关键词： 地中海贫血   3.0T磁共振   铁过载   肝脏  

摘要： 目的探讨地中海贫血患者3.0T磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)的肝脏形态学表现及定量是否存在差异。方法收集海南省人民医院确诊地中海贫血患者25例和正常对照组10例,按基因检查结果中合成的异常珠蛋白HzF和HbA2程度将地中海贫血患者分为三组。观察四组的肝脏MRI形态学表现,分析不同组别的肝脏信号强度比值及T2~*值是否存在统计学差异,以及MRI定量指标与血清铁蛋白的相关性。结果轻型地中海贫血患者的肝脏MRI形态学未见明确异常改变,轻型地中海贫血患者和正常对照组的MRI结果差异无统计学意义(P>0.05),与中间型地中海贫血组、重型地中海贫血组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。中间型地中海贫血患者所有序列中肝脏信号减低,定量结果分别与正常对照组、轻型地中海贫血组、重型地中海贫血组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。重型地中海贫血患者所有序列中肝脏信号减低,肝脏体积增大,定量结果分别与正常对照组、轻型地中海贫血组、中间型地中海贫血组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。信号强度比值、T2~*值与血清铁蛋白均无相关性。结论 3.0T磁共振可定量诊断中间型地中海贫血、重型地中海贫血,但对轻型地中海贫血的定量诊断价值有限。

关键词： 儿童   地中海贫血   进展  

摘要： 地中海贫血为溶血性贫血,属于常染色体阴性遗传性疾病,主要由珠蛋白基因出现缺陷,进一步造成血红蛋白的α链、非α-链两者之间比例不均衡,致使红细胞寿命缩短而导致。以珠蛋白肽链合成受到抑制情况,对地中海贫血进行分型,可以将其分为四种,分别为α、β、γ、δ型地中海贫血等。其中以α、β地中海贫血最为常见。本次研究主要对儿童地中海贫血的血流行病学特点、发病机制、临床表现、实验室检查、诊断及治疗等方面进行介绍。

关键词： 中间型β-地中海贫血   胎儿血红蛋白   修饰基因   奠基者效应   复发性突变  

摘要： 中间型β-地中海贫血(β-Thalassaemia Intermedia,β-TI)表型异质性大,其修饰因子主要包括影响γ-珠蛋白基因型表达的修饰基因、β-珠蛋白基因突变类型和a-珠蛋白基因突变等。其中,影响γ-珠蛋白基因型表达的修饰因子相关研究集中在一些可调节胎儿血红蛋白(Fetal Hemoglobin,Hb F)水平的顺式表达原件和反式作用因子。近年来研究发现,HBBP1(rs2071348)、HBG2(rs7482144)和HBS1L-MYB(rs9399137)单核苷酸多态性位点与Hb F水平相关,但这三个位点在不同地区和人群中与Hb F水平的关联性不尽相同,呈现出明显的地理和人群分布差异。目前我国人群中地中海贫血遗传修饰因子与中间型β-地贫的关系还缺乏系统的研究数据。β-珠蛋白基因突变类型也是影响β-TI表型异质性的因素之一,除了 β-地中海贫血突变类型本身的轻重程度影响,一些异常血红蛋白突变与β-地中海贫血突变复合后也会产生β-TI,如HbE和HbRush等。HbE是云南地区发生率最高的β-珠蛋白基因突变类型,在不同民族中具有高发生率。Hb Rush是一个罕见突变,目前在云南德宏地区发现了 17例杂合子携带者。这两个突变发生在云南地区的源流以及发生时间仍是未知。云南是我国地中海贫血高发地区之一,HbE/β-地贫突变是最常见的中间型β-地中海贫血突变类型。尤其是位于云南西南部的德宏傣族景颇族地区地中海贫血的发生率最高,人群中有较多的中间型β-地中海贫血,但其临床表现异质性和遗传修饰因子的研究还少有报道。因此探讨该地区人群遗传多态性与临床异质性的关系,进一步了解影响β-地中海贫血修饰因子的本质具有重要意义。[目的]本研究旨在分析云南德宏地区HBBP1、HBG2和HBSIL-MYB基因多态性位点在HbE患者、β-地贫患者和HbE/β-地贫患者与正常人群四个不同组别中的分布特点,探讨上述遗传修饰位点基因多态性与Hb F的关联性;同时分析Hb Rush和HbE突变在云南地区的分布是否由奠基者效应造成,以及推测突变携带者可能的起源和最近共同祖先存在的时间。[方法]探讨遗传修饰位点基因多态性与Hb F关联性时,采用ARMS-PCR法(Amplification Refractory Mutation System,ARMS)和 PCR-RFLP 法(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)检测云南德宏地区 41 例 HbE/β-地贫,98例β-地贫,89例HbE和192例正常对照样本的HBBP1(rs2071348)、HBG2(rs7482144)和HBSIL-MYB(rs9399137)等位基因型,并与Hb F进行关联分析;分析Hb Rush突变源流时,采用毛细血管电泳方法检测17例Hb Rush携带者和170例正常对照12个短串联重复序列(Short Tandem Repeats,STR)位点等位基因型,通过共同单倍型分析突变可能的源流;分析HbE突变源流时,采用毛细血管电泳方法检测德昂族17例,景颇族19例,傣族12例,阿昌族8例HbE携带者和德昂族75例,景颇族80例,傣族61例,阿昌族72例正常对照12个STR位点等位基因型,通过共同单倍型分析突变可能的源流;用ESTIAGE推算共同祖先时间。[结果](1)在组间Hb F水平和SNP等位基因分布比较的结果为:HbE/β-地贫组的Hb F水平显著高于正常对照组,且在HBBP1(rs2071348)和HBG2(rs7482144)两位点的最小等位基因频率(Minor Allele Frequency,MAF)分别为C等位基因(0.87)和T等位基因(0.64),显著高于正常对照组,在HBS1L-MYβ(rs9399137)位点与正常对照组差异无统计学意义;HbE组的Hb F水平高于正常对照组,且在HBBP1(rs2071348)和 HBG2(rs7482144)两位点的 MAF 分别为 C(0.84)和 T(0.89),显著高于正常对照组,在HBS1L-MYB(rs9399137)位点与正常对照组差异无统计学意义;β-地贫组的Hb F水平与正常对照组无明显差异,在HBS1L-MYB(rs9399137)位点的MAF为C等位基因(0.24),显著高于正常对照组。在HBBP1(rs2071348)的MAF为C(0.06),显著低于正常对照组。在HBG2(rs7482144)的MAF为T(0.08),与正常对照组无明显差异;组内SNP等位基因与Hb F水平的关联分析结果为:在正常对照组中HBBP1(rs2071348)位点的基因型与Hb F水平有显著相关性,其它各组中均未发现SNP多态性与Hb F水平的相关性。(2)11个Hb

关键词： α-地中海贫血   大片段缺失   Hb Bart's 胎儿水肿综合征   α-珠蛋白基因   NGS   HS-40  

摘要： 背景与目的α-地中海贫血是一种常染色体隐性遗传性疾病,主要表现为小细胞低色素性贫血。α-地中海贫血的分子基础主要以缺失突变为主,还有少部分的点突变,使α-珠蛋白产量下降,胎儿体内过多的γ-链聚合形成Hb Bart's(γ4)或成人体内过多的β-珠蛋白形成Hb H(β4),导致无效造血和红细胞被破坏。α珠蛋白基因的表达依赖于α-珠蛋白基因上游30-70kb侧翼的远端调控元件(多物种保守序列或者MCS-R)。其中,MCS-R2(HS-40)是强大的红系特异增强子,HS-40的核心元件约350bp,包含了几个红系特异转绿因子的结合位点,尤其是GATA1/2和NF-E2。本研究目的是鉴定一个α-珠蛋白基因簇的大片段缺失家系和一个α-珠蛋白远端调控元件(包括HS-40)的大片段缺失家系,这两种缺失突变均减少了 α-珠蛋白基因的表达,加重了患者的临床表型。材料与方法1.研究对象:家系A的先证者是广西柳州的29岁男士,MCV 56.4fL,MCH 17.8pg,Hb H 6.6%,表现为Hb H病。家系B先证者是广西柳州的引流的Hb Bart's水肿胎。2.实验方法:对先证者及其家系成员进行血液学表型分析,结合表型分析结果进行传统的α和β珠蛋白基因常见突变检测(Gap-PCR和RDB)。常见的突变检测结果不足以解释先证者的表型,于是通过MLPA和Sanger测序分别检测α-珠蛋白基因的拷贝数变化和HBA、HBB基因的点突变,结果显示:家系A先证者除了有-α3.7/缺失型外,还复合一段包括两个α基因的大片段缺失。家系B先证者除了有--SEA/缺失型外,还复合一段包括α-珠蛋白远端调控元件HS-40的大片段缺失。由于家系B的大片段缺失位置超出了 MLPA探针范围,接下来采用NGS捕获测序技术,分析缺失的断裂点区域。根据NGS结果显示的断裂点范围,采用Gap-PCR原理和方法,在断裂点两端设计多对的特异性引物,PCR产物测序鉴定大片段缺失断裂点位置。结果家系A先证者表现为Hb H病,综合Gap-PCR、MLPA及NGS结果显示,其基因型为-α3.7/缺失合并一个新的α-珠蛋白基因簇大片段缺失。通过家系分析发现,-α3.7/缺失遗传自父亲,α-珠蛋白基因簇大片段缺失遗传自母亲。通过大片段缺失断裂点鉴定,确定该缺失范围为chr16:197578-257871,缺失大小为60295bp,最后鉴定先证者基因型为-α37/--60。家系B先证者血红蛋白电泳结果为Hb Bart' s 88%,Hb Portland 11%。综合Gap-PCR、MLPA及NGS检测结果显示,其基因型为--SEA/缺失合并一个新的包含HS-40远端调控元件的大片段缺失。同理,家系分析发现其-SEA/缺失遗传自母亲,新的大片段缺失遗传自父亲。再通过大片段缺失断裂点鉴定,该缺失范围为chr16:96622-176317,缺失大小为79696bp,最后确定先证者基因型为(αα)LZ/--SEA。HS-40缺失使该条染色体上的2个α-珠蛋白基因表达下降,作用等同于--SEA/缺失,并且合并了--SEA/缺失突变,解释了先证者是严重的Hb Bart's水肿胎儿。结论本研究通过MLPA、NGS捕获测序和Gap-PCR方法鉴定了一例α-珠蛋白基因簇的大片段缺失和一例包括调控α-珠蛋白基因表达的远端调控序列HS-40的缺失,两例缺失突变都加重了血液学表型,尤其HS-40缺失严重下调了 α-珠蛋白基因表达。这两例病例丰富了 α-地中海贫血突变谱,同时再一次从人群中证实了 HS-40是α-珠蛋白基因表达非常重要的远端调控元件。

关键词： β-地中海贫血   发病机制   治疗   综述  

摘要： β-地中海贫血是具有家族遗传性的基因缺陷所致的血液疾病。其主要是因为β-珠蛋白存在潜在突变和缺失,从而导致无效红细胞生成以及因此出现的贫血。输血治疗仍是目前治疗β-地中海贫血的手段,但因此而产生的铁过载也严重影响患者的生活质量。该病其他治疗方法还包括移植治疗,铁螯合治疗,抗氧化及基因治疗等。该文拟对近年来,有关β-地中海贫血发病机制及治疗取得的进展进行综述。

关键词： 妊娠   地中海贫血   缺铁性贫血   红细胞参数  

摘要： [目的]:初步调查2017年在我院产科门诊确诊为妊娠合并地中海贫血患者的检出率以及基因型、民族、籍贯分布情况。探究红细胞参数对妊娠合并地中海贫血与缺铁性贫血进行鉴别的应用价值。利用红细胞参数通过线性逐步回归分析方法建立妊娠合并地中海贫血与缺铁性贫血的初步鉴别公式。[方法]:收集整理2017年1月1日至2017年12月31日来我院产科门诊进行初次产检孕妇的相关临床资料和实验室检查结果,将确诊为地中海贫血的孕妇作为妊娠合并地中海贫血组(A组),确诊为缺铁性贫血的孕妇作为妊娠合并缺铁性贫血组(B组),正常妊娠孕妇作为对照组(C组)。分析A组、B组、C组相关红细胞参数,通过线性逐步回归分析建立鉴别公式。[结果]:(1)妊娠合并地中海贫血108例,检出率约为7.8%。基因型:α-地中海贫血45例(41.67%),β-地中海贫血59例(54.63%),α复合β地中海贫血4例(3.70%);民族分布:汉族28例(25.93%)、壮族20例(18.52%)、傣族18例(16.67%)、彝族12(11.11%)、白族10例(9.26%);籍贯分布:昆明21例(19.44%)、文山16例(14.81%)、德宏15例(13.89%)、西双版纳13例(12.04%)、大理11例(10.19%)。(2)A组、B组、C组间的年龄、孕周差异无统计学意义(p>0.05)。A组、B组的RBC、Hb、Hct、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV、RDW-SD与C组差异均具有统计学意义(p<0.05)。A组与B组除MCH(p=0.066),其它红细胞参数差异均具有显著统计学意义(p<0.001)。(3)红细胞参数对A组、B组进行鉴别的临界值分别为:RBC4.60 X 1012/L、Hb96g/L、Hct0.343L/L、MCV70.3fL、MCHC288g/L、RDW-CV16.90%、RDW-SD43.6fl,灵敏度 RBC>MCV>RDW-CV>RDW-SD = Hct>Hb>MCHC,特异度 RDW-SD>MCHC>RDW-CV>Hb>RBC>Hct>MCV。红细胞参数曲线下面积 AUCRDW-SD AUCRDW-CV>AUCRBC>AUCHb>AUCMCHC>AUCHct>AUCMCV。(4)通过线性逐步回归分析得到的对A组、B组进行初步鉴别的公式为:CF=-32.100-0.123×Hb+0.347×MCV+1.101×RDW-CV,其灵敏度为 0.922,特异度为0.898,PPV为0.897,NPV为0.923,约登指数为0.820,准确度为0.910。[结论]:我院产检孕妇合并地中海贫血检出率较高,基本符合云南省地中海贫血民族、地域分布特征;红细胞参数对妊娠合并地中海贫血与缺铁性贫血鉴别效能依次为 RDW-SD>RDW-CV>RBC>Hb>MCHC>Hct>MCV;公式CF=-32.10-0.123×Hb+0.347×MCV+1.101×RDW-CV 对妊娠合并地中海贫血与缺铁性贫血鉴别效能较高,具有一定临床应用价值。

关键词： 缺铁性贫血   地中海贫血   血常规   鉴别诊断  

摘要： 目的:分析血常规检查在鉴别诊断缺铁性贫血和地中海贫血中的临床价值;方法:抽取36例缺铁性贫血作为A组,抽取36例地中海贫血为B组,比较两组血常规检测结果;结果:A组红细胞分布宽度（19.2±1.5）%高于B组（15.6±1.2）%,而血红蛋白（67.2±9.3）g/L和红细胞计数（3.7±1.0）×1012低于B组（90.3±9.5）g/L、（5.3±1.4）×1012,且P<0.05;两组的红细胞平均体积无显著差异（P>0.05）;结论:通过血常规能够鉴别诊断地中海贫血和缺铁性贫血;该方法操作简便,结果可靠。

关键词： 新生儿   α-地中海贫血   脐血筛查   基因分型  

摘要： 目的调查研究广西贺州新生儿脐血Hb Bart’s含量对α-地中海贫血的筛查意义和基因分型特点, 分析贺州地区新生儿中α-地中海贫血的发生率及基因分布情况, 为全市开展新生儿α-地中海贫血早期筛查和防治工作提供科学依据。方法采用全自动血红蛋白电泳仪对2014年1月-2016年12月在贺州地区出生的30 375例新生儿的脐血标本进行血红蛋白电泳, 并对疑似α-地中海贫血者采用采用跨越断裂点PCR技术和反向斑点杂交技术进行基因诊断。结果 30 375例新生儿脐带血中检出Hb Bart’s阳性标本3612例(占11.89%), 其中静止型2172例, 检出率7.15%;轻型1215例, 检出率4.00%;中间型(HbH病)222例, 检出率0.73%;重型3例, 检出率0.01%;经基因分析, 3480例被确诊为α-地中海贫血, 主要的基因类型为:-αSEA/αα(占72.72%)、-α3.7/αα(占24.40%)、-α4.2/αα(占2.50%)。结论 Hb Bart’s是目前临床检测α-地中海贫血的一项重要的生物学指标, 其含量越高与基因诊断符合率越高, 贺州地区新生儿α-地中海贫血以静止型为主。

关键词： 平均红细胞体积   平均血红蛋白含量   地中海贫血  

摘要： 目的:探讨平均红细胞体积(MCV)和平均血红蛋白含量(MCH)在筛查地中海贫血中的价值。方法:选择2015年2月至2017年2月本院收治的住院患者与健康体检者,共360例,对所有受检者的MCV与MCH进行检测,比较正常体检者与地中海贫血患者的MCV、MCH水平,同时比较单用MCV或MCH与联合应用MCV、MCH筛查地中海贫血的灵敏度与特异度。结果:地中海贫血患者MCV、MCH均明显低于正常体检者;和单用MCV、MCH筛查地中海贫血相比,联合应用MCV、MCH筛查特异度更高,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:在筛查地中海贫血时,对MCV、MCH进行联合应用检测可有效提高检测特异度,为临床筛查提供更合理、有效的参考依据。

关键词： β-地中海贫血   脾切除   蛋白C   蛋白S   抗凝血酶-Ⅲ  

摘要： 目的 检测β地中海贫血患者血浆内皮细胞活化分子标记物:E-选择素;凝血活化参数:凝血酶抗凝血酶复合物(TAT)、组织因子(TF)TF、组织因子途径抑制物(TFPI);血小板活化标记物β血小板球蛋白(β-TG)、P-选择素;天然抗凝血剂:蛋白C(PC)、蛋白S(PS)、抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ);以及血小板计数(PLT)、纤维蛋白原(FIB)含量。探讨广西地区的β-地中海贫血患者血凝状态以及促血栓形成的因素。方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)分别测定69例β-地中海贫血患者血浆中E-选择素、TAT、TF、TFPI、β-TG、P-选择素以及PC、PS、AT-Ⅲ的水平。69例β-地中海贫血患者中包含39例重型β-地贫(β-TM),30例中间型β-地贫(β-TI)。27例健康体检者作为对照组。结果 1、(1)PLT:切脾的β-TM与β-TI患者PLT(756.75±71.62)×10～9/L、(716.81±29.13)×10～9/L分别较未切脾β-TM的PLT(206.57±41)×10～9/L与β-TI的PLT(307.67±61.76)×10～9/L显著增高,差异具有统计学意义(P<0.05);未切脾的β-TM、β-TI与对照组PLT无统计学差异(P>0.05)。(2)FIB:与脾切术后β-TI组的FIB(2.62±0.12)×g/L比较,正常对照组血浆FIB(3.00±0.11)×g/L、β-TM组的FIB(3.10±0.12)×g/L以及未切脾β-TI的FIB(2.99±0.21)×g/L显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);其余各组间FIB含量无统计学意义(P>0.05)。2、血浆E-选择素、TAT、TF、TFPI、β-TG、P-选择素:(1)无论是否接受脾切除手术,β-TM和β-TI患者血浆E-选择素、TAT、TF、TFPI、β-TG、P-选择素水平均明显高于正常对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)无论是β-TM还是β-TI患者,脾切除组与未切脾组比较,血浆E-选择素、TAT、TF、TFPI、β-TG、P-选择素水平无统计学差异(P>0.05)。3、血浆PC、PS、AT-Ⅲ:(1)无论是否接受脾切除手术,β-TM和β-TI患者血浆PC、PS和AT-Ⅲ水平均明显低于正常对照组;β-TI患者较β-TM患者血浆PC、PS和AT-Ⅲ水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)无论是β-TM还是β-TI患者,脾切除组与未切脾组比较,PC、PS和AT-Ⅲ水平明显降低,差异有统计学差异(P<0.05)。(3)正常对照组血浆PC、PS和AT-Ⅲ水平如下:PC:(3214.46±109.61)×ng/ml、PS:(94595.76±11564.68)×ng/ml、AT-Ⅲ:(75657.42±12646.26)×ng/ml。脾切除组和未切脾组β-TM血浆PC、PS和AT-Ⅲ水平如下:PC:(2725.61±200.45)VS(3017.89±259.92)×ng/ml;PS:(57164.57±7388.67)VS(69820.98±15128.83)×ng/ml;AT-Ⅲ:(16471.93±2577.24)VS(23894.90±7552.00)×ng/ml。脾切除组和未切脾组β-TI血浆PC、PS和AT-Ⅲ水平如下:PC:(2275.68±137.60)VS(2592.03±185.71)×ng/ml;PS:(38417.93±3577.24)VS(45719.77±5479.67)×ng/ml;AT-Ⅲ:(10621.58±2573.58)VS(14856.19±3706.58)×ng/ml。4、Pearson相关分析:(1)β-地贫血浆E-选择素与P-选择素之间呈显著正相关;血浆TAT、TF、TFPI、β-TG两两之间互为正相关(P<0.05)。(2)血浆PC、PS与FIB两两之间互为正相关;AT-Ⅲ与PLT、TAT、TF、TFPI、β-TG呈显著负相关(P<0.05)。PC、PS与PLT、TAT、TF、TFPI、β-TG、AT-Ⅲ之间无明显关联(P>0.05)。结论 β-地中海贫血患者脾切除术后血栓易感性增加,主要原因是血小板增多,接受脾切手术的β-中间型地贫患者血浆纤维蛋白原含量降低。无论是否接受脾切除手术,β-地贫血浆E-选择素、TAT、TF、TFPI、β-TG、P-选择素水平升高,PC、PS和AT-Ⅲ水平降低,尤其是切脾的β-TI患者。β-地贫患者存在内皮细胞与血小板活化、以及天然抗凝血剂降低,促进高凝血状态的形成,而且脾切除可以增加β-TI患者血栓形成的易感性。