关键词： 生物信息学   野罂粟   外泌体   Ccl11   肺与大肠相表里  

摘要： 目的:运用生物信息学方法,对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)动物模型的肺、肠组织转录组测序数据进行统计分析,筛选两者相同的差异表达基因,预测肺肠组织间进行信号传递的可能途径。以肺/大肠归经药物野罂粟为工具,观察野罂粟含药血清处理后肠结构来源外泌体对肺结构细胞以及肺结构来源外泌体对肠结构来源细胞的相互调节作用,探讨野罂粟通过外泌体实现肺肠相互调节的信号传递机制,进一步验证前期动物实验的结果,为“肺与大肠相表里”的中医理论提供现代科学阐释和新的研究思路。方法:运用生物信息学方法对UC动物模型转录组测序数据进行统计分析,筛选肺肠组织间具有相同差异表达的基因,并对筛选出来的差异基因进行GO富集分析和KEGG通路富集分析,构建PPI蛋白互作网络;运用PCR法验证给予野罂粟处理前后UC模型肺肠组织中Ccl11、Car1的表达。采用细胞实验验证前期动物实验的发现。首先,分别将肺上皮细胞(A549)和肠上皮细胞(Caco-2)分为空白组和实验组,以重组人白细胞介素IL4/IL13作为刺激因子,通过差速高速离心法提取A549和Caco-2两种细胞有刺激和无刺激的外泌体,利用透射电镜(TEM)观察外泌体的形态,纳米粒子追踪分析仪(NTA)检测外泌体粒度分布和颗粒浓度,对提取的外泌体进行鉴定,明确A549和Caco-2两种细胞在炎性因子刺激前后外泌体分泌量的变化;其次,按照每100g体重每天0.054g生药给予SD大鼠野罂粟总提物,灌胃给药14天后,腹主动脉取血制备野罂粟含药血清,空白组给予等量蒸馏水,制备空白血清;最后将A549和Caco-2分别与Caco-2和A549来源有刺激/无刺激外泌体以及野罂粟含药血清、空白血清进行共培养,通过CCK8法测定野罂粟含药血清对A549和Caco-2增殖的影响,Western blot检测Ccl11特异性受体CCR3的表达。结果:生物信息学统计结果显示,UC模型中,肺肠组织间具有相同差异表达的基因共有49个,其中36个上调基因,13个下调基因;肺肠组织间差异基因主要涉及生物过程调节、质膜等,信号通路主要富集在细胞因子-细胞因子受体相互作用通路、神经活性配体-受体相互作用通路;肺肠组织间的核心基因为 Tlr2、Mmp10、Il1r2、Cxc16、Pla2g2a、Fcgr1a、Nos2、Alox15、Tlr1、Ccl11、Cd163、Camp。通过透射电镜(TEM)可以观察到A549细胞和Caco-2细胞来源的外泌体均呈现出清晰的茶托样结构,纳米粒子追踪分析仪(NTA)检测结果显示A549细胞来源的外泌体平均粒径为90.2nm,Caco-2细胞来源的外泌体平均粒径为120.2nm;细胞实验的结果显示,野罂粟含药血清对A549/Caco-2细胞的增殖表现出良好的抑制作用。结论:肠结构细胞来源的外泌体可通过Ccl11介导的信号通路对肺结构细胞发挥调节作用,在肺肠间存在外泌体介导的远程相互作用。野罂粟可能通过肠组织外泌体介导Ccl11相关信号通路调控肺组织间的信号应答。本研究为“肺与大肠相表里”的中医理论提供了证据支撑。

关键词： 先天性巨结肠   外泌体   hsa-miR103a-3p   NF1  

摘要： 研究背景先天性巨结肠病(HSCR、Hirschsprung's disease)是肠神经系统(ENS、enteric nervous system)的一种发育障碍,由神经嵴细胞迁移、增殖、分化和存活缺陷引起,导致肠壁神经节完全缺失。对于此病的病因,目前主要的两个观点:分别是肠道菌群微环境调节学说与自身遗传代谢学说。本疾病并不完全遵循孟德尔遗传学说,目前已证实有多个基因参与了疾病的发生发展过程。我们通过流行病学调查及后续的生物学实验,探索可能的致病因子及其在疾病发生发展过程中的作用。研究目的本研究中使用了测序技术对比先天性巨结肠患者和非先天性巨结肠人群的血浆外泌体差异性,体外细胞功能试验验证差异miRNA,通过数据库预测其下游靶基因并进行初步验证。为先天性巨结肠疾病的诊断和治疗提供思路。研究方法(1)通过设置纳入标准及排除标准,选择合适的样本入组。(2)通过超速离心法得到外泌体样本并通过电镜及粒径分析加以验证。(3)通过测序技术检测分离出的外泌体样本并进行差异化分析,得出差异基因。(4)构建细胞模型,通过脂质体转染造模成功后测定细胞功能从而推断对疾病发生发展的影响。(5)通过miRwork及StarBase数据库进行下游靶基因预测,找到可能的新的致病基因。研究结果(1)成功的从疾病组和治疗组的血浆中分离出外泌体并加以验证。(2)通过smallRNA测序技术,确定疾病组和对照组之间的外泌体存在组分差异并进行差异化分析。得出外泌体hsa-miR103a-3p在疾病组与对照组之间存在明显差异。(3)将差异基因通过细胞学进行细胞功能学实验,证明差异基因确实会在分子层面上对细胞生物学行为产生影响。(4)通过数据库进行简单的生信分析,找到NF1可能是下游靶基因并简单验证。研究结论患有先天性巨结肠疾病的患儿同肠道正常儿相比,血浆中的外泌体内容物会表现出比较明显的差异性。通过对外泌体的分离与测定,我们找到了外泌体内存在差异的hsa-miR103a-3p并通过在细胞功能学实验进行了验证。证明hsa-miR103a-3p也许会对先天性巨结肠疾病的发生发展造成负面影响。同时通过miRwalk和starbase数据库进行了下游靶基因预测并进行实验验证,认为NF1基因是其下游靶基因。

关键词： 双气囊小肠镜   小肠疾病   诊断   治疗  

摘要： [目的]由于检查手段的局限,既往小肠疾病的诊治一直是临床上的重点和难点。本研究旨在探讨双气囊小肠镜检查对小肠疾病的诊断和治疗价值。[方法]回顾性分析2015年1月至2020年12月在云南省第一人民医院消化科内镜中心接受双气囊小肠镜检查的466例患者的临床资料。包括年龄、性别、适应症、内镜诊疗、病理结果、出院指导等。[结果]共370名患者接受了 466例次双气囊小肠镜检查;其中274人接受了一次检查,96人接受了双向检查(经口腔和经肛门途径)。检出异常299例,检出率80.81%(299/370);常见的适应症是不明原因的消化道出血(OGIB)(30.8%,114/370)、不明原因腹痛(28.3%,105/370),诊断率分别是 64.9%、77.1%。常见的阳性发现包括非特异性炎症/糜烂(60例)、溃疡(34例),憩室(32例)、息肉(26例)、克罗恩病(CD)(24例)。发现的肿瘤分别是淋巴瘤(12例)、腺癌(11例)、间质瘤(8例),淋巴瘤多位于回肠,而间质瘤、腺瘤,多位于十二指肠和空肠。主要的内镜下干预措施是止血和息肉切除,包括止血夹、氩等离子体凝固(APC)、内镜下黏膜切除术(EMR)、内镜圈套切除、内镜下异物取出等手术,无严重并发症发生。[结论]双气囊小肠镜在明确小肠疾病中具有较高的诊断率,是一种安全有效的诊疗手段。

关键词： 双气囊小肠镜   小肠疾病   CT   诊疗价值  

摘要： 目的和意义:小肠疾病难以发现并诊断,早期发现小肠疾病可以进行及时地干预治疗。本研究的目的是探讨双气囊小肠镜对小肠疾病的临床诊疗价值,为双气囊小肠镜在小肠疾病中的价值提供理论依据。方法:本研究回顾性纳入2018年1月1日至2022年3月31日在广西医科大学第二附属医院住院行双气囊小肠镜检查和治疗的患者,记录病程、检查结果、病理结果、典型内镜下图片、诊断及并发症等临床信息。通过t检验、x检验、Fisher精确概率检验比较双气囊小肠镜与小肠CTE、腹部增强CT的病变检出率以及经口与经肛进镜的差异。结果:本研究共纳入104例患者,共行106次双气囊小肠镜检查,其中经口入镜检查50例,经肛入镜检查56例,双向入镜检查2例。双气囊小肠镜的阳性检出率为82.1%（87/106）。其中,镜下所见炎性改变有37例（34.9%）、溃疡21例（19.8%）、黏膜隆起17例（16.0%）、白斑6例（5.6%）、憩室3例（2.8%）、息肉2例（1.9%）和粪石1例（0.9%）,19例未见异常（17.9%）。临床诊断非特异性肠炎53例（51.0%,53/104）,克罗恩病、小肠溃疡各4例（各3.8%,4/104）,小肠息肉4例（3.8%,4/104,其中包括1例家族性腺瘤性息肉病）,憩室并出血、间质瘤各2例（各1.9%,2/104）,低分化癌1例（0.1%,1/104）。完成小肠CTE检查77例,腹部增强CT检查19例。小肠CTE检查的阳性检出率为61.0%（47/77）,腹部增强CT的阳性检出率为73.7%（14/19）,双气囊小肠镜与小肠CTE的病变阳性检出率差异具有统计学意义（x=10.067,P=0.002）,双气囊小肠镜与腹部增强CT、腹部增强CT与CTE的阳性检出率差异无统计学意义（P=0.363,P=0.426）。经口最大进镜深度为（348.4±73.4）cm,经肛最大进镜深度为（247.3±77.0）cm,经口最大进镜深度与经肛最大进镜深度差异有统计学意义（P<0.001）,两种入镜方式在主要症状、小肠镜所见病变上差异无统计学意义（P>0.05）。双气囊小肠镜的治疗性操作包括活检71例次（70.0%）,肿物切除2例次（1.9%）,内镜下止血行电凝电切术及钛夹夹闭术1例次（0.9%）。所有患者中有1例出现低钾血症,其余患者均未出现并发症。结论:双气囊小肠镜检查对小肠病变阳性检出率高于小肠CT检查,小肠CTE与双气囊小肠镜联合检查可提高小肠疾病的诊断率,同时双气囊小肠镜对病变可以进行有效的治疗,故双气囊小肠镜对小肠疾病的诊疗具有一定的临床应用价值。

关键词： 气囊辅助小肠镜   诊断   治疗   小肠疾病   并发症  

摘要： 目的:探讨气囊辅助小肠镜在小肠疾病诊疗中的有效性及安全性。方法:回顾性分析2005年11月—2019年10月南昌大学第一附属医院接受小肠镜诊疗患者的临床、内镜及病理资料。通过卡方检验或Fisher确切概率法比较各种小肠疾病的性别和年龄统计学差异以及腹痛和不明原因消化道出血（OGIB）患者间各种小肠疾病发生率的统计学差异。结果:1792例患者共行2159次小肠镜操作,包括仅经口操作645例,仅经肛780例,经口+经肛367例。其中,双气囊小肠镜（DBE）操作共1488次,单气囊小肠镜（SBE）操作共671次。总体病灶检出率为52.5%,最常见的小肠镜阳性诊断分别为非特异性肠炎（27.4%）、克罗恩病（18.8%）和小肠肿瘤（16.5%）。部分小肠镜阳性诊断存在性别和年龄的分布差异。男性患者的小肠疾病总体检出率（56.4%）高于女性患者（45.8%）（P＜0.001）。非特异性肠炎、克罗恩病、梅克尔憩室的检出率男性高于女性（P＜0.01）,而血管畸形的检出率女性高于男性（P＜0.05）。青年组、中年组、老年组患者的小肠镜阳性诊断率分别为52.4%、46.7%、61.9%,三组患者小肠镜阳性诊断率有显著差异（P＜0.001）。克罗恩病、梅克尔憩室检出率青年患者较高（P＜0.001）,而小肠肿瘤、血管畸形、小肠憩室、寄生虫检出率老年患者较高（P＜0.01）。接受小肠镜操作患者的最常见临床表现是腹痛（42.0%）和OGIB（32.9%）,OGIB患者的小肠疾病检出率（67.6%）显著高于腹痛患者（36.7%）（P＜0.001）。其中,OGIB患者的小肠镜诊断常见的是非特异性肠炎（15.1%）和小肠肿瘤（12.9%）;而腹痛常见的小肠镜诊断是非特异性肠炎（13.7%）和克罗恩病（9.4%）。在OGIB患者中,小肠肿瘤、小肠憩室、血管畸形、梅克尔憩室、寄生虫和血管瘤的检出率高于腹痛患者（P＜0.05）,而非特异性肠炎、克罗恩病、小肠息肉、肠结核和小肠异物在两种临床表现中的检出率无显著差异（P＞0.05）。在所有的小肠镜操作中,有42例治疗性小肠镜,其中止血（71.4%）是最主要的治疗方式。仅13例小肠镜操作（0.6%）出现了小肠镜相关并发症,且通过内镜干预或保守治疗均得到缓解。结论:气囊辅助小肠镜是一种有效且安全的小肠疾病诊疗方法。

关键词： 类器官   肠道干细胞   肠疾病   炎症性肠病  

摘要： 肠道类器官培养技术的发展使肠上皮结构可在体外三维空间呈现,其包括各类型的肠上皮细胞和部分肠道功能,对研究肠道发育和疾病、肠上皮屏障功能等具有显著价值.新型小肠类器官显著富集了损伤反应干细胞群,在培养过程中启动损伤再生基因的表达,能在体外高效地还原肠上皮损伤修复的病理生理过程,为研究上皮组织器官再生提供了新模型,且有助于肠道疾病的机制研究、损伤模型的建立以及药物筛选等.本文就类器官培养在肠道疾病研究中的应用和进展作一综述.

关键词： Biomarkers  

摘要： Although serum and fecal biomarkers (e.g., lactoferrin, and calprotectin) have been used in management and distinction between inflammatory bowel disease (IBD) and irritable bowel syndrome (IBS), none are proven to be a differential diagnostic tool between Crohn's disease (CD) and ulcerative colitis (UC). The main challenge with laboratory-based biomarkers in the stool test is the inability to indicate the location of the disease/inflammation in the gastrointestinal (GI) tract due to the homogenous nature of the collected fecal sample. For the first time, we have designed and developed a battery-free smart capsule that will allow targeted sampling of inflammatory biomarkers inside the gut lumen of the small intestine. The capsule is designed to provide a simple and non-invasive complementary tool to fecal biomarker analysis to differentiate the type of IBD by pinpointing the site of inflammatory biomarkers secretion (e.g., small or large bowel) throughout the GI tract. The capsule takes advantage of the rapid change from an acidic environment in the stomach to higher pH levels in the small intestine to dissolve a pH-sensitive polymeric coating as a means to activate the sampling process of the capsule within the small intestine. A swelling polyacrylamide hydrogel is placed inside the capsule as a milieu to collect the sampled GI fluid while also providing the required mechanical actuation to close the capsule once the sampling is completed. The hydrogel component along with the collected GI fluid can be easily obtained from the capsule through the screw-cap design for further extraction and analysis. As a proof of concept, the capsule's performance in sampling and extraction of bovine serum albumin (BSA) and calprotectin - a key biomarker of inflammation - was assessed within the physiologically relevant ranges. The ratio of extracted biomarkers relative to that in the initial sampling environment remained constant (similar to 3%) and independent of the sampling mat

关键词： 耳穴埋籽   穴位敷贴   肛肠疾病   疼痛程度  

摘要： 目的:研究耳穴埋籽联合穴位贴敷在缓解肛肠疾病患者术后疼痛中的应用价值。方法:选取自2018年6月-2020年12月由江苏大学附属医院收治的90例肛肠疾病患者作为观察对象,将其随机分为两组,每组45例。给予对照组患者穴位贴敷治疗,观察组患者则采用耳穴埋籽联合穴位贴敷的方式进行治疗,将两组患者的止痛时间、疼痛程度以及治疗效果进行对比,并比较两组患者的镇痛满意程度以及两组患者的用药依从性。结果:两组患者在经过治疗后,观察组止痛时间显著短于对照组(P<0.05),观察组视觉模拟评分法(Visual Analogue Scale,VAS)评分显著低于对照组(P<0.05),观察组患者的镇痛满意程度显著优于对照组(P<0.05),且观察组的用药依从性显著优于对照组(P<0.05),观察组的治疗效果显著优于对照组(P<0.05)。结论:针对肛肠疾病患者选用耳穴埋籽联合穴位贴敷的方式进行治疗,能够显著缓解患者的疼痛程度,同时能够有效缩短患者的止痛时间。

关键词： 肛肠疾病   术后尿潴留   中医护理临床路径   应用效果  

摘要： 目的对中医护理临床路径应用于肛肠疾病术后尿潴留患者的效果进行分析。方法以云南省第一人民医院2018年3月—2020年3月收治的108例肛肠疾病术后尿潴留患者为研究对象,随机抽签分组,54例列入观察组,采用中医护理临床路径开展术后护理;54例列入对照组,采用常规术后护理。比较2组患者术后尿潴留改善效果、术后疼痛程度以及心理情绪。结果观察组患者尿潴留护理有效率为94.44%,显著高于对照组的77.78%(P<0.05);观察组术后24 h、48 h、72 h的VAS评分以及术后72 h的SAS、SDS评分显著低于对照组(P<0.05);出院时,观察组临床护理总满意率为96.30%,显著高于对照组的66.67%(P<0.05)。结论在肛肠疾病术后尿潴留患者的临床护理中采用中医护理临床路径有突出效果,可有效改善尿潴留症状、缓解疼痛感、疏导负性情绪、提高满意度,值得推广。

关键词： Chemical coding   Enteric nervous system   Gastroenterology   Inflammatory bowel diseases   P2X7 receptor   Purinergic signaling  

摘要： The enteric nervous system(ENS)consists of thousands of small ganglia arranged in the submucosal and myenteric plexuses,which can be negatively affected by Crohn’s disease and ulcerative colitis-inflammatory bowel diseases(IBDs).IBDs are complex and multifactorial disorders characterized by chronic and recurrent inflammation of the intestine,and the symptoms of IBDs may include abdominal pain,diarrhea,rectal bleeding,and weight *** P2X7 receptor has become a promising therapeutic target for IBDs,especially owing to its wide expression and,in the case of other purinergic receptors,in both human and model animal enteric ***,little is known about the actual involvement between the activation of the P2X7 receptor and the cascade of subsequent events and how all these activities associated with chemical signals interfere with the functionality of the affected or treated *** this review,an integrated view is provided,correlating the structural organization of the ENS and the effects of IBDs,focusing on cellular constituents and how therapeutic approaches through the P2X7 receptor can assist in both protection from damage and tissue preservation.