关键词： 纳米金颗粒   单核苷酸多态性   地中海贫血   基因诊断  

摘要： 背景及目的:单核苷酸多态性SNP主要是指在基因组水平上由单个核苷酸的变异所引起的DNA序列多态性,是可遗传变异中最常见的突变。SNP遗传稳定性强,数量多,覆盖面广,已经取代限制性片段长度多态和微卫星多态,成为第三代DNA分子标记。人类的SNP通常表现为双等位基因多态性,可分为突变纯合子、正常纯合子和杂合子三种基因型,许多疾病的发生发展与单个碱基的突变密切相关,准确快速地检测SNP基因型,对疾病、临床检测和分子诊断等有重大意义。本研究以β地中海贫血的球蛋白基因的IVS-2-654和CD17这二个点突变作为研究对象,通过纳米金颗粒技术提高不对称PCR扩增特异性得到检测靶序列,运用无标记核酸探针技术,联合连接酶的高保真连接特性,构建一种不同基因型之间有显著熔点差异的单核苷酸多态性SNP的检测方法。 方法:利用纳米金颗粒介导不对称PCR得到检测靶序列,构建一种新的无标记核酸探针,综合连接酶技术和熔点差异扩大技术,通过连接反应介导显著提高不同基因型之间的熔点差异,然后根据不同的熔点峰快速准确地进行SNP多态性检测和分型。 结果:适宜浓度的纳米金颗粒提高了PCR扩增效率,通过无标记核酸探针,在连接反应过程中,各基因型产生了较大的熔点差异,实现了准确快速地点突变基因型分型,并成功对球蛋白基因的IVS-2-654和CD17这二个点突变的三种基因型进行有效分型。 结论:通过纳米金颗粒介导的不对称PCR扩增,使PCR产量和效率得以提高,获得了高质量的产物。设计了一种新的无标记核酸探针,通过连接酶技术和熔点差异扩大技术,创建了一种无荧光标记的SNP检测与分型的新方法。该方法具有准确、方便、快捷及成本低等特点,具有良好的保真性,有望对遗传病的筛查、预防和基因诊断有一定意义

关键词： 地中海贫血/诊断   儿童   广西[壮族自治区  

摘要： 目的调查贺州市儿童地中海贫血(地贫)发生率及类型,为本地区该病防治及优生优育奠定基础。方法采用雅培CD-3700血球仪、美国Helena电泳系统分别进行红细胞参数、血红蛋白电泳分析。结果在800例中检出α地贫55例,血红蛋白H病8例,β地贫杂合子29例,检出率分别是6.88%、1.00%、3.63%。结论贺州市是地贫发生率较高地区,应加强对儿童进行血液学筛查和基因诊断。

关键词： 出生人口素质   地中海地区   南宁市   计生委   贫血   预防   黄海   主任  

摘要： 地中海贫血（简称＂地贫＂）是一种遗传性慢性溶血性贫血病,因其首先在地中海地区发现而得名。南宁是＂地贫＂高发区,携带的人群比例大,分布范围广,而且此病是通过遗传的方式传播,并具有危害性大的特点。针对这一病症的特征,南宁市人口计生委坚持以人为本,从预防＂地贫＂入手,着手开展杜绝＂地贫＂儿出生的工作和科学研究,取得了显著的成效。为此,本刊记者对南宁市人口计生委主任黄海进行了专访。

关键词： 海洋性贫血   家系   基因检测  

摘要： 目的:了解海洋性贫血的遗传规律;提高对本病的认识、宣教,做好遗传咨询,产前诊断,减少海洋性贫血患儿出生。方法:在选定的4例先证者所能寻找到的家族成员56例中采集血样,采用PCR反向点杂交技术检测β-海洋性贫血基因突变类型,用跨跃断裂位点PCR技术和凝胶电泳检测α-海洋性贫血基因缺失类型。结果:在4例家系调查先证者的56例家族成员中检出阳性44例(78.6%)。结论:海洋性的PCR基因检测技术具有简便、快捷和准确的特点,且灵敏度高、检出率高、结果可靠。海洋性贫血符合常染色体显性遗传,男女均要发病,代代遗传,需加强婚前检查及产前诊断。

关键词： 妊娠   地中海贫血   MCV   MCH  

摘要： 目的：探讨平均红细胞体积（MCV）和平均红细胞血红蛋白含量（MCH）在妊娠周期中的变化规律及MCV、MCH对地贫筛查的价值。方法：收集2007年珠海市妇幼保健院正常育龄妇女的血细胞分析数据550例,通过随机数字法取110例,求其平均值为对照组。孕妇血细胞分析数据4 958例为实验组,通过分组求其平均值并通过SPSS 12.0软件画出相应曲线,观察MCV、MCH随孕周不同其值的变化规律,并与对照组进行比较。同时另收集地中海贫血筛查中经基因分析确诊的327例血细胞分析数据,通过受试者工作曲线（ROC）分析MCV、MCH对地贫筛查价值的大小。结果：对照组的MCV平均值为86.7 fl,MCH平均值为29.8 pg。实验组的MCV、MCH随孕周的增长而逐步增大,22~25周左右达高峰,随后下降。MCV的ROC曲线下面积达0.910,MCH的ROC曲线下面积达0.907。对照组与实验组的MCV值在孕26~29周有差异,MCH值在孕22~29周有差异。实验组的MCV、MCH值从孕26周开始下降。结论：孕妇的MCV和MCH随孕周的增加先升后降;MCV和MCH指标在妊娠期均可有效地筛查出地贫携带者。

关键词： 胎儿贫血   Hb-Bart’s病   纯合型α0-地中海贫血   胎盘   三维超声   体积  

摘要： 目的探讨三维超声测量胎盘体积预测胎儿纯合型α0-地中海贫血(Hb-Bart’s病)的应用价值。方法在2002年6月～2004年5月期间对孕9～12周有α0-地中海贫血风险的胎儿组和正常对照组的单胎妊娠进行前瞻性研究。受累胎儿指二维超声检查提示α0-地中海贫血,并通过DNA检测证实的胎儿。胎盘体积通过三维超声扫描技术测量。同时评估操作者内和操作者间的测量结果的一致性。比较受累胎儿和正常对照组的胎盘体积-头臀长比值。结果最终研究对象包括105名孕妇,其中43名为α0-地中海贫血高危组,62名为正常对照组。有11名(10.5%)胎儿确定患有α0-地中海贫血,均来自高危组,其余均为正常胎儿。三维超声测量胎盘体积的操作者内和操作者间的测量结果一致性相对较差,这主要表现在一致性的变异范围较大(-10.82～40.86mL)。受累妊娠组的胎盘体积-头臀长比值的平均值±标准差(1.37±0.65)大于未受累妊娠组(1.13±0.39),但这个差异无统计学意义(P>0.05)。结论在孕早期通过三维超声测量胎盘体积来预测α0-地中海贫血并不优于二维超声。

关键词： 地中海贫血   基因诊断   产前诊断   突变热点  

摘要： 目的:建立地中海贫血(地贫)的基因诊断和产前诊断方法,探讨云南人群地贫的基因突变类型。方法:运用多重PCR和PCR-RDB杂交技术对174例疑似患者分别进行α地贫和β地贫的基因诊断,对25例地贫高风险胎儿进行产前诊断。结果:在174例疑似地贫患者中检出地贫基因突变133例,其中α珠蛋白基因突变50例,β珠蛋白基因突变83例;在25例胎儿中检出1例HbH-CS病胎儿、1例HbBart’s胎儿水肿综合征,均诊断后引产,另有6例轻型α地贫携带者胎儿和8例β地贫携带者胎儿足月分娩。结论:应用多重PCR和PCR-RDB技术能够快速、有效地检出76.4%云南地贫疑似病例的基因突变,可作为常规基因诊断和产前诊断方法;云南人群的β地贫基因突变热点及发生率可能与国内其他地区不同,有必要进一步扩大云南的地中海贫血筛查研究。

关键词： 地中海贫血基因   基因诊断   云南   单基因遗传病   基因突变类型   东南亚地区   马来群岛   健康问题  

摘要： 地中海贫血是东南亚地区及我国南方最常见的一种单基因遗传病.国内外地中海贫血流行高发地区位于我国广东、广西、马来群岛[1]、埃及[2]等地.本病已经成为一个倍受关注的公共卫生健康问题.地中海贫血基因有地理和种族特异性,不同地区和不同民族基因突变类型可能有较大差异.

关键词： β-地中海贫血   反向点杂交   临床应用   贵州地区  

摘要： 目的:探讨β-地中海贫血基因诊断的临床应用价值。方法:采用反向点杂交技术,对84例可疑β-地中海贫血患者进行基因分析。结果:84例患者中检出49例β-地中海贫血,检出率为58.3%。共检出8种突变基因型,其中CD17杂合子占46.9%,CD41-42杂合子占22.5%;检出的5种突变等位基因按发生频率由大到小排列为:CD17、CD41-42、CD71-72、IVS-Ⅱ-654、βE(CD26),其中CD17(A→T)的发生频率为51.7%。结论:反向点杂交技术是临床确诊β-地中海贫血的一种准确可靠的基因诊断方法;CD17(A→T)是贵州地区最常见的β-地中海贫血基因突变类型。

关键词： MCV   RDW   地中海贫血  

摘要： 目的:探讨MCV和RDW在地中海贫血中变化的临床价值。方法:采用回顾性分析的方法,分析地中海贫血、缺铁性贫血患者及健康体检人员的MCV和RDW的变化情况。结果:地中海贫血组MCV明显低于健康对照组,明显高于缺铁性贫血组(P<0.05);RDW明显高于健康对照组,明显低于缺铁性贫血组(P<0.05);诊断为地中海贫血患者MCV<80 fl、RDW正常所占比例70.8%,明显高于MCV<80 fl、RDW>15.0%所占比例29.2%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:MCV和RDW作为诊断地中海贫血的敏感指标,临床推行性较广,准确率较高,值得临床推广应用。