关键词： 地中海贫血   二代测序   CNV   SNV  

摘要： 研究背景及目的地中海贫血是中国南方人群携带率较高的一种单基因遗传病,主要包括α-地中海贫血和β-地中海贫血。地中海贫血是由复杂机制引起的,包括拷贝数变异(CNV)和单核苷酸变异(SNV)。目前地贫主要的检测方式以Gap-PCR技术和PCR-RDB技术为主,但是这些检测技术只能检测已知的CNV或SNV,且对于CNV和SNV只能分开检测,操作过程复杂。本研究旨在应用多重PCR测序技术对CNV和SNV的α-地中海贫血和β-地中海贫血进行同时检测,并可发现未知突变,为后期地中海贫血的检测提供基础,也为其他遗传性疾病的诊断和预防提供参考和研究方向。方法收集来自福建医科大学附属医院和中山大学附属第一医院经过临床确诊的128例样本。首先根据地中海贫血基因设计多重PCR引物,将128例样本提取的DNA用设计的地贫引物池进行多重PCR扩增,将扩增产物进行文库构建,再将文库构建产物进行上机测序,最后对测序数据进行分析,再利用Gap-PCR和Sanger测序进行验证。结果在这项研究中,我们开发了一种新算法,使用NGS数据同时检测目标CNV和SNV。在该算法中,我们使用Align MAQ>10将测序读数对准特定位置并去除错配。为了检测CNV,使用33个非缺失型样品作为对照值来构建基线,用A,B,C和D比率代表-SEA,-α4.2,-α3.7和复合或纯合缺失型别。为了检测其他SNV,使用系统软件分析后,再将变异位点用Annovar软件进行注释。在我们的研究中,共检测到11种SNV,其中8个SNV在Clinvar数据库中有收录,为明确的致病位点。其他3个未在Clinvar数据库中记录,为非同义突变,另外检测到66个良性突变位点。本研究使用A比率<0.8,B比率<0.4,C比率<0.8,D比率<0.002来鉴定-SEA,-α4.2,-α3.7缺失和复合或纯合型别。共检测到61个-SEA杂合缺失型,12个-α4.2杂合缺失型,38个-α3.7缺失型,20个纯合缺失型别。敏感性分别为96.72%(59/61),83.33%(10/12),97.37%(37/38)和 95%(19/20),特异性分别为93.94%(31/33),100%(33/33),93.94%(31/33)和 100%(33/33)。结论在本研究中,我们选择具有CNV和SNV类型的地中海贫血作为我们的研究模型,验证多重PCR-NGS技术可以检测疾病特异性基因中的CNV和SNV。对于SNV的检测,使用Sanger测序验证,符合率为100%。发现了 3个未在Clinvar数据库中记录的SNV,丰富了地中海贫血突变数据库。对于CNV的检测,尽管在该研究中未实现100%的准确性,但是使用随后的验证技术(例如Gap-PCR技术)可以减少假阴性并且可以减少假阳性。总之,我们的研究证明了使用NGS数据检测目标SNV和CNV的可行性。该策略使用多重PCR和NGS作为常规方法,但需要对算法和技术方面进行进一步研究。

关键词： 血液检验   地中海贫血   缺铁性贫血   诊断   鉴别  

摘要： 目的:分析血液检验指标在贫血鉴别和诊断中的临床价值.方法:20例地中海贫血患者、20例缺铁性贫血患者及30例健康体检者作为研究对象,对其进行血液检验,对不同类型研究对象检验结果进行比较和分析.结果:地中海贫血、缺铁性贫血患者的平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞分布宽度(RDW)与健康体检者比较差异具有统计学意义(P<0.05);地中海贫血患者MCHC、RDW与缺铁性贫血患者比较差异具有统计学意义(t=26.4374、5.4187,P<0.05).结论:血液检验能够有效诊断贫血并准确鉴别贫血的类型,可作为贫血诊断和鉴别的首选措施在临床中应用和推广.

关键词： 缺铁性贫血   地中海贫血   血常规   检验  

摘要： 目的对缺铁性贫血、地中海贫血的血常规检验结果比较进行探讨。方法研究对象筛选基于纳入标准和排除标准作为前提,抽选时间为2018年1月到2019年1月,共选取缺铁性贫血患者50例,为参照组。于相同时间段另选地中海贫血患者50例,为观察组。两组患者均予以血常规检验,针对检验结果比较患者的血常规指标。结果观察组的血常规指标与参照组差异明显,且数值方面观察组Hb、MCHC更高,RBC、RDW、MCV更低,统计处理显示P<0.05,统计学意义成立;两组患者的MCH数值差异细微可忽略,P>0.05。结论缺铁性贫血以及地中海贫血患者的血常规指标存在差异,临床上可应用血常规检验予以鉴别诊断。

关键词： 尿石症   结石成分分析   尿液理化性质检测   护理   复发  

摘要： 目的研究在地中海贫血以及缺铁性贫血的临床鉴别诊断中应用血常规红细胞参数进行检验的临床检验价值效果。方法选择本院在2018年11月～2019年5月期间收治的46名贫血患者,通过随机表数字法选出23名地中海贫血患者为甲组,23名缺铁性贫血患者为乙组,对两组患者安排血常规检测,观察两组患者的红细胞宽度、计数、平均体积、血红蛋白、平均红细胞血红蛋白浓度以及含量(RDW、RBC、MCV、Hb、MCHC、MCH)的检测结果。结果甲组患者的MCV、RDW以及RBC检测参数结果大大低于乙组患者,(P<0.05);甲组患者的Hb以及MCHC…参数结果大大高于乙组患者,(P<0.05);甲乙两组患者的MCH参数检测结果差异较小(P>0.05)。结论在地中海贫血以及缺铁性贫血的临床鉴别诊断中,根据血常规红细胞参数值进行检验,具有良好的临床检验应用价值。

关键词： 输血治疗   β地中海贫血   应用价值  

摘要： 目的:对β地中海贫血患者接受输血治疗的情况进行分析.方法:以β地中海贫血患者为研究对象,时间为2016年3月-2018年2月,例数为100例,分为2组,其中50例输血依从患者为实验组,50例输血非依从患者为对照组,分析其干预的结果.结果:实验组β地中海贫血患者的LVEF、顺行性心搏量、心输出量、心指数、E、A水平均明显低于对照组,其舒张末期LV容积、收缩末期LV容积、每搏量则明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);实验组β地中海贫血患者的cTnI水平以及BNP水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论:β地中海贫血患者接受输血治疗,可取得较高的价值.

关键词： 地中海贫血   内源性一氧化碳呼气试验   红细胞寿命   血红蛋白  

摘要： 【目的】　　1、在可疑地中海贫血(简称地贫)人群中，采用内源性一氧化碳（CarbonicOxide;CO）呼气试验法检测红细胞寿命，描记受试者工作特征曲线（ReceiverOperatingCharacteristicCurve，简称ROC曲线）得出具有诊断价值的截断值，为地贫筛查提供参考指标。　　2、比较红细胞寿命测定与血细胞分析及血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的准确性。　　【方法】　　选取2017年11月～2019年1月到宝安区人民医院行地贫筛查者415例作为研究对象。收集其年龄、性别、血细胞参数（Hb、MCV、MCH）、网织红细胞百分比（Ret%）、网织红细胞计数（Ret）、肝功能、Coombs试验、G6PD试验、铁代谢指标（血清铁、铁蛋白、血清铁结合力、转铁蛋白）、维生素B12、叶酸、血红蛋白电泳等相关检查结果。采用内源性一氧化碳呼气试验检测红细胞寿命，采用跨越断裂点PCR法检测中国人常见的3种缺失型α-地贫，采用反向点杂交技术和高分辨率溶解曲线（HRM）检测3种突变型α-地贫和17个位点的19种突变型β地贫相关基因。根据地贫基因检测结果和缺铁性贫血（（IronDeficiencyAnemia简称IDA））诊断标准分为正常对照组、IDA组、α-地贫组（包括静止型、标准型、HbH病）、β-地贫组（包括轻型、中型、重型）。采用易侕统计软件()和R软件统计分析，并描记ROC曲线得出具有诊断价值的截断值;比较红细胞寿命测定与血细胞分析及血红蛋白电泳在地贫筛查中的准确性。P＜0.05为差异有统计学意义。　　【结果】　　1、一般资料及地贫基因检出率在受检的415人中，经基因检查确诊为地中海贫血212例（51.08%），其中α-地贫129例，包括静止型21例，标准型86例及HbH病22例;β-地贫75例，全部为轻型，未检出中间型及重型;β复合α地贫8例;α-地贫最常见突变基因为--SEA，占55.04%（71/129），静止型和HbH型常见突变基因型分别为-α3.7和--SEA/-3.7型，占比分别为7.75%（10/129）和10.85%（14/129）;轻型β-地贫以基因型CD41-42和IVS-II-654常见，占比分别为42.67%(32/75)和33.33%(25/75);β复合α地贫以CD41/42分别复合--SEA和-α3.7最常见，占比均为25%（2/8）。　　2、在未排除IDA时，红细胞寿命、MCV、MCH、HbA2筛查地贫的准确性比较采用ROC曲线分析显示，筛查出地贫的最佳红细胞寿命截断值为51.5d，对应ROC曲线下面积为0.5775，敏感性、特异性分别为32.08%、82.76%。红细胞寿命测定筛查地贫的准确性与MCV、MCH无明显差异（P＞0.05），但特异性高于MCV和MCH（P＜0.05）。　　3、在排除IDA后，红细胞寿命、MCV、MCH、HbA2筛查地贫的准确性比较采用ROC曲线分析发现，筛查出地贫的最佳红细胞寿命截断值为73.5d，ROC曲线下面积为0.7008，敏感性、特异性分别为49.06%、82.35%。在排除IDA后，红细胞寿命测定筛查地贫的准确性稍逊于MCV、MCH（P＜0.05），筛查β地贫的准确性不如HbA2（P＜0.05），筛查α-地贫及β合并α地贫的准确性与HbA2无明显差异（P＞0.05）。　　【结论】　　1、红细胞寿命测定可用于地贫的筛查，在未排除IDA时，筛查出地贫的最佳红细胞寿命截断值为51.5d，在排除IDA之后，筛查出地贫的最佳红细胞寿命截断值为73.5d。　　2、在未排除IDA时，红细胞寿命测定筛查地贫的准确性与MCV、MCH无明显差异，但特异性更高。在排除IDA之后，其筛查地贫的准确性不如MCV、MCH，筛查β地贫的准确性也不如HbA2，但筛查α-地贫及β合并α地贫的准确性与HbA2无明显差异。

关键词： 血常规   地中海贫血   缺铁性贫血   诊断与鉴别  

摘要： 目的通过血常规检查对比地中海贫血和缺铁性贫血各指标差异,从而通过差异化指标来诊断和鉴别两种疾病。方法选择本院于2018年1月2019年1月收治的30例地中海贫血和30例缺铁性贫血患者作为研究对象,分别进行血常规检测,对比两种类型贫血患者各项血常规指标,为临床鉴别两种贫血类型提供参考依据。结果地中海贫血患者的MCHC、MCV、RDW、Hb、RBC分别为（302.2±25.4）g/L、（66.1±4.3）、（21.5±2.1）%、（91.4±13.1）g/L、（4.8±0.6）×109/L;缺铁性贫血患者的MCHC、MCV、RDW、Hb、RBC分别为（299.8±24.6）g/L、（65.9±4.2）、（15.2±1.1）%、（72.5±14.3）g/L、（3.5±0.5）×109/L;两种类型贫血患者的RDW、Hb、RBC比较差异具有统计学意义（P<0.05）。结论血常规检验可通过血常规中RDW、Hb、RBC等指标辅助鉴别地中海贫血和缺铁性贫血。

关键词： 地中海贫血   缺铁性贫血,血常规检测   比较分析  

摘要： 目的:对比分析地中海贫血及缺铁性贫血血常规检验结果.方法:选取2017年7月-2018年7月由于贫血进入我院进行血常规分析的128例患者作为研究对象,其中64例患有地中海贫血的患者作为观察组A,将64例患有缺铁性贫血的患者作为观察组B,另外选取64例同期进行血常规检查的健康人员作为对照组,3组均进行血常规检测,对比分析三组患者的检查结果.结果:观察组A与观察组B相比于对照组患者的各项指标差异具有统计学意义(P<0.05),观察组A与观察组B的MCHC、MCH、MCV值相比较差异无统计学意义,观察组A的RDW值明显低于观察组B(P<0.05);观察组A的RBC与HB值明显低于对照组(P<0.05).观察组A和观察组B的白细胞以及血小板相比于对照组均出现异常情况,而观察组B相比与观察组A与对照组差异情况最为严重(P<0.05).结论:进行血常规检测可以检测患者是否存在贫血的症状,还可以对地中海贫血以及缺铁性贫血进行有效的区分,在临床贫血的检测中具有非常重要的研究价值.

关键词： 地中海贫血   空间分布   时空变化  

摘要： 目的：本研究运用地理信息系统技术，了解广西地中海贫血的地理分布情况，分析地中海贫血的高发地区和低发地区，从而探讨广西地中海贫血的时空趋势，为广西地中海贫血的空间分布情况提供数据支持，进而为广西地中海贫血防治政策的制定提供理论依据。　　方法：收集广西各市县2011年-2018年婚检和孕检相关数据，包括婚检人数，婚检地贫筛查人数，婚检地贫筛查阳性人数，孕检人数，孕检地贫筛查人数，孕检地贫筛查阳性人数等。在Excel2016中对数据进行处理，计算地贫婚检筛查阳性率、地贫孕检筛查阳性率、地贫婚检筛查率和地贫孕检筛查率。从国家基础地理信息中心获得1∶100万国家行政区划矢量地图，并从中截取广西壮族自治区行政区划矢量地图，并核查收集数据中的县区名称与矢量地图中的区划名称，使之匹配。使用GeoDa1.6.7软件对地贫婚检和孕检筛查阳性率数据进行经验贝叶斯平滑处理，并将平滑后的阳性率使用ArcGIS10.2制作专题图。使用ArcGIS10.2软件进行经验贝叶斯克里金插值和空间自相关分析，用SaTScan V9.6对数据进行纯空间和时空扫描统计，并用ArcGIS10.2软件进行可视化处理。　　结果：1.2011-2018年广西婚检共有6044498人参加地贫筛查，地贫筛查阳性总人数为1208819人，地贫婚检筛查阳性率为20.00％，婚检率为97.91％。地贫孕检共有5801731人参加地贫筛查，孕检筛查阳性总人数为1581129人，地贫孕检筛查筛查率为92.04％，地贫孕检筛查阳性率为20.28％。　　2.经过经验贝叶斯平滑后的地贫筛查阳性率专题图显示，2011年-2018年广西地贫筛查阳性率有明显的高值区域，高值点地区主要分布在桂西南地区的德保县、田阳县、田东县、龙州县等，桂中部的兴宾区、覃塘区等，以及桂东部的苍梧县等县区。低值地区则主要分布在桂北地区的资源县、全州县、兴安县等，桂西北地区的隆林各族自治县、融水县等县区。　　3.经验贝叶斯克里金插值结果显示，2011年-2018年广西地贫筛查阳性率存在聚集区域，高值聚集区域的中心点主要分布在桂西南地区，桂中部地区和桂东南地区。以高值点县区为中心，向周边县区阳性率逐渐减弱，桂北地区的县区和桂东南的省界边缘县区为各年的聚集区域的低值地区。　　4.全局和局域自相关分析结果图显示，2011年-2018年广西地贫存在聚集区域，聚集类型有高高聚集、高低聚集、低高聚集和低低聚集。存在有统计学意义的热点和冷点区域，热点区域主要分在桂西南地区的大部分县区（包括天等县、龙州县、右江区、田东县、平果县、凭祥市、大新县等）、桂东部的局部地区（包括苍梧县、八步区、藤县等）、以及桂中部的局部地区（包括兴宾区、武宣县、覃塘区等）。冷点区域则主要分布在桂北的大部分县区（包括资源县、兴安县、全州县、七星区、象山区、雁山区等）和桂西北局部县区（包括融水苗族自治县、环江毛南族自治县、西林县、隆林各族自治县等）。　　5.2011-2018年广西地贫婚检筛查人数逐年减少，但婚检率和阳性率随着时间的推移不断增高，婚检率至2018年达到99.99％，地贫筛查阳性率达到23.48％。地贫孕检筛查人数总体上呈现不规则的变化趋势，2011-2016年孕检筛查率、孕检筛查阳性率呈现出逐年升高的趋势，2016年的孕检筛查率达到99.58％，孕检筛查阳性率达到25.86％。2017年孕检筛查率降至96.11％，2018年则又升高到99.42％。2016-2018年孕检筛查阳性率呈现出逐渐递减的趋势，到2018年孕检筛查阳性率为20.28％。　　6.2011-2018年广西地贫婚检筛查和孕检筛查纯空间扫描统计结果一致，发现有10个有统计学意义的高发聚集区。一级聚集区是以靖西县为中心，半径为135.32千米的圆形区域，辖11个县区，LLR=3435.746，P=0.001，RR=1.30。　　7.地贫婚检时空扫描统计发现4个有统计学意义的高发聚集区，一级聚集区是以靖西县为中心，半径为135.57千米的圆形区域，聚集时段为2011-2014年，辖12个县区，LLR=2385.232，P=0.001，RR=1.39。　　8.地贫孕检筛查时空扫描统计发现4个高发聚集区域，一级时空聚集区以柳北区为中心，半径为143.94千米范围的圆形区域，聚集时段为2012-2014年，辖34个县区，LLR=1466.802，P=0.001，RR=1.16。　　9.地贫婚检筛查和孕检筛查联合时空扫描统计发现5个有统计学意义的高发聚集区域，一级时空聚集区以柳江县为中心，半径130.64千米的圆形区域，聚集时段为2012-2014年，辖27个县区，LLR=1661.202，P=0.001，RR=1.07。　　结论：1.广西地贫筛查阳性率高，意味着地贫携带率也高，受累人群众多，地贫

关键词： 贵港地区   重型地中海贫血孕妇   随访管理   效果分析  

摘要： 目的:探讨贵港地区重型地中海贫血孕妇随访管理和效果分析。方法:回顾性分析2016年1月-2018年12月在我市(包括三区两县市)经产前诊断为重型地贫胎儿272例的临床资料,通过随访管理,分析管理效果。结果:2016年地贫筛查基因检测2587对,基因同型地贫行产前诊断363对,重型地贫胎儿98例,终止妊娠92例;2017年地贫筛查基因检测2192对,基因同型地贫行产前诊断265对,重型地贫胎儿95例,终止妊娠93例;2018年地贫筛查基因检测1954对,基因同型地贫行产前诊断304对,重型地贫胎儿79例,终止妊娠75例。结论:贵港地区重型地中海贫血孕妇随访管理和效果显著,共终止妊娠260例,3年来为贵港地区减少重型地贫儿出生260人,取得了很大的成效。