关键词:
热应激
微塑料
种子发芽
ABA
GA
sHSPs
土壤养分
微生物多样性与组成
摘要:
地球温度的持续上升主要由人类活动和气候变化驱动,表现为热应激(HS),并带来了重大的生态和农业影响。微塑料(MPs)已成为持久的环境污染物,特别是在农业土壤中,引起了人们对微生物活动、土壤健康和作物生产力的关注。本研究探讨了热应激和微塑料对小麦(Triticum aestivum)和玉米(Zea mays)在种子发芽、植物生长(包括生理和生化反应)、土壤养分、土壤微生物群落及基因表达方面的单独和联合影响,并采用PCR技术进行基因表达检测。选取了不同强度(30℃、35℃和40℃)和时间(3、6、12和18小时)的热应激,以及不同浓度(0.1%、0.5%和1%w/w)的聚乙烯微塑料(PE-MPs)和聚丙烯微塑料(PP-MPs),粒径为1.5μm。35℃和40℃的热应激显著(p<0.05)提高了种子发芽率(GP),与对照相比,小麦和玉米的发芽率分别增加了 7.62±2.92%和9.48±5.8%。对于小麦种子,PE-MPs的存在导致发芽率降低了 18.78±1.60%,而PP-MPs则导致发芽率降低了 11.14±4.06%。在玉米种子中,PE-MPs导致发芽率降低了 16.8±6%,而PP-MPs导致发芽率降低10.72±4.33%。两种微塑料在40℃的热应激下以1%w/w的浓度联合作用时,显著(p<0.05)降低了发芽率。
研究结果显示,施加1%w/w的PE-MPs和PP-MPs显著降低了植物高度(降低比例分别为 19.09%和 10.51%)、根长度(28.60%和 9.14%)、叶面积(41.91%和 26.50%)、叶绿素含量(11.70%和7.65%)以及生物量(30.20%和20.24%)(p<0.05)。单独的热应激及与微塑料共同暴露导致植物组织损伤,表明活性氧(ROS)含量显著(p<0.05)增加,如过氧化氢(H2O2)和脂质过氧化的丙二醛(MDA)含量增加。作为对ROS的反应,氨基酸(如脯氨酸)和抗氧化酶(如过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD))显著(p<0.05)增加,联合处理和两种微塑料的处理组均高于单独处理。在种子发芽、生理和生化参数方面,PE-MPs对小麦和玉米的影响均大于PP-MPs。在40℃和45℃的热应激下,小麦样品的脱落酸(ABA)显著增加,分别上升了 18.45%和21.32%;玉米样品的脱落酸则上升了 23.56%和30.53%。PE-MPs和PP-MPs(1%w/w)分别诱导减少了小麦中12.04%和玉米中14.34%的ABA。结果表明,在40℃和45℃的热应激下,小麦和玉米样品中的赤霉素(GA)分别减少了 10.62%和17.46%,而在玉米样品中则减少了 22.42%和28.27%。同样,施加1%w/w的PE-MPs浓度分别导致小麦和玉米减少了 12.46%和20.61%的GA。然而,施加1%w/w的PP-MPs使GA减少了 7.23%和11.56%。研究结果显示,在热应激下,小麦和玉米样品中sHSPs(小热休克蛋白)的表达水平相较于各自的对照组显著增加,包括ZSHSP-9、ZSHSP-1、WSHSP-11和WSHSP-12。统计分析显示这些结果的准确性,p值均低于0.0001(****),表明其显著。
对细菌16S rRNA基因进行高通量测序,共获得1,354,153个序列,并识别出3,722个操作性分类单元(OTUs),其中1,281个OTUs在所有样本中共享。α多样性分析表明,Chao1指数显示大多数处理组(小麦0.1%、小麦0.5%、玉米0.1%、玉米0.5%)导致OTU丰富度增加,而小麦1%MPs浓度则显示丰富度下降。香农指数表明,在所有微塑料浓度下,玉米土壤的多样性保持稳定,而小麦土壤在较低浓度下保持稳定,但在1%浓度时下降。β多样性分析证实了群落组成的显著变化,所有样本均以变形菌(Proteobacteria,23.66%)、放线菌(Actinobacteria,21.27%)、绿弯菌(Chloroflexi,13.67%)和未分类(0.01%)为主。结果显示,低到中等浓度的PP-MPs(0.1%至0.5%)导致了微生物多样性的增加,特别是在小麦土壤中,而高浓度的微塑料(1%)则显示出对微生物群落组成多样性的下降。所有土壤样本中均发现子囊菌门(Ascomycota,89.2%)为主导门,表明其对微塑料污染的抵抗力高,其次是未分类的真菌(5.78%)和担子菌门(Basidiomycota,3.13%)。显然,PP-MPs导致了Clitopilus、Fusarium和Neocosmospora在对照环境中的丰度变化。在小麦土壤样本中,观察到在0.1%微塑料浓度下Aspergillus和Humicola占主导地位,而在玉米土壤中,Penicil