关键词： 慢性肾脏病   地中海贫血   铁代谢   铁调素  

摘要： 目的：　　CKD合并地贫患者铁代谢情况及其与Hepcidin水平相关性研究　　方法：　　慢性肾脏病贫血非透析患者30例(CKD组)、慢性肾脏病贫血合并α地中海贫血非透析患者30名(CKD-a地贫组)、慢性肾脏病贫血合并β地中海贫血非透析患者30名(CKD-β地贫组)、对照组选取同期正常健康体检人员30名(正常组).四组男女性别比例分别为101.5:100、101.8:100、102.5:100及102.1:100;年龄范围为:20-67岁,均值在(50.3±8.97)岁,统计显示无差异.所有入组人员在早上空腹抽取四份静脉血样分别送本院血液室测定RBC、Hb、Hct、hs-CRP,在生化实验室中测量BUN、CREA、ALB、SI,将SF、TSAT、sTfR、iPTH的测量交由核医学科完成,Hepcidin的测量通过试剂盒实现.　　结果：　　1.四组的Hepcidin的浓度中位数及25%-75%分别如下:　　正常组127.32ng/ml(82.00-180.85);CKD组208.82ng/ml(164.75-438.89);CKD-a地贫组83.5ng/ml(62.49-97.16);CKD-β地贫组73.04ng/ml(58.76-89.54).　　CKD组的Hepcidin的浓度明显高于正常人组Hepcidin浓度(P=0.026),并且显著高于CKD-a地贫组(P<0.001)及CKD-β地贫组(P<0.001);正常人组Hepcidin的浓度显著高于CKD-a地贫组(P=0.008)及CKD-β地贫组(P=0.038);CKD-β地贫组Hepcidin的浓度明显低于CKD-a地贫组(P<0.001)差异具有显著的统计学意义.　　2.四组的sTFR水平的中位数及25%-75%分别如下:　　正常组1.70%(1.23-2.13);CKD组0.19%(0.04-1.70);CKD-a地贫组3.21%(1.63-3.70);CKD-β地贫组3.49%(1.10-4.38).　　CKD组sTfR水平明显低于正常组(P=0.048),同时明显低于CKD-a地贫组(P<0.001)及CKD-β地贫组(P<0.001).正常对照组的sTfR的浓度水平明显比CKD-a地贫组(P=0.043)及CKD-β地贫组均低(P=0.043).CKD-a地贫组与CKD-β地贫组之间差异显著的统计学意义(P=0.997).　　3.四组的SI的浓度中位数及25%-75%分别如下:　　正常组23.58umol/L(17.15-29.41);CKD组8.38umol/L(6.79-9.29);CKD-a地贫组41.43umol/L(35.49-47.83);CKD-β地贫组45.63umol/L(40.32-52.00).　　CKD组的SI浓度明显低于正常组(P=0.044),同时也明显低于CKD-a地贫组(P<0.001)及CKD-β地贫组(P<0.001).正常组的SI浓度明显比CKD-a地贫组(P<0.001)及CKD-β地贫组低(P<0.001).CKD-α地贫组与CKD-β地贫组之间差异无显著的统计学意义(P=0.937)　　4.四组的SF的浓度中位数及25%-75%分别如下:　　正常组71.50ng/ml(63.52-90.93);CKD组162.50ng/ml(72.61-408.50);CKD-a地贫组493.01ng/ml(157.85-538.25);CKD-β地贫组537.99ng/ml(138.70-594.20).　　正常组的SF的浓度明显低于CKD组(P=0.008),同时也明显低于CKD-a地贫组(P<0.001)及CKD-β地贫组(P<0.001).CKD组的SF浓度明显比CKD-a地贫组(P=0.045)及CKD-β地贫组低(P=0.012).CKD-α地贫组与CKD-β地贫组之间差异无显著的统计学意义(P=0.672).　　5.各组的TSAT的浓度中位数及25%-75%分别如下:　　正常组35.19%(29.21%-39.26%);CKD组14.50%(10.91%-19.96%);CKD-a地贫组48.66%(39.66%-54.00%);CKD-β地贫组53.25%(33.06%-58.00%).　　CKD组的TSAT的浓度明显低于正常组(P<0.001),同时也明显低于CKD-a地贫组(P<0.001)及CKD-β地贫组(P<0.001).正常组的TSAT浓度明显比CKD-a地贫组(P=0.032)及CKD-β地贫组低(P=0.048).CKD-a地贫组与CKD-β地贫组之间差异无显著的统计学意义(P=0.894).　　***与血清铁蛋白SF和可溶性转铁蛋白受体sTfR呈正相关(标准系数β=0.507,

关键词： 地中海贫血   红细胞   T淋巴细胞亚群   感染  

摘要： 目的 探讨红细胞引起淋巴细胞免疫功能紊乱在重度β地中海贫血患儿反复感染中的作用.方法 应用流式细胞仪免疫荧光法检测50例重度β地中海贫血患儿及50例健康对照儿童的T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞、B淋巴细胞水平,检测红细胞表面的CD58、和T细胞表达的CD2的表达量及血浆中丙烯醛含量.结果 病例组CD3、CD4细胞及CD4/CD8比值显著高于对照组(t=4.204,P ＜0.05;t=9.505,P ＜0.05;t =8.65,P＜0.05),CD8细胞量与对照组比较无明显差异(t=1.588,P ＞0.05).病例组红细胞表达CD58和T细胞表达CD2下降(t=82.46,P ＜0.05;t =2.79,P＜0.05),血浆中丙烯醛含量增加(t=4.625,P ＜0.05).结论 重度β地中海贫血患儿易发感染与红细胞调节T细胞免疫功能改变相关.

关键词： 中间型β地中海贫血   基因诊断   临床表现  

摘要： 目的:分析1例中间型β地中海贫血的基因检测结果与临床表现.方法:资料选取我院2014年-2016年期间收治的1例中间型β地中海贫血患儿,采用常规PCR技术以及DNA序列测定进行基因诊断.结果:常规PCR检测技术结果为β41/42杂合子,提示为轻型β地中海贫血;DNA序列测定结果发现患儿β珠蛋白基因还存在PolyA(A＞G)突变,为βPolyA(A＞G)/β41/42双重杂合子.结论:临床诊断为中间型β地中海贫血需要结合临床表现和基因检测结果综合分析,对于常规基因检测与地中海贫血表型筛查结果不符时,应考虑为罕见或未知突变类型,进一步检测非常见类型α或β地中海贫血基因,以防漏诊或误诊.

关键词： β-地中海贫血   剪接位点   中间型地中海贫血  

摘要： 目的对血常规和血红蛋白电泳筛查结果均提示疑为β-地中海贫血的孕妇及其丈夫进行β-地中海贫血基因分析后确诊夫妇双方均为β-地中海贫血突变基因携带者, 同时鉴定出一种在中国人群未见报道的罕见β-珠蛋白基因突变IVS-Ⅱ-1(G>A)(HBB:c.315+1G>A), 并对胎儿进行产前基因诊断。方法应用血常规和血红蛋白分析进行地中海贫血筛查。对筛查提示为β-地中海贫血的患者采用聚合酶链式反应-反向点杂交(PCR-RDB)方法检测中国南方人群常见的17种点突变型β-地中海贫血突变类型。对于未发现常见突变的患者则进行β-珠蛋白基因测序分析。结果此孕妇携带一种罕见β-珠蛋白基因第二个内含子剪接位点突变IVS-Ⅱ-1(G>A), 其丈夫为常见的β-珠蛋白基因IVS-Ⅱ-654(C>T)(HBB:c.315+1G>A)位点杂合突变。经产前诊断, 胎儿仅遗传到父亲的突变位点, 基因型为βIVS-Ⅱ-654/βN。结论β-珠蛋白基因IVS-Ⅱ-1(G > A)位点突变在我国的首次发现, 丰富了中国人群β-地中海贫血突变谱, 对于指导遗传咨询和产前基因诊断有重要价值。

关键词： 地中海贫血   移植物抗宿主病   移植物来源   抗人胸腺细胞球蛋白  

摘要： 目的研究影响重型地中海贫血患者同胞造血干细胞移植后移植物抗宿主病(GVHD)的相关危险因素。方法回顾分析237例在广西医科大学第一附属医院接受同胞异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)的重型地中海贫血患者的临床资料,采用单因素分析及多因素分析方法分析影响地贫患者移植术后GVHD的危险因素。纳入的因素包括:患者性别、患者年龄、肝脏大小、血清铁蛋白水平、预处理方案中抗人胸腺细胞球蛋白(ATG)的使用、供者性别、供者年龄、女供男的移植方式、人白细胞抗原(HLA)相合程度、血型相合程度、移植方式和回输总有核细胞数。结果237例患者中30例(12.65%)出现GVHD。27例(11.3%)出现a GVHD。其中,18例(7.6%)为Ⅱ-Ⅳ级a GVHD。9例(3.8%)患者出现慢性移植物抗宿主病(c GVHD)。单因素分析显示患者年龄、供者年龄、HLA相合程度、移植物来源为影响Ⅱ-Ⅳ级a GVHD的危险因素。多因素分析显示供者年龄、HLA相合程度和移植物来源为Ⅱ-Ⅳ级a GVHD的独立危险因素。HLA不全相合组的Ⅱ-Ⅳ级a GVHD累积发生率(40.0%)显著高于HLA相合组的Ⅱ-Ⅳ级a GVHD累积发生率(6.9%)(P=0.003)。外周血联合骨髓组的Ⅱ-Ⅳ级a GVHD累积发生率(14.9%)显著高于脐带血联合骨髓组的Ⅱ-Ⅳ级a GVHD累积发生率(0.8%)(P<0.001)。供者年龄≥10岁组的Ⅱ-Ⅳ级a GVHD累积发生率(25.0%)显著高于供者年龄<10岁组(4.0%)(P<0.001)。单因素分析显示供者年龄、患者移植前肝脏大小和ATG使用剂量为影响c GVHD的危险因素。多因素分析显示供者年龄和ATG的使用剂量是c GVHD的独立危险因素。供者年龄≥10岁组的c GVHD发生率(13.9%)显著高于供者年龄<10岁组的c GVHD累积发生率(2.0%)(P<0.001)。ATG 10mg组的c GVHD累积发生率(2.0%)显著低于ATG 8mg的c GVHD累积发生率(14.7%)(P<0.001)。结论HLA相合程度、移植物来源和供者年龄是影响Ⅱ-Ⅳ级a GVHD发生率的独立危险因素。ATG的使用剂量、供者年龄为c GVHD的独立危险因素。

关键词： β珠蛋白基因   β地中海贫血   短串联重复序列   多态信息量   胚胎植入前遗传学诊断   植入前遗传学单体型分析   β地中海贫血   短串联重复序列   二代测序   胚胎植入前遗传学诊断   植入前遗传学单体型分析   β地中海贫血   短串联重复序列   多重置换扩增   胚胎植入前遗传学诊断   植入前遗传学单体型分析  

摘要： 第一部分广西人群β珠蛋白基因15个STR基因座的遗传多态性研究目的研究与β珠蛋白(β-globin,HBB)基因紧密连锁的15个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)基因座在广西人群中的遗传多态性,为建立β地中海贫血胚胎植入前遗传学诊断(preimplantation genetic diagnosis,PGD)的单体型分析技术(preimplantation genetic haplotyping,PGH)提供实验依据。方法采集广西地区150名无关个体的外周静脉血,提取外周血基因组DNA,通过荧光PCR技术扩增与β珠蛋白基因紧密连锁(距离HBB基因<1Mb)的15个STR基因座(HBB4506、D11S988、HBB4677、D11S2362、HBB5089、D11S1243、HBB5138、HBB5178、HBB5205、D11S1760、HBB5576、HBB5655、HBB5820、HBB5859、D11S1338),扩增产物使用ABI3500Dx遗传分析仪进行毛细管电泳,结果用Genemaper 4.1软件进行分析。最后利用Microsoft Excel软件计算15个HBB-STR基因座的等位基因频率分布以及多态信息量(polymorphism information content,PIC)等。结果在这15个HBB-STR基因座(HBB4506、D11S988、HBB4677、D11S2362、HBB5089、D11S1243、HBB5138、HBB5178、HBB5205、D11S1760、HBB5576、HBB5655、HBB5820、HBB5859、D11S1338)上分别检出18、24、22、11、18、27、13、13、16、23、22、16、17、18和7个等位基因,等位基因频率从0.003333到0.383333不等。这15个HBB-STR基因座的多态信息量(PIC)分别为0.8457、0.8983、0.8931、0.7592、0.8698、0.9046、0.7940、0.7925、0.7708、0.9102、0.8583、0.8467、0.7438、0.8366和0.7704。这15个基因座的PIC均>0.7000,平均值为0.8329,其中PIC>0.8500的HBB-STR基因座有6个。结论本研究检测的这15个HBB-STR基因座在广西人群中的多态信息量(PIC)较高,具有高度的遗传多态性,在建立β地中海贫血胚胎植入前遗传学诊断(PGD)的单体型分析(PGH)技术中具有较高的应用价值,为后续工作的开展提供了实验依据。第二部分β地中海贫血胚胎植入前遗传学诊断中不同诊断方法的比较目的对β地贫PGD中两种遗传学诊断方法——反向点杂交(reverse dot blot,RDB)结合STR单体型分析技术与二代测序(Next generation sequencing,NGS)技术,从诊断时间、确诊率、费用等方面进行对比研究,建立最适宜的遗传学诊断技术应用于广西地区β地贫PGD。方法选择双方均为β地中海贫血基因突变携带者、有PGD指征且同意参加本研究的的夫妇。患者夫妇及另外三名家系成员(女方母亲、男方母亲和男方父亲)一同抽取外周静脉血进行15个STR位点的家系连锁分析。患者经过常规的药物促排卵、取卵、取精、卵胞浆内单精子注射(Intracytoplasmic sperm injection,ICSI)、胚胎培养等程序,将所得胚胎全部进行囊胚培养,形成囊胚后,取囊胚期数个(5-8个)滋养外胚层细胞活检,活检后即将所有囊胚行玻璃化冷冻。利用多重置换扩增(Multiple displacement amplification,MDA)法对滋养外胚层细胞进行全基因组扩增(Whole genome amplification,WGA)。MDA扩增产物一部分采用反向点杂交(RDB)结合15个短串联重复序列(STR)位点的单体型分析(PGH)技术进行遗传学诊断(A组);另一部分MDA扩增产物采用二代测序(NGS)方法进行诊断(B组)。比较两种方法的检出率、诊断符合率、所需时间和费用等。待诊断结果出来后选择最合适的囊胚进行解冻移植。结果纳入本研究的患者获卵24个,胚胎13个,囊胚培养后形成6枚囊胚(囊胚评分分别为4BB,4BC,3CC,3CC,3BC,3CC),每个囊胚取滋养外胚层细胞活检,6例样本MDA法扩增均扩增成功,扩增成功率100%。A组中,囊胚1地贫基因型诊断结果为β-28/βCD41-42;囊胚2地贫基因型诊断结果为βCD41-42/βN;囊胚3地贫基因型诊断结果为βN/βN;囊胚4的地贫基因型诊断结果为β-28/βN/βN;囊胚5和6的地贫基因型诊断结果均为β-28/βN。B组的地贫

关键词： 地中海贫血   实验室诊断   技术进展  

摘要： 地中海贫血是一类以α或β珠蛋白链合成障碍为特征的溶血性贫血病,是人类最常见的单基因遗传病之一。临床为了提高地中海贫血的诊断准确率,降低漏诊以及误诊情况,有必要综合应用实验室各类技术,加强研究,发现更有效、更合适的诊断方法。本研究具体就近些年实验室有关地中海贫血的各类不同诊断技术的情况进行综合论述。

关键词： 地中海贫血   血红蛋白H病   基因型   表现型  

摘要： 目的分析了解广东河源客家人群144例血红蛋白H病(Hb H病)的基因型和血液学资料。方法采用血常规联合毛细血管电泳对11 398例患者进行地贫筛查, 应用缺口PCR(Gap-PCR)和反向点杂交(reverse dot blot, RDB)技术进行α-地中海贫血基因分析。结果 144例中间型α-地中海贫血(Hb H病)被检出, 发生率为1.26%(144/11398)。所有检出Hb H病患者的相关红细胞参数均呈现不同程度的降低, 仍以缺失型Hb H病(123例, 85%)为主, 其中94例--SEA/-α3.7, 29例--SEA/-α4.2, 非缺失型Hb H病21例, 其中11例αWSα/--SEA, 9例αCSα/--SEA, 1例αQSα/--SEA。非缺失型Hb H病患者首次诊断年龄与缺失型患者比较差异无统计学意义(P=0.941), 男性患者年轻于女性患者(P均为0.000)。非缺失型患者平均红细胞体积(mean corpuscular volume, MCV)及平均红细胞血红蛋白含量(mean corpuscular hemoglobin, MCH)水平均高于缺失型患者(P均为0.000)。结论该研究丰富了河源地区客家人群Hb H病患者的分子遗传学和血液学的科学资料, 为该地区的遗传咨询和产前诊断提供重要参考。

关键词： 血常规检验   地中海贫血   缺铁性贫血   诊断与鉴别  

摘要： 目的对地中海贫血和缺铁性贫血患者进行血常规检验,研究和分析其诊断与鉴别效果。方法选取110例2015年6月至2016年6月到本院就诊的贫血患者来研究,将其分为地中海贫血组和缺铁性贫血组,两组各55例但是贫血类型不同。两组贫血患者的血常规指标检验要求患者空腹并以2 ml静脉血进行全自动血液分析,对比研究两组贫血患者的血常规指标的诊断及鉴别的成果。结果在RDW、RBC及MCV水平方面,地中海贫血组比缺铁性贫血组低(P<0.05),有统计学意义。在Hb、MCHC方面,地中海贫血组比缺铁性贫血组高(P<0.05),有统计学意义。但是在MCH水平方面,两组结果(P>0.05)无统计学意义。结论运用血常规指标来诊断和鉴别地中海贫血与缺铁性贫血患者是有效、准确、科学可行的,值得在临床治疗上广泛运用。

关键词： 地中海贫血   血红蛋白   铁蛋白   妊娠结局  

摘要： 目的:研究地中海贫血孕妇妊娠期血红蛋白与铁蛋白变化情况及其对孕妇妊娠结局的影响,以作为临床借鉴。方法:收集2014年3月至2015年3月来我院就诊的50例地中海贫血孕妇的临床资料,作为观察组,将同期来我院就诊的50例健康孕妇的临床资料作为对照组,统计分析两组孕妇在不同孕周内血红蛋白与血蛋白水平的变化,并对两组孕妇的妊娠结局做对比。结果:在不同孕周内,观察组的孕妇身体血红蛋白水平均显著低于健康孕妇,两组对比差异明显(P<0.05),具有统计学意义;两组孕妇铁蛋白水平的对比,只在孕早期具有统计学意义(P<0.05),在孕中期与孕晚期,不具有统计学意义(P>0.05);对比两组孕妇的妊娠结局:观察组顺产36例,剖宫产14例,对照组顺产38例,剖宫产12例,两组对比,不具有统计学意义(P>0.05);新生儿体质量对比,观察组为(3015±621)g,对照组为(3200±520)g,两组对比不具有统计学意义(P>0.05),分娩出血量对比,观察组顺产后2h内出血(316.2±95.5)mL,剖宫产出血量(382.4±116.3)mL,对照组顺产后2h内出血(245.1±88.4)mL,剖宫产出血量(273.3±103.2)mL,两组对比差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。结论:孕育期内,患有地中海贫血的孕妇的血红蛋白水平会下降且显著低于健康孕妇,所有孕妇均会缺铁,是否患有地中海贫血,对孕妇分娩方式的选择及新生儿体质量没有影响,但患有地中海贫血的孕妇分娩时出血量大,对分娩以及手术的耐受能力相对低下。孕期所有孕妇均应补铁,而患地中海贫血的孕妇应更注意身体保健。