关键词： 乳铁蛋白   新型冠状病毒   抗病毒药物   RNA依赖的RNA聚合酶  

摘要： 近年,有研究表明人乳和牛乳可以抑制新型冠状病毒(新冠病毒)感染,但其中的关键成分和作用机制尚不清楚。本研究旨在确定乳汁中发挥主要抗病毒作用的成分,并探索其潜在的分子机制。首先利用一株来自穿山甲的类新冠病毒GX＿P2V筛选,发现5 mg/mL浓度下的乳汁成分乳铁蛋白和乳脂球膜Vero E6细胞水平分别具有99.99%和98.98%的抑制感染效果,并能在多种易感细胞系上抑制GX＿P2V感染,其抗新冠病毒的效果在具有转录和复制能力的新冠病毒样颗粒上得到验证。病毒吸附实验和基于水疱性口炎病毒的新冠病毒Spike蛋白假病毒模型均证实乳铁蛋白和乳脂球膜可以抑制病毒进入细胞。酶联免疫吸附实验和表面等离子体共振实验证实乳铁蛋白通过结合Spike蛋白,以阻断病毒Spike蛋白与细胞ACE2受体的结合,其平衡解离常数为0.647μM,并可结合细胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白聚糖吸附受体。此外,乳铁蛋白可在病毒入胞后发挥作用,采用重组表达的冠状病毒复制酶进行体外RNA延伸实验,结果表明乳铁蛋白在纳摩尔浓度水平抑制了新冠病毒和SARS-CoV的RNA依赖的RNA聚合酶活性。最后,牛乳铁蛋白可有效降低GX＿P2V感染的金黄地鼠肺部和气管中的病毒载量,减轻病毒感染导致的病理损害。本研究阐明了乳铁蛋白抑制新冠病毒感染的多种潜在分子机制,为乳铁蛋白作为一种有前景的抗冠状病毒药物奠定了基础。

关键词： 健康传播   新冠肺炎   媒介使用   主观知识   客观知识  

摘要： 2022年春夏交接之时上海爆发大规模新型冠状病毒感染,相关健康知识在预防、治疗阶段的重要性再次凸显。这次疫情让民众对传染病健康知识的需求有所增加,而新冠肺炎知识的生产、传播与当下数字媒介的传播特点高度契合。因此,新冠疫情大流行时期人们使用媒介获取、储备、理解病毒相关知识的实践需要得到关注。同时,数字媒介环境下“知识”边界的重构变化更加明显,知识的主观化转向逐渐引起学界的关注。上海居民使用媒介开展新冠肺炎知识实践的情况如何?媒介对他们的新冠肺炎知识水平有何影响?人们理解的新冠肺炎知识一定是客观的、理性的知识吗?基于上述疑问,本文在2022年9月至10月上海疫情防控常态化期间对上海16个行政区的居民展开问卷调查,探究媒介使用、风险感知、社会经济地位对新冠肺炎主观、客观知识的影响。研究发现,在“新十条”公布之前,上海居民的社交媒体使用、传统媒介使用、人际讨论皆可提升居民的主观知识水平,但对客观知识水平的提升没有产生效果;社会经济地位的两项指标教育程度、家庭月收入均预测个体客观知识水平;传统媒介使用通过中介变量风险感知提升个体的客观知识和主观知识水平。本文认为,无论社交媒体还是传统媒介,媒介对居民新冠肺炎主观知识的加强说明,新冠肺炎健康知识的普及应通过新媒介作用到民众的具身体验,从而引导人们对病毒、对传染病的科学认知;传统媒介传播知识的职能或面临衰弱的境地,应利用民众的风险感知来促使他们接触、学习更多的科学、权威的传染病知识。本文还进一步讨论,媒介化语境下,人媒结合的具身实践、地理空间媒介是如何介入个体对新冠肺炎知识的感知过程以及健康话语的场域中一种基于健康资本的权力如何影响人们对病毒以及流行病的认知。

关键词： 酸性鞘磷脂酶   阿米替林   神经酰胺   电离辐射   小窝蛋白1   SARS-CoV-2  

摘要： 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型也称新冠病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2),可引起新型冠状病毒肺炎(Corona virus disease2019,COVID-19),该病自2019年底出现后迅速发展为全球大流行,对公共卫生和全球经济构成严重威胁。新冠病毒主要通过空气、接触、粪口和气溶胶四种方式传播,其传播力和致病性比2003年爆发的非典病毒更强。尽管新冠病毒具有人群普遍易感性,老年人群以及患有基础代谢疾病的患者相对于健康个体更易感,更倾向于发展为重症肺炎。值得注意的是,临床肿瘤放疗患者也具有较高的新冠易感性。既往研究认为,免疫力和脏器功能低下是导致放疗患者易感新冠病毒的主要原因。由于电离辐射能够使受照细胞和组织产生复杂的生物学效应,宿主细胞的易感性改变也是不容忽视的致病因素。新冠病毒主要通过表面棘突蛋白(Spike)与宿主细胞膜受体血管紧张素转化酶2(Angiotensin convertion enzyme 2 ACE2)高亲和力结合实现病毒黏附,在宿主蛋白酶作用下通过内吞途经进入细胞。病毒内吞环节与宿主细胞膜上的鞘脂、胆固醇和内吞蛋白有关。有研究显示酸性鞘磷脂酶(Acid sphingomyelinase,ASM)存在于溶酶体中,在刺激作用下可被激活转移至细胞膜上,水解膜上的鞘脂生成疏水性产物神经酰胺(Ceramide,CER),后者可将各脂筏微域合并成更大的富含神经酰胺的膜结构域平台,这样的平台被认为是细胞内吞和摄取病原体的位点。最近有研究证明ASM/CER与新冠病毒的内吞相关。此外,小窝蛋白1(Caveolin-1,Cav-1)是小窝形成的必须组成部分。它介导形成的小窝参与许多病原体内吞过程。病原体首先结合到细胞膜上的富含鞘脂和胆固醇的小窝区域,随后小窝内陷形成内吞小泡介导病毒入胞。因此电离辐射是否会引起ASM/CER和Cav-1的异常表达,进而引起新冠病毒的感染增加尚不清楚。本课题探讨了电离辐射对新冠病毒侵袭宿主细胞的影响,并从鞘磷脂代谢和Cav-1表达改变两个角度分析了相关机制。研究首先构建了体外新冠病毒假病毒细胞感染模型,评估了电离辐射对病毒感染的影响。联合应用RNA转录组测序和生物信息学分析,发现了电离辐射对细胞鞘磷脂代谢的激活作用。通过分子生物学实验,明确了ASM/CER通路对新冠病毒感染的促进效应。在此基础上,建立了体内新冠病毒假病毒感染模型,成功验证电离辐射通过作用于ASM增加体内感染。与此同时,通过对转录组测序结果的全面分析,发现受照细胞Cav-1显著上调。并利用假病毒实验证实Cav-1表达的增强促进了新冠病毒入侵宿主细胞。具体研究结果如下:1.成功构建体外新冠病毒假病毒细胞感染模型,发现单次1.0Gy、2.0Gy、4.0Gyγ射线辐照细胞可呈剂量依赖性地促进假病毒感染。2.应用转录组测序发现电离辐射可显著改变细胞鞘磷脂代谢,并通过不同分子生物学实验揭示辐照可上调人肺泡上皮A549细胞和人肠上皮Caco-2细胞ASM的表达。3.发现A549和Caco-2细胞暴露于电离辐射后鞘磷脂代谢产物CER水平增加,液相色谱-质谱结果显示C16-CER、C18-CER、C24-CER含量在辐照后均显著上调。利用ASM干扰RNA和ASM功能抑制剂阿米替林(Amitriptyline,AMT)可逆转上述异常,提示电离辐射通过ASM/CER轴活化鞘磷脂代谢。4.利用ASM沉默、胆固醇抑制剂以及AMT干预可减弱电离辐射诱导的细胞膜脂筏形成,在体外显著降低新冠病毒假病毒侵袭宿主细胞。5.成功构建体内新冠病毒假病毒感染模型,并证实AMT干预可减弱电离辐射对病毒感染的增强效应,提示鞘磷脂代谢抑制剂AMT具有预防临床放疗患者易感新冠病毒的应用潜力。6.发现电离辐射可上调A549细胞Cav-1表达,利用Cav-1沉默和体外新冠病毒假病毒实验,明确了电离辐射强化Cav-1依赖的小窝内吞作用可促进新冠病毒感染。综上,本研究揭示了电离辐射通过增强鞘磷脂代谢和Cav-1依赖的内吞作用致敏宿主细胞易感新冠病毒的作用和机制,在此基础上发现AMT可减弱电离辐射增强病毒感染的效应,从而为临床放疗患者防治新冠病毒感染提供新思路。

关键词： 新型冠状病毒肺炎   社会资本   身体质量指数   学生  

摘要： 目的 了解新型冠状病毒肺炎（COVID-19，以下简称“新冠肺炎”）疫情封控期间中国学生社会资本改变对身体质量指数（body mass index,BMI）的影响，为新冠肺炎疫情封控期间促进学生体质健康提供依据。方法 本研究所用数据均来自新冠肺炎疫情对行为生活方式改变的影响调查(the COVID-19 impact on lifestyle change survey,COINLICS)，运用logistic回归进行影响因素分析。结果 新冠肺炎疫情封控一月后，8 870名BMI不变/增加的学生中，BMI不变的学生5 939例，占比67.0%,BMI增加的学生2 931例，占比33.0%。个人社会资本、新冠肺炎疫情前BMI以及体力活动水平均是封控后BMI增加的主要影响因素。新冠肺炎疫情期间个人社会资本的得分降低是学生BMI增加的危险因素(OR=1.005,95%CI:1.001～1.011)；以新冠肺炎疫情前正常BMI的学生为参考，BMI为超重的学生封控一月后BMI增加风险更高(OR=1.123,95%CI:1.079～1.169)；与体力活动不变相比，体力活动减少的学生(OR=1.096,95%CI:1.070～1.123)封控后一月BMI增加风险更大。结论 采取针对性措施提高封控期间学生个人社会资本得分，能促进新冠肺炎疫情封控期间学生体质健康。

关键词： 包膜病毒   包膜蛋白   病毒感染失活剂   新发和再现病毒   新型冠状病毒  

摘要： 由包膜病毒,例如人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)及严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2, SARS-CoV-2)等引发的传染病,对人类健康和全球公共卫生造成了很大的威胁.目前已有的抗病毒药物大多数通过作用于病毒入侵细胞时或进入细胞后的生活周期来抑制感染.这些药物在遇到游离的病毒时,并不能导致病毒失去感染性,而是等待病毒感染细胞后发挥抑制作用.蛋白类病毒感染失活剂是一类可直接作用于游离病毒并导致其失去感染性的抗病毒蛋白或多肽,其主要通过与病毒颗粒上包膜蛋白(envelope glycoproteins, Envs)中的一个或多个位点相互作用,引发病毒包膜蛋白功能丧失或病毒基因组释放等,从而使病毒失去感染性.值得注意的是,蛋白类病毒感染失活剂有望比传统的抗病毒药物具有更高的利用率,且在体内应用时比化学类失活剂更安全,因此越来越受到关注.本文选择一些研究较多的代表性病毒,重点介绍了HIV, SARS-CoV及SARS-CoV-2,登革病毒(dengue virus, DENV)及寨卡病毒(Zika virus, ZIKV)的蛋白类病毒感染失活剂研究的最新进展,以及其用于紧急应对新发和再现病毒大暴发、大流行的潜力.

关键词： 通识性文本翻译   模糊语言   模糊修辞  

摘要： 本翻译实践报告以《大重启:文化、危机与新冠肺炎疫情》(Culture,Crisis,and COVID-19:The Great Reset)序言部分以及第一至第二章为翻译实践文本。作者站在新的视角向读者展示了疫情大流行已成为常态化的情况下,中西方不同的文化背景应对新冠疫情的状态、结果及其原因,并重点阐述了企业这一群体在疫情应对和防控中起到的作用。该报告对于翻译过程中遇到的问题进行归纳总结,并提出相应的解决方案。该文本属于学术类文本中的通识性文本,态度客观,学术性较强。作者运用大量的模糊修辞,以提高文本的美感和艺术性,提高读者阅读兴趣。作者从模糊修辞的两个分类,即常式模糊修辞和变式模糊修辞作为切入点来分析。针对常式模糊修辞,作者从模糊名词、模糊动词和模糊形容词三方面来分析;针对变式模糊修辞,作者聚焦于比喻、拟人和夸张的修辞手法进行案例分析。译者主要采用了意译,增译的翻译策略,且将原文进行概念外延,力求译文达到和原文等同的效果。通过对本次翻译实践活动及翻译实践报告撰写,笔者对于通识性文本中模糊修辞的界定和翻译有了更深入的理解,并在总结翻译问题的基础上提出合理的解决方法,以期为今后此类文本的翻译实践提供相应的借鉴和参考。

关键词： 现场快速检测   Nanoluc荧光素酶   RPA   样本进-结果出   新型冠状病毒  

摘要： 新型冠状病毒引发的新冠肺炎对全球公共卫生安全带来了极大的威胁,在这类新发突发性传染病防控中病毒快速检测至关重要。传统的病毒检测方法存在实验操作复杂、实验环境要求高和检测周期长等不足,目前病毒检测方法的发展趋势为快速检测,操作简单、检测周期短、无需复杂仪器设备,有利于基层和偏远、资源匮乏地区使用。新冠病毒检测最常用方法是病毒抗原检测和核酸检测。以病毒抗原作为检测靶标的免疫层析方法具有操作简便、反应快速的优势,无需仪器设备,可即时读取结果,非常适于现场应用,但由于检测灵敏度低,仅可作为病原感染的辅助诊断方法;基于核酸检测的实时荧光定量PCR具有灵敏度高、结果准确的优势,已成为病原感染确诊的金标准,但是需要专业的实验室条件及仪器设备,以及耗时长的核酸提取及扩增过程,因此,实时荧光定量PCR并不适于现场及基层机构检测应用。目前,亟须开发高灵敏的病毒抗原检测技术和更为简便快速的核酸检测技术。本研究以新冠病毒为研究对象,针对目前病毒抗原检测灵敏度低的问题及核酸检测耗时久的问题,分别开展了基于荧光素酶标记抗体的高灵敏全自动磁微粒发光免疫分析技术研究和基于重组酶聚合酶等温扩增的一体化快速核酸检测技术。在基于荧光素酶标记抗体的高灵敏全自动磁微粒发光免疫分析技术(Nluc-AMCA)的研究过程中,为了提高病毒抗原检测的灵敏度,我们创新性地使用小分子量、高灵敏和可生物标记的Nanoluc荧光素酶做为检测抗体标记物,并采用以下技术优化策略:(1)采用真核系统重组表达策略,实现Nanoluc荧光素酶在检测抗体上的高效定向标记,避免传统化学标记方法造成的抗体标记不均匀、标记位点不可控从而影响Fab片段的结合活性;(2)探索不同质粒种类、质粒构建方式及转染方式,最终以抗体轻链、重链和Nanoluc荧光素酶依次串联成单质粒稳定转染细胞,可持续获得标记抗体;(3)筛选较为广谱的捕获抗体,建立双抗体夹心方法检测新冠病毒,并与全自动磁微粒化学发光仪相结合,优化检测体系和检测流程,建立全自动、高灵敏的Nluc-AMCA。为了评估胞内表达荧光素酶标记抗体(Nluc-ch2C5)在提升病毒抗原检测灵敏度中的作用,我们将其与荧光素酶化学标记抗体(Nluc-MBS-ch2C5)、传统的辣根过氧化物酶化学标记抗体(HRP-ch2C5)进行比较。结果表明,Nluc-ch2C5具有最高的检测灵敏度(79 pfu/reaction),其检测灵敏度比Nluc-MBS-ch2C5(1315.3 pfu/reaction)高16倍,比HRP-ch2C5(3339 pfu/reaction)高42倍。为了保证Nluc-AMCA检测结果的灵敏性和特异性,我们分别对其最低检出限、灵敏性及特异性进行了评估。该技术用于新冠病毒检测的最低检出限可达68 pfu/reaction;不与其他呼吸道相关病毒发生交叉反应,具有很高的特异性;在临床样本检测中,特异性为100%,敏感性为75%,其敏感性高于胶体金法(68.75%)和ELISA法(62.5%)。在基于重组酶聚合酶等温扩增的一体化快速核酸检测技术(I-RPA)研究过程中,为了缩短核酸检测时间,简化实验操作,我们从以下方面进行了技术探索:(1)制备样本处理液直接进行样本处理,简化样本处理过程,实现无需核酸纯化的样本处理步骤;(2)设计并筛选灵敏特异的重组酶聚合酶等温扩增技术(RPA)的引物探针,实现检测靶标的指数扩增;(3)优化封闭式检测卡盒及检测流程,将RPA等温扩增过程与免核酸提取的样本处理过程相结合,建立了一体化的新冠病毒快速核酸检测技术,30 min可完成整个样本处理及扩增过程。为了保证检测结果的灵敏性和特异性,我们分别对I-RPA的最低检出限、灵敏性及特异性进行了评估。利用多株新冠病毒株培养物确定该I-RPA技术的最低检出限为35 copies/reaction;利用包括普通冠状病毒在内的20种其他呼吸道病毒检测I-RPA技术的特异性,确定I-RPA与其他病原体核酸无交叉反应;利用临床样本进行检测,I-RPA的检测结果与常规q PCR具有较好的一致性,特异性为100%,敏感性达92.8%。本研究建立的Nluc-AMCA和I-RPA方法,不仅可用于新冠病毒抗原的高灵敏自动化检测与核酸的现场快速检测,还可作为技术平台用于其他传染病感染的检测中,为传染病检测提供新的检测方法和思路。

关键词： COVID-19   SARS-CoV-2   基因多态性   跨膜丝氨酸蛋白酶2   TMPRSS2rs12329760   meta分析  

摘要： 研究背景与目的:自2019年新型冠状病毒肺炎(Coronavirus Disease2019,COVID-19)疫情爆发以来,全球COVID-19发病率和死亡率仍不断上升。已有meta分析探讨了跨膜丝氨酸蛋白酶2(transmembrane serineprotease2,TMPRSS2)rs12329760基因多态性与新冠肺炎易感性或严重程度的关系,但研究结果并不一致。此外,这些meta分析纳入研究较少,目前已有新增研究发表,且探讨了 rs12329760基因多态性与新冠肺炎患者死亡风险的关联。因此,本meta分析目的旨在汇总最新的研究证据,评估rs12329760基因多态性与新冠肺炎(易感性、严重程度、死亡风险)的关联是否显著,为新冠肺炎的临床实践提供证据支持。材料与方法:根据PICOS原则,制定检索策略,使用关键词和自由词的组合检索,包括:“新型冠状病毒肺炎”、“新型冠状病毒”、“跨膜丝氨酸蛋白酶2”、“TMPRSS2”、“多态性”及“单核苷酸”等。检索中英文电子数据库:中国生物医学文献数据库(China Biology Medicine disc,CBM)、中国知网(Chinese National Knowledge Infrastructure,CNKI)、万方数据知识服务平台(WanFang Database,WF)、维普中文科技期刊全文数据库(China Science and Technology Journal Database,VIP)、Pubmed、Embase、Web of science、Scopus、Ovid,以及手工检索既往发表的荟萃分析及评论的参考文献,检索时间范围限于各数据库建库至今。根据纳入和排除标准筛查符合要求的相关研究,仔细阅读并提取相关研究数据。使用Revman5.3及R4.1.3软件对资料进行统计学分析,二分类变量资料采用比值比(odds ratio,OR)和95%可信区间(Confidence Interval,CI)表达。结果:共纳入13篇英文文献,其中1篇为横断面研究、7篇为队列研究,余5篇为病例对照研究。根据纽卡斯尔-渥太华量表(Newcastle-Ottawa Scale,NOS)、美国卫生保健质量和研究机构(Agencyfor Healthcare Research and Quality,AHRQ)制定的量表进行文献质量评估,4篇文献质量为中等质量,9篇文献质量为高质量,所纳入文献均符合哈迪-温伯格平衡(Hardy-Weinbergequilibrium,HWE),具体分析结果如下:***12329760基因多态性与SARS-CoV-2感染风险方面,共8篇文献纳入meta分析:①等位基因模型(Cvs T)OR=0.89,95%CI=(0.77-1.03),Z=0.56,P=0.12,差异无统计学意义;②显性模型(CC+CT vs TT)OR=0.88,95%CI=(0.08-9.99),Z=0.37,P=0.71,差异无统计学意义;③隐性模型(CCvs CT+TT)OR=1.33,95%CI=(0.92-1.91),Z=0.48,P=0.63,差异无统计学意义;④共显性模型(CCvs CT)OR=0.96,95%CI=(0.84-1.10),Z=0.59,P=0.55,差异无统计学意义;⑤纯合子模型(CC vs TT)OR=0.92,95%CI=(0.60-1.41),Z=0.38,P=0.71,差异无统计学意义。***12329760基因多态性与新型冠状病毒肺炎病情严重程度方面,共9篇文献纳入meta分析:①等位基因模型(Cvs T)OR=0.85,95%CI=(0.61-1.18),Z=0.98,P=0.33,差异无统计学意义;②显性模型(CC+CT vs TT)OR=0.91,95%CI=(0.51-1.62),Z=0.33,P=0.74,差异无统计学意义;③隐性模型(CCvs CT+TT)OR=0.79,95%CI=(0.53-1.18),Z=1.15,P=0.25,差异无统计学意义;④共显性模型(CC vs CT)OR=0.79,95%CI=(0.56-1.10),Z=1.42,P=0.15,差异无统计学意义;⑤纯合子模型(CC vs TT)OR=0.78,95%CI=(0.38-1.62),Z=0.66,P=0.51,差异无统计学意义。***12329760基因多态性与新型冠状病毒肺炎死亡风险方面,共4篇文献纳入meta分析:①等位基因模型(Cvs T)OR=0.59,95%CI=(0.17-2.08),Z=0.82,P=0.41,差异无统计学意义;②显性模型(CC+CT vs TT)OR=0.52,95%CI=(0.14-1.98),Z=0.57,