关键词： 地中海贫血   铁过载   螯合剂  

摘要： 地中海贫血(Thalassemia)是由于珠蛋白链比例失衡而产生异源四聚体引起的溶血性贫血。严重地贫生存依赖于定期输血,这反过来又会导致输血铁过载和由铁毒性引起的继发性多器官损伤。现将有关铁过载在不同类型地贫中的机制、如何诊断与量化,以及处理方案综述如下,本文希望能为地中海贫血进一步的临床诊疗提供参考。

关键词： 血红蛋白电泳   地中海贫血基因检测   地中海贫血   早期诊断  

摘要： 目的分析血红蛋白电泳联合地中海贫血(地贫)基因检测对地中海贫血的早期诊断价值,并探讨血红蛋白A2(Hb A2)在不同类型地中海贫血早期诊断中的应用价值。方法选取2021年7月1日至2021年7月30日于广东省鹤山市人民医院就诊的疑似地中海贫血患者208例作为研究对象。将血红蛋白电泳筛查结果为阳性的标本进一步进行地贫基因检测,并根据地贫基因检测结果进行分组,比较各组血红蛋白指标。通过全自动毛细血管血红蛋白电泳分析Hb A2水平,绘制受试者工作曲线(ROC)评估Hb A2在不同类型地中海贫血早期诊断中的价值。结果血红蛋白电泳筛查208例疑似地中海贫血的患者,结果显示,阳性例数共50例(24.03%,50/208),其中疑似α-地中海贫血41例(82.00%,41/50),疑似β-地中海贫血9例(18.00%,9/50)。将50例血红蛋白电泳呈阳性患者进一步进行地贫基因检测,结果显示,确诊为地中海贫血28例(56.00%,28/50),其中α-地中海贫血20例(71.42%,20/28),与血红蛋白电泳筛查符合率为48.78%;β-地中海贫血确诊为8例(28.57%,8/28),与血红蛋白电泳筛查符合率为88.88%。将地贫基因检测结果为阳性的28例地中海贫血分为α-地中海贫血组20例[静止型α-地中海贫血17例,中间型α-地中海贫血3例]与β-地中海贫血组8例[轻型β-地中海贫血6例,其他2例],并将地贫基因检测结果为阴性的22例作为阴性对照组。分别比较各组血红蛋白指标,发现β-地中海贫血组Hb A2高于阴性对照组、α-地中海贫血组(P<0.05);α-地中海贫血组、β-地中海贫血组血红蛋白F均高于阴性对照组(P<0.05);阴性对照组血红蛋白A高于α-地中海贫血组、β-地中海贫血组,但差异未见统计学意义(P>0.05)。Hb A2指标在诊断静止型、轻型、中间型α-地中海贫血和轻型β-地中海贫血的AUC分别为0.708、0.834、0.957、0.987;最佳截断值为2.83%、2.60%、2.20%、3.43%;敏感度为48.16%、72.66%、95.31%、99.30%;特异度为83.33%、83.70%、92.90%、96.90%。结论血红蛋白电泳联合地贫基因检测可提高非地中海贫血的排除率及地中海贫血的检出率,尤其是β-地中海贫血在血红蛋白电泳检出率更高,且Hb A2指标对诊断中间型α-地中海贫血和轻型β-地中海贫血准确性高,可用于早期诊断地中海贫血。

关键词： β-地中海贫血   BCL11A基因   rs4671393位点   rs766432位点   胎儿血红蛋白  

摘要： 目的检测β-地中海贫血患者B细胞淋巴瘤因子11A(BCL11A)基因rs4671393、rs766432位点的多态性并研究其与胎儿血红蛋白(HbF)水平的相关性,为临床提供参考。方法选取2020年1月至2021年6月深圳市宝安区石岩人民医院收治的120例β-地中海贫血患者设为观察组,另选取同期院内100名健康体检者设为对照组,进行回顾性分析。采集两组研究对象外周血2 mL,进行血红蛋白电泳检测HbF;提取血液基因组DNA,PCR扩增,分析BCL11A目的基因rs4671393、rs766432位点多态性PCR限制性片段长度多态性,并对扩增产物进行DNA测序验证酶切结果。比较两组研究对象的rs4671393、rs766432位点基因型与等位基因频率;分析BCL11A基因rs4671393、rs766432位点不同基因型与HbF的相关性。结果观察组研究对象rs4671393位点AA基因型、A等位基因频率高于对照组(P<0.05),观察组研究对象rs766432位点CC基因型、C等位基因频率较高于对照组(P<0.05),经Spearman检验,BCL11A基因rs4671393、rs766432位点与HbF水平呈正相关(P<0.05)。结论宝安地区的β-地中海贫血患者与健康人群的rs4671393、rs766432位点基因型分布和等位基因频率存在一定差异,此外β-地中海贫血患者rs4671393位点的G-A突变、rs766432位点的A-C突变可能促进HbF的合成。

关键词： 地中海贫血   CRISPR/Cas9   同义突变   单碱基突变  

摘要： 目的 建立一种高效构建β-地中海贫血CD17(A>T)点突变基因型HEK293T细胞系的方法。方法 利用改良的CRISPR/Cas9基因编辑技术,即无痕基因组编辑(consecutive re-Guide or re-Cas steps to erase CRISPR/Cas-blocked targets, CORRECT),通过电转染CRISPR/Cas9质粒诱导HEK293T细胞HBB基因切割,同时以引入有CD17(A>T)点突变和同义突变碱基(G>T)的单链寡核苷酸(singlestranded oligo DNA nucleotides, ssODNs)作为同源模板进行重组,经单克隆筛选、测序验证获得β-珠蛋白基因(HBB)点突变CD17(A>T)基因型HEK293T细胞系。结果 利用“CORRECT”技术成功获得一株β-地贫CD17(A>T)基因型点突变的HEK293T细胞系,同义突变的引入减少Cas9蛋白对靶点不准确的再编辑,提高单碱基突变效率。结论 通过“CORRECT”技术可以高效获得点突变的293T细胞系,对单碱基突变疾病模型的细胞系及动物模型的建立具有重要意义。

关键词： 地中海贫血   年龄   基因型   血液学表型  

摘要： 目的:了解本地区人群中地中海贫血基因型分布特点,分析β-地中海贫血杂合子血液学表型与年龄的关系。方法:选取2017年6月至2021月6月于成都医学院第一附属医院检测地贫基因疑似病例1 351例,采用PCR-反向斑点杂交法检测常见α、β地中海贫血基因类型,收集确诊病例的MCV、MCH、MCHC、Hb数据。β-地中海贫血杂合子患者按照年龄分为0-18岁组、19-50岁组、> 50岁组,比较各组间血液学表型的差异。结果:在1 351例检测标本中,确诊地中海贫血523例(38.71%),其中13种基因型α-地贫260例(19.25%),12种基因型β-地贫252例(18.65%),9种基因型α复合β地贫11例。MCV、MCH在0-18岁组、19-50岁组、> 50岁组呈明显上升趋势,MCHC在0-18岁组最高,Hb在> 50岁组最低,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:本地区α-地中海贫血以--^(SEA)/αα基因型为主,β地中海贫血以CD41-42/N、IVS-II-654/N基因型为主,且在β-地中海贫血杂合子中,MCV、MCH在0-18岁组最低、在> 50岁组最高,年龄对地中海贫血初筛中血液学参数的影响,为临床诊疗过程中提供了一定的参考价值。

关键词： 同胞全和干细胞移植   非亲缘干细胞移植   单倍体干细胞移植   重型β-地中海贫血   长期生活质量  

摘要： 目的了解同胞人类白细胞抗原(HLA)全合、非亲缘HLA全和及单倍体造血干细胞移植术后重型β-地中海贫血患儿长期生存质量情况。方法选取2012—2019年于广西医科大学第一附属医院干细胞移植病区收治的不同移植类型的133例重型β-地中海贫血患儿为研究对象,其中男87例,女46例,平均年龄为5.39岁。使用单因素分析和多重线性回归分析重型β-地中海贫血患儿造血干细胞移植术后长期生存质量的相关因素。计量资料采用独立样本t检验或单因素方差分析,计数资料采用χ2检验。结果133例重型β-地中海贫血患儿及其家长参与本次问卷调查。急性移植物抗宿主病(GVHD)发生率为14.3%(19/133),慢性GVHD发生率为3.8%(5/133)。接受非亲缘HLA全合移植的患儿生活质量评分均较高,急性GVHD、慢性GVHD和合并症发生率均低于接受单倍体造血干细胞源移植的患儿(均P<0.05)。外周血干细胞移植(PBSCT)或脐血干细胞移植(UCBT)、PBSCT+骨髓移植(BMT)、BMT、BMT+UCBT均对生活质量无明显影响(均P>0.05)。单因素分析表明年龄(B=-3.234,P<0.001)、慢性GVHD(B=-19.452,P=0.001)、并发症(B=-23.327,P<0.001)和移植时长(B=13.369,P<0.001)与移植后重型β-地中海贫血患儿生活质量相关,其他因素如性别、移植物类型、供者类型、HLA是否相合、供受者血型是否相合、GVHD预防方案、急性GVHD与患儿生活质量均无显著相关性(均P>0.05)。多元线性回归分析表示患儿年龄越大、并发症种类越多,患儿移植后生活质量越差,而随着移植后时间延长,患儿生活质量越好(均P<0.05)。结论有合适供者重型地中海贫血患儿尽早进行异基因造血干细胞移植,注重控制移植并发症,保证患儿移植后生活质量。

关键词： 地中海贫血基因诊断   优生优育   新生儿质量   地中海贫血   产前诊断  

摘要： 目的:研究诊断地中海贫血基因在优生优育指导中的应用价值。方法:选取2020年1月-2021年12月常规产检的夫妇共1542例,检测地中海贫血基因并分析检测结果。结果:1542例育龄人群初筛阳性340例(22.05%),基因诊断显示地中海贫血基因阳性218例(14.14%);49对双方均为同型基因高危地中海贫血夫妇中孕产妇进行产前诊断结果显示,正常胎儿、各类重型/中间型地贫胎儿分别检出14例、14例,经干预后14例重型/中间型地贫胎儿家庭中12例终止妊娠。结论:荆门市是地中海贫血高发地区,人群携带率较高,婚前检查、孕检或产前诊断应重点关注地贫基因诊断,为遗传咨询提供可靠依据,并给予待孕夫妇遗传咨询与指导,可提高新生儿质量。

关键词： 地中海贫血   异基因造血干细胞移植   芦可替尼   移植物抗宿主病   儿童  

摘要： 目的:评价芦可替尼预防儿童干细胞移植后移植物抗宿主病(GVHD)的有效性和安全性。方法:收集2020年3月-2021年3月期间本院完成的22例非亲缘供者和单倍体相合同胞供者造血干细胞移植的重型地中海贫血患儿,移植后+30到+100 d口服芦可替尼5 mg/d预防GVHD,观察治疗后患者急性GVHD、慢性GVHD,CMV、EBV病毒感染状况。结果:22例患者全部植入成功,5例患者诊断为急性GVHD,3例为II度以下皮肤GVHD,2例为II度肠道GVHD例,经治疗后痊愈,无死亡病例。全部患者随访时间超过21周,累计慢性GVHD 4例,其中局限性肝脏GVHD 3例,肺部GVHD 1例,经积极治疗后获得缓解。8例患者出现EBV copies升高(>3×10^(3)/ml),3例患者出现CMV copies数增加,给予减停免疫抑制剂、抗病毒治疗后恢复。没有患者发生CMV感染性疾病和EBV阳性的淋巴组织增殖异常,无移植相关的死亡。结论:对于替代供者移植的儿童患者,预防性应用芦可替尼可有效地减少GVHD的发生和严重程度,不影响造血恢复,改善了地贫儿童的移植后生存状况。

关键词： 新型冠状病毒肺炎   输血依赖型地中海贫血   输血   疫情防控  

摘要： 目的探讨新冠肺炎疫情期间输血依赖型地中海贫血(transfusion-dependent thalassemia,TDT)患儿输血现状及影响因素,为实施干预措施提供依据。方法采用自行设计问卷调查表对2020年3—5月在右江民族医学院附属医院输血治疗的150例TDT患儿家属进行调查。结果80.67%患儿未能定期规律返院输血。二元logistic回归分析结果显示,区域封闭式管理(OR=7.352,P<0.05)、血源短缺(OR=19.880,P<0.001)、担心感染新冠肺炎(OR=3.390,P<0.05)是新冠肺炎疫情期间TDT患儿未能规律返院输血的主要影响因素。结论新冠肺炎疫情期间TDT患儿的规律输血治疗受到严重影响,建议实施多部门合作模式,共同帮助解决问题,以提高患儿规律返院输血率。

关键词： 地中海贫血   核酸杂交   血蛋白电泳   分子流行病学   曲靖地区   血常规  

摘要： 目的本研究通过分析血常规、血红蛋白电泳及基因检测,旨在调查云南省曲靖地区地中海贫血(TM)的基因突变情况,系统分析TM的流行病学数据,为设计适当的预防策略提供参考,降低TM缺陷儿出生,提高居民生活质量。方法选取2017年7月至2021年8月在云南省曲靖市第一人民医院就诊的门诊、住院贫血患者共20952例患者进行血液学筛查,包括血常规指标,如平均红细胞体积(MCV),平均血红蛋白含量(MCH),血红蛋白(Hb),高效液相色谱(HPLC)对Hb进行电泳,对表型阳性者用聚合酶链反应(PCR)流变杂交技术检测中国人群常见的α和β地贫-TM突变类型,进一步调查1821例疑似的TM携带者。结果共诊断出地中海贫血携带者464例(25.48%),其中α-TM 164例(9.01%),β-TM 284例(15.60%),α合并β-TM 16例(0.88%),携带率分别为2.21%,0.78%,1.36%,0.08%。本次研究共检测出13种等位基因共21种基因型。包括静止型α-TM(-α^(3.7)/αα、-α^(4.2)/αα、α^(QS)α/αα、α^(CS)α/αα)49.39%,轻型(东南亚型)α-TM(-SEA/αα)47.56%、中间型(HbH病)α-TM(--SEA/-α^(4.2)、--SEA/-α^(3.7))3.05%;β-TM基因型有CD17/β^(N)(34.86%)、CD41-42/β^(N)(23.94%)、βE/β^(N)突变(22.18%)、IVS-Ⅱ-654/β^(N)(15.85%)、-29/β^(N)(1.06%)、CD71-72/β^(N)(1.41%)、Cap/β^(N)(0.70%);α合并β复合型TM基因型有α^(3.7)/αα联合CD41-42/β^(N)突变(25.00%)、--SEA/αα联合IVS-Ⅱ-654/β^(N)突变(25.00%)、α^(3.7)/αα联合βe/β^(N)突变(12.50%)、--SEA/-α^(4.2)联合CD41-42/β^(N)突变(12.50%)、αWSα/αα联合βe/β^(N)突变(12.50%)、αWSα/αα联合CD41-42/β^(N)突变(12.50%)。结论曲靖地区TM基因携带率相对较高,常见的突变类型均在该地出现,这些发现将有助于临床遗传咨询,对曲靖地区TM防控有重要意义。