关键词： 地中海贫血   筛查   基因诊断  

摘要： 目的初步了解长沙地区育龄人群地中海贫血患病率及其基因类型,加强该地区育龄人群地中海贫血筛查工作以预防重症地贫患儿的出生。方法通过检测10987例育龄人群外周血的平均红细胞容积(MCV)平均红细胞血红蛋白含量(MCH)和血红蛋白电泳进行地中海贫血的筛查。对筛查阳性者用Gap-PCR及反向斑点膜条杂交技术(Reverse Dot Blot Hybridization,RDB)法进行α、β地中海贫血基因诊断。结果 10987例育龄人群中,血红蛋白分析筛出可疑α地贫495例,β地贫317例。阳性率为7.39%。其中419例接受α、β地贫基因检测,确诊α地贫74例,β地贫123例,α、β复合地贫7例,筛查阳性诊断率分别为23.34%;75%;1.67%。结论长沙毗邻地贫高发区,人群携带率也较高,其α、β地贫基因型分布的特点符合中国南方地区的基本特点。对育龄人群进行地贫的筛查和基因诊断,是预防重型地贫儿出生的有效措施。

关键词： 肾藏精生髓   髓生血   地中海贫血   临床   核心病机   益髓生血颗粒  

摘要： 地中海贫血是因先天性基因缺陷致使珠蛋白合成障碍引起的一种遗传性血液病,也叫珠蛋白合成障碍性贫血。它是世界上发病率高、危害最大的单基因遗传病,至今尚无有效的治疗方法。中国中医科学院广安门医院根据肾藏精生髓、髓生血理论,在广西高发区,用补肾益髓法治疗地中海贫血600余例,取得了肯定疗效。论文探讨了中药治疗地中海贫血的证治规律,总结了近30年的临床实践,提出了中医治疗地中海贫血的理论基础和中医核心病机假说,形成了系统的理论与有效治法。依托多项国家基金,从整体效应、基因突变与疗效关系、骨髓有效造血、红细胞结构与功能、调控珠蛋白mRNA表达等不同层面,探讨了中药治疗地中海贫血疗效特点和作用靶点的分子机制,使中药治疗地中海贫血整体水平达到新的高度。研究结果将从一个侧面揭示"肾藏精"及"与肾相关"疾病的内在关系。从"肾"论治地中海贫血的临床与基础研究成果,为阐释"肾藏精"脏象理论的科学内涵提供了有说服力的证据。

关键词： 孕妇   维生素D   痕量元素   血液   地中海贫血   糖尿病,妊娠  

摘要： 目的探讨孕妇血清1,25-二羟基维生素D3[1,25-(OH)2D3]、孕期微量元素与地中海贫血、妊娠期糖尿病、甲状腺功能低下、慢性疾病之间的关系。方法将2012年1月至2013年2月就诊并常规产前随诊的3 795例孕妇进行分组,根据孕期常见疾病分为不同的研究组563例(地中海贫血组392例、妊娠期糖尿病组54例、甲状腺功能低下组56例、慢性疾病组61例)和对照组3 232例,测定各组孕妇血清中1,25-(OH)2D3、血钙、血磷和血镁水平。结果地中海贫血组、妊娠期糖尿病组孕妇1,25-(OH)2D3水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),血钙低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);地中海贫血组孕妇血镁水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),而其余疾病组孕妇血镁水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05);各疾病组孕妇血磷水平与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论地中海贫血、妊娠期糖尿病对孕妇体内25-羟基维生素D、血钙水平有一定影响,在进行孕期指导时应针对不同疾病制订相应的保健和治疗策略。

关键词： 地中海贫血   筛查   高效液相色谱   空腹血糖  

摘要： 目的:研究高效液相色谱分析法(HPLC)地中海贫血筛查时P2峰提示空腹血糖(FBG)升高的阈值。方法:用HPLC法筛查77例地中海贫血患者P2峰≥5.0%,同时又做了FBG检测,对患者的临床资料进行回顾性分析,探讨P2峰提示血糖升高的阈值。结果:P2峰5.0%时,未发现有FBG升高,P2峰5.1%时开始出现FBG升高,P2峰≥5.7%时,FBG升高比率为100%,P2峰≥5.7%与血糖升高的符合程度较好。结论:用HPLC法地中海贫血筛查时,P2峰提示血糖升高的阈值定为P2峰≥5.7%较为理想。

关键词： 去铁酮片   重型β地中海贫血   铁螯合剂  

摘要： 目的:观察去铁酮片治疗广西重型β地中海贫血患儿的效果。方法:采用输血加去铁酮片治疗重型β地中海贫血患儿27例,比较用药前后患儿血清铁蛋白水平及肝、肾功能和血象指标变化。结果:口服去铁酮片可遏制输血后患儿的血清铁蛋白浓度升高,个别病例出现血象及肝功能异常变化。结论:给予患儿输血的同时,使用口服去铁酮片去铁是有效的,但应注意药物产生的不良反应。

关键词： β-地中海贫血CD41—42突变基因   慢病毒   293T细胞  

摘要： 目的:构建介导人β-地中海贫血CD41-42突变基因为目的基因的慢病毒载体,为基因治疗的细胞模型和转基因小鼠的建立提供基础。方法:抽提β-地中海贫血CD41-42突变纯合子患者的DNA,设计合成相应特异性引物,PCR扩增CD41-42突变基因,加上SphI和NotI两个酶切位点进行T载体克隆,通过筛选获得重组质粒。用限制性内切酶将目的基因片段和LV5慢病毒载体连接,转入感受态细胞,筛选获得慢病毒表达载体LV5-βCD41-42,并进行测序。将慢病毒载体转染293T细胞,包装病毒,测定病毒浓度。结果:通过PCR获得长度为2128bp带有SphI和NotI序列的目的基因。pUC57载体和慢病毒表达载体LV5连接,慢病毒表达载体LV5-βCD41-42构建成功,序列正确。结论:成功构建并包装含β-地中海贫血CD41-42突变基因的人慢病毒。

关键词： 地中海贫血   基因   诊断  

摘要： 地中海贫血(简称地贫)是一组高度异质性的遗传性溶血性疾病。它是由于珠蛋白基因突变,生物合成受阻、产量不足或缺如所致。我院从2012年6月开始对471例地贫携带的孕夫妇进行基因分型,了解我县地贫分布类型情况,更好的指导地贫治工作,为实施优生优育提供医学依据。

关键词： 不稳定血红蛋白   大细胞性贫血   骨髓增生   再生障碍性贫血   骨髓纤维化   地中海贫血   溶血性贫血   生成障碍   慢性疾病性贫血   肝脏疾病  

摘要： （上接第2013年4期）60实验室检验和诊断手册（续表）与X-染色体相关的常染色体贫血珠蛋白生成障碍性贫血地中海贫血、血红蛋白病,以生成不稳定血红蛋白为特征正常细胞正色素性贫血（MCV 82⁹8fl）贫血伴骨髓增生良好急性失血后贫血溶血性贫血（当网织红细胞增多时,可呈大细胞性）贫血伴骨髓增生不良骨髓造血功能障碍再生障碍性贫血、纯红细胞再生障碍性贫血骨髓浸润恶性细胞浸润、骨髓纤维化、遗传性贮积病促红细胞生成素生成障碍肾脏、肝脏疾病,内分泌紊乱,营养不良,慢性疾病性贫血大细胞性贫血（MCV 100¹50fl）维生素B¹²缺乏摄入减少严格素食。

关键词： β-地中海贫血   实时荧光PCR   熔解曲线分析   基因诊断   产前诊断  

摘要： 目的对荧光PCR熔解曲线法用于β地中海贫血（β地贫）基因诊断和产前诊断进行临床评价。方法收集2011年1至8月柳州市妇幼保健院优生遗传实验室外周血标本451份，其中经血液学表型分析为β地贫阳性表型标本372份，β地贫阴性表型标本79份。同时收集2011年6—9月夫妇双方经PCR—RDB针法确诊为β地贫基因携带者，在我院行β地贫产前诊断的胎儿绒毛、羊水及脐带血标本共84份，其中孕10～β周胎儿绒毛标本16份、孕16—24周羊水标本64份、孕17周以上胎儿脐血标本4份。按双盲对照试验，分别采用荧光PCR熔解曲线法（可检测24种β珠蛋白基因突变）、PCR-反向点杂交（RDB探针法（可检测17种β-珠蛋白基因突变）和DNA测序法同时对451份外周血标本和84份胎儿绒毛、羊水、脐带血产前诊断标本进行检测。计算荧光PCR熔解曲线法和RDBPCR探针法、DNA基因测序法检测结果的野生型符合率、突变型符合率和总符合率。结果利用荧光熔解曲线法在451份外周血标本中共检出β种突变类型、19种基因型，其中有447份标本与PCR—RDB针法的基因型检测结果相符，符合率为99．1％（447／451），902个等位基因位点检出符合率为99．6％（898／902），有4份标本与PCR—RDB针法的基因型检测结果不相符，经DNA测序法验证，有3份标本与荧光熔解曲线法的检测结果完全一致，1份标本的β珠蛋白基因突变不在荧光熔解曲线法检测范围而未被检出。450份外周血标本的荧光熔解曲线法检测结果与DNA测序法相符，符合率为99．8％（450／451）。利用荧光熔解曲线法在84份产前诊断胎儿标本中共检出8种突变类型、18种基因型，168个等位基因位点的检测结果与PCR—RDB针法和DNA基因测序法检测结果符合率为100％。结论荧光PCR熔解曲线法可同时检测多份待测标本，并可准确检出多种基因突变类型，可用于β地中海贫血的基因诊断和产前诊断。

关键词： 基因突变   α-地中海贫血   β-地中海贫血   β复合α地中海贫血   构成比  

摘要： 目的研究广东省茂名地区α和β地中海贫血基因型分布特征。方法对2009年4月至2013年6月本院检验科遗传学实验室检测的2 198例地中海贫血基因诊断结果进行分析。其中α-地中海贫血采用跨越断裂点PCR(Gap-PCR)基因诊断技术,β-地中海贫血采用PCR结合反向点杂交RDB(PCR-RDB)方法。结果2 198例地中海贫血标本中,检测出缺失型α-地贫1 083例,最常见的基因类型是-^(SEA)/αα;检验出β-地贫622例,共有11种基因型,最常见的基因型是CD41/42(-TCTT),其次是IVS-Ⅱ-654(C>T);检出β复合α地贫基因84例。结论茂名地区α缺失型地贫以~^(SEA)/αα为主;β-地贫突变类型排在前四位的是CD41/42(-TCTT)、IVS-Ⅱ-654(C2>T)、-28(A>G)和CD17(A>T);β复合α地贫基因检出率为13.5%。本研究为茂名地区制定人群筛查地中海贫血预防计划和遗传咨询、产前诊断提供了有价值的基础资料;基因检测对于地中海贫血的临床诊断、治疗和预防有重要的意义。