关键词： 地中海贫血   毛细管电泳   非缺失型   血红蛋白Constant   Spring  

摘要： 目的评价Capillarys 2型毛细管电泳仪在检测α非缺失型地中海贫血(地贫)Hb Constant Spring(Hb CS)中的应用价值。方法用Capillarys 2型毛细管电泳仪分别对确诊的67例Hb CS患者、50例非地贫患者和54例健康人进行血红蛋白电泳,提取全血基因组DNA进行PCR扩增及反向斑点杂交试验检测Hb CS。随机选取含量分别为0.1%、0.2%、1.5%、1.6%、2.7%和2.8%的6份Hb CS标本各重复测定5次,以评价仪器的重复性。结果以PCR加反向斑点杂交为金标准,Capillarys2型毛细管电泳仪测定Hb CS的敏感性和特异性分别为94.0%、98.1%,阳性预测值为96.9%,阴性预测值为96.2%,诊断效率为96.5%。Hb CS纯合子的Hb CS含量为(1.82±0.60)%,Hb CS杂合子为(0.55±0.26)%,二者差异有统计学意义(t=9.31,P<0.01)。重复性测定的6份标本值分别为(0.12±0.04)%、(0.18±0.04)%、(1.52±0.04)%、(1.6±0)%、(2.66±0.05)%、(2.8%±0.06)%。结论 Capillarys 2型毛细管电泳仪作为α非缺失型地贫血红蛋白CS的快速检测手段,有较高的敏感性、特异性和较好的重复性。

关键词： β地中海贫血   高保真聚合酶   硫化修饰引物  

摘要： 目的:采用高保真DNA聚合酶介导的基因突变敏感性分子开关准确、快速检测β地中海贫血。方法:首先提取正常人血液基因组DNA,根据已知β珠蛋白基因热点突变CD41-42、IVS2-654区域序列,分别设计突变序列扩增引物,利用低保真酶进行引物延伸反应,将其PCR产物克隆到pMD19-T载体,得到β地中海贫血常见的两个突变位点的基因突变克隆:CD41-42、IVS2-654,然后以这两个突变位点为检测靶点,分别设计3′末端与野生型基因位点或突变基因位点配对的引物,硫化磷酸修饰3′末端并偶联高保真DNA聚合酶构成的基因突变敏感性分子开关,对含有相应突变的阳性质粒模板及正常人基因组DNA模板进行引物延伸反应,并通过凝胶成像系统对其进行分析。结果:当引物与模板完全配对时,引物被延伸,有PCR产物;当引物与模板不完全配对时,引物不被延伸,无PCR产物。结论:高保真DNA聚合酶介导的基因突变敏感性分子开关能准确、快速筛查β地中海贫血CD41-42、IVS2-654突变,提示其在单基因遗传病的诊断中具有广阔的应用前景。

关键词： 壮族人群   地中海贫血   现状干预  

摘要： 目的:预防和控制壮族人群地中海贫血重症患儿的出生,减少出生缺陷,提高壮族人群出生人口素质。方法:监测居住在武鸣县的,父母双方均为壮族的产妇(包括本地户口以及非本地户口在监测地区居住一年以上的产妇),妊娠至生后42天的胎婴儿。结果:应监测父母双方均为壮族胎婴儿12087人,实监测11738人,实监测人数占应监测人数的97.11%。地中海贫血(胎儿水肿综合征)出生缺陷22例,出生缺陷发生率1.87%;孕28周前行治疗性引产的地中海贫血胎儿16例。结论:地中海贫血在武鸣县壮族人群出生缺陷种类排序中居第2位,是武鸣县壮族人群主要出生缺陷之一。推广免费意愿婚前医学检查、产前检查及产前筛查服务等综合干预措施,是降低壮族人群地中海贫血发生率,提高出生人口素质的关键。

关键词： 产前筛查   地中海贫血   MCV   MCH   血红蛋白电泳  

摘要： 目的探讨平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白(MCH)联合血红蛋白(Hb)电泳在地中海贫血筛查中的临床应用价值,对地中海贫血初筛阳性者、夫妇为同型地中海贫携带者进行基因诊断,避免重型地中海贫血患儿出生。方法采用血常规五分类中的MCV、MCH联合血红蛋白电泳进行孕妇产前筛查。结果在3 720例被筛查人群中,筛查阳性765例,阳性率20.56%,其中:筛出α地中海贫血445例,阳性率11.96%,β地中海贫血320例,阳性率8.60%。经基因诊断确诊地中海贫血545例,占筛查总数的14.65%,其中:α地贫308例,占8.28%,β地贫杂合子185例,占4.97%,α复合β地贫52例,占1.40%。结论 MCV、MCH联合血红蛋白电泳可作为地贫初筛阳性的指标,结合基因诊断,对地中海贫的筛查和诊断有较大意义。

关键词： β-地中海贫血   血清铁蛋白   血清维生素D3  

摘要： 【目的】研究广西重型β地中海贫血患者血清铁蛋白(SF)及维生素D3水平,探讨铁过载对重型β地贫患者维生素D3水平的影响。 【方法】对73例重型β地贫患者及73例健康儿童(正常对照组)进行血清SF和维生素D3水平检测,SF及维生素D3均采用电化学发光法检测。 【结果】 ①重型β地贫患者SF的均值为3933.8±2370.21ng/ml(中位值3853ng/m1)；其中重度铁过载(SF＞2500ng/ml)的有48例(65.75%),轻中度铁过载(SF≤2500ng/ml)的有25例,(34.25%)。SF水平与年龄及输血总量相关分析结果示存在正相夭； ②重型β地贫患者维生素D3的均值为21.43±11.28ng/ml,正常对照组维生素D3的均值为27.02±7.43ng/ml(P<0.05)。 ③重型β地贫患者中,维生素D3缺乏的有39例(53.42%),维生素D3相对不足的有23例(31.51%),维生素D3缺乏及相对不足的共62例(占84.93%)；正常对照组维生素D3缺乏的有12例(16.44%),维生素D3相对不足的有35例(47.95%),维生素D3缺乏及相对不足的有47例(64.39%)。重型β地贫患者中维生素D3缺乏及相对不足与正常对照组比较有明显差异(P＜0.05)。 ④重型β地贫患者中,SF与血清维生素D3存在负相关(r=-0.262,P=0.025)。 ⑤在73名重型β地贫患者中,重度铁过载(SF＞2500ng/ml)患者维生素D3均值为18.19±7.70ng/ml,轻中度铁过载(SF52500ng/ml)患者维生素D3均值为27.354±14.18ng/ml。重度铁过载组维生素D3值低于轻中度铁过载组,差异有统计学意义(P<0.05)。 【结论】①重型β地贫患者铁过载情况严重,铁过载与患者年龄及总输血量相关；②重型G地贫患者维生素D3水平显著低于正常对照组；重型β地贫患者中维生素D3缺乏及相对不足的发生率为84.93%,显著高于正常对照组(64.39%)；③重型β地贫患者SF与维生素D,值呈负相关,铁过载可能是导致地贫患者维生素D3浓度低的原因之一。

关键词： 高保真聚合酶   硫化修饰引物   β地中海贫血   基因检测  

摘要： 目的：采用高保真DNA聚合酶介导的基因突变敏感性分子开关准确、快速检测β地中海贫血基因突变。 方法：首先提取正常人血液基因组DNA，根据已知中国人群β珠蛋白基因热点突变CD41-42、IVS-2nt654、TATAbox-28、CD17、CD71-72及CD26区域序列，分别设计引入突变位点的扩增引物，利用低保真酶进行引物延伸反应，将其PCR产物克隆到pMD19-T载体，得到β地中海贫血常见的六个突变位点的基因突变克隆：CD41-42、IVS-2nt654、TATAbox-28、CD17、CD71-72及CD26。然后以这六个突变位点为检测靶点，分别设计3’末端与野生型基因位点或突变型基因位点配对的引物，硫化磷酸修饰后偶联高保真DNA聚合酶构成基因突变敏感性分子开关。首先在不同体系分别对含有相应突变位点的六个阳性质粒模板及正常人基因组DNA模板进行引物延伸反应，并通过凝胶成像系统对其进行分析；然后在同一体系中同时对含有相应突变位点的六个阳性质粒模板及正常人基因组DNA模板进行引物延伸反应，并通过凝胶成像系统对其进行分析；最后对已知分别含有CD26和TATAbox-28突变位点的病人DNA样本进行检测。 结果：在不同反应体系分别对六个热点突变进行检测。结果显示，使用正常人的染色体DNA样本，该方法仅能使野生型等位基因相关引物得以延伸，而突变型等位基因位点特异性引物不能被延伸。反之，使用突变质粒模板，该方法仅能使突变型等位基因位点相关引物得以延伸，而野生型等位基因位点特异性引物不能被延伸。在同一反应体系同时对以上热点突变进行检测。同样，完全配对引物能被延伸，不完全配对引物不能被延伸。对分别含有CD26和TATAbox-28突变位点的病人DNA样本进行检测，与含CD26突变位点的病人DNA模板配对的突变引物有产物，不配对的无产物；与含TATAbox-28突变位点的病人DNA模板配对的突变引物有产物，不配对的无产物。 结论： 1.成功获得可用于基因检测技术研发的人工突变的地中海贫血基因突变阳性模板； 2.高保真聚合酶介导的突变敏感性分子开关对β地中海贫血基因单一热点突变有较高的特异性和敏感性； 3.高保真聚合酶介导的突变敏感性分子开关可用于多重PCR快速筛查β地中海贫血基因热点突变。

关键词： 地中海贫血   铁过载   铁螯合剂   铁代谢障碍  

摘要： 机体铁过载常见于某些遗传性疾病的患者,如地中海贫血。人体铁含量过高可对各脏器功能产生严重影响,并可催化发生氧化还原反应释放羟自由基,破坏多种生物大分子,因此临床对地中海贫血的治疗都需辅以除铁治疗。铁螯合剂可与体内铁离子有效结合并促进铁排泄,降低体内铁含量及其在各器官的病理性沉积。目前临床使用的铁螯合药物有去铁胺、去铁酮和地拉罗司,且均存在局限性。因此,半个世纪以来医药工作者一直致力于寻找口服吸收好、毒副作用小的新药,而HBED,DFT,PIH类化合物有望成为具有临床价值的新铁螯合剂。

关键词： GENETIC testing   METHODOLOGY   BETA-Thalassemia   DECISION making   GENETIC counseling   PATIENT-family relations   RELIGION   RESEARCH -- Finance   SUPERSTITION   RETROSPECTIVE studies   DATA analysis -- Software   GENETIC carriers   PSYCHOLOGY   DESCRIPTIVE statistics   GENETIC aspects  

摘要： Objective Despite premarital screening, prenatal diagnosis and the option for voluntary termination of pregnancy, some Iranian couples continue a pregnancy with a fetus affected with beta-thalassaemia major (beta-TM). We examined the reasons for this decision, to evaluate the sociocultural challenges these couples face. Methods A retrospective evaluation of medical records of all fetuses aborted was conducted to identify those with beta-TM, to determine the frequency of beta-TM births and to establish the number of couples with beta-thalassaemia who declined prenatal diagnosis or a termination of pregnancy in this period. We investigated the reasons for declining these options. Results The birth prevalence of beta-TM decreased from 39.38 to 2.68 in 100,000 live births from 2005 to 2010. Terminations of pregnancy for affected fetuses increased from 67 in 2005 to 135 in 2010. We identified eight couples as beta-thalassaemia carriers who declined prenatal diagnosis or a termination of pregnancy. All but one couple already had a child with beta-TM. The reasons for declining prenatal diagnosis were strong religious beliefs, superstition and faith in a supernatural solution in six couples. Economic and cultural factors, and previous termination of pregnancy were also mentioned as reasons by the other two couples. Conclusion Although most of the couples had a beta-TM child and related socioeconomic problems, their reasons for refusing prenatal diagnosis or termination remain a challenge for the healthcare system in Iran. Couple screening and educational programmes have effectively decreased the rates of refusal in at-risk couples in recent years.

关键词： LETTERS to the editor   BETA-Thalassemia  

摘要： A letter to the editor is presented in response to the article "Beta-Thalassemia Carrier Detection by NESTROFT: An Answer in Rural Scenario?," by I. Chakrabarti, S. K. Sinha, N. Ghosh and B. K. Goswami.

关键词： 地中海贫血   基因型   基因突变频率   种族差异   地域分布   产前诊断  

摘要： 目的：为预防和控制广西重型及中间型地中海贫血患儿的出生，对广西地中海贫血发病情况、基因突变类型、发生频率、种族差异、地域分布情况等进行调查分析，进一步了解广西地中海基因分布情况。 方法：通过收集从2007年1月至2011年12月在广西医科大学第一附院行地中海贫血产前诊断的广西籍同型地贫基因携带者夫妇的相关信息，对其基因类型、种族发病情况、地域分布及产前诊断结果进行回顾性分析。调查结果采用SPSS17.0统计软件进行分析。 结果：在4830例地贫基因携带者中，α-地中海贫血2586例，占53.54%，β-地中海贫血1890例，占39.13%，复合型地贫346例，占7.16%，异常血红蛋白8例，占0.17%。地中海贫血在壮族、汉族及瑶族人群中常见，其他民族仅见散在病例，其中α-地中海贫血在壮族、汉族及瑶族中的比例分别为29.55%、22.48%和1.16%，三个民族间差异有统计学意义，而3个民族的基因突变趋势相似。β-地中海贫血携带者人群中壮族占18.67%，汉族占19.63%，瑶族占0.66%，三者差异有统计学意义，其基因突变类型有显著差异性。地中海贫血人群携带具有显著的地域差异性，以南宁、武鸣、横县、宾阳、贵港、邕宁、玉林、平果例数较多。在2415例进行产前诊断的孕妇中，1086例在孕早期行绒毛活检，占44.97%，1233例行羊膜腔穿刺术，占51.06%，96例行经皮脐静脉穿刺术，占3.97%。检出HbH病145例，Hart’s水肿胎儿169例，重型及中间型β-地贫258例。 结论：本研究中地中海贫血的基因突变具有相同趋势，其发生频率有差异，α-地中海贫血携带者检出率高于β-地中海贫血。地中海贫血具有显著的地域差异和种族差异。产前诊断是避免重型及中间型地贫患儿出生的有效措施。