关键词:
原发性胆汁性胆管炎
蛋白质组学
诊断
熊脱氧胆酸
生物标志物
原发性胆汁性胆管炎
干燥综合征
脂质组学
诊断
熊脱氧胆酸
生物标志物
原发性胆汁性胆管炎
固有淋巴细胞
熊脱氧胆酸
流式细胞术
生物标志物
原发性胆汁性胆管炎
抗线粒体抗体M2亚型
风险预测
健康体检
抗体
免疫反应
严重急性呼吸综合征冠状病毒2
原发性胆汁性胆管炎
新冠灭活疫苗
糖尿病
新型冠状病毒肺炎
严重急性呼吸综合征冠状病毒2
新冠疫苗
抗体
免疫反应
严重急性呼吸综合征冠状病毒2
2型糖尿病
新冠灭活疫苗
摘要:
目的:原发性胆汁性胆管炎(Primary biliary cholangitis,PBC)是一种以肝内胆管进行性损伤、非化脓性胆管炎以及肝内胆汁淤积为主要特征的自身免疫性肝脏疾病。临床上诊断PBC须同时满足血清碱性磷酸酶或谷氨酰转肽酶异常升高,以及抗线粒体抗体(Anti-mitochondrial antibody,AMA)或 AMA-M2 阳性。然而,部分PBC患者不能同时满足以上条件,所以需要挖掘用于PBC诊断的新型标志物。熊脱氧胆酸(Ursodeoxycholic acid,UDCA)是治疗PBC的一线药物,然而临床上约有40%的PBC患者对UDCA治疗不应答,早期发现UDCA治疗无效的PBC患者有助于尽早应用二线治疗方案改善其预后。本研究基于PBC患者的蛋白质组学分析,筛选可用于PBC患者诊断及反映UDCA治疗效果的蛋白质类生物标志物。方法:基于数据非依赖型采集质谱技术联合抗体芯片技术构建的高通量蛋白质组学检测平台,针对51例PBC患者与15例健康对照(Healthy controls,HCs)的血浆样本开展蛋白质组学分析。挖掘两组间差异蛋白,对其进行生物信息学分析、蛋白表达趋势分析、药物靶点分析以及与反映PBC活动性指标的相关性分析,从而发现具有PBC诊断及反映UDCA治疗效果的差异蛋白,并通过酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)在包含 129 例 PBC 患者、16 例干燥综合征患者、16例慢性乙型肝炎患者、8例自身免疫性肝炎患者以及31例HCs的独立验证队列中,对候选差异蛋白作为PBC标志物的性能进行分析。
结果:PBC患者与HCs之间,基于高通量蛋白质组学检测平台共筛选到361个差异蛋白。生物信息学分析结果显示,361个差异蛋白参与5个主要生物学过程类别,分别为免疫反应、细胞迁移、细胞间粘附作用、淋巴细胞活化调节以及细胞外调节蛋白激酶级联传导;通路富集分析显示,上调差异蛋白主要富集于细胞因子受体相互作用通路、病毒蛋白与细胞因子及其受体相互作用通路等炎症调控相关通路,下调蛋白主要富集于氮素代谢、维生素消化吸收等代谢相关通路。基于PBC患者的UDCA治疗状态进行差异蛋白表达趋势分析,可将361个差异蛋白分为4个聚类并进行通路富集分析,发现NF-kappa B信号通路中富集了多个蛋白在UDCA治疗不应答PBC患者中的表达水平显著高于UDCA治疗应答PBC患者。药物靶点分析结果显示,91个差异蛋白是疾病药物治疗的潜在靶点,其中13个差异蛋白可作为治疗自身免疫病的药物靶点,1 1个差异蛋白可作为治疗消化系统肿瘤的药物靶点。相关性分析显示,26个差异蛋白可同时与5种反映PBC疾病活动性的实验室检查指标具有显著相关性。最终选取了 10个候选差异蛋白进行ELISA验证,发现6个差异蛋白即多聚免疫球蛋白受体、细胞间黏附分子1、膜内氨酰氨基肽酶、血管细胞黏附因子1、转化生长因子-β诱导蛋白IG-H3(Transforming growth factor-beta-induced protein ig-h3,TGFBI)以及 CD163,均可作为 PBC 患者诊断及反映UDCA治疗效果的蛋白质类标志物,其中TGFBI从未在PBC中进行报道,该蛋白在PBC诊断及区分UDCA治疗应答与不应答PBC患者的曲线下面积值均为0.824。
结论:本研究利用高通量蛋白质组学检测平台描绘了 PBC患者血浆蛋白质组学特征,揭示了 PBC患者不同的UDCA治疗状态对其血浆蛋白质表达谱的影响,验证了 6个具有PBC诊断及反映UDCA治疗反应性标志物潜力的差异蛋白,其中TGFBI在PBC中首次报道,该蛋白在PBC发病机制中的作用值得进一步探索。
目的:脂质代谢异常在原发性胆汁性胆管炎(Primary biliary cholangitis,PBC)患者中普遍存在。干燥综合征(Sj(?)gren's syndrome,SS)是PBC患者最容易合并的自身免疫性肝外疾病,临床上大约有35%的PBC患者可合并SS。然而,这两种疾病的脂质特征尚未完全明确。因此,本研究通过对两种疾病的血浆脂质类代谢物变化进行分析,揭示两种疾病的血浆脂质代谢特征,筛选可用于PBC诊断及反映熊脱氧胆酸(Ursodeoxycholic acid,UDCA)治疗效果的脂质类标志物。
方法:基于超高效液相色谱联用高分辨质谱技术针对60例PBC患者、30例SS患者以及30例健康对照(Healthy control,HCs)的血浆样本进行非靶向脂质组学分析。通过正交偏最小二乘判别分析筛选PBC患者与HCs之间的、PBC患者与SS之间的差异脂质进行筛选,采用无监督的一致性聚类分析对PBC患者进行基于脂质组学数据的分型,利用相关性分