关键词： 自复制型mRNA   新型冠状病毒   肿瘤疫苗   肿瘤免疫治疗   RNA表达调控  

摘要： 疫苗的接种不仅是人类应对突发传染性疾病最有效的策略,而且是肿瘤等疾病的重要免疫治疗方式。随着分子生物学技术与mRNA药物递送系统的发展,mRNA疫苗因其免疫保护效率高、安全性良好、制备周期短和体外无细胞条件大规模生产等特点,已成为疫苗研发的国际前沿热点。然而,传统m RNA表达时间较短,抗原表达量较低,需要多次且大剂量的免疫接种才能达到免疫保护效果。提高mRNA所编码抗原的表达量及表达持久性,将有助于增强m RNA疫苗的临床应用推广。自复制型mRNA（saRNA）衍生于甲病毒基因组,可显著增强宿主细胞内抗原的表达时间和表达丰度。此外,saRNA还可宿主细胞触发先天免疫反应系统,进而增强疫苗的免疫原性。基于上述的saRNA优势,本论文以减毒委内瑞拉马脑炎病毒TC-83毒株来源的sa RNA作为基因表达载体,构建纳米颗粒后应用于防治新型冠状病毒肺炎与肿瘤的研究。本论文研究内容主要分为以下三个部分: （1）将编码SARS-CoV-2 Spike蛋白RBD结构域的saRNA包载至LPR纳米颗粒中,制备为LPR-saRNA-RBD纳米疫苗。该疫苗可有效的将saRNA递送至引流淋巴结,诱导RBD在淋巴结中长时间表达,并激活淋巴结中先天免疫系统。LPR-saRNA-RBD纳米疫苗可诱导抗原特异性T细胞免疫反应,并促进CD8+T细胞的分化;促进淋巴结中生发中心的形成,进而诱导Anti-RBD IgG抗体的生成。接种LPR-saRNA-RBD纳米疫苗可下调SARS-CoV-2在小鼠肺部的感染和复制能力,并降低病毒感染导致的小鼠肺部炎症及病理损伤情况。为进一步增强saRNA的表达效率,我们在非结构蛋白区域不同位点引入突变,并筛选出可增强目的基因表达的非结构蛋白ns P1GGAC-nsP2AT突变组合。以该非结构蛋白突变组合的saRNA为RBD表达载体,并包载至本实验室开发的高效率递送载体LNP纳米颗粒中制备为LNP-sa RNA-RBD纳米疫苗。基于该疫苗的表达和转染优势,LNP-saRNA-RBD接种后诱导产生的Anti-RBD IgG和SARS-CoV-2假病毒中和抗体滴度更高,并且可以更为显著的抑制SARS-CoV-2在小鼠肺部的感染、复制以及感染性病毒颗粒的生成,从而显著减缓小鼠肺部炎症损伤情况,有效预防因病毒感染导致的小鼠体重下降。 （2）在宫颈癌小鼠模型中,将表达HPV16 E7或GM-CSF-HPV16 E7融合序列的saRNA包载至LPR纳米颗粒后进行肌肉注射。实验结果显示,LPR-saRNA-GM-CSF-E7纳米疫苗可显著促进抗原提呈细胞向引流淋巴结浸润,并激活淋巴结中先天免疫相关信号通路;增强肿瘤组织中Th1类型的细胞因子表达,并促进脾脏与外周血中T细胞的效应功能;诱导肿瘤相关巨噬细胞极化至M1表型,且下调调节性T细胞和骨髓来源的抑制性细胞;延缓小鼠肿瘤生长,进而提升小鼠生存期。在黑色素瘤小鼠模型中,分别将表达具有免疫调节作用的细胞因子IL-12或IL-15的sa RNA包载至LPR纳米颗粒后向小鼠肿瘤内注射。LPR-saRNA纳米颗粒可诱导IL-12和IL-15在肿瘤组织中表达;激活肿瘤组织与淋巴结先天免疫相关信号通路,进而诱导免疫细胞浸润;促进肿瘤组织中T细胞和NK活化与增殖,增强效应T细胞功能;抑制调节性T细胞和骨髓来源的抑制性细胞,并且诱导肿瘤相关巨噬细胞向M1表型极化。因此,该LPR-saRNA纳米颗粒可抑制小鼠肿瘤生长,延长荷瘤小鼠生存期。 （3）为探究saRNA药物表达的可控化,我们将不稳定结构域、L7Ae蛋白和K-turn基序等作为调控原件,构建sa RNA表达基因电路。实验结果显示,小分子抗菌药物甲氧苄啶可作为开关,在saRNA-DD-Luciferase结构中“开启”luciferase表达;在saRNA-DD-L7Ae-2x K-turn-Luciferase结构中“关闭”luciferase表达。

关键词： 新型冠状病毒感染   描述性研究   重症肺炎   肺纤维化   危险因素  

摘要： 背景 自2019年12月始全球暴发了严重急性呼吸系统综合症冠状病毒-2（SARS coronavirus-2,SARS-CoV-2）引起的肺炎大流行,对全球卫生系统带来了极大负担。SARS-CoV-2与严重急性呼吸综合征冠状病毒（SARS coronavirus,SARS-CoV）和中东呼吸综合征冠状病毒（MERS coronavirus,MERS-CoV）基因序列高度同源,都会导致严重的呼吸系统症状。该病毒感染的患者和无症状感染者是主要传染源,通过飞沫、密切接触等方式进行传播。2020年1月12日,由该病毒引起的疾病已经被世界卫生组织（World Health Organization,WHO）正式命名为新型冠状病毒感染（Coronavirus disease 2019,COVID-19）。目前,由SARS-CoV-2感染引起的国内的COVID-19大面积爆发已经得到控制,但局部小范围流行及散发病例仍不断出现,并且很多患者疾病后期出现了肺纤维化。2003年SARS流行期间有258名SARS患者在北京小汤山医院经治疗好转出院,其中51名患者影像学出现肺纤维化征象;后续随访1年仍有23.7%的患者遗留肺弥散功能障碍,27.8%的患者在胸部检查结果中存在明显的肺间质改变。对于COVID-19痊愈后出现的肺纤维化的临床认识有限,并且如何规范管理也是临床面临的问题,需要我们从类似疾病中寻找共同的临床规律,继而开展临床研究,探索COVID-19后肺纤维化的影响因素。 目的 1、分析武汉火神山医院和空军军医大学西京医院收治的COVID-19患者临床流行病学特征及不同病毒株的临床症状,为公共卫生决策和临床诊疗中早期干预提供参考证据; 2、分析重型与危重型COVID-19患者不良预后的风险因素,为COVID-19患者改善预后措施的制定提供参考依据; 3、分析导致COVID-19患者炎症后肺纤维化（Postinflammatory pulmonary fibrosis,PPF）的危险因素,为新型冠状病毒感染后肺纤维化的预防和诊疗提供决策参考依据。 方法 1、以武汉火神山医院2020年2月至2020年4月和空军军医大学西京医院2022年12月至2023年1月收治的COVID-19患者为研究对象,火神山医院收治的COVID-19患者1337名,西京医院收治的COVID-19患者1084名,统计两组患者病例资料,描述性分析患病人群性别、年龄等流行病学特征,采用X2检验、非参数检验分析两组患者一般情况差异。 2、以武汉火神山医院收治的重症COVID-19患者为研究对象,按照不同治疗结局分为治愈组和死亡组。将一般情况、实验室检查结果、治疗情况作为暴露因素,采用X2检验、非参数检验、多元Logistic回归分析方法寻找重症COVID-19不良预后的风险因素。 3、以武汉火神山医院收治的出现肺纤维化的COVID-19患者为研究对象,按照COVID-19患者是否形成肺纤维化分为纤维化组和无纤维化组,以患者治疗结束前胸部CT是否有肺纤维化作为判断依据,采用多元Logistic回归分析方法寻找COVID-19患者PPF的危险因素。 结果 1、火神山医院收治患者1337名,人群发病高峰在2020年1月份。男性654例,占48.9%,女性683例,占51.1%。年龄呈左偏态分布,年龄构成中,主要受累人群是中老年,45岁～60岁占比达到了31.7%,60岁以上老年人占比达到了49.0%。发热（994例,占74.3%）、咳嗽（907例,占67.8%）、乏力（737例,占55.1%）为火神山医院患者的主要症状。西京医院收治患者1084名,男性669例,占61.7%,女性415例,占38.3%。年龄呈左偏态分布,西京医院COVID-19患者构成中,45岁～60岁占比达到了15.9%,60岁以上老年人占比达到了71.8%。发热（796例,占73.4%）、咳嗽（748例,占69.0%）为西京医院COVID-19患者的主要症状。两组资料进一步比较,结果显示在年龄构成（P<0.001）、分型（P<0.001）、乏力（P<0.001）、鼻塞（P=0.002）、流涕（P<0.001）症状上差异有统计学意义（P<0.05）;在发热（P=0.642）、咳嗽（P=0.568）症状方面差异无统计学意义。 2、对治愈组和死亡组患者一般资料、检查结果和治疗情况进行单因素分析,结果显示年龄、性别、体温、呼吸频率、平均动脉压、高血压病史、糖尿病史、冠心病史、慢性肾脏病史、白细胞计数、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、中性粒细胞计数/淋巴细胞计数比值、单核细胞计数、血小板计数、乳酸脱氢酶、C反应蛋白、白蛋白、谷草转氨酶、肌酐、D-二聚体、APTT、转入ICU、中药治疗、糖皮质激素治疗方

关键词： 新型冠状病毒感染后长期症状   新冠康复   湿毒疫   阳气耗损   津血亏虚   平调五脏   扶正系列方   张忠德  

摘要： 新型冠状病毒感染进入恢复期后，常会出现多个系统的症状，称之为新型冠状病毒感染后长期症状，中医对其辨治有独特的优势。张忠德教授认为，新型冠状病毒感染属于中医学“湿毒疫”范畴，新冠感染进入恢复期，所感湿毒之邪可使脏腑气血阴阳处于失调状态，出现阳气耗损或津血亏虚，湿浊困阻气机、入络成瘀为引起新型冠状病毒感染后长期症状的关键；提出其治疗应以平调五脏气血阴阳为原则，采用运化湿毒痰浊、理气活血化瘀之法治疗。根据五脏气血津液阴阳之盛衰，辨证分型选用“扶正系列方”：元气亏虚证可选扶正升白方；肺脾肾虚证可用扶正益肺方；肝气郁结、心脾两虚证可选扶正安神方。临证时，张忠德教授针对湿毒浊气留滞部位选择相应的药物进行加减，并重视脾胃在整个治疗过程中的作用，注意顾护脾胃，以促进新型冠状病毒感染后患者的康复，提高其生活质量。

关键词： 血清学检测   密切接触者   医务人员   健康人群  

摘要： 目的了解宁夏地区2020年新型冠状病毒感染者血清抗体情况及变化趋势,探讨密切接触者、医务人员和健康人群中血清学检测的影响因素。 方法采用横断面研究设计调查四类人群的血清抗体水平。新冠感染者的相关资料通过―中国疾病预防控制信息系统应用门户‖收集。血液采集按照发病日期计算,分别在发病1个月内、3个月和6个月采集血标本。密切接触者、医务人员和健康人群,使用统一设计的调查问卷通过面对面与研究对象进行问卷调查,同时采集一次血标本。利用化学发光法、胶体金法和酶联免疫法分别进行血清学检测。影响因素分析采用Logistic回归和Poisson回归,此外还利用限制性立方样条探讨了年龄和检测结果的非线性关系。在健康人群和密切接触者中,采用潜在类别分析以个体为中心,综合评估个人卫生和防护习惯与检测结果是否相关。 结果新冠病毒血清学检测结果中,随着病程时间延长,感染者血液中的抗Ig G抗体呈明显下降趋势。在密切接触者、医务人员和健康人群中属酶联免疫法检出率最高。影响因素分析时,在密切接触者中,酶联免疫法检测结果的分析表明随着年龄的增长,检测出阳性结果的风险可能会增加,和新冠感染者接触越频繁也会增加阳性结果的风险,而回家后先洗手会降低阳性风险。胶体金法检测的因素分析中也得出了同样的结果。此外,和新冠感染者接触的越不频繁且接触时做了防护会减小化学发光法Ig G检测阳性结果的可能,化学发光法Ig M检测的分析中也得出了同样的结论。医务人员中,近期患肺炎可能是化学发光法Ig M检测结果为阳性的危险因素。健康人群中,酶联免疫法检测的多因素分析表明随着年龄的增长,出现阳性检测结果的风险会增加。 结论1.新冠感染者血清学检测结果因检测方法而异。2.手部卫生可能是密切接触者血清阳性的重要影响因素。3.密切接触者、医务人员和健康人群中血清学检测结果影响因素不尽相同。

摘要： 新型冠状病毒(新冠病毒)感染与急性肾损伤(AKI)的高发病率相关。尽管已有报道称新冠病毒相关AKI后的前几个月肾功能迅速下降, 但新冠病毒相关AKI与肾功能的长期关联尚不明确。近期美国学者进行了一项研究, 旨在评估新冠病毒相关AKI患者的长期肾脏功能。该试验是一项在大型医院系统中使用电子健康记录数据进行的回顾性纵向多中心队列研究, 研究对象为发生AKI和新冠病毒感染或其他疾病的成人住院患者。纳入的患者在新冠病毒大流行期间(2020年3月至2022年6月)入院, 接受了SARS-CoV-2筛查, 发生AKI并存活至出院;或者在新冠病毒大流行前5年内(2016年10月至2020年1月)入院, 有甲型流感或乙型流感阳性检测结果, 发生AKI并存活至出院。患者在出院后最长随访2年, 数据分析时间为2022年12月至2023年11月。主要结局为主要肾脏不良事件〔MAKE, 其定义为死亡和肾功能恶化的综合结果, 即预计肾小球滤过率(eGFR)与出院eGFR相比下降≥25%, 或需要透析的肾衰竭〕, 并进行多变量事件时间分析, 以比较新冠病毒相关AKI患者与同一期间因其他疾病入院的AKI患者之间的MAKE。为了进一步比较, 还评估了流感相关历史队列患者的这一结果。结果显示, 研究队列包括9?624例住院患者, 平均年龄为(69.0±15.7)岁;4?955例(51.5%)为女性;包括987例新冠病毒相关AKI患者, 276例流感相关AKI患者和8?361例其他疾病相关AKI患者。与其他两组相比, 新冠病毒相关AKI患者年龄略小, 基线eGFR更高, 基线合并症评分更差, 疾病严重程度标志更高, 住院时间更长;与其他AKI组相比, 新冠病毒相关AKI组MAKE发生率较低〔调整后风险比(aHR)=0.67, 95%可信区间(95%CI)为0.59～0.75〕, 这主要是由于全因病死率较低(aHR=0.31, 95%CI为0.24～0.39)和肾功能恶化率较低(aHR=0.78, 95%CI为0.69～0.88)。研究人员据此得出结论:相较于其他疾病相关的AKI患者, 新冠病毒相关AKI住院幸存患者MAKE发生率、长期肾功能恶化率以及病死率均较低。

关键词： 慢性心衰   新型冠状病毒   中医证型   相关性   差异性  

摘要： 目的:新型冠状病毒在不同中医证型慢性心力衰竭患者中可能会对心功能各项相关指标产生差异,观察并分析这些差异,可以探讨新型冠状病毒对不同中医证型慢性心力衰竭患者的影响,并进一步阐明新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID19)和慢性心力衰的中医证型相关性,从而提供更多临床研究数据,辅助临床医师进行辨证施治,提升治疗效果。 方法:本研究旨在调查江西中医药大学附属医院81位慢性心衰住院患者的相关数据,这些患者在感染新型冠状病毒前后均有住院经历。研究对象包括患者的症状、病史和基本资料。研究将慢性心衰患者根据中医证型划分为不同组别,如气阴两虚、气虚血瘀、血瘀阻滞、痰湿阻滞和阳虚水泛等。采集相关的左心超声心动图指标,并建立包含心功能等级和生化指标数据的EXCEL数据库,使用SPSS27.1进行数据分析,结合Graph Pad Prism8.0.2进行图表制作。通过深入研究新冠病毒疫情和慢性心衰中中医证型之间的关系,旨在为受新冠病毒感染的慢性心衰患者提供更准确的诊疗信息和方法。 结果: 1.感染了新型冠状病毒的慢性心衰患者中男性患者较多,其多数吸烟且高血压、糖尿病、冠心病、慢性阻塞性肺炎为主要合并病。 2.不同中医证型中阳虚水泛型的患者占比最高,为37%,其次是痰湿阻滞型,占比为21%,血瘀阻滞型、气虚血瘀型、气阴两虚型和的占比分别为19.8%、12.3%和9.9%。 3.感染前心功能Ⅱ级占比61.72%,Ⅲ级占比31.48%,Ⅳ级占比8.64%;感染后,Ⅱ级占比55.55%,Ⅲ级占比29.62%,Ⅳ级占比14.81%。 4.气虚血瘀证型、气阴两虚证型、痰湿阻滞证型、血瘀阻滞证型、阳虚水泛证型患者中,感染新冠病毒前后的BNP、CREA、CRP、GGT、LDL指标升高并且符合T检验的P<0.05的标准,具有统计学意义,HDL、LAD、LVEDD这些指标的变化不具备统计学意义。 5.感染新冠病毒后,不同中医证型的BNP和CRP指标具有显著差异,它们对应的P<0.05。而CREA、GGT、LAD、LVEDD、HDL、LDL这些指标在不同中医证型之间的差异不具备统计学意义,其对应的P>0.05 结论: 1.不同中医证型按比例从大到小排列为中阳虚水泛型、痰湿阻滞型、血瘀阻滞型、气虚血瘀型、气阴两虚型。 2.患有5种中医证型的患者,感染新冠病毒后BNP、CREA、CRP、GGT、LDL指标均显著增高,而HDL、LAD、LVEDD变化无统计学意义。 3.感染新冠病毒后,不同中医证型的BNP和CRP指标存在显著差异,而CREA、GGT、LAD、LVEDD、HDL、LDL之间的差异不显著。

关键词： 新冠后遗症   持续症状   脏腑   疲劳评估量表  

摘要： 目的:了解新冠感染患者出院后不同阶段症状变化及在各系统分布情况,结合中医在预后和康复方面独特优势,为患者恢复期的治疗及预后的改善提供参考。 方法:本研究纳入2022年3月至5月在长春中医药大学附属医院、通源方舱及长春市传染病医院确诊新冠病毒感染患者,在其出院后第6个月、第12个月、第18个月进行电话随访。共随访2990例,随访成功1975例,无症状1645例,有症状330例,第12个月随访再感染518例。将1975例患者全部纳入,同时在第18个月对其中42例进行临床研究,构建数据库,运用统计学方法分析。 结果: 1、男性1060例,女性915例。报告女性后遗症状多于男性,在心悸、气短/呼吸困难、乏力/疲劳等症状有统计学意义(P<0.05)。老年组(>60岁)与青年、中年组相比,在失眠、咳嗽等症状具有统计学意义(P<0.05)。有无吸烟比较在失眠、焦虑、乏力/疲劳等症状差异有统计学意义(P<0.05)。有无基础病史分析在心悸、失眠、焦虑等症状差异有统计学意义(P<0.05)。 2、第12个月随访再感染例数为518例,占比26.23%。年龄与再感染分析中青年组(<45岁)复阳比例最高(P<0.05)。三次随访有症状分别为330例、278例和245例,与总随访人数比较占比分别为16.71%、14.08%和12.41%。乏力/疲劳例数占比例最大为171例;其次为气短/呼吸困难和咳嗽,例数分别为91例和84例。三次随访症状总个数分别为909个、719个和592个。随访症状对比中各症状发生率都有所下降,乏力/疲劳由第6个月的8.66%降到第18个月的6.99%;气短/呼吸困难由4.61%降到3.49%;咳嗽由4.25%降到1.77%。 3、量表、理化检查、肺CT、肺功能及6分钟步行试验结果均在正常范围内,少数患者存在异常结果。结果异常患者与随访后遗症状相符。在院与第18个月随访21名患者理化检查结果经分析淋巴细胞P<0.05,但由于研究发现以上各项指标总体中位数均在正常范围内,无临床意义。 结论: 1、新冠后遗症患者存在症状随时间的推移逐渐下降,但在出院后第18个月存在症状所占比例仍高达12.41%。 2、新冠后遗症患者症状分布广泛,遍布各个系统,最常见的症状为乏力/疲劳、气短/呼吸困难和咳嗽。 3、新冠后遗症患者女性多于男性,年龄上以高龄人群为主。患者吸烟史和基础病史也是新冠后遗症的高发因素。 4、量表、理化指标、肺CT、肺功能和六分钟步行试验结果大部分为正常,但患者仍存在新冠后遗症状。结果异常患者在心理方面、运动能力和生活质量存在一定程度的损害。我们应持续关注,充分发挥中医药在治疗和预后方面的优势。

关键词： 人类免疫缺陷病毒   非核苷类逆转录酶抑制剂   新型冠状病毒   木瓜样蛋白酶抑制剂   抗病毒药物研究  

摘要： 病毒感染对人类健康构成巨大威胁,每年导致数百万人死亡。特别是以人类免疫缺陷病毒(HIV-1)和新型冠状病毒(SARS-CoV-2)为代表的RNA病毒,由于它们的聚合酶校正功能缺失或不足,病毒基因组突变率高,极易发生突变对现有药物产生耐药。因此,研发新型高效抗耐药的抗HIV-1和SARS-CoV-2药物是目前抗病毒药物研究的热点。本论文针对HIV-1和SARS-CoV-2临床用药产生的耐药性问题,分别以在病毒复制周期中发挥重要作用的HIV-1逆转录酶(RT)以及SARS-CoV-2木瓜样蛋白酶(PLpro)为靶标,采用结构生物学导向的合理药物设计,开展了以下三方面的工作: (1)基于“四点药效团”模型的新型HIV-1 NNRTIs的发现 HIV-1属于RNA病毒中的逆转录病毒,必须依靠RT将基因组RNA逆转录为双链DNA才能完成复制过程,因此HIV-1 RT是抗艾滋病药物设计的理想靶标。其中,非核苷类逆转录酶抑制剂(NNRTIs)因具有高效、低毒的优点,是艾滋病高效逆转录疗法(HAART)的重要组成部分,但该类抑制剂在临床使用中均不可避免的出现了耐药性问题。因此,亟需研发新一代具有高效抗耐药性的NNRTIs候选药物。 基于二芳基嘧啶(DAPY)类NNRTIs与HIV-1 RT结合的“四点药效团”模型,以课题组前期发现的抗HIV-1候选药物K-5a2为先导,针对其抗HIV-1双突变株K103N/Y181C(RES056)活性以及药代动力学性质不佳的问题,基于K-5a2/RT共晶结构,在其中心嘧啶环C5位引入结构多样性取代基占据可容纳区域Ⅱ,设计并合成了 IA系列18个化合物,以提高化合物与RT的亲和力,进而提高抗病毒活性和抗耐药性。 在MT-4细胞中采用MTT法测试了目标化合物的体外抗HIV-1活性。结果表明,IA系列化合物对HIV-1野生株和突变株均具有良好的活性。其中,化合物IA-12c活性最优,对HIV-1野生株及突变株的EC50值为3.75-24.4 nM,优于或与上市药物依曲韦林相当(ETR,EC50=2.80-37.6 nM)。特别是对双突变株 RES056,IA-12c(EC50=24.4nM)的活性超过 ETR(EC50=37.6nM)和 K-5a2(EC50=30.6nM)。IA-12c/HIV-1RT共晶结构显示,新引入的5-位吡啶取代基伸入可容纳区域Ⅱ,吡啶氮原子通过水分子介导的氢键与I180、T165、Q182、M184形成多重氢键,其中M184是RT催化位点的关键氨基酸,该氢键对于维持化合物的活性具有重要作用;此外,左翼苯环4-位氰基通过水桥与Y188和L228形成额外氢键,这些新形成的氢键网络显著提高了 IA-12c的抗耐药性。然而,体内成药性评价发现,虽然IA-12c毒性较低、安全性良好,但其口服生物利用度仅为15.3%,仍有进一步提升的空间。 为进一步提高IA-12c的抗耐药性和成药性质,IB系列将IA-12c左翼氰基替换为氰基乙烯基,增强与保守型氨基酸W229的疏水作用;同时采用生物电子等排体策略对5-位吡啶环进行多样性结构替换,设计合成了 36个结构全新的化合物。IB系列化合物对野生型HIV-1的EC50值均小于10 nM,对突变株活性较IA系列化合物进一步提升。其中,5-位嘧啶取代衍生物IB-9b活性尤为突出,EC50值分别为4.95nM(ⅢB)、3.43nM(L100I)、4.77nM(K103N)、5.88nM(Y181C)、15.3nM(Y188L)、9.49nM(E138K)、11.8nM(F227L/V106A)、10.1 nM(RES056)。IB-9b 对双突变株 RES056 活性明显提高,分别是K-5a2和ETR的3倍和5.2倍。体外HIV-1 RT抑制实验显示,系列I化合物具有亚微摩尔的抑酶活性,趋势与细胞水平抗病毒活性一致,证明其作用靶点为HIV-1RT。初步成药性评价发现,IB-9b对常见的CYP酶亚型具有低的抑制活性(IC50>10μM);IB-9b在大鼠体内具有良好的药代动力学性质,口服生物利用度为31.8%,是IA-12c的2倍;同时,IB-9b在小鼠体内表现出良好的安全性,LD50大于2000 mg/kg。因此,IB-9b作为口服抗艾滋病药物,具有广阔的开发前景。 (2)基于晶体结构的新型SARS-CoV-2PLpro共价抑制剂的发现 直至今日,SARS-CoV-2仍严重威胁着人类的生命健康。SARS-CoV-2属于单正链RNA病毒,容易发生突变导致耐药的产生,目前已发现多种对上市药物耐药的病毒株,因此急需开发具有新机制、新靶点的新冠病毒治疗药物。SARS-CoV-2 PLpro是病毒复制过程中的关键蛋白酶,不仅参与病毒多聚蛋白的剪切成熟,还抑制宿