关键词： 地中海贫血   表型   遗传筛查   基因诊断  

摘要： 地中海贫血（简称地贫）是人类最常见的单基因遗传性血液病，主要有α和β两种类型。严重类型地贫患儿的出生已成为一个重大公共卫生问题。通过基于大样本的遗传筛查（即检出地贫基因携带者或杂合子）和针对发现的高风险家庭实施产前诊断是目前公认的降低该病出生率的有效途径。临床上可通过血液学表型筛查（红细胞指标测定结合Hb分析），必要时采用DNA诊断技术检出地贫杂合子。全血细胞计数和高效液相色谱（HPLC）或适宜的其他替代技术如毛细管电泳（CE）已成为地贫血液学表型筛查的主要技术手段和临床一线筛查技术，跨越断裂点PCR（gap—PCR）和反向点杂交（RDB）技术是国内外应用最为广泛的检测缺失型和非缺失型（点突变）地贫的基因诊断方法，而基于实时荧光PCR和基因芯片等地贫分子诊断技术则有着巨大的应用前景。

关键词： 地中海贫血   基因分析   儿童  

摘要： 目的探讨佛山地区β地中海贫血(β地贫)基因突变类型的分布特征。方法对来佛山市妇幼保健院就诊和体检的儿童进行血细胞分析,MCV<82 fl者抽取静脉血2 ml(EDTA抗凝),用反向点杂交法进行β地贫基因分析。结果血细胞分析MCV<82 fl者1341例,检出β地贫377人,检出率为28.1%,共检出11种突变基因,23种基因型,居前5位依次是:CD41-42(40.2%)、IVS-2-654(24.5%)、CD17(15.5%)、TATAbox-28(8.5%)和CD71-72(4.2%),其中杂合子11种(93.6%),双重杂合子9种(4.5%),纯合子3种(1.9%)。结论佛山是β地贫高发区,基因背景多样复杂,对于MCV<82 fl儿童有必要进行β地贫基因诊断,并建立β地贫基因网络档案库。

关键词： β-地中海贫血   基因突变类型   反向斑点杂交技术   区域性  

摘要： 目的了解分析广东省顺德地区儿童β-地中海贫血的检出率,基因突变类型及其基因分布,为开展相关研究与治疗提供依据。方法采用PCR反向斑点杂交技术(RDB)检测14种β-地中海贫血基因类型。结果在516例儿童对象中检出10种β-地贫基因突变类型,其中确诊携带β-地中海贫血突变基因有180例,检出率为34.88%,全为杂合子,未见纯合子。按其发生频率高低依次为:CD41-42占46.66%;IVS-Ⅱ-654占16.66%;CD17占15.0%;TATA box-28占8.33%;CD71-72占5.0%;CD43,βE各占1.67%。其中双重杂合子有9例,占确诊患儿5.0%。分别为CD41-42/βE,CD41-42/CD17,CD41-42/TATA box-28,各占1.67%。结论本研究初步揭示了顺德地区β-地中海贫血的检出率、基因类型及基因频率,β-地中海贫血基因突变类型分布存在区域差异,为进行遗传咨询、临床治疗和婚育指导提供了有价值的基础资料。

关键词： 地中海贫血   孕晚期妇女   网织红细胞参数   网织血小板  

摘要： 目的探讨网织红细胞6项参数及网织血小板在地中海贫血(简称地贫)孕晚期妇女中的变化及意义。方法对经基因确诊的39例地贫孕晚期妇女、30例正常孕晚期妇女和30例正常非孕妇女,应用SysmexXE-5000全自动血细胞分析仪测定网织红细胞绝对值(RET#)、网织红细胞百分率(RET%)、未成熟网织红细胞比率(IRF%)、低荧光强度网织红细胞百分率(LFR%)、中荧光强度网织红细胞百分率(MFR%)、高荧光强度网织红细胞百分率(HFR%)6项网织红细胞参数及网织血小板百分率(IPF%)。结果地贫孕晚期妇女、正常孕晚期妇女、正常非孕妇女的六项网织红细胞参数及网织血小板比较,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),其中地贫孕晚期妇女RET#、RET%、IRF%、MFR%、HFR%、IPF%明显增高,LFR%明显下降。结论地贫孕晚期妇女在生理和病理的双重刺激下骨髓的造血功能更旺盛,检测妊娠妇女的网织红细胞参数及网织血小板,有助于发现地贫患者,减少及控制危重地贫患儿的出生。

关键词： β地中海贫血   基因突变   重叠延伸PCR   定点诱变  

摘要： 目的:构建含β地中海贫血(简称β地贫)-28(A>G)与IVS-2-654(C>T)突变基因的质粒标准品。方法:以含β珠蛋白野生型基因的质粒DNA为模板,采用重叠延伸PCR(Overlap extension PCR,OE-PCR)定点诱变后行TA克隆的方法分别构建含-28(A>G)与IVS-2-654(C>T)突变基因的质粒。结果:DNA测序表明:重组质粒1的确含β地贫-28(A>G)突变基因,β珠蛋白-28处的碱基已由A突变成G,其余序列与野生型完全相同;重组质粒2的确含IVS-2-654(C>T)突变基因,β珠蛋白IVS-2-654处的碱基已由C突变成T,其余序列与野生型完全相。成功实现了定点诱变。结论:分别成功地构建了含β地贫-28(A>G)与IVS-2-654(C>T)突变基因的质粒标准品,进一步为HRM技术检测β地贫基因突变方法的建立及该病其它基因诊断与筛查技术的研究奠定了实验基础。

关键词： β地中海贫血   聚合酶链反应   熔解曲线分析   基因诊断   产前诊断  

摘要： 目的对荧光PCR熔解曲线法用于β-地中海贫血（β-地贫）基因诊断和产前诊断进行临床评价。方法收集2011年1至8月柳州市妇幼保健院外周血标本451份，其中经血液学表型分析为β-地贫阳性表型标本372份，β-地贫阴性表型标本79份。同时收集2011年6至9月夫妇双方经PCR-RDB探针法确诊为B一地贫基因携带者，在我院行β-地贫产前诊断的胎儿绒毛、羊水及脐带血标本共84份，其中孕10～13周胎儿绒毛标本16份、孕16～24周羊水标本64份、孕17周以上胎儿脐血标本4份。按双盲对照试验，分别采用荧光PCR熔解曲线法（可检测24种13珠蛋白基因突变）、PCR-反向点杂交（RDB）探针法（可检测17种13珠蛋白基因突变）和DNA测序法同时对451份外周血标本和84份胎儿绒毛、羊水、脐带血产前诊断标本进行检测。计算荧光PCR熔解曲线法和PCR—RDB探针法、DNA基因测序法检测结果的野生型符合率、突变型符合率和总符合率。结果利用荧光熔解曲线法在451份外周血标本中共检出13种突变类型、19种基因型，其中有447份标本与***探针法的基因型检测结果相符，符合率为99．1％（447／451），902个等位基因位点检出符合率为99．6％（898／902），有4份标本与PCR—RDB探针法的基因型检测结果不相符，经DNA测序法验证，有3份标本与荧光熔解曲线法的检测结果完全一致，1份标本的13珠蛋白基因突变不在荧光熔解曲线法检测范围而未被检出。450份外周血标本的荧光熔解曲线法检测结果与DNA测序法相符，符合率为99．8％（450／451）。利用荧光熔解曲线法在84份产前诊断胎儿标本中共检出8种突变类型、18种基因型，168个等位基因位点的检测结果与PCR—RDB探针法和DNA基因测序法检测结果符合率为100％。结论荧光PCR熔解曲线法可同时检测多份待测标本，并可准确检出多种基因突变类型，可用于β-地贫的基因诊断和产前诊断。

关键词： β地中海贫血   黄芪   疗效   胎儿血红蛋白   儿童  

摘要： 目的评价黄芪及其复方中药颗粒治疗小儿β地中海贫血的疗效及安全性。方法采用随机对照双盲的临床试验法,57例入选患儿先按中间型及重型分层,再随机分入黄芪组、复方组(黄芪+党参+龟板)、安慰剂对照组,疗程12周,观察各组血液学指标及安全性指标。结果经12周的治疗,中间型患儿复方组血红蛋白提升值为1.21±1.12 g/dL,黄芪组为1.05±0.80 g/dL,而对照组则下降了0.28±0.51 g/dL,3组比较差异有统计学意义(P<0.01)。疗程结束后复方组及黄芪组的Hb水平均显著高于对照组(P<0.05)。黄芪及其复方治疗均显著提升了胎儿血红蛋白水平,一定程度上提升了红细胞总数、平均血红蛋白含量及网织红细胞。中间型患儿复方组总有效率为64%,黄芪组为62%,均显著高于对照组(9%;P<0.01)。在重型患儿中也有类似以上效果,但逊于中间型患儿。服用药物对患儿白细胞总数、中性粒细胞总数、血小板总数及肝肾功能均无显著性影响。结论黄芪及其复方治疗小儿β地中海贫血具有一定疗效且较安全。

关键词： β地中海贫血   分子诊断   产前诊断  

摘要： β-贫血（β-地贫）是世界上最常见、对人类健康危害最严重的单基因遗传病之一。本文从临床实验室的角度，对β-地贫分子诊断技术的最新进展进行了综述，涉及反向斑点杂交、微测序、实时PCR以及无创产前诊断等技术的原理、特点和发展趋势等。

关键词： 儿童   地贫   G6PD缺乏症   流行病学   傣族   云南  

摘要： 目的了解云南省新平县傣族儿童地中海贫血和G6PD缺乏症的现状。方法地中海贫血检测:对调查者用日本特康血细胞分析仪进行血细胞分析,PH8.6缓冲液醋酸纤维薄膜做电泳分析;G6PD缺乏症检测:采用改良葡萄糖6-磷酸脱氢酶(G6PD)测定比值法(手工操作法)进行检测。结果β一地贫检出率6.5%,α-地贫检出率8.7%,G6PD缺乏症检出率8.3%。结论地贫和G6PD缺乏症在云南省新平县傣族儿童中属高发,地贫和G6PD缺乏症的人群地理分布与历史上疟疾流行的地理分布存在着一定的相关性。该调查为云南省新平县傣族进行遗传咨询及进行地贫和G6PD缺乏症的预防提供了有价值的基础资料。

关键词： 广西医科大学   地中海贫血   全国政协委员   基因携带率   防治   长夏   遗传性疾病   高发区  

摘要： 广西是地中海贫血高发区．调查显示，广西人群中地中海贫血基因携带率为20％，远远高于有关省份及港台地区（广东11．6％、香港8．4％、台湾5．5％、四川4．1％、江西2．7％），在壮族聚居地更为高发，如南宁、百色、崇左等壮族人口聚集地区地中海贫血携带率高达26％左右，壮族中地中海贫血儿也最多，是广西危害最大的遗传性疾病。