关键词： 新型冠状病毒感染肺炎   恢复期   免疫紊乱   动物模型  

摘要： 目的 建立一种稳定可复制、高度模拟新型冠状病毒感染肺炎(novel coronavirus pneumonia,NCP)恢复期患者的小鼠模型。方法 将30只Balb/c雌性小鼠,随机分为对照组和感染后第1、3、7、10天组,共5组(n=6),感染组小鼠予SARS-CoV-2病毒棘突(Spike,S)蛋白原液气管滴注进行感染,分别于感染后第1、3、7、10天取材,依次标记为D1S组、D3S组、D7S组、D10S组;对照组(N组)进行假手术,第10天取材。采用免疫荧光双染法观察S蛋白与肺组织ACE2受体结合情况;HE染色观察小鼠的肺组织病理,RT-qPCR测定小鼠肺组织中IL-4、IL-6 mRNA表达;流式细胞术检测小鼠脾脏CD4^(+)T淋巴细胞中Th17/Treg、Th1/Th2细胞比值、DC细胞中cDC、pDC、CD80^(+)、CD86^(+)细胞比例。结果 荧光双染色结果提示S蛋白和血管紧张素转化酶2(ACE2)可在气道上皮细胞中位置重合;HE染色结果显示,与N组相比,D1S组小鼠肺部组织结构紊乱,上皮细胞变性、塌陷,肺泡损伤,伴间质水肿和炎性浸润,而D3S、D7S及D10S组小鼠则呈现逐渐恢复的状态,D10S组小鼠肺组织相较于对照组还存在一些轻微的病理损伤;与N组比较,IL-4 mRNA含量在D1S组小鼠无明显变化(P>0.05),但在D10S组小鼠肺组织中明显升高(P<0.01),而IL-6 mRNA含量在D1S组小鼠显著升高(P<0.01),且在D3S组及D10S组有所降低(P<0.01),但D10S组小鼠IL-6 mRNA水平相较于N组仍有升高(P <0.05);流式细胞术结果显示,与N组比较,D10S组小鼠Th17/Treg显著增加(P<0.01)、Th1/Th2比值显著降低(P<0.05);相较于N组,D10S组小鼠中cDC、CD80^(+)、CD86^(+)细胞比例均有所减少(P<0.05),而D10S组小鼠pDC细胞比例则无明显改变(P>0.05)。结论 D10S组小鼠肺部病理、炎症因子、免疫细胞相关指标变化符合NCP恢复期的临床特征,S蛋白滴鼻可模拟NCP小鼠模型,为新型冠状病毒感染恢复期的研究奠定了基础;NCP恢复期患者仍存在机体损伤及免疫功能紊乱等问题,提示新型冠状病毒感染后机体损伤的长久性与康复治疗的重要性。

关键词： 疟疾   输入性   新冠肺炎   防控机制  

摘要： 目的分析武汉市新型冠状病毒肺炎流行期境外输入性疟疾流行特征,探讨重大公共卫生事件对消除疟疾后疟疾防控的影响。方法收集2016-2022年境外输入性疟疾的流行病学数据,包括性别、年龄、职业、首诊确诊情况、发病-首诊时间、发病-确诊时间等。将数据分为消除疟疾后阶段和新冠肺炎防控阶段,进行比较分析。结果2016-2022年共报告境外输入性疟疾202例,其中消除疟疾后阶段180例,含恶性疟130例(重症12例),新冠肺炎防控阶段22例,含恶性疟11例(重症5例,死亡1例)。两阶段病例均以男性为主,年龄差异有统计学意义(χ^(2)=7.71,P<0.05),输入虫种结构比不同,差异有统计学意义(χ^(2)=5.16,P<0.05),虽然首诊确诊率和发病-首诊时间两阶段之间的差异无统计学意义(χ^(2)/Z=0.12、-0.35,P=0.73、0.72),但两者之间首诊-确诊时间及发病-确诊时间的差异均有统计学意义(Z=-2.35、-2.24,P均<0.05),新冠肺炎防控阶段恶性疟重症发生率显著上升(χ_(矫正)^(2)=9.58,P<0.01)。结论重大公共卫生事件发生时应加强疟疾流行区返回人员监测及疾控-临床联合防控机制,发热应及早检测疟原虫,提高诊断效率,缩短发病-确诊时间,遏制重症死亡病例发生。

关键词： 扶正解毒利水法   常规治疗   新型冠状病毒感染   心功能不全   老年人   奥密克戎  

摘要： 目的探讨扶正解毒利水法对老年新型冠状病毒感染合并心功能不全患者的临床疗效。方法86例患者随机分为对照组和观察组,每组43例,2组采用常规治疗,同时对照组给予清肺排毒汤,观察组给予扶正解毒利水法,疗程6 d。检测NT-proBNP、炎症指标(白细胞、淋巴细胞、CRP)、心肌损伤标志物(肌红蛋白、肌钙蛋白)、核酸转阴时间、肺部病灶吸收率、安全性指标变化。结果观察组核酸转阴时间短于对照组(P<0.05)。治疗后,2组NT-proBNP、白细胞、CRP、心肌损伤标志物降低(P<0.05),淋巴细胞升高(P<0.05),以观察组更明显(P<0.05)。2组肺部病灶吸收率、安全性指标比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论扶正排毒利水法可安全有效地减轻老年新型冠状病毒感染合并心功能不全患者炎症反应,降低心肌损伤程度,缩短核酸转阴时间。

关键词： 新型冠状病毒感染   慢性疼痛   疾病类型   致病机制   疾病诊疗  

摘要： 新型冠状病毒(简称新冠病毒)感染后慢性疼痛可根据其发病机制和临床特征分为病毒直接引发的新发慢性疼痛、重症监护室(ICU)相关疼痛、治疗诱发疼痛以及原有疼痛加重四个类型;目前认为新冠病毒感染后慢性疼痛的致病机制主要与病毒直接作用、ICU相关损伤、治疗相关因素以及原有慢性疼痛恶化有关;因新冠病毒感染后慢性疼痛往往发生于感染后的数周至数月,此时咽拭子等检查结果可呈阴性,可以结合患者的既往病史、临床症状及体征、全身体格检查和多系统辅助检查,综合评估慢性疼痛是否与新冠病毒感染相关;对于确诊的新冠病毒感染后慢性疼痛的治疗应遵从多学科协作、中西医结合、药物与非药物联合干预的原则,同时强调医护人员与患者的密切配合。

关键词： 新型冠状病毒   Nsp5   保守性分析   高通量测序   转录组分析   蛋白表达验证   炎症反应  

摘要： [目的]探究严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)非结构蛋白5(Nsp5)对宿主细胞基因mRNA的影响及其生物学意义。[方法]通过NCBI和Uniprot网站对当前流行的部分SARS-CoV-2突变株的Nsp5序列进行同源性分析,并对有和无过表达Nsp5的人非小细胞肺癌细胞A549细胞进行转录组测序及差异分析,对差异基因进行GO和KEGG功能分析,并对部分差异表达基因进行实时荧光定量反转录PCR(RT-qPCR)验证。[结果]序列比对分析发现Nsp5在SARS-CoV-2突变株中高度保守,保守性比例为99.67%;GO分析提示差异基因主要富集在第二信使介导的信号通路,氯离子通道复合物和细胞因子活性等方面;KEGG富集分析提示,差异表达基因主要参与信号通路如:PI3K-AKT、MAPK和细胞因子-细胞因子受体的相互作用;RT-qPCR实验验证了Nsp5可显著上调部分促炎相关基因CCL5、HILPDA(1.7倍)、SAT1(2倍)的表达;显著下调部分抑炎基因NSD1(1.9倍)、DHCR24(5.5倍)、DANJB1(2倍)、HNRNPM(3倍)、HYOU1-2(5.9倍)的表达。[结论]Nsp5蛋白可能通过上调炎症因子、下调抑炎因子的表达参与SARS-CoV-2感染诱导的炎症反应,为探索Nsp5在病毒与宿主相互作用中的角色提供了新线索。

关键词： 苍术   厚朴   网络药理学   分子对接   作用机制   苍术内酯I   汉黄芩素   通路  

摘要： [目的]对苍术-厚朴药治疗新冠肺炎的作用机制进行分析探究。[方法]通过中药系统药理学数据库(TCMSP)搜索苍术-厚朴药对主要化学成分及作用的靶点,通过GeneCards、OMIM、TTD和DrugBank数据库收集与新冠肺炎相关的作用靶点,通过STRING数据库对共同作用靶点进行筛选,构建药物-活性成分-核心靶点网络。利用绘图工具对富集分析数据进行多维网络图形绘制,利用CB-Dock模块进行分子对接。[结果]获得苍术-厚朴药对有效成分17个,4072个COVID-19相关靶点,根据度值可知主要有效成分为汉黄芩素、和厚朴酚、厚朴酚、苍术酮Ⅰ、桉树脑等,核心靶点为白细胞介素6(IL-6)、IL1B、肿瘤坏死因子(TNF)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、肿瘤蛋白p53(TP53)等,聚焦于癌症通路、AGE-RAGE糖尿病并发症信号通路、脂类和动脉粥样硬化、人巨细胞病毒感染、IL-17信号通路等通路。分子对接验证核心成分均能与靶点结合。[结论]证实苍术酮I和汉黄芩素是苍术-厚朴药对中的主要活性成分,通过核心靶点IL-6、TNF、AKT1、TP53对新冠肺炎发挥治疗作用,为中药在新冠肺炎的治疗中提供新思路。

关键词： 新型冠状病毒感染   咳嗽   蔡宛如   国医名师   临床经验  

摘要： 新型冠状病毒感染后6个月内仍存在疲劳、乏力、呼吸急促、慢性咳嗽、胸闷、情绪异常等症状[1-3]。刘天柱等[4]对中国1116例新冠病毒感染患者进行了问卷调查,其中新冠感染后有咳嗽症状患者1015例,而感染30 d咳嗽症状消失人数仅366例。西医治疗新型冠状病毒感染后咳嗽(后简称新冠后咳嗽)主要采用对症治疗,中医通过四诊合参、辨证论治临床疗效佳。

关键词： 中成药   新型冠状病毒   新型冠状病毒肺炎   新型冠状病毒感染   伞状评价   GRADE评价   Meta分析   证据映射   安全性   有效性  

摘要： 目的总结评价中成药治疗新型冠状病毒肺炎(COVID-19)疗效及安全性的系统综述证据,对中成药作为干预手段治疗COVID-19的安全性和有效性进行评估,对相关证据的质量做出评价。方法检索PubMed、Cochrane Library、Embase、Sinomed、中国知网、万方数据、维普网从建库至2023年6月15日的中成药治疗COVID-19的系统综述,并提取相关信息。使用Revman 5.3软件进行二次Meta分析,利用AMSTAR-II评估文章的方法学质量,采用GRADE分级方法对证据确定性进行评估,并将评估结果以气泡图的形式呈现。结果最终纳入了13项系统评价,共计17053例病例。Meta分析结果显示,与单独采用西药标准治疗相比,中成药联合西药标准治疗在多个结局指标体现出优势,主要包括全因死亡率[RR=0.26,95%CI=(0.09~0.81),P=0.02,I^(2)=0%]、核酸转阴率[RR=1.12,95%CI=(1.01~1.23),P=0.03,I^(2)=44%]、转重症率[RR=0.49,95%CI=(0.37~0.64),P<0.00001,I^(2)=0%]、肺部影像学改善、临床症状消失率(包括发热、咳嗽、疲劳、气短)以及临床症状消失时间(特别是疲劳)。在不良反应发生率、缓解喉痛、腹泻方面2组没有明显区别。气泡图结果显示,极低等级的证据表明,热炎宁合剂、金花清感颗粒、连花清瘟颗粒、参黄颗粒、疏风解毒胶囊、连花清瘟胶囊、血必净注射液、连花清咳颗粒分别在提高核酸转阴率、降低转重症率、提高肺部影像学恢复率方面,可能有微弱到中等程度的效果。结论综合分析表明,与常规西医治疗相比,中成药联合常规治疗在治疗COVID-19表现出更好的疗效。由于目前所收集到的证据质量相对较低,需要开展更多高质量的临床试验以进一步验证。

关键词： 新型冠状病毒感染恢复期   大气下陷   病因   病机   益气升陷法  

摘要： 笔者从大气下陷理论的角度出发，探讨了新型冠状病毒感染恢复期的临床表现。文章详细分析了该阶段的病因和病机特点，认为伏邪和正虚是新型冠状病毒感染恢复期发病的基础，而大气下陷则是该阶段的必经环节。通过参考相关文献和临床资料，本文阐述了大气下陷与新型冠状病毒感染恢复期临床表现之间的联系，并运用中医理论将两者相互关联，深入分析了二者之间的密切关系。基于现有的诊疗方案和文献中的临床数据，本文提出了新型冠状病毒感染恢复期病机以“大气虚”贯穿全程的观点，并据此创新性地提出了新型冠状病毒感染恢复期“三期四型”的分期分型，从“大气不足，肺气虚损”的邪去正虚期，发展到“大气郁滞或心肺阳衰”的邪正相持期，最终为“大气极陷，脾肾两亏”的正虚邪恋期。在治疗原则上，以“益气升陷”法为总纲，针对不同分期分型运用各类升陷汤加减治疗，为临床诊疗新型冠状病毒感染恢复期提供了新的思路。

关键词： 新型冠状病毒   RNA聚合酶   根皮素   类似物   分子对接   活性测试  

摘要： 目的 探索根皮素对新型冠状病毒RNA聚合酶的抑制活性，并预测3种根皮素类似物小分子的靶酶抑制活性。方法 运用分子对接手段研究根皮素与RNA聚合酶活性位点处的结合模式；利用细胞水平的新型冠状病毒RNA聚合酶nsp7/nsp8/nsp12催化反应体系检测根皮素对RNA聚合酶的抑制活性。选择3种与根皮素结构类似的中药小分子进行靶酶抑制活性预测，应用分子对接方法研究它们与靶酶活性位点间的结合模式。结果 根皮素及其类似物均可较好的结合于RNA聚合酶的活性位点处，占据NTPs通道而阻碍核苷酸底物的进入，进而抑制RNA聚合酶主导的核酸复制。细胞水平上的抑制RNA聚合酶活性测试实验结果表明，根皮素对新型冠状病毒RNA聚合酶具有明显的抑制活性，虽然活性弱于瑞德西韦，但其细胞毒性亦低于瑞德西韦；同时，预测根皮素类似物亦可抑制RNA聚合酶而具有抗新型冠状病毒药理作用。结论 本研究证实根皮素具有RNA聚合酶抑制活性，并预测根皮素类似物小分子亦具有RNA聚合酶抑制活性，结果可进一步为抗新型冠状病毒药物研发提供参考。