关键词： 新型冠状病毒抗原   检测试剂   企业参考品  

摘要： 目的:构建一种针对企业试剂产品的新型冠状病毒抗原检测用参考品,以实现对试剂的质量控制和性能评估。方法:以中国食品药品检定研究院制备的新型冠状病毒抗原检测试剂国家参考品为对照,构建用于验证新型冠状病毒抗原试剂检出性能的企业参考品,对两种参考品进行比较,并对参考品的稳定性进行验证。结果:企业参考品最低检出限S5标定结果为1.25×10^(5) U/mL;国家参考品与企业参考品对应的阴性参考品N1~N20、阳性参考品P1~P8及重复性参考品R1~R3检测结果色阶一致且符合要求;37˚C保存4d,-20℃保存1年或反复进行4次冻融后均不会对企业参考品的稳定性构成影响;试剂的性能验证结果表明,阴性符合率、阳性符合率、重复性结果均满足对应要求。结论:制备的企业参考品性能达到应用要求,可用于对试剂质量的控制和评价。

关键词： 淋巴细胞亚群   新型冠状病毒   淋巴瘤  

摘要： 目的探讨既往淋巴瘤病史和新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)感染对住院患者外周血和支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中淋巴细胞亚群免疫反应的影响,旨在为理解coronavirus disease 2019,(COVID-19)的病理机制和制定治疗策略提供新的信息。方法收集2023年1月至2023年6月航天中心医院住院患者52例,根据住院患者既往史和BALF SARS-CoV-2核酸结果分为3组:①既往史淋巴瘤患者BALF SARS-CoV-2核酸阳性组(A组);②既往史淋巴瘤患者BALF SARS-CoV-2核酸阴性组(B组);③非淋巴瘤患者BALF SARS-CoV-2核酸阴性组(C组)。通过流式细胞仪评估外周血和BALF中淋巴细胞亚群的免疫反应和表达。结果纳入了52例住院患者,A组(既往淋巴瘤患者且BALF SARS-CoV-2核酸阳性)与C组(非淋巴瘤既往史患者且BALF SARS-CoV-2核酸阴性)在外周血和BALF中的总T淋巴细胞、B淋巴细胞以及CD4^(+)/CD8^(+)比值差异存在统计学意义。BALF中的总T淋巴细胞比例普遍高于外周血,A组的CD4^(+)T淋巴细胞、CD8^(+)T淋巴细胞和CD4^(+)/CD8^(+)比值的显著差异可能反映了SARS-CoV-2感染对适应性免疫反应的影响。此外,B淋巴细胞和NK细胞在外周血中的比例显著高于BALF中的比例,表明全身性与局部免疫反应的不同功能和重要性。结论强调了BALF和外周血作为研究COVID-19复杂传染病过程中细胞免疫相关标志物的重要性,并指出了既往淋巴瘤病史对免疫反应的潜在影响。尽管存在样本量小和回顾性单中心研究的局限性,但其结果为理解SARS-CoV-2感染的免疫学机制提供了新的见解,并可能对临床诊疗具有指导意义。

关键词： 新型冠状病毒   原发性闭角型青光眼  

摘要： 目的探讨新型冠状病毒(SARS-CoV-2)爆发期原发性闭角型青光眼(PACG)患者的临床特点。方法PACG患者24例(24眼),根据入院时SARS-CoV-2核酸检测结果分为阳性组和阴性组,每组12例(12眼),均接受小梁切除术治疗。术前1d测量前房深度,术前1d和术后3d测量患者眼压和最佳矫正视力。结果术前阳性组前房深度为(1.65±0.20)mm,低于阴性组的(1.85±0.26)mm(P<0.05)。阳性组术前眼压高于阴性组(P<0.05);阳性组术后眼压低于术前(P<0.05);阳性组眼压下降幅度大于阴性组(P<0.05)。阳性组术前最佳矫正视力较阴性组差(P<0.05);阳性组术后最佳矫正视力优于术前(P<0.05),且最佳矫正视力下降幅度大于阴性组(P<0.05)。结论SARS-CoV-2对PACG患者的前房深度、眼压和视力均有影响,但在接受小梁切除术后阳性患者的眼压和视力较阴性患者预后更好。

关键词： 线粒体动力学   新型冠状病毒感染   急性呼吸窘迫综合征  

摘要： 新型冠状病毒(新冠病毒)感染所致重症肺炎患者常合并急性呼吸窘迫综合征(ARDS),病死率高。ARDS以弥漫性肺泡损伤、肺水肿和低氧血症为特征,线粒体在低氧和病毒感染下易出现形态及功能异常,进而引发细胞凋亡和损伤,严重影响疾病进程。线粒体通过裂变和融合维持稳态,ARDS时低氧使动力相关蛋白1(Drp1)磷酸化,引发线粒体过度分裂,破坏肺泡上皮屏障。动物实验显示抑制该过程可减轻肺损伤,为治疗提供潜在方向。新冠病毒感染相关ARDS的病理机制与典型ARDS类似,但程度更严重,病毒感染和低氧导致线粒体平衡被打破,引发裂变和自噬异常,促使氧化应激和线粒体DNA(mtDNA)释放,激活炎症小体,诱导缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达,加剧病毒感染、炎症和凝血反应,导致多器官损伤。针对新冠病毒感染相关ARDS的治疗常使用机械通气和糖皮质激素。机械通气易导致肺和膈肌损伤、线粒体动力学改变,肺保护性通气策略可减少不良影响;糖皮质激素可调节线粒体功能和免疫反应,通过多途径改善病情。新冠病毒感染相关线粒体动力学失衡源于低氧和病毒蛋白,引发肺部及多器官损伤。本综述旨在明确线粒体动力学失衡与新冠病毒感染相关ARDS的病理生理学机制,探索调控线粒体动力学平衡以治疗该疾病的有效策略,为新冠病毒感染相关ARDS患者提供新的治疗靶点与方法。由于现有治疗有局限,未来需深入研究线粒体功能障碍机制,开发新疗法和调控策略,以提升治疗效果。

关键词： COVID-19   adenovirus type-5 vector-based COVID-19 vaccine   immunogenicity   safety   needle-free injector  

摘要： Objectives To evaluate the safety and immunogenicity of adenovirus type 5 vectored COVID-19 vaccine (Ad5-nCoV), by intradermal immunization with a needle-free injector in *** This study was divided into two parts. In study A, 105 rats were randomly assigned to seven groups, to receive the low-dose, medium-dose, or high-dose vaccine by needle-free intradermal injections (NFI), or needle-based intramuscular injections (NI), or needle-free intradermal injections with saline solution as a control group. Blood samples were collected on day 0 before vaccination, and day 7, day 14, day 21 and day 28 after vaccination. Binding antibody, pseudovirus neutralizing antibody as well as cellular immune response were measured. The safety endpoints included weight changes and skin reactions. In study B, 32 rats were randomly assigned to four groups to receive low-dose, or medium-dose vaccine by NFI or NI, to observe pathological changes at the injection site following *** No safety concern was noted associated with NFI of Ad5-nCoV. Comparable levels of neutralizing antibodies against various variants induced by NFI compared to NI at the same *** The NFI immunization would be considered as an alternative immunization method to replace the traditional NI for the Ad5-nCoV.

关键词： 新型冠状病毒感染   听力损失   早期预警   治疗  

摘要： 目的探讨新型冠状病毒感染相关听力损失(corona virus disease 2019-related hearing loss,COVID-19-RHL)的分类、发病机制、治疗及预测新型冠状病毒感染(corona virus disease 2019,COVID-19)的可能性。方法检索PubMed、EMBASE、中国知网等数据库关于COVID-19与听力相关的文献,对COVID-19-RHL的分类、发病机制、治疗及预测的可能性进行研究。结果COVID-19-RHL相关的文献较少,以病例报道为主,临床类型主要包括突发性感音神经性耳聋(sudden sensorineural hearing loss,SSNHL)、感音神经性耳聋(sensorineural hearing loss,SNHL)、中耳炎(otitis media,OM)、SNHL/SSNHL伴OM。SSNHL是COVID-19-RHL最常见的类型。COVID-19-RHL发病机制可能包括病毒直接损伤内耳结构、免疫介导的炎症、血栓形成致微循环障碍等。口服联合鼓室内注射糖皮质激素可以改善大多数COVID-19相关SSNHL患者的听力,OM可以通过门诊治疗或居家观察治愈。无症状感染者可出现4、6、8 kHz等高频纯音阈值升高,瞬态诱发性耳声发射(transient evoked otoacoustic emission,TEOAE)幅值降低,疫情流行地区听力损失可预测COVID-19阳性患者。结论COVID-19-RHL包括4个类型,SSNHL是最常见的类型,糖皮质激素可以改善大多数SSNHL患者听力。临床医师应高度警惕COVID-19大流行地区出现听力损失且无典型呼吸道症状患者感染病毒的可能性,高频纯音测听和TEOAE检查可早期发现COVID-19无症状感染者伴有的听觉损伤。

关键词： 新型冠状病毒   刺突蛋白蛋白   单链抗体  

摘要： 目的:构建抗新型冠状病毒S蛋白单链抗体(scFv)重组基因。方法:采用基因工程抗体技术,对BALB/c小鼠利用新型冠状病毒S蛋白抗原进行免疫接种,通过提取脾脏总RNA取得抗体可变区(V)重链(VH)和轻链(VL)基因序列,经过多种引物PCR扩增并筛选得到对应的VH和VL基因序列,再经过提纯回收后,通过Linker将带有限制性酶切位点的抗新型冠状病毒S蛋白VH和VL引物基因与VH、VL基因用重叠延伸PCR方法成功连接得到scFv重组基因,测序结果通过NCBI网站使用BLAST在基因库对比分析。结果:成功获得抗新型冠状病毒S蛋白VH和VL基因,并通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)方法连接得到scFv,scFv经过BLSAT分析显示其基因同源性大于80%。间接ELISA检测结果显示,原核表达上清有明显的结合。结论:本研究为新型冠状病毒的诊治及研发新型相关抗体提供技术基础。

关键词： 新型冠状病毒   弱阳性核酸质控品   均一性   稳定性  

摘要： 目的:本研究旨在通过实验室内稀释法自配新型冠状病毒弱阳性质控品,并对其性能进行评价以满足新冠病毒核酸检测的质量控制需求。方法:使用阴性临床样本、样本保存液和去离子水三种基质将强阳性假病毒核酸质控品稀释成弱阳性质控品,采用逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进行核酸扩增,评价其分装后的均一性以及其在反复冻融、室温放置、2~8℃、-20℃、-70℃的不同条件下的稳定性。结果:三种基质配制的质控品分装后均一性良好,使用阴性临床样本制备的弱阳性质控品能在反复冻融4次、室温放置20小时、2~8℃暂存6天、-20℃冻存8周和-70℃冻存16周保持稳定;而使用样本保存液配制的弱阳性质控品能在室温放置16小时、2~8℃暂存6天、-20℃冻存6周和-70℃冻存20周保持稳定;去离子水组则在冻融1次不能稳定。结论:阴性临床样本和保存液均是实验室内稀释法自配新型冠状病毒弱阳性质控品理想的基质,并且稳定性能满足临床日常检测需求。建议根据实验室实际条件选择,并结合所使用扩增试剂检测靶基因覆盖范围,确定最佳的使用条件,保证检测质量。

关键词： 新冠病毒   谱系划分   分子进化   适应性变异   流行趋势  

摘要： 由严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-Co V-2)引起的2019冠状病毒病(coronavirusdisease2019,COVID-19)大流行给人类生命安全和全球经济造成了巨大冲击。SARS-Co V-2基因组的快速变异引起了广泛关注,基因组中几乎每个位点都发生过单核苷酸变异(single nucleotidevariants,SNVs),其中刺突蛋白上的变异在病毒的适应性进化和传播中起着尤为关键的作用。本文综述了SARS-Co V-2及非人类动物中相关冠状病毒的系统发生关系,并深入分析了SARS-Co V-2的谱系划分以及关键氨基酸变异对病毒生物学特性的影响。此外,本文还概述了当前面临的挑战,并展望了深度突变扫描(deep mutational scanning,DMS)结合人工智能方法在预测新冠病毒变异株流行趋势中的广阔应用前景。

关键词： 新型冠状病毒感染   维生素C   甘草酸   网络药理学   作用机制  

摘要： 基于网络药理学技术,探索维生素C(VC)和甘草酸(GA)联合防治新型冠状病毒感染(COVID-19)的作用机制.通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、SuperPred、SEA Search Server(SEA)、DrugBank、Comparative Toxicogenomics Database(CTD)和SwissTargetPrediction数据库综合相关文献获得VC和GA功能靶标,以及Genecards等数据库获取COVID-19治疗靶点;构建“药物-疾病-靶点”网络,并进行基因本体论(GO)富集分析、京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析和蛋白互作网络分析(PPI);运用Autodock Vina软件进行分子对接.筛选出VC功能靶标667个、GA功能靶标154个、COVID-19靶点1 586个,VC与GA共有45个靶标与COVID-19致病靶点相关.关键靶点包括ALB、MAPK3、EGFR、IL2、MAPK1和CTLA4等. GO分析显示靶点富集于肽基丝氨酸磷酸化、蛋白结合等生物过程,KEGG分析提示靶点主要作用于5-羟色胺能突触通路.分子对接表明,VC和GA与SARS-CoV-2 3CL水解酶、ACE2等靶点具有较强结合能力.研究表明,VC和GA可能通过调节免疫系统的激活,在COVID-19预防和治疗中发挥协同作用.