关键词： β地中海贫血   生物,基因修饰   临床试验   干细胞  

摘要： β地中海贫血为单基因遗传病,患者因β珠蛋白基因突变致红细胞无法形成正常成年人血红蛋白,而发生溶血性贫血。目前的主要治疗方法为异基因造血干细胞移植或对症定期输血并使用祛铁剂减轻铁负荷。重型患者预后很差,如不经治疗可危及生命。通过基因修饰自体造血干细胞为β地中海贫血患者提供了新的治疗选择,可能通过单次给药即实现长期、稳定提升血红蛋白水平,使一次性治愈β地中海贫血成为可能。文章从有效性评价终点、临床试验设计、入组人群、受试者监测等方面,对基因治疗β地中海贫血的临床试验设计关键要素进行探讨,以期为加快企业研发该类药物提供参考。

关键词： 新型冠状病毒肺炎   输血依赖型地中海贫血   输血   疫情防控  

摘要： 目的 分析新型冠状病毒肺炎疫情期间输血依赖型地中海贫血患儿输血现状,分析影响因素,以协助医院管理层提出相应对策。方法 选择2020年10—12月定期规律到该院儿科输血治疗的重型地贫患儿家属244人进行问卷调查。并随机选择其中11人进行半结构访谈。结果 疫情对输血的影响总得分(14.0±2.3)分,其中“疫情期间献血志愿者减少对输血治疗的影响”得分最高,为(3.2±0.8)分。影响重型地贫患儿返院输血的主要原因是疫情期间多地区处于封锁状态、血源紧张、血库血源短缺、住院费用增加、新冠肺炎疾病特点不了解。结论 针对疫情特殊时期利用医院、家庭、社会三方支持体系,可保证疫情期间患儿能按时按量返院输血治疗。

关键词： 地中海贫血   罕见突变   基因检测  

摘要： β-地中海贫血(简称β-地贫)是我国南方地区常见的一种遗传性溶血性贫血病,临床表现为小细胞低色素性贫血。β-地贫是由于β-珠蛋白(HBB)基因突变导致β-珠蛋白肽链缺如(β0)或合成不足(β+)引起的常染色体隐性遗传病。到目前为止,在人类血红蛋白(Hb)变异和地中海贫血数据库(HbVar: https: //***/)中收录的β-地贫突变类型有300多种。

关键词： 血红蛋白E   地中海贫血   基因型   血液学特征  

摘要： 目的分析惠州客家地区血红蛋白E(Hb E)病患者的发生率、基因型分布和血液学特征。方法收集2014年4月至2021年10月在惠州市中心人民医院和惠州市第一妇幼保健院进行地贫基因检测的标本共114902例,选择经检测确诊为Hb E的546例患者作为研究对象。使用血细胞分析仪和全自动毛细管电泳仪检测Hb E病患者的血液学指标,采用PCR-流式荧光杂交技术和导流杂交技术检测α-和β-地中海贫血(简称地贫)基因。结果惠州客家地区人群Hb E病的发生率为0.475%,共检出15种基因型,其中以Hb E杂合子分布居多,占84.80%。Hb E杂合子患者呈轻微小细胞低色素性贫血,合并α+-地贫时表型有所缓解,合并α^(0)-地贫时表型不能被缓解。三组Hb E病患者之间的血液学参数比较分析显示各组间的平均红细胞体积(MCV)与Hb E差异均有统计学意义(P<0.05)。其中,各组Hb E含量的原始数据分布最集中,且Hb E含量随着合并α-珠蛋白基因突变个数的增多而减少。合并Hb H病时,均表现为轻度贫血,电泳未检出异常Hb H,Hb A_(2)含量小于3.5%,Hb E含量在10%左右。合并β^(-28)表现为轻至中度贫血,Hb A_(2)含量均大于5%,Hb E含量在50%左右,再合并α-地贫时表型可被缓解。结论惠州客家地区人群Hb E病发生率高,本研究有助于为疾病筛查和产前诊断以及遗传咨询提供临床参考资料。

关键词： 中华医学会   致死性疾病   β地贫   β地中海贫血   输血依赖   生存质量   β珠蛋白基因   社会经济文化  

摘要： β地中海贫血(β地贫)是由于β珠蛋白基因缺陷导致的遗传性溶血性疾病,是WHO关注的全球社会公共问题之一,我国南方地区如广东、广西、海南、云南、贵州、江西、湖南、四川、重庆、福建、香港、澳门及台湾是β地贫的高发区。20世纪80年代以前输血依赖型β地贫(TDT)被认为是致死性疾病,随着医疗技术及社会经济文化的巨大进步,TDT得到了有效的预防及管理,患者的寿命得到了极大的延长,生存质量得到了显著的提高。为进一步提高我国TDT(特别是成年TDT)的诊断及治疗水平,中华医学会血液学分会征求有关专家的意见,参考最新的国际地中海贫血联盟(TIF)的指南及我国以往的专家共识和相关文献,形成这部指南,旨在进一步规范我国TDT的诊断及治疗。

关键词： 地中海贫血   铁过载   螯合剂  

摘要： 地中海贫血(Thalassemia)是由于珠蛋白链比例失衡而产生异源四聚体引起的溶血性贫血。严重地贫生存依赖于定期输血,这反过来又会导致输血铁过载和由铁毒性引起的继发性多器官损伤。现将有关铁过载在不同类型地贫中的机制、如何诊断与量化,以及处理方案综述如下,本文希望能为地中海贫血进一步的临床诊疗提供参考。

关键词： 血红蛋白电泳   地中海贫血基因检测   地中海贫血   早期诊断  

摘要： 目的分析血红蛋白电泳联合地中海贫血(地贫)基因检测对地中海贫血的早期诊断价值,并探讨血红蛋白A2(Hb A2)在不同类型地中海贫血早期诊断中的应用价值。方法选取2021年7月1日至2021年7月30日于广东省鹤山市人民医院就诊的疑似地中海贫血患者208例作为研究对象。将血红蛋白电泳筛查结果为阳性的标本进一步进行地贫基因检测,并根据地贫基因检测结果进行分组,比较各组血红蛋白指标。通过全自动毛细血管血红蛋白电泳分析Hb A2水平,绘制受试者工作曲线(ROC)评估Hb A2在不同类型地中海贫血早期诊断中的价值。结果血红蛋白电泳筛查208例疑似地中海贫血的患者,结果显示,阳性例数共50例(24.03%,50/208),其中疑似α-地中海贫血41例(82.00%,41/50),疑似β-地中海贫血9例(18.00%,9/50)。将50例血红蛋白电泳呈阳性患者进一步进行地贫基因检测,结果显示,确诊为地中海贫血28例(56.00%,28/50),其中α-地中海贫血20例(71.42%,20/28),与血红蛋白电泳筛查符合率为48.78%;β-地中海贫血确诊为8例(28.57%,8/28),与血红蛋白电泳筛查符合率为88.88%。将地贫基因检测结果为阳性的28例地中海贫血分为α-地中海贫血组20例[静止型α-地中海贫血17例,中间型α-地中海贫血3例]与β-地中海贫血组8例[轻型β-地中海贫血6例,其他2例],并将地贫基因检测结果为阴性的22例作为阴性对照组。分别比较各组血红蛋白指标,发现β-地中海贫血组Hb A2高于阴性对照组、α-地中海贫血组(P<0.05);α-地中海贫血组、β-地中海贫血组血红蛋白F均高于阴性对照组(P<0.05);阴性对照组血红蛋白A高于α-地中海贫血组、β-地中海贫血组,但差异未见统计学意义(P>0.05)。Hb A2指标在诊断静止型、轻型、中间型α-地中海贫血和轻型β-地中海贫血的AUC分别为0.708、0.834、0.957、0.987;最佳截断值为2.83%、2.60%、2.20%、3.43%;敏感度为48.16%、72.66%、95.31%、99.30%;特异度为83.33%、83.70%、92.90%、96.90%。结论血红蛋白电泳联合地贫基因检测可提高非地中海贫血的排除率及地中海贫血的检出率,尤其是β-地中海贫血在血红蛋白电泳检出率更高,且Hb A2指标对诊断中间型α-地中海贫血和轻型β-地中海贫血准确性高,可用于早期诊断地中海贫血。

关键词： β-地中海贫血   BCL11A基因   rs4671393位点   rs766432位点   胎儿血红蛋白  

摘要： 目的检测β-地中海贫血患者B细胞淋巴瘤因子11A(BCL11A)基因rs4671393、rs766432位点的多态性并研究其与胎儿血红蛋白(HbF)水平的相关性,为临床提供参考。方法选取2020年1月至2021年6月深圳市宝安区石岩人民医院收治的120例β-地中海贫血患者设为观察组,另选取同期院内100名健康体检者设为对照组,进行回顾性分析。采集两组研究对象外周血2 mL,进行血红蛋白电泳检测HbF;提取血液基因组DNA,PCR扩增,分析BCL11A目的基因rs4671393、rs766432位点多态性PCR限制性片段长度多态性,并对扩增产物进行DNA测序验证酶切结果。比较两组研究对象的rs4671393、rs766432位点基因型与等位基因频率;分析BCL11A基因rs4671393、rs766432位点不同基因型与HbF的相关性。结果观察组研究对象rs4671393位点AA基因型、A等位基因频率高于对照组(P<0.05),观察组研究对象rs766432位点CC基因型、C等位基因频率较高于对照组(P<0.05),经Spearman检验,BCL11A基因rs4671393、rs766432位点与HbF水平呈正相关(P<0.05)。结论宝安地区的β-地中海贫血患者与健康人群的rs4671393、rs766432位点基因型分布和等位基因频率存在一定差异,此外β-地中海贫血患者rs4671393位点的G-A突变、rs766432位点的A-C突变可能促进HbF的合成。

关键词： 地中海贫血   CRISPR/Cas9   同义突变   单碱基突变  

摘要： 目的 建立一种高效构建β-地中海贫血CD17(A>T)点突变基因型HEK293T细胞系的方法。方法 利用改良的CRISPR/Cas9基因编辑技术,即无痕基因组编辑(consecutive re-Guide or re-Cas steps to erase CRISPR/Cas-blocked targets, CORRECT),通过电转染CRISPR/Cas9质粒诱导HEK293T细胞HBB基因切割,同时以引入有CD17(A>T)点突变和同义突变碱基(G>T)的单链寡核苷酸(singlestranded oligo DNA nucleotides, ssODNs)作为同源模板进行重组,经单克隆筛选、测序验证获得β-珠蛋白基因(HBB)点突变CD17(A>T)基因型HEK293T细胞系。结果 利用“CORRECT”技术成功获得一株β-地贫CD17(A>T)基因型点突变的HEK293T细胞系,同义突变的引入减少Cas9蛋白对靶点不准确的再编辑,提高单碱基突变效率。结论 通过“CORRECT”技术可以高效获得点突变的293T细胞系,对单碱基突变疾病模型的细胞系及动物模型的建立具有重要意义。

关键词： 地中海贫血   年龄   基因型   血液学表型  

摘要： 目的:了解本地区人群中地中海贫血基因型分布特点,分析β-地中海贫血杂合子血液学表型与年龄的关系。方法:选取2017年6月至2021月6月于成都医学院第一附属医院检测地贫基因疑似病例1 351例,采用PCR-反向斑点杂交法检测常见α、β地中海贫血基因类型,收集确诊病例的MCV、MCH、MCHC、Hb数据。β-地中海贫血杂合子患者按照年龄分为0-18岁组、19-50岁组、> 50岁组,比较各组间血液学表型的差异。结果:在1 351例检测标本中,确诊地中海贫血523例(38.71%),其中13种基因型α-地贫260例(19.25%),12种基因型β-地贫252例(18.65%),9种基因型α复合β地贫11例。MCV、MCH在0-18岁组、19-50岁组、> 50岁组呈明显上升趋势,MCHC在0-18岁组最高,Hb在> 50岁组最低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:本地区α-地中海贫血以--^(SEA)/αα基因型为主,β地中海贫血以CD41-42/N、IVS-II-654/N基因型为主,且在β-地中海贫血杂合子中,MCV、MCH在0-18岁组最低、在> 50岁组最高,年龄对地中海贫血初筛中血液学参数的影响,为临床诊疗过程中提供了一定的参考价值。