关键词： 地中海贫血   云南省   基因单倍型  

摘要： 目的:对西双版纳州勐海县学龄前儿童进行地中海贫血的流行病学调查和基因单倍型分析。方法:勐海县妇幼保健院体检的儿童应用血红蛋白电泳联合血常规筛查地贫,同时对所有病例进行α-地贫、β-地贫基因检测。应用连锁分析和限制性内切酶片段长度多态性方法分析当地地贫人群的基因单倍型。结果:在103名受检的学龄前儿童中,确诊α-地贫者14例,β-地贫9例,α-地贫复合β-地贫2例,α-地贫基因携带率15.5%,β-地贫基因携带率12.6%。检出5种与地贫相关的基因单倍型。结论:西双版纳州勐海县是地贫高发地区,研究结果有助于当地地贫防控有效开展。

关键词： DNA甲基化   胎儿血红蛋白   地中海贫血   珠蛋白开关  

摘要： 背景与目的β-地中海贫血是由一系列不同的遗传变异引起的,根据其临床表型可以分为轻型地中海贫血、中间型地中海贫血和重型地中海贫血。重型地中海贫血是一种临床表型非常严重的β-地中海贫血,主要表现为α链和非α链比例的严重失衡、严重的无效红细胞造血以及依赖红细胞输血来维持生存。平均每月一次的输血使这些病人出现铁超载,这些铁沉积在他们的内脏里,需要铁螯合剂进行除铁治疗来免除这种威胁1。β-地中海贫血异常造血主要表现在早期红系祖细胞（原红细胞和更早阶段）的膨胀增殖和无效造血2。β-地中海贫血患者骨髓的红系前体细胞数量是正常人的五到六倍,他们主要增加早幼红细胞和中幼红细胞数量,降低晚幼红细胞数量3,4。另外,β-地中海贫血骨髓红细胞由早期的中幼红细胞开始就含有电子密度高度的α珠蛋白聚合物,并且随着红细胞的成熟这种聚合物体积增大和出现的频率增多5。这些聚合物能富集在红细胞膜上,并对红细胞膜造成损伤。而胎儿珠蛋白基因的表达能一定程度缓解α链和非α链比例的失衡,从而缓解β-地中海贫血患者严重的贫血症状。胎儿血红蛋白简称HbF,它是由两条γ肽链和两条α肽链组合而成。γ-珠蛋白肽链由11号染色体上的HBH1和HBG2基因编码。HbF主要在胎儿时期表达,它是胎儿时期运输氧气的主要血红蛋白。HbF的表达在胎儿出生前后逐渐降低,而这时逐渐开始表达成人血红蛋白（HbA）,出生后1到2岁达到最高峰并维持终生。有一部分人在β-珠蛋白基因簇调控区上发生的基因突变抑制了γ到β开关,结果导致他们终生HbF升高,这类人被称为患有良性的遗传性持续性胎儿血红蛋白增高症（HPFH）。有趣的是,个体复合HPFH和β-地中海贫血突变表现出较轻的疾病严重性,在少数病例中甚至是无症状的6,7。这些临床观察提示通过基因编辑手段或者药物诱导逆转γ到β珠蛋白开关可能是治疗β-地中海贫血一个有效的途径。另外,个体仅仅有HPFH突变是无症状的,证明成人持续高表达HbF没有不良后果。一组无输血史地中海贫血患者体内的HbF水平是与疾病的临床严重程度成负相关的7。因此,诱导HbF表达对缓解β-地中海贫血患者严重的临床症状具有重要意义。HbF表达水平存在个体差异性,它受到很多基因元素的调节。根据前人研究,HbF相关的三个重要数量性状位点已经被确定。在llp15染色体上HBG2基因5'端上游158bp上的C/T单核苷酸多态性8,6q23染色体上HBSIL-MYB基因间区多态性9以及2p16染色体BCLlla基因上的多态性10,它们可以调控HbF进而影响β-地中海贫血疾病的严重性11。进一步研究表明BCLlla是γ-珠蛋白基因一个重要的抑制性转录因子,它可以抑制HbF表达。在镰刀形细胞贫血转基因小鼠模型中失活BCLlla使该模型小鼠持续高水平表达全细胞型HbF,纠正了镰刀形细胞贫血小鼠血液和病理上的缺陷12。BCLlla可能通过结合其它转录因子介导沉默γ珠蛋白基因,例如结合在染色体上γ珠蛋白启动子的SOX6,或是通过直接与β珠蛋白基因簇不同区域结合来作用的13。确实,在β-珠蛋白基因簇上的一些HPFH突变提升γ珠蛋白基因转录,其原因是突变阻止了 BCLlla的结合14。利用CRISPR/Cas9靶向删除小鼠同源BCLlla上的+62增强子,小鼠神经细胞和B淋巴细胞BCLlla表达水平正常,小鼠健康出生且没有伴随B细胞成熟障碍,但是在红系祖细胞中BCLlla水平大幅度降低15。最近报道,红系转录因子KLF1是γ珠蛋白基因到β珠蛋白基因开关的一个关键的调节因子16。在人类和小鼠红系祖细胞中敲降KLF1可以显著性的减少BCLlla表达水平以及增加γ珠蛋白基因表达水平与β珠蛋白基因表达水平比率,提示KLF1是通过直接激活β珠蛋白基因表达的和间接抑制Y珠蛋白基因表达来调控珠蛋白基因开关的17。还有一些常见的转录因子调控HbF表达水平。MYB是一个转录因子,它能在造血过程中发挥多功能角色。可以减少MYB基因表达的常见DNA多态性和稀有突变都表现出提高红系祖细胞中的HbF水平18。HBS1L-MYB基因间区的突变与BCL11a位点上的突变对HbF的升高具有累加效应,这两个基因一起可以产生比其它通路更大的作用19。最新报道,由ZBTB7A基因编码的白血病淋巴瘤相关因子LRF是一个ZBTB转录因子,它是通过C末端C2H2类型的锌指结构结合到DNA上的,而且它还可能通过它的N端BTB结构域招募转录抑制蛋白复合物20。LRF是一个γ珠蛋白基因的抑制性转录因子,在成人阶段它结合到γ珠蛋白基因上使染色体保持致密的核小体结构进而使沉默Y珠蛋白基因的表达。LRF的沉默机制是独立于BCL11a沉默胎儿珠蛋白基因的另一种途径,它可以通过NURD抑制复合物发挥这种抑制作用的21。这些研究都为后续的HbF重新激活提供了一定的理论基础。表观遗传

关键词： 地中海贫血   基因型   临床特点  

摘要： 目的:分析44例地中海贫血住院患者的基因突变与基因型分布特征及临床特点,比较不同年龄组间临床表现以及相关血液学指标的差异,为疾病的诊断、防治提供参考价值。方法:收集遵义医学院附属医院血液内科及儿科2010年1月至2015年12月收治住院的44例地中海贫血患者临床资料,并以14岁为界分为A(≥14岁)、B(<14岁)两组,应用SPSS统计软件比较两组在临床表现、血红蛋白、MCV、MCH、MCHC、网织红细胞绝对值与百分比以及血清铁蛋白指标之间是否具有差异。结果:44例地贫患者中α地贫8例(占18.20%),β地贫34例(占77.30%),αβ复合型地贫2例(占4.50%)。A组20例,其中α地贫6例(占30.00%),β地贫12例(占60.00%),αβ复合型2例(占10.00%);B组24例,其中α地贫2例(占8.30%),β地贫22例(占91.70%),αβ复合型0例(占0.00%)。α地贫基因突变位点有4种类型,分别为--SEA(占50.00%)、-α3.7(占12.50%)、Hb CS(占25.00%)、Hb QS(占12.50%);β地贫基因突变位点有6种类型,分别为CD17(占39.58%),CD41-42(占29.17%),654(占14.58%),-28(占8.33%),CD26(占6.25%),CD71-72(占2.08%),共组合出20种地贫基因型。A、B两组相关指标对比结果如下:1.临床表现:皮肤黏膜黄染:两组间比较无统计学意义(P>0.05);肝脏肿大:A组阳性率0.05)。2.血红蛋白:两组比较无统计学意义(P>0.05)。***、MCH、MCHC:MCV平均值A组>B组,差异有统计学意义(P<0.05);MCH、MCHC平均值比较均无统计学意义(P>0.05)。4.网织红细胞绝对值、百分比:两组差异均无统计学意义(P>0.05)。5.血清铁蛋白:44例地贫患者血清铁蛋白大于370.00ug/L者有15例(占34.09%),大于1000.00ug/L者有5例(占11.36%)。A、B组两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)地中海贫血住院患者的基因突变及分布情况与我国南方分布趋势基本一致,同也存在自身特点,其中αβ复合型地贫占有一定比例。(2)年龄14岁以下地贫患者易出现肝脏肿大,其小细胞低色素性也更为明显。(3)MCV对地贫筛查具有重要作用。(4)地中海贫血患者铁负荷过重者比例较大,需重视对机体铁负荷的监测,加强去铁治疗。

关键词： 地中海贫血   诊断方法   聚合酶链式反应   基因诊断   研究进展  

摘要： 地中海贫血是由于珠蛋白合成肽链时受阻致使α链或β链合成不足或缺失为特征而引发的特异性隐性遗传病,该病高发于从地中海沿岸的意大利、希腊、马耳他、塞浦路斯到东南亚各国的广大地区,我国南方也是本病的高发地区[1-2].因此提高地中海贫血诊断的准确率,减少误诊及漏诊显得尤为重要.本文对地中海贫血的实验室诊断方法 的研究进展进行综述,可以为地中海贫血临床实验室的诊断方面做出相应的技术选择,更好的服务于临床.

关键词： 血红蛋白病   地中海贫血   基因   胎儿血红蛋白   单核苷酸多态性   环境适应  

摘要： 血红蛋白病是珠蛋白基因突变后导致血红蛋白结构异常或者合成量不足而引起的一类常染色体隐性遗传病,广泛分布于热带、亚热带及地中海地区,是世界上最常见的出生缺陷之一,发病率位于各种出生缺陷中的第三位,已成为世界性的重大公共卫生问题,流行病学及临床研究还表明血红蛋白病的主要分布地区与疟疾的流行区域相互重叠。根据珠蛋白基因突变的结果,血红蛋白病可以分为地中海贫血和异常血红蛋白病。组成血红蛋白的珠蛋白肽链的合成减少引起的血红蛋白病,称为地中海贫血(地贫),如α-地贫和β-地贫。而组成血红蛋白的珠蛋白链分子结构发生异常导致的血红蛋白病,称为异常血红蛋白病,如HbS、HbE、Hb Constant Spring(HbCS)等。另外,遗传性胎儿血红蛋白持续存在综合征(Hereditary persistence fetal hemoglobin,HPFH)也被归为地中海贫血。云南属于血红蛋白病的高发地区,而且由于云南独特的地理环境,造成了云南人群的血红蛋白病的多样性,但目前仍然缺乏云南人群血红蛋白病详细、完整的遗传病学调查研究。本研究拟对云南地区的人群血红蛋白病携带率进行调查,了解云南地区的人群血红蛋白病发生情况,对云南血红蛋白病携带率较高的傣族人群的血红蛋白病的发生率进行详细调查,进一步认识云南傣族的血红蛋白病的流行情况。HbF升高能对重型血红蛋白病患者的临床症状有所缓解,研究中也对云南地区人群的Hb F升高调控机制进行探讨,为云南血红蛋白病的遗传咨询和临床诊治提供参考,并为云南人群制定正确的预防和控制措施提供理论基础。采集云南地区的51950份育龄人群血样样本进行血红蛋白电泳分析,对出现的异常血红蛋白分别进行α-、β-珠蛋白基因常规突变检测,同时对未检出常规突变的样本进行测序分析突变位点。结果显示共检出560例HbE的携带者,检出率为1.08%,HbE的发生率明显高于全国其他地区。在受检的云南少数民族中,不同民族的HbE发生率不同,但是阿昌族(33.33%)景颇族(20.83%),傣族(13.1%)、傈僳族(9.49%)的最高。此外,分析结果还显示检出130例HbCS、9 例 Hb D-Punjab、24 例 Hb New York、3 例 Hb G-Copenhagen、3 例 Hb J-Wenchang-Wuming、2 例 Hb Thailand、4 例 Hb Strumica、2 例 Hb Queens 和 2例Hb Beijing异常血红蛋白携带者。这些结果表明除了检出了云南周边省市地区和东南亚常见的异常血红蛋白病外,同时检出了中国未见报道的Hb G-Copenhagen及Hb Strumica异常血红蛋白携带者,反映了云南地区人群异常血红蛋白的多样性和独特性。在血红蛋白病中,以α-和β-地贫的危害较严重,为了进一步认识云南地区人群中α-和β-地贫的基因突变类型和不同民族间的突变类型分布差异,对云南地区20个民族的2046例血常规检测或血红蛋白电泳后确诊为血液学表型筛查阳性且非缺铁性贫血的育龄人群分别进行α-、β-珠蛋白基因常见突变检测,同时对未检出常规突变的样本进一步测序分析其基因突变类型。结果表明,2046例地贫患者中一共检出66种基因突变类型,其中α-地贫基因最常见的突变类型依次为-SEA/αα、-α3.7/αα和αCSα/αα,β-地贫基因最常见的突变类型依次为CD26 GAG→AAG)、CD41-42(-CTTT)/N和CD17(AAG>TAG)/N,研究结果与国内其他省市的已报道的常见基因突变类型不同,具有明显的独特性和多样性。此外还检出了中国未见报道的β-珠蛋白基因的Codon5突变、-88(C>T)和IVS-I-110突变。本研究结果也反映了在云南地区的汉族与少数民族之间的珠蛋白基因突变类型及顺位差异较大,但是少数民族中α-和β-珠蛋白基因还是以常见的突变为主,在汉族和彝族人群中发现一些罕见的α-和β-珠蛋白基因突变类型,这些结果也为研究民族的迁徙和遗传多样性研究提供参考。基于上述云南少数民族人群中珠蛋白基因突变类型分析结果,为了更深一步认识云南少数民族的珠蛋白基因突变类型,我们选择主要分布在东南亚也是云南的居住人口较多的一个跨境民族—傣族,利用NGS(第二代测序,Next generation sequencing,NGS)技术对云南德宏州、西双版纳州共951例傣族育龄人群进行珠蛋白基因筛查。一共检出471例样本为珠蛋白基因突变的携带者,携带率为49.5%,其中α-地贫携带率高达30.5%,β-地贫携带率为10.4%,α-复合β-地贫的携带率为8.6%。但用传统的血液血筛查的方法仅能检出22.0%的携带率。通过测序检出了α-或 β-珠蛋白的 Hb Queens Park、Hb Hekinan、Hb Owari、H

关键词： 血液检验   缺铁性贫血   地中海贫血   鉴别诊断   临床意义  

摘要： 目的探讨血液检验在贫血鉴别诊断中的临床意义。方法选取2013年1月至2014年12月我院门诊接收的70例贫血患者,分为缺铁性贫血组和地中海贫血组,同期选取30例健康体检者为健康对照组,三组均行血液检验,对比检验结果。结果地中海贫血组MCV、MCH、Hb、RBC高于缺铁性贫血组,缺铁性贫血组RDW高于地中海贫血组,P<0.05,有统计学意义;缺铁性贫血组检验灵敏度、特异性及符合率高于地中海贫血组,P<0.05,有统计学意义。结论血液检验对不同贫血类型的灵敏度、特异性及符合率不同,对缺铁性贫血的鉴别诊断价值更高。

关键词： α地中海贫血   HKαα   产前诊断   系谱  

摘要： 目的研究巢式PCR结合家系分析的方法对罕见α地中海贫血(α地贫)的诊断价值。方法对先证者及12名家系成员, 采用血常规分析、红细胞脆性及血红蛋白电泳进行地贫筛查;采用PCR-反向斑点杂交(PCR-reverse dot blot, RDB)技术诊断非缺失α地贫点突变和17种β地贫基因点突变;采用跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)进行缺失型α地贫基因型分析;采用巢式PCR检测HKαα基因型;绘制α地贫基因遗传图谱。结果 12例家系成员中, 4例MCV、MCH、红细胞脆性低于正常参考值, 8例血液学指标均无异常;12例血红蛋白电泳均正常;12例家系成员中--SEA/αα和αα/αα基因型各2例, HKαα/αα基因型6例, HKαα/--SEA基因型2例;均无17种常见β地贫和3种常见非缺失α地贫。结论巢式PCR结合家系分析方法是发现罕见地贫基因型并减少HKαα地贫的漏诊误诊的重要方法。

关键词： 缺铁性贫血   地中海贫血   血常规检验   对比  

摘要： 目的 :探索缺铁性贫血和地中海贫血患者血常规检验的对比性。方法 :选择2014年4月至2015年4月期间收治180例行血常规检验患者为此次研究对象,其中地中海贫血和缺铁性贫血分别各有90例患者,在同一时间内,选取90例血常规检验健康体检者作为对照组,对三组受检者进行血常规检验。结果 :三组受检者对比RDW水平值、MCV水平值、MCH水平值、MCHC水平值存在差异(P<0.05),而地中海贫血患者和缺铁性贫血对比诊断准确率不存在差异性(P>0.05)。结论 :血常规检验可简便快捷的分辨地中海贫血患者和缺铁性贫血患者,且在判断患者病情严重性中具有一定意义。

关键词： beta-thalassemia major   iron overload   oxidative stress   antioxidant therapy  

摘要： Iron overload in beta-thalassemia major occurs mainly due to blood transfusion, an essential treatment for beta-thalassemia major patients, which results in oxidative stress. It has been thought that oxidative stress causes elevation of immune system senescent cells. Under this condition, cells normally enhance in aging, which is referred to as premature immunosenescence. Because there is no animal model for immunosenescence, most knowledge on the immunosenescence pattern is based on induction of immunosenescence. In this review, we describe iron overload and oxidative stress in beta-thalassemia major patients and how they make these patients a suitable human model for immunosenescence. We also consider oxidative stress in some kinds of chronic virus infections, which induce changes in the immune system similar to beta-thalassemia major. In conclusion, a therapeutic approach used to improve the immune system in such chronic virus diseases, may change the immunosenescence state and make life conditions better for beta-thalassemia major patients.

关键词： 缺铁性贫血   地中海贫血   血常规检验  

摘要： 目的:探讨应用血常规检验鉴别缺铁性贫血和地中海贫血的价值,给临床诊断提供理论依据.方法:选取2015年1月-2015年12月在医院接受治疗的56例缺铁性贫血患者和同期的56例地中海贫血患者作为研究对象,分别对两组患者进行血常规检测,分析比较两组患者的各项指标.结果:A组的缺铁性贫血患者经血常规检查,RDW为(19.48±1.21)%,MCH为(22.45±2.15)pq,MCHC为(278.51±9.48)g/L,MCV为(70.99±3.4)fl;B组地中海贫血患者血常规检查结果中RDW为(12.14±1.08)%,MCH为(22.10±2.19)pq,MCHC为(320.15±11.56)g/L,MCV为(67.15±2.9)fl.缺铁性贫血患者的RDW和MCV明显高于地中海贫血患者,组间差异明显,具有统计学意义(P<0.05),缺铁性贫血患者的MCHC明显低于地中海贫血患者,组间差异明显,具有统计学意义(P<0.05),两组患者的MCH比较,没有明显差异(P>0.05).结论:血常规检测中RDW、MC和MCHC可以作为缺铁性贫血和地中海贫血鉴别的重要指标,给临床诊断有着非常重要的意义.