关键词： 新型冠状病毒感染急性咳嗽   中医   证素   聚类分析   关联分析  

摘要： 目的:总结新型冠状病毒感染急性咳嗽的中医证素分布特点,探讨证素与咳嗽特点的相关性,分析不同证素间的关联,归纳临床常见证型,为临床辨证论治提供参考依据。 方法:采用横断面调查的研究方法,选择2022年12月至2023年12月在北京中医药大学东直门医院门诊就诊的新型冠状病毒感染急性咳嗽患者为研究对象,通过制定新型冠状病毒感染急性咳嗽临床证素信息调查表,采集患者的基本信息、咳嗽相关症状以及中医四诊等信息,依据证候辨证素量表的分析方法,运用SPSS26.0软件与R语言软件进行统计分析,归纳总结本病的病位证素、病性证素的特点,分析证素与基线资料、咳嗽特点的相关性,并通过关联分析及聚类分析总结证素间的关联与临床的常见证型。 结果: 1 一般资料:共收集符合纳入标准的新型冠状病毒感染急性咳嗽患者220例,其中男性59例,占26.82%,女性161例,占73.18%。平均年龄为(32.5±11.7)岁,其中年龄<40岁的患者最多,占73.64%。男女患者在年龄分布上无明显差异。病程<7天的有197例,占比89.5%;7-14天有23例,占比10.5%。 2咳嗽发作特点:220例患者的VAS评分均值为4.1 ±2.2。220例患者中夜间咳嗽加重者最多,为104例,占38.81%;白天咳嗽加重者58例,占21.64%;晨起咳嗽加重者31例,占11.57%;午后咳嗽加重者17例,占6.34%;无咳嗽时间规律者57例,占21.27%。220例患者中,咳嗽无诱发因素者94例,占22.33%;有诱发因素者,其冷热空气诱发加重者最多,为85例,占20.19%;说话过多诱发者63例,占14.96%;活动或劳累诱发者57例,占13.54%;烟草油烟等异味气体诱发者53例,占12.59%。 3临床症状分布:呼吸道相关症状出现的频次>30次由高到低依次排列为:咳嗽、吐痰、干咳、咽喉痒、鼻塞流清涕、咽干、咽痛、气短、打喷嚏、胸闷。痰液性质出现频次≥15次由高到低依次排列为:痰色白、痰色黄、痰黏难咳、痰少质稠。除呼吸道症状外,其他症状中最常见症状为倦怠乏力,占45.91%,其次为经常畏冷、口苦、头晕、头痛、发热等。 4中医证素分布: 4.1病位证素:共提取到10个病位证素,按证素出现的频率高低排序前5位依次为肺(出现率为100.00%)、表(出现136次,占61.82%)、肝(出现32次,占14.55%)、脾(出现13次,占6.82%)、肾(出现14次,占6.36%)、心神(出现9次,占4.09%)。提示新冠感染急性咳嗽的最基本病位证素为肺,其次为超过半数兼有表。依照证素等级分布结果显示,肺证素为Ⅲ级(严重)为主,占63.64%,表证素为I级(较轻)为主,占27.27%。病位证素组合以单病位(30.45%)、双病位(50.91%)为主。其中“肺+表”组合和“肺”所占比例较高,分别占45.00%、30.45%。 4.2病性证素:共提取到病性证素16个,按证素出现的频率高低排序前8位依次为痰(出现115次,占52.27%)、阴虚(出现67次,占30.45%)、气虚(出现57次,占25.91%)、阳虚(出现44次,占20.00%)、热(出现42次,占19.09%)、寒(出现37次,占16.82%)、湿(出现37次,占16.82%)、外风(出现37次,占16.82%)等。表明本病病性以痰(邪实)为主,可兼有热、寒、风,同时夹有正虚,主要可伴见阴虚、气虚和阳虚。按照证素等级分布,痰证素I级(较轻)、Ⅱ级(明显)和Ⅲ级(严重)均存在;阴虚、热证素以Ⅰ级(较轻)及Ⅱ级(明显)为主;气虚、阳虚、寒、湿、外风、血虚、气滞证素以I级(较轻)为主。病性证素组合以单病性(占14.09%)、双病性(占18.18%)、三病性(占19.09%)组合为主;按照病性证素虚实情况分类,虚证为20例(占9.09%),实证为62例(占28.18%),虚实夹杂为138例(占62.73%),以虚实夹杂为主。 4.3中医证素与一般资料的相关性:以性别男为对照组,女性的痰证素等级高的可能性更大(P<0.05,OR>1)。以无主动或被动吸烟史为对照组,有吸烟史的痰证素等级高的可能性更大(P<0.05,OR>1)。以病程<7天为对照组,病程为1-2周患者的表证素等级低的可能性越大(P<0.05,OR<1)。 4.4中医证素与咳嗽特点的相关性:随咳嗽严重程度的增加,阴虚证素等级高的可能性更大(P<0.05,OR>1)。由活动或劳累诱发咳嗽加重者,阴虚证素等级低的可能性更大(P<0.05,OR<1)。由饮食不当诱发咳嗽加重者,阴虚证素等级高的可能性更大(P<0.05,OR>1)。由说话过多诱发咳嗽加重者,痰证素等级低的可能性更大(P<0.05,OR<1)。由白天咳嗽加重者,痰证素等级低的可能性更大(P<

关键词： 新型冠状病毒   流感病毒   广谱抗病毒小分子化合物   钙信号   钙调蛋白抑制剂  

摘要： 研究背景 由SARS-CoV-2引起的新冠肺炎大流行持续挑战着全球公共卫生系统。截至2024年2月,WHO报告的COVID-19确诊病例超过7.74亿例。与此同时,流感病毒的肆虐,加上各种呼吸道病原体的共同感染给疫情防控带来了巨大压力。此外,猴痘病毒（MPXV）和尼帕病毒（Ni V）等新出现和重新出现病毒病原体的潜在爆发强调了对有效的广谱抗病毒药物的迫切需求。现有广谱抗病毒药物多靶向病毒的保守蛋白,包括病毒RNA/DNA聚合酶,病毒表面结构蛋白亚单位或蛋白酶等,这类药物的广泛应用容易增加病毒进化压力,导致耐药性病毒株的出现。相较而言,靶向病毒感染和复制所需的宿主蛋白是一个理想的策略,而Ca2+信号作为宿主多种生理活动的调节信号参与多种病毒的感染和复制,多种Ca2+信号抑制剂也被用于研究病毒与宿主的相互作用,并被认为是一类潜在的抗病毒药物。 研究目的 本研究以钙离子信号通路相关蛋白为关键宿主靶点,选择钙调蛋白抑制剂、钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶、钙调神经磷酸酶和TRPV4的抑制剂作为主要研究对象,筛选具有较高抗病毒活性的抑制剂,利用多种细胞感染模型评价优选抑制剂的广谱抗病毒活性,探究候选小分子化合物的抗病毒谱。同时,在多种小鼠感染模型中共评估其对SARS-CoV-2和流感病毒感染的治疗效果,并在体内外评估抑制剂的抗病毒潜在分子机制,为对抗多种病毒感染,尤其是新冠肺炎大流行和季节性流感的治疗药物研究提供新研究数据。 研究方法与结果 靶向钙信号的抗病毒小分子化合物筛选与抗SARS-CoV-2评价:在Vero-E6细胞模型中,通过检测钙调蛋白抑制剂、钙/钙调素依赖性蛋白激酶抑制剂、钙调神经磷酸酶抑制剂和TRPV4的抑制剂对SARS-CoV-2感染细胞上清中病毒载量的影响,评价不同钙信号抑制剂对SARS-CoV-2的抗病毒活性。研究结果表明,钙调蛋白抑制剂A-7、W-7和W-13以及钙调神经磷酸酶抑制剂具有较高抗病毒活性,作为候选抗病毒小分子化合物。通过观察细胞病变和CCK-8法评价候选抗病毒小分子的细胞毒性和对SARS-CoV-2细胞病变效应的抑制效果。检测结果表明,三种钙调蛋白抑制剂均可以显著抑制SARS-CoV-2的细胞病变效应,其中W-7在Vero-E6细胞中具有更高的抗病毒活性。 W-7对SARS-CoV-2及其变异株的抗病毒作用研究:为系统评估W-7对SARS-CoV-2及其变异株的抑制作用,首先通过CCK-8法、间接免疫荧光法和实时荧光定量法在Vero-E6、Huh7和293T-ACE2细胞模型中评估W-7在体外的抗病毒作用。结果表明,W-7以剂量依赖的方式抑制SARS-CoV-2及其变异株的细胞病变效应,提高病毒感染细胞的增殖活性,降低细胞中病毒蛋白表达水平和细胞上清中的病毒基因拷贝数,对SARS-CoV-2及其变异株均表现出极强的抗病毒作用。其次,在BALB/c和C57BL/6N小鼠以及金黄地鼠模型中,通过检测小鼠肺部和鼻甲骨的病毒基因拷贝数、小鼠体重、生存率以及肺损伤等指标评价W-7在体内的治疗效果。结果证明,W-7可以显著降低SARS-CoV-2感染小鼠体内的病毒载量,缓解小鼠体重下降程度,提高小鼠生存率,对SARS-CoV-2/Omicron BF.7致死性感染金黄地鼠模型的保护率为75%,并可以改善肺部病理损伤,具有良好的抗病毒效果。 W-7在体外和体内模型中对流感病毒的抗病毒作用评价:为探究W-7的抗病毒作用是否具有广谱性,本研究在MDCK细胞模型和BALB/c小鼠模型中检测W-7对甲型和乙型流感病毒的抗病毒作用。体外实验结果表明,W-7可以显著降低多种亚型/类型流感病毒在细胞中的复制,降低细胞中病毒蛋白的表达和细胞上清中的病毒滴度,其抑制作用具有剂量依赖性。小鼠实验结果显示,W-7可以缓解小鼠体重降低,提高小鼠生存率,对甲型H1N1流感病毒感染小鼠的保护率为42.86%,对乙型流感病毒感染小鼠的保护率为66.67%。W-7不仅可以降低小鼠肺组织和鼻甲骨中的病毒滴度,还可以减轻小鼠肺组织和气管组织的病理损伤。另外,本研究还在金黄地鼠模型中探究W-7对SARS-CoV-2和甲型H1N1流感病毒混合感染的治疗效果,结果显示,W-7不仅对两种病毒的单独感染具有良好的抑制作用,还对两者的混合感染具有较好的治疗效果,可以改善混合感染小鼠体重的降低,减轻小鼠肺损伤。 W-7在体外广谱抗病毒与机制研究:为探究W-7的抗病毒谱,本研究在体外感染模型中评价该药物对多种RNA病毒和DNA病毒抑制作用。结果表明,W-7可显著抑制水泡性口炎病毒（VSV）、狂犬病毒（RV）和痘苗病毒（VACV）病毒蛋白在细胞中表达,显著降低犬瘟热病毒（CDV）、犬副流感病毒（CPIV）、犬腺病毒（CAV）感染细胞上清中的病毒滴度,具有极

关键词： 新型冠状病毒   新型冠状病毒感染   肺损伤   铜   铜死亡  

摘要： 背景: 新型冠状病毒感染（Coronavirus disease 2019,COVID-19）是由严重急性呼吸综合征病毒-2（Severe Acute Respiratory Syndrome Coronavirus 2,SARS-Co V-2）感染所致的一种具有强传染性、高传播性、危害严重的疾病。它的临床表现多种多样,且重型及危重型患者病情进展迅速,预后较差,截至2024年1月7日,已在全球范围导致超过700万例死亡病例。 近期金属元素在COVID-19致病机制中的作用引起了人们的关注,其中铁、铜、锌、硒等金属离子备受瞩目,锌被认为是重症COVID-19的重要预测因子,铁死亡也被报道参与SARS-Co V-2导致心肌损伤过程。铜离子作为人体必需的微量元素,在生物过程中充当关键的催化辅因子,且与铁离子类似,铜过量积累后可诱导细胞“铜死亡”。我们在研究中发现COVID-19患者与健康对照组相比,血清铜离子水平明显升高,生物信息学分析发现铜死亡相关基因对COVID-19发展过程存在影响,故我们推测铜死亡可能参与SARS-Co V-2感染导致肺损伤的致病过程。因此,研究铜离子在不同分型COVID-19患者中的水平以及与疾病的相关性,明确铜离子在SARS-Co V-2感染致病过程中的作用机制,将会对后续临床预后判断和抗新型冠状病毒药物的研发提供重要的细胞学与分子学依据。 目的: 本研究旨在明确不同分型COVID-19患者血清铜离子水平,通过统计方法分析铜离子与COVID-19的相关性。深入探讨新型冠状病毒刺突蛋白（Spike protein）诱导肺泡上皮细胞损伤与铜死亡之间的关系。为COVID-19的预后判断和精准治疗靶点的开发提供理论基础。 方法: 1.不同分型COVID-19患者血清铜离子水平的探讨 （1）收集吉林大学第二医院呼吸与危重症医学科2022年12月至2023年2月住院的COVID-19确诊病例的临床资料,根据入院病情进行分组。 （2）检测COVID-19患者和健康对照组血清样本中细胞因子（IL-1β、IL-6、IL-18、IFN-γ、TNF-α、TGF-β1）、铜离子、铜蓝蛋白（CP）和铜死亡关键调节因子铁氧还蛋白1（FDX1）水平。 2.探讨铜离子对肺泡上皮细胞的影响 （1）铜离子载体单独或与多种金属离子联合刺激A549细胞,CCK8方法检测细胞生存情况。 （2）顺铂、Elesclomol-Cu Cl2刺激A549细胞,AO/EB染色检查阳性细胞和Western blot检测Caspase 3和Cleaved-Caspase 3蛋白表达情况。多种细胞死亡机制抑制剂预处理细胞后,Elesclomol-Cu Cl2或顺铂、ML162刺激细胞,CCK8方法检测细胞生存情况。 （3）Elesclomol-Cu Cl2刺激A549细胞后,比色法检测细胞内铜离子浓度。Western blot检测Lipoy-DLAT、Lipoy-DLST、FDX1、DLAT、DLST、HSP70和SLC31A1表达水平。 （4）Elesclomol-Cu Cl2刺激A549细胞后,ELISA方法检测晚期糖基化终产物（AGEs）、细胞内ATP含量;透射电镜观察线粒体形态变化;β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老情况;Western blot方法检测细胞线粒体氧化磷酸化（OXPHOS）复合物和细胞色素C氧化酶Ⅳ（COXⅣ）表达水平。 3.探讨新型冠状病毒刺突蛋白诱导肺泡上皮细胞损伤与铜死亡的关系 （1）不同浓度梯度的Spike protein刺激A549细胞后,比色法检测细胞内铜离子浓度;q RT-PCR方法检测铜转运蛋白SLC31A1、ATP7A和ATP7B m RNA的表达水平;ELISA法检测CP、FDX1的表达情况;Western blot检测SLC31A1、FDX1的表达水平;ELISA方法检测细胞因子的表达情况。 （2）应用25 ng/m L Spike protein或应用铜螯合剂TTM预处理后再给予25ng/m L Spike protein刺激A549细胞,比色法检测细胞内铜离子浓度;ELISA方法检测CP、FDX1的表达情况;q RT-PCR方法检测铜死亡相关基因以及P65m RNA表达水平;Western blot方法检测铜死亡相关蛋白表达情况;ELISA方法检测AGEs、细胞内ATP含量;透射电镜观察线粒体形态变化;β-半乳糖苷酶染色观察细胞衰老情况;Western blot方法检测线粒体OXPHOS复合物和COXⅣ表达水平。ELISA方法检测细胞因子的表达情况。 （3）Spike Protein刺激巨噬细胞,留取培养液上清,应用上清液或应用TTM预处理后再给予上清液刺激A549细胞,比色法检测细胞内铜离子浓度;ELISA方法检测C

关键词： ARDL   后疫情时代   物流   运输  

摘要： 在当今的全球化时代,为了保证人员、商品和服务从一个地方及时、高效地移动到另一个地方,物流和运输部门已经与大多数企业和公司融为一体。COVID-19的爆发严重打击了全球航运业和物流业,也严重打击了孟加拉国。由于物流困难、交通限制、生产放缓等问题,COVID-19严重影响了孟加拉国的运输和物流部门。关于COVID-19影响的文献范围十分广泛。因此,解决这一研究差距的更好方法是深入研究复苏的步伐、潜在的结构转型以及对企业和就业的持久影响。为了透彻了解后疫情时代对孟加拉国运输和物流业的影响,本研究打算深入探讨这些关键主题。 为了了解后疫情时代对孟加拉国物流和运输部门的影响,我们首先使用了孟加拉国的陆地、空中和海洋数据。其次,除孟加拉国外,我们还使用了其他四个国家的数据:中国、美国、德国和英国。首次静态测试表明,ARDL(自回归分布滞后)最适合该数据集。ARDL是计量经济学中的一种统计建模技术,用于分析因变量与其滞后值以及一个或多个自变量的滞后值之间的动态关系。ARDL模型在处理既有短期动态又有长期动态的时间序列数据时十分有效。在论文中,我们比较了我国和其他国家的COVID-19病例数和人均死亡人数。 实证研究结果表明,COVID-19病例数与涉及汽车运输的致命事故数之间存在统计学意义上的显著负相关。此外,我们还发现COVID-19病例数与航空物流行业死亡数之间存在负相关。实证调查表明,陆地和水上的COVID-19病例数之间存在微弱的相关性。COVID-19病例数与航空物流行业死亡数之间存在显著负相关,而陆地和海洋上的COVID-19病例数之间存在微弱的相关性。我们的实证调查表明,COVID-19病例与CN航运业务中的死亡之间存在显著正相关。 实证研究结果表明,在孟加拉国,COVID-19病例与汽车运输致命事故之间存在显著的负相关。这表明,在疫情期间,这种运输方式的安全可能会出现积极的结果。同样,我们的研究显示,COVID-19病例与航空物流业的死亡事故之间存在显著的负相关。这种意料之外的相关性促使我们进一步调查导致这一趋势的因素,从而为在健康危机期间加强航空业的安全协议提供启示。此外,研究表明,COVID-19病例与陆地和海上运输之间的相关性较弱;COVID-19病例与CN船运业务中的死亡事故之间似乎存在着更实质性的负相关。了解这种相关性对于改进安全措施和调整业务以降低疫情期间的风险至关重要。 这些发现强调了调整安全协议、重新评估物流战略以及实施创新措施的重要性,以在疫情期间和疫情过后保障运输业和公众健康。对这些相关性及其影响的进一步研究将有助于为孟加拉国乃至全球的运输和物流行业制定抗灾战略。