋白Nsp10和Nsp16进行了优化纯化条件并通过镍层析柱进行纯化,获得了纯化后的Nsp10和Nsp16蛋白质,并将菌体混合进行Nsp10/Nsp16融合蛋白的纯化。(4)通过体外转录的方法到了SARS-CoV-2冠状病毒的UTR的RNA,通过Capped RNA Synthesis加帽系统对RNA进行加帽,以得到RNA作用底物。结论(1)成功构建了SARS-CoV-2冠状病毒Nsp10和Nsp16表达载体PET15b-Nsp10和PET30a-Nsp16。(2)成功表达了PET15b-Nsp10和PET30a-Nsp16重组质粒,成功优化培养条件并大量表达以可溶形式存在的Nsp10和Nsp16蛋白。(3)成功通过镍层析柱纯化了Nsp10和Nsp16蛋白和Nsp10/Nsp16融合蛋白,为体外功能的研究提供了基础。(4)成功通过体外转录的方法得到了底物RNA进行加帽,为甲基化功能检测提供了底物。

关键词： CRISPR-Cas13a   单碱基突变   核酸检测   新型冠状病毒   引物交换反应  

摘要： 目的及时鉴别新型冠状病毒变异毒株突变是遏制其传播的最佳方法之一。常用的测序方法周期长、费用高,不能满足快速鉴别新型冠状病毒的变异毒株的需要,探索其快速、简便鉴别方法是领域内的研究热点,通过Lw Cas13a蛋白的表达纯化,获得有活性的Cas13a蛋白;建立基于CRISPR技术的新型冠状病毒的核酸层析检测方法,并评价该方法对新型冠状病毒Delta变异毒株D614G单碱基突变检测的特异性。方法*** Cas13a蛋白的原核表达纯化:通过对其诱导温度、诱导时间及IPTG诱导剂浓度等条件进行优化,确定可溶性表达条件;通过镍亲和层析纯化蛋白并对其进行活性鉴定,以获取课题实验CRISPR反应体系中的关键试验生物活性材料;2.设计并通过CRISPR反应筛选新型冠状病毒的模板链及cr RNA:通过体外转录、RNA纯化及配对筛选,获得与模板链配对较好,且可激活Cas13a蛋白切割活性的cr RNA,以满足课题研究所需的核酸序列;3.筛选发卡结构与引物,通过优化引物交换反应（PER）扩增条件,设计并验证特异性探针,将CRISPR技术与PER后扩增技术联合后探究其灵敏度及特异性;以搭建的CRIPSR/PER核酸检测技术为载体,筛选新型冠状病毒Delta变异毒株D614G单碱基突变位点的特异性cr RNA,评价该技术对单碱基突变位点检测的特异性。结果1.确定了Cas13a蛋白诱导表达的最适温度为16℃,最佳时间16h,IPTG终浓度为1mmol/m L,纯化后的Cas13a蛋白纯度较高,对其活性鉴定后,其结果表明自制Cas13a蛋白活性较好,满足实验要求。2.获得了14条RNA序列,其中RNA-1与c RNA-1、RNA-2与cr RNA-7、RNA-3与cr RNA-11、RNA-4与cr RNA-17配对可较好激活Cas13a蛋白活性。3.筛选确定了H27发卡结构与P27引物配对的扩增效果最好;确定PER最佳扩增条件为:温度37℃,Bst DNA聚合酶加入4U,H27发卡结构加入10μL,Mg SO4加入1μL,d NTP加入2μL,扩增时间为40min;基于CRISPR/PER的核酸层析检测方法的最低检测限为:100pg/μL RNA模板链,特异性较好,该方法可特异性识别新型冠状病毒Delta变异株的D614G位点的单碱基突变。结论1.确定了Cas13a蛋白的诱导表达条件:IPTG终浓度为1mmol/L,16℃诱导表达16h;2.建立了CRISPR/PER实验室核酸检测方法,经初步测定该方法的最低检测限为100pg/μLRNA模板链,特异性较好;3.筛选确定了SARS-CoV-2原始毒株S和ORF1ab的2条cr RNA,SARS-CoV-2 Delta变异毒株D614G突变位点的特异性cr RNA,为SARS-CoV-2的检测及单碱基突变检测提供新思路。

关键词： 病死率   传染病   大流行   新冠肺炎  

摘要： 目的:本研究旨在探索一种利用人群水平监测大数据在传染病大流行过程中准确计算病死率的新方法,并以新冠肺炎为例计算全球各国家或地区疫情初期的病死率,以期为政府和卫生部门在疫情早期评价传染病危害、及时制定相关政策并采取有力措施提供数据支撑。方法:本研究探索出一种在传染病大流行过程中计算病死率的新方法,并将其命名为“假设T值法”。该方法对传统的病死率计算公式进行了调整,即病死率等于某天的累计死亡人数除以T天前的累计确诊人数,其中T值为某人群从疾病确诊到出现死亡结局的平均天数并且T值是从一系列假设值中筛选出来的。首先,利用模拟累计确诊病例数增长数据探索“趋近”规律:如果假设T值等于真实T值,实时病死率会保持不变,即等于疫情结束后使用定义法公式得到的真实病死率;如果假设T值大于(或小于)真实T值,实时病死率会大于(或小于)真实病死率,并随时间推移逐渐减小(或增加)直至无限趋近真实病死率。因此,在许多由假设T值计算出的具有增减趋势的实时病死率曲线中间,只要能找到最早保持稳定不变的那条曲线,就可以找到真实的T值并获得真实病死率;本研究将此法命名为“假设T值法”。然后,运用“假设T值法”计算中国湖北省和非湖北地区新冠肺炎疫情初期病死率并验证新算法的准确性。最后,运用“假设T值法”计算并分析全球其他国家新冠肺炎疫情初期病死率。结果:根据“趋近”规律和“假设T值法”,中国非湖北地区新冠肺炎疫情初期的病死率为0.8%,湖北省为6.6%;此外,两地区疫情初期每日估计病死人数与每日真实病死人数随时间变化曲线的吻合程度也验证了“假设T值法”的准确性。欧洲国家新冠肺炎疫情初期的病死率相对较高,其中荷兰为12.6%,意大利为14.1%,比利时为18.1%,瑞士、波兰和罗马尼亚约为6%,爱尔兰为7.9%;德国、葡萄牙、奥地利、挪威和捷克相对较低,约为3%至4%。在欧洲以外的其他国家中,美国新冠肺炎疫情初期的病死率为7%,智利为2.1%,以色列为1.6%。结论:本研究提供了一种利用人群水平监测大数据在传染病大流行过程中计算病死率的新方法,即“假设T值法”。该方法不仅简单有效,而且不受样本量和随访时间的限制,无需等到疫情结束便可准确计算病死率。该方法有助于为政府和卫生部门在疫情早期评价传染病危害、及时制定相关政策并采取有力措施提供数据支撑。

关键词： 新冠肺炎   信息疫情   社交媒体倦怠   SOR理论  

摘要： 2020年世界卫生组织在针对新冠肺炎疫情的报告中指出,新冠肺炎期间存在着“信息疫情”现象,社交媒体中此现象表现得尤为突出。疫情期间,新浪微博平台是以大学生为代表的青年群体最主要的疫情信息来源,大学生用户每日高强度使用微博,良莠混杂的疫情信息奔涌而来,这可能对用户造成不同程度上的认知负担,甚至对身心健康产生危害。因此,本研究将大学生微博用户做为研究对象,在社会心理学SOR理论框架下,结合前人研究,构建整合模型。以社交媒体倦怠为中介变量,探究新冠肺炎疫情背景下大学生微博倦怠情况及消极使用行为意向。采用问卷调查方式,运用AMOS24.0和SPSS26.0软件进行了验证性因子分析和研究模型的假设检验,并通过中介效应检验来验证假设。研究结果显示,疫情期间大学生群体中存在较高水平的社交媒体倦怠;同时,过量疫情信息推送、疫情相关谣言泛滥、疫情信息模棱两可、过量疫情信息分享不仅能够直接正向预测消极使用行为意向,而且能够通过社交媒体倦怠的中介作用正向预测消极使用行为意向。本研究通过对大学生微博用户倦怠和消极使用意向形成机理的探究,揭示了疫情背景下大学生社交媒体倦怠现象及弊端,并在此基础上从新闻行业、社交媒体平台和大学生用户三个方面讨论了如何缓解用户倦怠情绪,对未来公共突发卫生事件期间,削弱“信息疫情”的消极影响,正向引导大学生信息行为,以及社交平台功能设置、监管与运营方面提供一些参考价值。

关键词： 冠状病毒感染   德尔塔变异株   奥密克戎变异株   临床特征   CT   高海拔  

摘要： 目的:通过分析比较甘肃省高海拔地区(海拔>1000米)新型冠状病毒德尔塔与奥密克戎变异株感染者的临床特征和胸部CT影像表现,探讨高海拔地区新型冠状病毒感染病例的临床表现及CT影像学特点,为高海拔地区新型冠状病毒感染的防治提供科学依据。方法:采用回顾性研究方法,收集兰州市重离子医院2021年10月1日至2022年9月31日,收治的1439例确诊病例,根据纳入和排除标准进行筛选后,共计纳入418名患者作为研究对象,包括103例德尔塔变异株感染病例(德尔塔组)及315例奥密克戎变异株感染病例(奥密克戎组),比较分析两组患者的人口学资料、临床特征、实验室检查、抗体水平、胸部CT影像学特征及临床预后特点。结果:共纳入确诊病例418例,其中德尔塔组103例,奥密克戎组315例。男性180例(43.1%),女性238例(56.9%),中位年龄分别为42岁和36岁,临床分型均以轻型为主;德尔塔组中的普通型和重型患者比例明显高于奥密克戎组;两组患者临床分型比较,差异有统计学意义(χ2=43.782,P<0.05)。新型冠状病毒疫苗全程接种率为32.3%(135/418),奥密克戎组全程疫苗接种率高于德尔塔组,各组间差异有统计学意义(χ2=52.202,P<0.001);奥密克戎组确诊至末次接种疫苗时间超过6个月的患者比例高于德尔塔组,差异有统计学意义(χ2=39.587,P<0.001);共采集血型样本112份,其中A型35例(31.3%)和B型39例(34.8%),比例高于AB型13例(11.6%)和O型25例(22.3%)患者,各组间差异无统计学意义(均P>0.05)。生活地区海拔>1500米的患者核酸转阴时间长于海拔1000-1500米地区的患者,差异有统计学意义(Z=-2.912,P=0.04)。德尔塔组和奥密克戎组患者核酸转阴时间(入院前后核酸阳性持续时间)中位数分别为为18天和12天,住院时间中位数分别为15天和10天,差异有统计学意义(Z=-9.379、-9.971,均P<0.05)。患者最常见的临床症状为咳嗽、咳痰,然后是发热、咽喉不适、肌肉关节酸痛等。奥密克戎组发热患者比例高于德尔塔组[48.3%(152/315)VS 16.5%(17/103)],差异有统计学意义(χ2=33.482,P<0.001)。两组患者中,有96名(23.0%)患者合并一种或多种疾病,其中德尔塔组患者合并的基础疾病更多。实验室检查结果显示:49例(11.7%)患者的淋巴细胞计数减少,其中德尔塔组患者5例(4.9%),奥密克戎组44例(14.0%),差异具有统计学意义(χ2=6.230,P=0.013)。德尔塔组患者的降钙素原和血清淀粉样蛋白A水平升高患者比例均低于奥密克戎组,差异有统计学意义(χ2=40.517,29.498,P<0.05)。患者入院时有258人(70.1%)Ig G抗体水平升高,其中德尔塔组患者升高比例高于奥密克戎组,差异有统计学意义(χ2=7.319,P=0.007);德尔塔组Ig M抗体水平升高比例高于奥密克戎组,差异有统计学意义(χ2=49.425,P<0.001)。胸部CT数据分析显示,两组患者全肺病变总体积/全肺体积、全肺磨玻璃样病变体积/全肺体积等指标,差异有统计学意义(均P<0.05)。结论:德尔塔和奥密克戎变异株感染者临床分型均以轻型为主,德尔塔变异株感染者普通型和重型比例高于奥密克戎变异株感染者;奥密克戎变异株感染者在发热及上呼吸道症状上更多见,肺部CT炎性病灶更少、病毒核酸转阴时间和住院时间更短;奥密克戎变异株感染人数更多,且多数在末次接种疫苗6个月以后确诊,与当地疫苗接种政策和疫苗接种后体内保护性抗体滴度降低有关;海拔高度可影响新冠病毒感染者的病毒核酸转阴时间和住院时间。

关键词： 全科团队   新冠肺炎   老年2型糖尿病患者  

摘要： 目的 了解社区老年2型糖尿病患者在新冠肺炎期间的血糖控制、饮食、运动情况，以及在全科团队实施个性化管理后的成效。方法 2020年10月—2021年11月对浦东泥城8个村居委的糖尿病患者进行筛查排摸，将排摸出的128例社区老年2型糖尿病患者作为本次研究对象，并给予个体化糖尿病相关知识教育、制订落实健康饮食方案、制订落实合理运动方案、定期血糖监测、保持健康心态、学会战胜疫情的技能、开辟绿色就医通道及定期家庭访视，分析全科团队进行管理后糖尿病患者在糖尿病知识、血糖控制情况、自我管理能力等方面的影响。结果 完成6个月干预后，社区老年2型糖尿病患者对糖尿病知识及态度得分、饮食效能得分、运动效能得分均高于干预前，差异有统计学意义(P<0.05)；身体质量(BMI)指数、收缩压、舒张压、空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白等指标均有不同程度好转，干预前后比较，差异有统计学意义(P<0.05)。结论 在新冠疫情期间，以全科团队为主导，对辖区内的老年2型糖尿病患者进行排摸，由全科医生和社区护士定期上门进行管理，优化老年2型糖尿病患者看病流程，解决疫情期间就医难问题，可以有效提升老年2型糖尿病患者的血糖控制率、自我管理效能。

关键词： 新冠肺炎   突发公共卫生事件   联防联控机制  

摘要： 在新型冠状病毒感染的肺炎疫情爆发初始阶段,党和国家就迅速反应,我国逐步形成从中央到地方各级、各领域的应对新冠肺炎疫情联防联控工作机制。国家和人民共同努力在短期内遏制了疫情在更大范围内蔓延,这其中,应对新冠肺炎疫情联防联控工作机制发挥的作用功不可没。那么在这个过程中,应对新型冠状病毒感染的肺炎疫情联防联控工作机制是如何发挥作用来迅速遏制疫情在短期内蔓延的?新冠肺炎疫情联防联控机制的运行逻辑到底是怎样的?本研究基于协同治理理论视角,对H省新冠肺炎疫情联防联控工作开展进行深度考察,采用扎根理论的研究方法,构建出突发公共卫生事件联防联控机制运行“领导驱动—过程控制—结果保障”解释框架。研究发现,突发公共卫生事件联防联控机制运行是“领导驱动”、“过程控制”与“结果保障”的有机统一,彰显整体性治理的中国特色。其中,“领导驱动”是联防联控机制运行的协同驱动因素,高层领导推动和国家组织动员驱动各级组织迅速反应。“过程控制”是联防联控机制运行的协同过程因素,其中主体协作机制是协同过程的运作核心,信息共享机制是贯穿整个协同过程的基础,利益协调机制是推动协同过程利好发展的基本保障。“结果保障”作为联防联控机制运行的协同结果因素,责任共担机制促进联防联控四方责任落实,督导检查机制巩固联防联控工作成果,推动实现精准防控科学救治的治理目标,始终坚持人民至上生命至上,保障广大人民群众的根本利益。通过“领导驱动—过程控制—结果保障”解释框架,有利于进一步理解突发公共卫生事件联防联控机制的组织架构和工作机制,整体认识新冠肺炎疫情联防联控机制运行逻辑。本研究为理解突发公共卫生事件治理的中国方案提供了参考借鉴,对进一步提升突发公共卫生事件治理水平具有一定启示。(正文共42681字,参考文献126篇)

关键词： 新型冠状病毒   新型冠状病毒肺炎   奥密克戎变异株  

摘要： 目的 分析2022年9月四川省遂宁市发生的一起新型冠状病毒肺炎本土疫情特征，为遂宁市的疫情防控提供参考依据。方法 收集本次疫情相关资料，对感染者的流行病学特征进行描述性分析。结果 本起疫情持续15 d，共报告205例感染者，男性85例，女性120例，年龄中位数M(P25,P75)为52(34.5,60)岁；无症状感染者90例，确诊病例115例（轻型106例、普通型3例、重型4例、危重型2例），无死亡病例报告。病毒基因测序为奥密克戎变异株BA.2.76，未完成新冠疫苗加强免疫组患重症的比例为2.44%，高于完成新冠疫苗加强免疫组的0.49%；未完成新冠疫苗加强免疫组首次核酸阳性ORF1ab靶标为25.10、N靶标Ct值中位数为25.10，均低于完成新冠疫苗加强免疫组的29.30和28.45。结论随着防控措施的落实，疫情得到快速有效控制。新冠疫苗加强免疫可以有效降低感染者体内病毒载量，减少重症病例的发生。