关键词： 新型冠状病毒   皮内免疫   微针   体液免疫   细胞免疫  

摘要： 目的研究新型皮内免疫方法对新型冠状病毒重组S1(rS1)蛋白的免疫效果。方法112只BALB/c小鼠随机分为对照组[只注射Al(OH)3佐剂]、5μg S1组、5μg S1+Al(OH)3组、10μg S1组、10μg S1+Al(OH)3组、20μg S1组、20μg S1+Al(OH)3组,每组分别进行肌内免疫和微针皮内免疫,各组免疫所用S1蛋白与佐剂Al(OH)3质量比为1∶10,共14组,每组8只。免疫程序为0、2和4周3次免疫。通过酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)比较不同免疫途径和免疫剂量诱导的IgG、IgG1和IgG2a结合抗体水平。用SARS-CoV-2野生型(WT)和Omicron(BA.5)假病毒来评估中和抗体的水平。通过酶联免疫斑点实验(enzyme-linked immunosorbent spot,ELISpot)对细胞免疫反应进行评估。抗体终点滴度和中和数据通过Kruskal-Wallis检验进行分析,细胞免疫数据使用单因素方差分析进行分析。结果皮内免疫新型冠状病毒rS1蛋白诱导IgG、IgG1、IgG2a抗体效价高于肌内免疫。免疫rS1蛋白产生的特异性抗血清对新型冠状病毒野生型和Omicron BA.5有明显的中和效果,并且皮内免疫组诱导小鼠产生的中和抗体水平高于肌内免疫组,皮内免疫10μg+Al(OH)3对野生型新型冠状病毒的中和抗体GMT为922,对Omicron BA.5的中和抗体GMT为99。免疫rS1蛋白的小鼠脾淋巴细胞IFN-γ和IL-4水平上升,且皮内组免疫诱导小鼠产生的细胞免疫反应高于肌内免疫组,皮内免疫20μg组引起的IFN-γ水平最高[(370.7±42.36)个免疫斑点];皮内免疫10μg+Al(OH)3组引起的IL-4水平最高[(416.7±51.83)个免疫斑点]。结论皮内免疫引起的免疫应答强于传统的肌内免疫方法,可应用于后续疫苗接种策略。

关键词： 乳铁蛋白   新型冠状病毒   新冠肺炎   硫酸乙酰肝素蛋白多糖   抗病毒  

摘要： 由新型冠状病毒(Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染引起的新冠肺炎可引起咳嗽、发热、细胞因子风暴、急性呼吸窘迫综合征等症状。SARS-CoV-2不但对人类健康造成重大侵害,还严重制约了全球经济发展。SARS-CoV-2可吸附宿主细胞表面的硫酸乙酰肝素蛋白多糖(Heparan sulfate proteoglycans,HSPGs)并与血管紧张素转换酶2(Angiotensin converting enzyme 2,ACE2)结合,通过不断复制侵入宿主细胞,造成肺脏、肾脏和心血管等器官疾病的发生。乳铁蛋白(Lactoferrin,LF)是一种糖胺聚糖(Glycosaminoglycan,GAG)结合蛋白,具有抗病毒、抗菌、调节免疫、缓解炎症等多种功能。研究发现,乳铁蛋白可竞争性结合HSPGs,并具有辅助治疗新冠肺炎的重要作用。通过对乳铁蛋白抑制SARS-CoV-2感染及对新冠肺炎辅助治疗相关的研究进展进行综述,为其在医学、食品领域的应用提供理论参考。

关键词： 鼠肺炎病毒   实时荧光定量聚合酶链反应   新型冠状病毒   实验动物   检测方法   动物模型  

摘要： 目的建立鼠肺炎病毒(pneumonia virus of mice,PVM)实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,Q-PCR)检测方法,用于新型冠状病毒感染模型用小鼠等实验动物及其动物相关样本的检测。方法选择PVM G基因保守序列设计合成引物和探针,建立Q-PCR方法。并进行方法的线性、特异性、敏感性、重复性、稳定性和可信度验证。应用建立的方法对包括用于构建新型冠状病毒感染模型用hACE2等8个品系142只小鼠,及15只大鼠、5只沙鼠、4只黄鼠、63只裸鼹鼠和19只PVM感染小鼠的肺组织样本进行PVM检测。结果建立的方法与仙台病毒、呼肠孤病毒Ⅲ型、汉坦病毒、淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒无交叉反应。方法的线性范围为1×10^(1)-1×10^(8)拷贝/μl,检测病毒质粒标准品灵敏度达101拷贝/μl;重复性、稳定性结果显示实验内和实验间平均变异系数均<5%。用建立的方法检测用于构建新型冠状病毒感染模型用hACE2等8个品系142只小鼠,及15只大鼠、5只沙鼠、4只黄鼠和63只裸鼹鼠,结果均为阴性;检测19只PVM感染小鼠肺组织样本,PVM阳性率为36.84%(7/19),与RT-PCR检测结果符合率为100%。结论建立的PVM Q-PCR方法特异性、敏感性,重复性、稳定性好,检测结果可靠,能够用于构建新型冠状病毒感染模型常用品系小鼠等实验动物的监测及其相关样本的检测。未发现用于构建新型冠状病毒感染模型常用品系小鼠携带PVM。

关键词： 丹皮   网络药理学   分子对接   槲皮素   血管内皮细胞生长因子受体   新型冠状病毒肺炎  

摘要： 目的基于网路药理学和分子对接技术探讨丹皮治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)的有效成分、核心靶点及潜在作用机制。方法通过中药系统药理学分析平台(TCMSP)获取丹皮的有效成分及作用靶点,GeneCards®和OMIM®数据库获得COVID-19相关靶点,两者取交集后获得丹皮治疗COVID-19的潜在靶点。将潜在靶点输入STRING数据库,获取靶点蛋白在生物系统中的相互作用关系,建立蛋白互作网络(PPI)图筛选核心靶点,采用Cytoscape软件绘制COVID-19-丹皮—有效成分—靶点网络图,筛选丹皮主要活性成分。对潜在靶点进行GO和KEGG富集分析,获取潜在靶点的相关分子功能和信号通路。采用Discovery Studio 2019软件对靶点网络图中丹皮主要活性成分及临床常用于治疗COVID-19的药物奈玛特韦、瑞德西韦与COVID-19的药物治疗靶点3CL蛋白酶、血管紧张素转化酶2(ACE2)进行分子—蛋白对接。结果共获得丹皮有效成分6个,即槲皮素、丁子香萜、谷甾醇、山奈酚、(+)-儿茶素、单体5-{[5-(4-甲氧基苯基)-2-呋喃]亚甲基}巴比妥酸(简称巴比妥酸),有效成分作用靶点150个,与COVID-19相关靶点716个取交集后获得丹皮治疗COVID-19的潜在靶点36个。PPI图显示核心靶点主要包括血管内皮细胞生长因子受体(VEGFR)、白细胞介素6(IL-6)、IL-1B等。COVID-19-丹皮—有效成分—靶点网络图显示,丹皮治疗COVID-19的主要活性成分排名先后顺序为槲皮素、山奈酚、巴比妥酸和(+)-儿茶素,核心靶点为过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、环加氧酶2(PTGS2)、雌激素受体1(ESR1)。GO和KEGG富集分析得到61个分子功能和109个信号通路,分子功能主要包括细胞因子受体结合活性、DNA结合转录因子结合活性、信号受体激活因子活性等,信号通路主要包括脂质与动脉粥样硬化、IL-17、肿瘤坏死因子(TNF)家族等。分子—蛋白对接结果显示,与奈玛特韦、瑞德西韦相比,丹皮有效成分巴比妥酸和槲皮素分别与3CL蛋白酶和ACE2有更稳定的结合能力。结论丹皮通过有效成分槲皮素、巴比妥酸、(+)-儿茶素、山奈酚作用于PPARG、PTGS2、ESR1等核心靶点对COVID-19发挥治疗作用,其机制主要与调控脂质与动脉粥样硬化、IL-17、TNF等通路有关。

关键词： 心房颤动   新冠疫情   就诊模式   规律就诊   CHA_(2)DS_(2)-VASc评分   脑卒中  

摘要： 目的观察新型冠状病毒肺炎(新冠)疫情期间心房颤动(房颤)患者的就诊模式变化。方法本研究为横断面研究。使用房颤综合管理平台数据库,筛选2018年1月至2021年12月在复旦大学附属华山医院就诊的诊断为"房颤"或"心房颤动"的患者,将新冠疫情前(2018年1月至2019年12月)来院的房颤患者设为A组,将新冠疫情后(2020年1月至2021年12月)来院的房颤患者设为B组。收集并比较两组患者的年龄、性别、CHA2DS2-VASc评分、就诊科室、合并疾病等信息,并对两组患者就诊分布、合并症占比,规律就诊及影响因素进行分析。结果①基本信息:纳入10077例房颤患者,平均年龄74.1岁,其中男5030例。A组3420例(就诊次数11804),B组6657例(就诊次数21268)。B组就诊患者平均年龄小于A组(74.62岁对73.81岁,P<0.001),女性就诊占比高于A组[50.3%(5936/11804)对52.7%(11214/21268),P<0.001],CHA_(2)DS_(2)-VASc评分高于A组(2分对3分,P<0.001)。B组患者门急诊就诊占比增加,住院人数占比减少。②相关合并疾病:B组患者脑卒中占比增加[10.0%(1175/11804)对12.0%(2545/21268),P<0.001]、心力衰竭占比增加[5.8%(679/11804)对9.4%(1996/21268),P<0.001]。③门急诊患者规律就诊的关联因素:本市户籍(OR=5.624,95%CI 4.173~7.579)、年龄>65岁(OR=1.676,95%CI 1.351~2.079)与规律就诊呈正相关,新冠疫情发生后(OR=0.746,95%CI 0.623~0.892)、合并心力衰竭(OR=0.568,95%CI 0.365~0.883)及高血压(OR=0.807,95%CI 0.663~0.982)与规律就诊呈负相关。④就诊患者分布:B组患者心内科就诊占比减少[70.5%(6893/9777)对63.6%(12095/19004),P<0.001],神经内科就诊占比增加[6.1%(599/9777)对9.8%(1853/19004),P<0.001]。B组心内科就诊患者平均就诊次数减少(3.16次/年对2.24次/年,P<0.001),神经内科就诊患者平均就诊次数增多(1.51次/年对2.72次/年,P<0.001)。结论疫情发生后,房颤患者的就诊模式发生变化,总就诊人数增加,且合并症较多。规律就诊的患者比例降低且与新冠疫情密切相关,急诊和神经内科来院就诊的患者增加。

关键词： 蒿芩清胆汤   新冠病毒   中医药   网络药理学   分子对接  

摘要： 目的:运用网络药理学、分子对接探究蒿芩清胆汤治疗新型冠状病毒的作用机制,为临床运用蒿芩清胆汤治疗新冠肺炎提供理论依据。方法:通过TCMSP、PDB等数据库筛选蒿芩清胆汤中的中药有效成分及其作用靶点;通过Genecards、OMIMS数据库筛选出新型冠状病毒的疾病靶点;使用String数据库、Cytoscape3.7.2软件构建“药物-靶点-疾病”网络和核心靶点相互作用关系;通过R语言对潜在靶标进行KEGG富集和GO富集;通过Autodock vina等进行分子对接。结果:经筛选、去重挖掘出蒿芩清胆汤中化合物176个,344个药物靶点,COVID-19相关靶点259个,二者交集靶点54个,关键化合物涉及槲皮素、山奈酚、木犀草素、汉黄芩素和刺芒柄花素,关键靶点涉及IL6、TNF、MAPK1、STAT1、TP53、STAT3、MAPK14、AKT1等;GO富集分析共得到628个条目,KEGG通路富集共筛选出137条信号通路;分子对接结果显示,蒿芩清胆汤核心化合物与SARS-CoV-23CL水解酶和血管紧张素转化酶II都≤-5 KJ/mol。结论:蒿芩清胆汤能通过多成分、多靶点、多通路作用于新型冠状病毒。

关键词： 新型冠状病毒肺炎   中医药治疗   未病先防   既病防变   瘥后防复  

摘要： 中医学浩瀚的宝藏中对于疫情的诊疗有着独特的认识。中医讲究防与治结合,从疫情爆发开始中医药“未病先防,既病防变,瘥后防复”的三防思想就灵活运用到防治新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,COVID-19)的过程中,中医药三防思想因疾病所处的不同阶段灵活运用,现分别论述未病先防、既病防变、瘥后防复这三种防治措施在疾病发生前的预防,发病中治疗以及疾病恢复后的保健作用,未病先防、既病防变、瘥后防复这三种防治措施的适用范围主要以未患有新冠肺炎、新冠肺炎治疗中以及新冠肺炎康复中的成年人为主,在防疫工作中面对不同疾病阶段的患者时需要医者灵活运用,为全国各省同仁运用中医防治COVID-19提供参考依据。

关键词： 新冠肺炎   后疫情时代   城市社区体育   体育治理  

摘要： 该文通过文献资料法和观察法等研究方法,探究了新冠肺炎疫情给城市社区体育带来的机遇,以及后疫情时代将面临的挑战,并提出应对策略。研究认为,机遇是疫情强化了人们体育促进健康的意识,培育了新的体育锻炼形式,推动了城市社区体育治理,但也暴露出城市社区体育在体育设施、云体育、居家体育和线上运动会以及社区体育治理方面面临的挑战,继而提出体育设施数字化与智能化发展,完善云体育、居家体育和线上运动会的服务体系,发挥新元主体参与社区治理的积极性的策略。

关键词： 新型冠状病毒感染   变异株   流行特征   聚集性疫情  

摘要： 分析2020⁃2022年期间广西新型冠状病毒感染(Coronavirus disease 2019,COVID⁃19)疾病的流行病学和病原学特征,为广西和其他地区COVID⁃19的疾病预防控制工作提供参考。搜集2020年1月1日⁃2022年12月7日期间广西报告的所有COVID⁃19病例信息和聚集性疫情资料,采用Excel 2010、SPSS20.0软件对数据进行分析和作图。2020⁃2022年期间广西累计报告COVID⁃19本地病例14119例,输入病例4455例,其中本地病例在所有县(市、区)均有报告,职业以家务及待业、农民为主;境外输入病例主要集中在边境的8个县(市、区),占94.84%,职业分布则以商业服务和工人为主;根据病例流行曲线及主要流行株可将广西这一时期COVID⁃19疫情分为3个阶段,第一阶段均由原始株导致;第二阶段以德尔塔株为主,占83.12%;第三阶段以奥密克戎株为主,占99.89%。对158起COVID⁃19聚集性疫情分析显示,引起内陆地区和边境地区聚集性疫情的变异株类型存在差异,且疫情来源不同,内陆地区的聚集性疫情79.70%因国内其他省份疫情波及导致,而边境地区68%因境外疫情输入,越南是广西边境地区境外输入性疫情的主要来源国。广西作为边境省份,境外输入导致的聚集性疫情与越南高度关联,且发生地区主要集中在8个边境县(市、区)的村屯;基因测序和流调结果提示广西边境地区聚集性疫情的变异株型别、好发场所均与内陆地区存在差异,因此制定两类地区的COVID⁃19防控措施上应有所不同。

关键词： 新型冠状病毒   临床试验   伦理问题   科研诚信   伦理治理  

摘要： 在新冠病毒感染(简称“新冠感染”)引发的突发公共卫生事件中,安全有效的药物对满足临床救治需求、恢复社会活动和经济发展有重要意义,而药物研发过程中存在着研究设计不科学、脆弱人群保护、利益冲突等方面的伦理挑战。本文着重讨论新冠感染临床试验可接受风险受益比、资源公正分配、加急伦理审查程序及标准等,由此建议突发公共卫生事件紧急应对时,临床试验应由政府引导、科研机构和社会力量协同攻关,对科研不诚信行为零容忍、维系伦理审查独立性、着实保护研究参与者权益,健全科技伦理治理体系。