关键词： 地中海贫血   基因型   筛查  

摘要： 目的了解琼海地区育龄人群中α、β地中海贫血基因型的分布情况。方法对育龄夫妇采用红细胞平均体积(MCV)和红细胞脆性一管法进行地中海贫血筛查,对992例筛查阳性者采用PCR及反向斑点杂交技术进行α、β地中海贫血基因型诊断。结果从11 753人中筛选出阳性者992人,阳性检出率为8.44%,其中检出α地中海贫血647例,基因携带率为5.50%,常见的α地中海贫血基因型--SEA/αα、-α3.7/αα、-α4.2/αα构成比例分别为55.79%、16.85%、10.36%。检出β地中海贫血基因型9种共302例,基因携带率为2.57%。比较常见的5种基因型为β41-42(-TCTT)、β-28(A→T)、βCD17(A→T)、βIVS-Ⅱ-654(C→T)、βCD71-72(+A),共占97.02%。在本次筛查中,汉族地中海贫血基因携带率为6.41%,苗族为15.63%,黎族为27.25%,壮族10.53%。结论琼海地区地中海贫血基因携带率高,针对育龄人群基因筛查对降低地中海贫血患儿出生率,提高人口质量具有重要意义。

关键词： 血红蛋白电泳   血红蛋白病   地中海贫血  

摘要： 目的回顾性分析全自动血红蛋白(Hb)电泳检测的结果,并探讨Hb电泳在血红蛋白病筛查中的意义。方法收集2011年1月至2013年12月在该院进行血常规及全自动Hb电泳检测的患者临床资料,记录其平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)及Hb电泳检测结果,对疑似地中海贫血的患者进行地中海贫血基因检测,计算Hb电泳筛查的检出率、基因检测的符合率及各种血红蛋白病的构成比。结果共收集了12 898例患者的临床资料,MCV为(85.32±13.61)fL,MCH为(29.87±6.44)pg,通过全自动Hb电泳仪共检出阳性标本1 315例,其中男568例、女747例,检出率是10.19%,其中疑似α-地中海贫血的患者761例,占5.90%;疑似β-地中海贫血的患者495例,占3.84%;HbJ患者11例,占0.08%;HbK患者15例,占0.12%;HbG患者9例,占0.07%;HbD患者3例,占0.02%;HbE患者21例,占0.16%。α-地中海贫血基因符合率80.55%,β-地中海贫血基因符合率96.77%。结论全自动Hb电泳检测在血红蛋白病的筛查中能发挥重要作用。

关键词： 地中海贫血   血常规   临床诊断  

摘要： 目的对地中海贫血患儿血常规检验的准确性进行分析研究。方法采用全自动血液分析仪对地中海贫血患儿的白细胞计数、红细胞计数、血小板计数以及血红蛋白含量进行检验,并将血常规报告与正常小儿组进行比较,分析血常规检验在地中海贫血诊断中的准确性。结果患儿组的红细胞计数、血小板计数以及血红蛋白含量与正常组小儿之间均存在明显差异,P<0.05;血常规检验结果与人工涂片镜检的符合率为90%。结论血常规检验是地中海贫血临床诊断的重要依据,部分患儿血小板和白细胞计数会受小红细胞或有核红细胞影响出现偏差,在检验过程中应对检验数据进行详细分析,对出现可疑结果应进行人类涂片镜检分类,然后可快速准确发出相应检验报告。

关键词： 血红蛋白属   电泳   α地中海贫血   β地中海贫血   基因  

摘要： 目的 探讨应用血红蛋白毛细管电泳技术对α地中海贫血筛查方案.方法 采用荧光PCR熔解曲线技术对1000例早孕妇女进行α地中海贫血基因诊断,将α地贫基因携带者和正常孕妇分为地贫组和正常组,比较两组孕妇的血红蛋白成分差异.结果 地贫组HbA2均值为1.96,标准差为0.386,HbF均值为0.01,标准差为0.098;正常组HbA2均值为2.79,标准差为0.418,HbF均值为0.01,标准差为0.105.两组间HbA2值的差异有统计学意义（P＜0.05）,HbF值无提示作用.如果取HbA2值＜2.2为α地中海贫血筛查截断值,则α地贫基因携带检出率为9/16,假阴性率为7/16;如果取HbA2值＜2.4为a地中海贫血筛查截断值,则α地贫基因携带检出率为10/16,假阴性率为6/16.结论 血红蛋白毛细管电泳方法对α地中海贫血的筛查效率不及β地中海贫血,但选择一个合理的截断值再组合其他指标仍是临床可接受的筛查方案.

关键词： 地中海贫血   基因诊断   基因谱  

摘要： 目的分析广州市育龄人群中地中海贫血(地贫)的流行情况,为本地区地贫的防治提供决策参考。方法采用血液学初步筛查地贫高危人群,采用跨越断裂点的聚合酶链式反应技术和反向点杂交技术诊断α、β地贫基因。结果2638例初筛阳性受检者中1381例基因确诊为地贫,其中α地贫857例(62.06%)、β地贫524例(37.94%)、β地贫中含αβ复合型地贫72例(5.21%)。α地贫以--SEA/αα型(69.08%)为主,β地贫则以β41-42/β(37.40%)最为常见。结论广州市α、β地贫携带率及基因型分布符合广东省的基本特点,在地中海贫血高发区对育龄人群进行地贫筛查和基因诊断对降低本地区地中海贫血发生率有重要意义。

关键词： 地中海贫血   维生素D   危险因素  

摘要： 目的了解我国地中海贫血儿童维生素D(vitamin D,Vit D)水平状况。方法 81例各型地中海贫血患儿纳入研究,收集临床资料,计算体质指数Z分值(body mass index Z-score,BMI-Z分值);测定血清25-(OH)D、钙和磷水平;采用PCR-RFLP方法分析Vit D受体(vitamin D receptor,VDR)基因Fok I、Bsm I、Apa I位点多态性。结果地中海贫血患儿25-(OH)D水平为(23.7±9.2)ng/mL,显著低于对照组的(28.3±10.5)ng/mL(P<0.05);地中海贫血合并Vit D缺乏或不足的发生率为66.7%,比对照组高;重型地中海贫血Vit D缺乏或不足者检出率88.9%,中间型64.0%,轻型48.3%。所有患儿血清钙、磷浓度均正常。BMI-Z分值≤-1与Vit D缺乏或不足相关,而VDR基因多态性、性别及居住地并非危险因素。结论地中海贫血患儿Vit D缺乏或不足发生率高,且与贫血严重程度以及营养状态相关。

关键词： β-地中海贫血   人β-珠蛋白基因   慢病毒  

摘要： 目的:构建全长人β-珠蛋白基因慢病毒载体,稳定转染K562细胞使得β-珠蛋白高效表达,为β-珠蛋白基因添加治疗奠定基础。方法:采用PCR扩增人正常β-珠蛋白基因,加上Sph I和Not I两个酶切位点进行T载体克隆,获得重组质粒p UC57-β-globin。用限制性内切酶连接目的基因片段和慢病毒载体,筛选获得慢病毒表达载体LV-β-globin,测序。将慢病毒载体转染293T细胞,包装病毒。用LV-β-globin感染K562细胞。采用流式细胞仪检测荧光效率,运用实时PCR及Western Blotting检测K562细胞中β-珠蛋白mRNA及蛋白表达情况。结果:通过PCR获得长度为2 128 bp的目的基因。连接p UC57载体和慢病毒表达载体,慢病毒表达载体LV-β-globin构建成功,序列正确。LV-β-globin转染K562细胞72 h后,显示大量绿色荧光表达,荧光效率为94.8%。β-珠蛋白mRNA 2-ΔΔCt值为4.080±0.078,高于对照组;β-珠蛋白灰度值为1.063±0.082,高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:成功构建并包装含人β-珠蛋白基因的慢病毒载体并高效稳定表达。

关键词： 糖尿病   地中海贫血   糖化血红蛋白  

摘要： 目的:探讨地中海贫血糖尿病(DM)患者糖化血红蛋白(Hb A1c)检测的意义。方法:回顾性分析2011年1月至2012年11月收治的82例DM患者的临床资料,其中伴α型地中海贫血32例、伴β型地中海贫血20例、未伴地中海贫血基因30例。将同期进行体检的50例正常健康人作为正常对照组。分别测定Hb A1c、空腹血糖。结果:α型地中海贫血DM组、β型地中海贫血DM组和未伴地中海贫血基因DM组患者的空腹血糖水平和Hb A1c水平均较正常对照组高(均P<0.05)。α型与β型地中海贫血DM组Hb A1c水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。α型、β型地中海贫血DM组与未伴地中海贫血基因DM组患者的Hb A1c水平分别比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:β型地中海贫血DM患者的Hb A1c检测未能正确反映患者体内糖化血红蛋白水平,不能作为血糖监测有效评价指标。

关键词： β地中海贫血   基因突变   IVS-Ⅱ5   G→C突变   @@  

摘要： 目的：探讨β地中海贫血IVS-Ⅱ-5 G→C基因突变类型的临床和实验室检测特征.方法：对病例进行血常规检查、血红蛋白（Hb）分析,及应用聚合酶链反应（PCR）,反向斑点杂交法及DNA测序等方法检测β地中海贫血基因突变.结果：在51例未检测出中国人常见的17种β地中海贫血基因突变的病例中共发现12例为β地中海贫血IVS-Ⅱ-5 G→C基因突变类型,其中8例为IVS-Ⅱ-5 G→C基因突变杂合子,4例复合其它β地中海贫血基因突变,包括1例复合βCD7CD71/72基因突变,1例复合βCD17基因突变,2例复合βCD41/42基因突变.IVS-Ⅱ-5 G→C基因突变杂合子的血常规检查显示Hb 91.8-146.8 g/L,MCV 64.65-109 fL,MCH 20.78-36.17 pg;Hb分析Hb F为0.1％-8.9％,Hb A2为2.9％-3.9％.复合βCCD71/72基因突变的双重杂合子血常规检查显示Hb 57.6 g/L,MCV59.14 fL,MCH 16.66 pg;Hb分析HbA2 6.0％,Hb F 23.9％.复合βCD17基因突变的双重杂合子血常规检查显示Hb 72 g/L,MCV 66.33 fL,MCH 18.93 pg;Hb分析HbA2 6.7％,Hb F 27％.复合βCD41/42基因突变的双重杂合子血常规检查显示Hb分别为89.5,56.9 g/L,MCV分别为68.37,61.77 fL,MCH分别为21.38,18.53 pg;Hb分析Hb A2分别为4.3％和6.2％,Hb F分别为31.4％和25.1％.结论：β珠蛋白基因IVS-Ⅱ-5 G→C突变导致β＋地中海贫血.其杂合子有轻度贫血,Hb A2升高.但部分病例的血液学分析正常,Hb A2正常,在临床上容易误诊和漏诊.当复合其它β地中海贫血基因突变时,临床上表现为中间型或重型地中海贫血。

关键词： CD41-42地中海贫血   基因型   红细胞参数  

摘要： 目的了解清远地区人群CD41-42β地中海贫血(以下简称地贫)基因携带情况及基因型组合特点,分析其红细胞参数特点,为更好地筛查和预防地贫提供参考资料。方法收集地贫基因诊断标本2 080例,其中儿童标本517例,成人标本1 563例。采用gap-PCR扩增法检测3种常见的缺失型α地贫基因,PCR-膜反向点杂交(PCR-RDB)技术检测17种突变型β地贫基因;并对基因型为CD41-42的受检者进行血常规检测,根据性别、年龄将CD41-42杂合子数据进行分组,观察不同人群红细胞计数(RBC)、血红蛋白浓度(Hb)、红细胞压积(Hct)、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)5项指标的差异。结果 (1)调查人群中,检出CD41-42基因型139例,CD41-42总携带率为6.68%(139/2 080),其中CD41-42杂合子110例(5.29%),CD41-42复合α地贫20例(0.96%),CD41-42复合β地贫9例(0.43%);CD41-42杂合子携带率、CD41-42复合α地贫基因儿童与成人间携带率差异无统计学意义(P>0.05),CD41-42复合β地贫基因儿童与成人间携带率差异有统计学意义(P<0.05),成人目前仅发现CD41-42/βEM一种β地贫双重杂合子。(2)各基因型对红细胞参数影响大小顺序分别为CD41-42复合β地贫>CD41-42>CD41-42复合α地贫(P<0.05)。(3)CD41-42杂合子红细胞参数分析,儿童男女组间各红细胞参数差异无统计学意义(P>0.05);成人男女组间RBC、Hb、Hct差异有统计学意义(P<0.05),MCV、MCH差异无统计学意义(P>0.05);男性儿童与男性成人比较,组间各参数差异有统计学意义(P<0.05);女性儿童与女性成人比较,组间RBC、Hb、Hct差异无统计学意义(P>0.05),MCV、MCH差异有统计学意义(P<0.05)。结论清远地区人群中,CD41-42β地贫以CD41-42杂合子最为常见,其次为CD41-42复合α地贫,CD41-42复合β地贫最为少见。CD41-42杂合子与其他类型地贫突变合并存在时,不同组合其红细胞参数差异较大,在进行遗传咨询时,应做好遗传告知;CD41-42基因携带者红细胞参数受性别、年龄影响较大,在制定筛查指标临界值时,需考虑性别、年龄因素。