关键词： 心悸的病因病机   治则治法   大补心汤   新冠肺炎恢复后   徐江红  

摘要： 目的：总结徐江红教授应用《辅行诀脏腑用药法要》中的大补心汤治疗新冠肺炎恢复后心悸患者的疗效经验。方法：通过临床跟诊抄方，收集徐江红教授用“温阳行气，开郁化滞”法治疗胸阳不振，痰瘀阻络型心悸的病案，从中选取短期疗效显著的医案一则，详细摘录并加以按评。结果：对于心悸，辨证为“胸阳不振，痰瘀阻络”证型的，通过“温阳行气，开郁化滞”法治疗获愈。结论：徐江红教授应用大补心汤临证经验独特，疗效显著，值得借鉴与临床应用。

关键词： 新型冠状病毒肺炎   中医证型   心肌损伤   logistic回归分析  

摘要： 目的:观察并分析新型冠状病毒感染患者的各项临床相关资料以及心脏超声指标LVEF、LVESD、LVEDD以及心肌损伤生化指标CK-MB、cTnI、cTnT、LDH,探讨新型冠状病毒对于不同中医证型患者的影响以及相关心肌损伤与不同证型的分布特点,阐明其内在的病因病机,进而为新型冠状病毒感染患者相关心肌损伤的干预提供有效的参考信息,提高临床诊疗的疗效。 方法: 1.选取2022年12月至2023年2月江西中医药大学附属医院确诊的152例COVID-19感染患者临床资料开展回顾性研究,收集患者基本信息、中医证型及心脏彩超及心肌损伤相关生化指标等临床数据,比较不同证型患者各指标表达水平有无差异。然后将患者根据是否存在COVID-19相关心肌损伤分为损伤组和对照组,开展单因素分析和多因素logistic回归分析,探讨COVID-19相关心肌损伤影响因素。 2.将全部调查结果录入Excel建立数据库,然后导入IBM公司SPSS22.0软件进行分析,如果统计资料中属于计数资料的数据,则用[n（%）]表示,两组间的两两比较,则可以使用卡方（χ2）检验或费希尔（Fisher）精确概率法,多重假设检验采用Bonferroni法校正检验水准,计量资料采用Kolmogorov-Smirnov法进行正态性检验,结果符合正态分布者采用（±s）表示,两组资料间的两两比较可以采用独立样本t检验,多组比较采用单因素方差分析,并采用LSD-t检验进行两两比较,非正态分布者采用四分位数表示,采用非参数检验进行统计分析,采用多因素logistic回归分析研究COVID-19相关心肌损伤影响因素,统计学结果以P<0.05为差异有统计学意义。 结果: 1.不同性别、年龄、吸烟史、饮酒史、基础疾病史和中医证型COVID-19患者LVESD、LVEDD和LVEF比较差异均无统计学意义（P>0.05）。 2.不同性别、吸烟史、饮酒史、糖尿病史、高脂血症病史和超重/肥胖病史COVID-19患者CK-MB、cTnI、cTnT、LDH比较差异均无统计学意义（P>0.05）。 3.年龄≥60岁患者CK-MB、cTnI、cTnT、LDH高于<60岁患者,差异有统计学意义（P<0.05）;合并高血压患者CK-MB、cTnI、cTnT、LDH高于非高血压患者,差异有统计学意义（P<0.05）。 4.各个中医证型中,寒湿郁肺证、湿热蕴肺证、湿毒郁肺证、寒湿阻肺证、疫毒夹燥证、疫毒闭肺证和气营两燔证患者CK-MB、cTnI、cTnT、LDH整体呈上升趋势。相同临床分型两两比较显示湿热蕴肺证CK-MB、cTnI、cTnT、LDH高于寒湿郁肺证,差异有统计学意义（P<0.05）。 5.以cTnI或cTnT升高超过第99百分位上限为COVID-19相关心肌损伤进行诊断显示152例COVID-19患者中39例存在心肌损伤,占比25.66%,损伤组和对照组年龄、高血压及中医证型比较差异有统计学意义（P<0.05）;多因素logistic回归分析显示,高血压（OR=8.654,95%CI:2.544～29.443）和气营两燔证（OR=17.006,95%CI:2.205～131.159）与COVID-19相关心肌损伤风险升高关系密切。 结论: COVID-19患者的LVEF、LVESD和LVEDD等超声检查结果无明显异常;各中医证型COVID-19患者CK-MB、cTnI、cTnT、LDH等心肌损伤标志物表达水平均呈上升趋势,且随着病情进展而升高,其中轻型患者以湿热蕴肺证各生化指标升高幅度较为明显,重型患者中气营两燔证可能导致心肌损伤风险升高,两者均与湿热病邪侵袭密切相关,需在临床治疗中重点从湿热之邪入手;并且注意高危患者的心肌损伤筛查,警惕COVID-19治疗相关的心血管副作用,及时阻隔其损害发生。

关键词： 新型冠状病毒肺炎   N-乙酰半胱氨酸   抗病毒作用   临床疗效  

摘要： 目的：　　探讨N-乙酰半胱氨酸治疗中型和重型COVID-19患者的临床疗效。　　方法：　　对2022年12月至2023年1月收治于南昌大学第一附属医院呼吸与危重症医学科的中型和重型的 COVID-19 患者进行回顾性分析。按实际治疗方案分为NAC治疗组和对照组，比较两组患者的一般资料、实验室检查结果、用药情况、影像学检查变化、住院时间、机械通气发生率、转入ICU发生率和死亡率。　　结果：　　共纳入中型和重型COVID-19患者131例，其中N-乙酰半胱氨酸（NAC）治疗组 68 例，对照组 63 例。两组的一般资料、入院第一天的实验室检查、用药情况差异无统计学意义（P ＞0.05），具有良好的可比性。两组患者治疗前后白细胞计数、淋巴细胞计数差异无统计学意义（P ＞0.05），治疗后，两组C反应蛋白较治疗前显著降低（P ＜0.05），血小板较治疗前显著升高（P ＜0.05）， NAC治疗组C反应蛋白和血小板计数显著低于对照组（P ＜0.05）;NAC治疗组入院第7天的胸部CT肺部阴影相较入院第1天吸收面积大于50%的比例显著高于对照组（P ＜0.05）;治疗后，两组白细胞、淋巴细胞、住院时间、机械通气发生率、转入ICU发生率和死亡率差异无统计学意义（P ＞0.05）。　　结论：　　NAC 对 COVID-19 具有一定的辅助治疗作用，能够加快中型和重型COVID-19 患者肺部阴影的吸收，降低 CRP 水平，但在缩短住院时间、预防疾病进展和减少转入ICU、气管插管和死亡的风险上作用不明显。

摘要： 从新型冠状病毒(新冠病毒)感染大流行的早期开始, 有研究表明细胞因子失调和补体激活在严重疾病中的作用。近期英国学者在TACTIC-R试验中评估了巴瑞替尼〔Janus激酶1(JAK1)和JAK2的抑制剂〕与雷夫利珠单抗(补体C5激活的单克隆抑制剂)作为标准疗法辅助治疗新冠病毒感染住院成人患者的疗效和安全性。TACTIC-R试验是一项4期随机、平行、开放标签的平台试验, 在英国进行, 被紧急指定为公共卫生项目, 旨在评估将免疫抑制剂重新用于治疗重症新冠病毒感染的潜力, 根据其风险评分进行分层。研究纳入来自英国22家医院新冠病毒感染的成人患者(年龄≥18岁)。依据风险评分, 将入住重症医学科或死亡风险为40%的患者按1∶1∶1的比例随机分配到单纯标准治疗组、标准治疗联合巴瑞替尼组(巴瑞替尼组)及标准治疗联合雷夫利珠单抗组(雷夫利珠单抗组)。综合主要结局为从随机分组到发生死亡、有创机械通气、体外膜肺氧合、心血管器官支持或肾衰竭的时间(时间≤14 d)。当每个研究组截至第14天有125例患者数据集可供使用时, 即进行初步中期分析, 研究分析了纳入随机分组的所有患者。结果显示:2020年5月8日至2021年5月7日, 研究共纳入417例患者, 被随机分配到单纯标准治疗组145例, 巴瑞替尼组137例, 雷夫利珠单抗组135例。巴瑞替尼组137例患者中只有54例(39%)接受了最长14 d的治疗, 雷夫利珠单抗组135例患者中有132例(98%)接受了预期剂量。试验在初步中期分析后以无效为由停止。与单纯标准治疗组相比, 巴瑞替尼组达到复合主要终点的估计风险比(HR)为1.11, 95%可信区间(95%CI)为0.62～1.99;雷夫利珠单抗组达到复合主要终点的HR为1.53(95%CI为0.88～2.67)。单纯标准治疗组报告了45例严重不良事件(21例死亡), 巴瑞替尼组报告了57例(24例死亡), 雷夫利珠单抗组报告了60例(18例死亡)。研究人员据此得出结论:巴瑞替尼和雷夫利珠单抗均未能有效降低重症新冠病毒感染患者的疾病严重程度;辅助治疗与标准治疗之间的安全性相似;巴瑞替尼的短期给药可能是此项研究结果与其他研究结果之间存在差异的原因;靶向补体C5激活产物C5a的治疗潜力仍需要进一步评估。

关键词： 新型冠状病毒   Nsp13   CREB1   解旋酶   病毒复制  

摘要： 新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引起的新型冠状病毒感染(COVID-19)全球性爆发严重威胁了人类健康。尽管对于SARS-CoV-2已经有了广泛且深入的研究,但冠状病毒与宿主相互作用机制的进一步阐明,以揭示病毒如何入侵宿主细胞、复制及传播是至关重要的。目前对抗新型冠状病毒药物的研发主要集中于靶向病毒RNA聚合酶(RdRp)、蛋白酶(Mpro)等病毒复制的关键位点。但随着新型冠状病毒的持续感染及不断变异,有限的治疗方案导致部分抗病毒药物的效力在显著减弱,因此研发新的抗冠状病毒药物具有重要的公共卫生及社会意义。 2020年Gordon等人通过亲和纯化质谱(AP-MS)高通量筛选,发现了 332种能够与新型冠状病毒蛋白相互作用的宿主蛋白。其中我们关注到新型冠状病毒非结构蛋白13(non-structural protein 13,Nsp13)与宿主蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)之间可能存在相互作用,同时由于Nsp13作为新型冠状病毒复制过程中的关键酶,以及其高度保守的氨基酸序列,使其成为药物干预的有效靶点。基于这一发现,我们进一步进行了免疫共沉淀实验(Co-IP),确认Nsp13蛋白与宿主cAMP激活蛋白激酶催化亚基α(PRKACA)及其下游的环腺苷酸反应元件结合蛋白(Cyclic AMP-responsive element-binding protein 1,CREB1)均存在相互作。并通过免疫荧光实验,在感染了SARS-CoV-2的细胞及肺部组织切片中发现Nsp13与PRKACA及CREB1共定位于细胞质中。此外,通过Far western及点印记(dot blotting)等实验证明,宿主CREB1与病毒蛋白Nsp13的2A结构域之间存在直接相互作用。通过进一步的蛋白对接实验计算出其可能存在相互作用的氨基酸位点,并通过点突变实验证明,这些位点的突变会显著减弱Nsp13与CREB1的相互作用。上述实验均证实宿主CREB1与病毒蛋白Nsp13之间存在直接相互作用。 由于Nsp13的2A结构域对其解旋酶活性至关重要,因此我们利用基于荧光能量共振转移(Fluorescence resonance energy transfer,FRET)的实验方法对Nsp13的解旋酶活性进行了检测。实验结果显示,与Nsp13单独孵育相比,Nsp13与CREB1共同孵育后能够显著增强Nsp13的ATP酶及解旋酶活性。此外,虽然宿主PKA对Nsp13的活性没有直接的调控作用,但实验证明其对CREB1的磷酸化会显著增强CREB1对Nsp13解旋酶活性的促进作用。 鉴于Nsp13的解旋酶活性与冠状病毒的增殖密切相关,为此,本研究进一步探究了PKA-CREB1信号通路对冠状病毒增殖的影响。首先使用新型冠状病毒互补系统对病毒的增殖水平进行研究,该系统产生的病毒样颗粒可以在生物安全二级实验室中操作并模拟新型冠状病毒的生命周期。通过在细胞水平敲低或抑制宿主PRKACA和CREB1的表达水平及活性,我们观察到新型冠状病毒的增殖显著受到抑制。上述结果提示了冠状病毒利用宿主因子来促进自身增殖的策略,同时相较于宿主蛋白,病毒蛋白存在变异的可能性更高,因此为避免产生耐药毒株的风险,本研究靶向宿主因子,使用PKA及CREB1的特异性抑制剂来评价其抗病毒效果。在新型冠状病毒实毒感染实验中,使用PKA或CREB1活性的抑制剂(H89或666-15)处理A549-hACE2细胞后,对于早期分离株(WIV04)和奥密克戎株(Omicron)的感染均表现出显著的抗病毒效果。值得注意的是,相较于瑞德西韦(Remdesivir)的IC50 1.76μM,CREB1的抑制剂666-15表现出更佳的抗病毒效果,其IC50为732.9nM。 为了进一步研究该药物在动物水平对新型冠状病毒感染的抑制效果,本研究使用新型冠状病毒鼠适应株(C57MA14)感染小鼠进行实验。结果显示,使用药物666-15预给药后的小鼠感染后生存率显著上升,同时在小鼠的肺部组织切片中也发现其肺部炎性细胞浸润、血管出血、肺泡狭窄等病理现象也有显著的缓解,这一结果提示PKA-CREB1信号通路可能与新型冠状病毒的致病机制密切相关。 本研究证明了宿主CREB1与新型冠状病毒解旋酶Nsp13之间存在直接相互作用,并且阐明了新型冠状病毒利用宿主因子协助自身增殖的策略及机制,同时发现PKA及CREB1的抑制剂能够显著抑制SARS-CoV-2的增殖水平。综上,这项研究的结果解释了PKA-CREB1信号通路对新型冠状病毒增殖的重要影响,并且,由于解旋酶Nsp13在冠状病毒增殖中的重要作用,PKA-CREB1很有可能作为新的用于治疗冠状病毒感染的靶点,CREB1抑制剂666-15的有效性也在实验中得到了