关键词： 突发公共卫生事件   应急准备能力   能力评估  

摘要： 新冠肺炎疫情是近二十年来在国内蔓延速度最快、危害最严重、影响最广泛的一次重大突发公共卫生事件。疫情发生后,理论和实践研究的关注重点从事后处置转为事前应急准备。2022年,国家应急管理部划分出四个应急准备领域并研制一批关键应急基础标准,深入推进应急准备提升强化,推进国家应急准备能力建设成为国家亟待解决且持续关注的关键问题。 本文选取F市应对新冠肺炎疫情为背景,以突发公共卫生事件应急准备能力为研究对象,引入应急管理理论、风险管理理论,对F市突发公共卫生事件应急准备能力进行评估,寻找F市在开展应急准备工作中的不足之处,提出F市应急准备能力的优化路径。运用文献分析法、德尔菲法等方式,选出4个一级指标和17个二级指标,从应急准备社会能力、应急准备文化能力、应急准备经济能力和应急准备韧性能力等维度上建立基层政府应对突发公共卫生事件应急准备能力的评估指标体系。基于F市应对新冠肺炎疫情应急准备工作的实施情况和应急准备能力的回溯性分析,对其应急准备能力进行实证评估。采用层次分析法结合专家打分的方法,依据评分结果分析F市在开展应急准备工作中的优势及薄弱点,发现目前F市在开展应急准备工作中主要存在应急人才队伍建设薄弱、群众风险意识低、应急预案编制实操性有限、应急物资储备保障不足、基础应急设施建设不完善等不足。鉴于以上提到的F市应急准备能力存在的短板,提出以下一系列提升F市应急准备能力的策略与建议:推动应急预案科学编制及动态管理、优化应急物资储备管理及多元化模式、构建专业应急人才队伍、完善基础韧性设施建设等。 通过上述建立的指标体系评估F市应急准备能力,顺应强化应急准备建设的时代要求,为地方政府应急准备能力评估提供深入和丰富的理论基础及依据,深入实证研究,旨在为F市及其它基层政府在提升应急准备能力工作方面提供切合实际的指导和借鉴。

关键词： 新型冠状病毒   周期性介孔有机硅   巨噬细胞诱导的C型凝集素   生发中心   细胞免疫  

摘要： 新型冠状病毒（Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2）感染引起的2019年冠状病毒疾病（COVID-19）大流行,对人类健康和公共安全造成了严重危害。疫苗接种是有效遏制疫情传播的重要措施之一。目前,已有多种形式的SARS-CoV-2疫苗获批上市并在全球广泛使用。然而,随着病毒的不断变异,包括亚单位疫苗在内的各种疫苗均无法有效预防病毒对机体的感染。因此,目前仍需要进一步提升现有疫苗的免疫原性以诱导机体产生更为高效、广谱和持久的免疫应答。佐剂作为亚单位疫苗的关键组分,能够帮助疫苗抗原诱导强大和持久的免疫应答。因此开发更为安全高效的新型佐剂是研发能有效预防感染的SARS-CoV-2疫苗的迫切需求。 课题组前期的研究发现周期性介孔有机硅（Periodic mesoporous organosilica,PMO）作为一种潜在的纳米佐剂可以通过直接激活B细胞帮助蛋白亚单位疫苗引起强效和持久的免疫应答。PMO在激活B细胞的同时上调其表面巨噬细胞诱导的C型凝集素受体（Macrophage-inducible C-type lectin,Mincle）表达。Mincle是参与固有免疫应答的模式识别受体之一,与其配体结合后使免疫细胞进一步活化,参与免疫反应过程。为了进一步增强B细胞的活化和新冠亚单位疫苗的免疫效果,本论文利用PMO具有介孔结构的特点,设计在纳米佐剂PMO的基础上携载Mincle配体TDB,并以新冠病毒表面刺突蛋白（Spike,S）受体结合区（Receptor binding domains,RBD）为免疫原,制备新型的纳米佐剂疫苗,并对其性质和体内激活的免疫应答水平进行系统的研究。 本论文首先对纳米佐剂PMO对Mincle配体TDB的载量进行了摸索,之后与RBD蛋白结合,制备成纳米佐剂疫苗PMO-TDB-RBD,并对其结构和粒径等性质进行了表征。随后,我们采用流式细胞术和实时荧光定量PCR方法在体外和体内分别评价了疫苗对B细胞和树突状细胞（Dendritic cells,DC）的激活能力,结果发现携载TDB后其通过激活Mincle信号通路,进一步增强B细胞活化,同时还增强了DC细胞的活化效果。通过体内抗原提呈细胞吞噬实验,我们发现PMO-TDB佐剂疫苗具有一定的淋巴结靶向性,并能够增加淋巴结中B细胞和DC细胞对抗原的吞噬促进抗原提呈。以上结果表明,纳米佐剂疫苗PMO-TDB-RBD能够通过激活Mincle信号通路同时增强对B细胞和DC细胞的激活水平。 在明确了纳米佐剂疫苗PMO-TDB-RBD对B细胞和DC细胞激活功能后,我们首先对小鼠进行了单次疫苗免疫,并检测了其对短期生发中心（Germinal center,GC）应答的影响。结果表明,相较于PMO-RBD,PMO-TDB-RBD能够进一步提升GC B细胞、滤泡辅助T细胞（Tfh）的激活水平,并降低淋巴结中调节性T细胞（Tregs）数量,进而促进短期GC应答。之后,我们对PMO-TDB-RBD进行了长期免疫评价,系统的分析了三次免疫后诱导机体产生的抗体水平和淋巴结中GC B细胞、Tfh细胞、Tregs和记忆B细胞的变化。同时,也对脾中CD4+T细胞和CD8+T细胞数量和激活水平进行了分析,并通过ELISPOT实验对小鼠T细胞响应进行了检测。结果表明,PMO-TDB-RBD三次免疫后能够显著提升生发中心应答,引起较强的体液免疫反应。同时其能引起较强的系统性CD4+T细胞和CD8+T细胞响应,并促进脾细胞中IFN-γ和IL-2分泌,显著提升了细胞免疫应答水平。总之,相较于PMO-RBD,优化后的纳米佐剂疫苗PMO-TDB-RBD在体内能够诱导更强的体液和细胞免疫应答。 综上所述,本论文在前期开发的纳米佐剂PMO的基础上,通过携载Mincle配体TDB进一步提升了新冠亚单位疫苗的免疫原性。研究证实PMO-TDB-RBD能够同时激活B细胞和DC细胞中Mincle信号通路,增强了B细胞和T细胞的响应,从而诱导机体产生更强的生发中心和系统性应答,进而产生强烈的体液和细胞免疫反应。本研究为PMO作为新型纳米佐剂的应用以及新冠病毒等病原体亚单位疫苗的设计与开发提供了基础和依据。

关键词： 新冠肺炎   阿兹夫定片   药理机制   临床疗效   安全性  

摘要： 目的：　　新型冠状病毒（SARS-CoV-2）于2019年底首次被发现，并随后造成全球范围大流行。其是一种RNA病毒，不仅能通过呼吸道造成肺组织损伤，还能传播到宿主的多个肺外器官，如肝脏、心脏、大脑等，造成全身多器官损伤。新型冠状病毒不仅传播能力强，还能在传播过程中发生基因突变和基因重组，这增加了其在体内复制能力、对疫苗的免疫逃逸能力以及人体的感染和再感染机率。因此，及时有效的抗病毒治疗是抑制病毒传播、防止感染者发展为严重疾病或死亡的最重要方案之一。　　尽管自新型冠状病毒疫情爆发以来，诸多防治药物问世，如单克隆抗体、中医药方剂、奈玛特韦俐托那韦（Paxlovid）、阿兹夫定片（Azvudine Tablets）等，然而尚无哪种药物有明确的有效性和安全性循证医学证据。甚至随着病毒的不断变异，早期可能有效的药物，在病毒变异后疗效大打折扣。虽然目前全世界对于新型冠状病毒引起的疫情放松警惕，但是该病毒并没有完全消失，而是依然在不断变异并传播。2024年1月世界卫生组织提出“X疾病”（未知的病原体或任何因变异而具备大流行潜力的已知病原体）可能导致“比新型冠状病毒大流行还要高20倍的死亡率”，不能排除新型冠状病毒不会成为“X疾病”的一个病原体。因此积累此次攻坚新型冠状病毒的预防和治疗经验，为日后可能再次出现的冠状病毒大流行防患于未然尤为重要。　　阿兹夫定片（Azvudine Tablets）是国内首个自主研发并获批用于治疗新型冠状病毒感染患者的口服小分子抗病毒药物，其不仅能抑制RNA依赖性RNA聚合酶（RdRp）,而且还能在胸腺中聚集，促进胸腺功能恢复，调节免疫。已有研究证明其能够缩短新型冠状病毒感染者的核酸转化阴性时间、住院时间、降低病毒载量、复合疾病进展结局和住院率，且无治疗相关不良事件或严重不良事件报告。但这些研究的样本量局限，并且是单中心研究，目前需要更大样本量的循证医学证据来进一步证明其有效性和安全性。　　本研究旨在探讨阿兹夫定片在新型冠状病毒感染住院患者中的有效性和安全性。因此，通过收集河南省九家医院的临床患者病历资料，建立了一个大样本量的多中心回顾性研究队列。通过比较使用阿兹夫定片治疗与未使用阿兹夫定片治疗的新型冠状病毒感染患者的数据，探究在真实世界中阿兹夫定片治疗新型冠状病毒感染住院患者的有效性和安全性。本研究结果为阿兹夫定片治疗新型冠状病毒感染者的临床应用提供了更有力的循证医学证据，为以后可能再次出现的冠状病毒大流行提供药物以及研究思路参考。　　方法：　　收集2022年12月5日至2023年1月31日期间河南省9家医院（郑州大学第一附属医院、河南省胸科医院、河南省传染病医院、光山县人民医院、郑州大学附属洛阳中心医院、商丘市立医院、安阳市第五人民医院、南阳市中心医院、封丘县人民医院）的新型冠状病毒（SARS-CoV-2）感染的住院患者，共32864例。剔除年龄低于18岁患者（1314例）以及接受其他抗病毒药物治疗患者（1607例）后，共29943例患者符合纳入及排除标准被纳入本回顾性队列研究，其中使用阿兹夫定片治疗的患者5838例，未使用任何抗病毒药物的常规治疗患者24105例。经过1∶1倾向评分匹配，使用阿兹夫定片治疗的患者5801例，为阿兹夫定组;未使用任何抗病毒药物的常规治疗患者5801例，为对照组。主要结局是全因死亡，次要结局是复合疾病进展（轻、中度患者进展为重症或危重症;重症患者进展为危重症（休克、需要机械通气或ICU监护）;发生死亡）。从确诊新型冠状病毒感染的日期，追踪患者到结局事件发生或至30天为止。　　采用Kaplan-Meier分析、Log-rank检验，探究与对照组相比，使用阿兹夫定片是否能降低新型冠状病毒感染住院患者的全因死亡和复合疾病进展累积发生率;亚组分析进一步探讨在不同基线特征的特定人群中，阿兹夫定片对全因死亡和复合疾病进展的影响。此外，为检验研究结果的稳健性，分别采用缩小人群法，logistic回归法以及平均值填充缺失数据法，重新对29943例患者进行1∶1倾向评分匹配，Kaplan-Meier分析、Log-rank检验对主要结局和次要结局进行分析。　　安全性结果根据不良事件的所有等级（不良事件≥3级）进行评估。所有不良事件均按照不良事件通用术语标准5.0（CTCAE5.0）定义。收集两组患者治疗后发生不良事件的数据，使用卡方检验比较阿兹夫定组与对照组之间不良事件发生率是否有统计学差异，进而探究阿兹夫定片治疗新型冠状病毒感染住院患者的安全性。　　结果：　　1.共纳入32864例新型冠状病毒感染的住院患者，其中使用阿兹夫定片治疗的患者5838例，未使用任何抗病毒药物的常规治疗患者24105例。经过1∶1倾向评分匹配后，阿兹夫定组与对照组各有5801例患者被纳入研究分析;2.主要结果:Kaplan