关键词： 地中海贫血   -α3.7/αα   HKαα   巢式PCR   MLPA  

摘要： 目的:地中海贫血(简称“地贫”)是一种全球常见的常染色体单基因遗传病,不同基因型临床表现可不相同。轻型地贫可为小细胞低色素轻度贫血,中间型及重型地贫可致中、重度溶血性贫血,还可伴有黄疸、肝脾肿大、发育迟缓等表现。重型地贫患儿甚至可于出生前或出生后死亡。目前仅可通过造血干细胞移植或基因编辑治愈,但配型困难,且价格昂贵,临床上暂不能普遍运用。在我国,地贫好发于长江沿岸及以南流域,如广西、广东、海南、云南、福建、四川、重庆等地区,各地区地贫携带率差异较大,为3.3%-24.07%不等。不同地区、不同人群存在不同的地贫基因突变谱。目前运用间隙-聚合酶链式反应(gap-polymerase chain reaction,Gap-PCR)技术及反向斑点杂交技术(reverse dot blot,RDB)可检测24种常见突变,但仍余有3%的风险还存在其他的突变未能检测到。香港型地贫(HongKongαα,HKαα)则是一种未在检测范围内较为罕见的α-地贫,即同一染色体上同时包含了-α3.7及αααanti-4.2。由于目前常规检测试剂盒中缺乏对αααanti-4.2三联体的检测,所以-α3.7/αααanti-4.2及HKαα地贫携带者常被误诊为-α3.7/αα。当-α3.7/αα的配偶为--SEA/αα时,他们的后代有1/4概率为-α3.7/--SEA,为血红蛋白H病(Hemoglobin H,Hb H)。Hb H病临床表现不一,可为小细胞低色素性轻度贫血至重度贫血。严重者发育迟缓、脾大明显,可因合并感染而导致病情加重。因此孕妇需进行产前诊断明确基因型。而HKαα既不属于-α3.7缺失型,亦不属于αααanti-4.2三联体,HKαα/--SEA主要表现为轻型(α-地贫,将HKαα诊断为-α3.7缺失型地贫基因携带者,当其配偶为--SEA/ααα时,则因需明确诊断而进行不必要的有创检查,增加了流产风险及经济负担,给孕妇带来了精神压力。而当患者基因型为-α3.7/αααati-4.2时,首先,无论其配偶是否为地贫患者,地贫基因均会遗传给下一代。再者,当合并β-地贫时,因αααati-4.2可使α-珠蛋白链的合成增加而加重β-地贫的表型。因前两者的临床表现、遗传咨询和产前诊断与-α3.7/αα不同,所以检出αααanti-4.2及HKαα基因型迫在眉睫。而目前HKαα的经典检测方法——巢式PCR,无法区分HKαα/αα、HKαα/-α3.7、HKαα/αααanti-4.2、HKαα/αααanti-3.7、HKαα/HKαα 等,而基因型与临床表现、遗传概率相关,故对HKαα基因型鉴定十分必要。本研究主要通过对四川地区人群进行地中海贫血基因检测,了解该地区地中海贫血基因分布情况,为临床医师提供遗传咨询和产前诊断资料。同时,建立一种鉴定-α3.7缺失型地贫基因携带者的αααanti-4.2与HKαα基因型的方法。方法:收集2017年7月至2019年10月于四川省人民医院就诊并进行地贫基因型检测样本。常规地贫基因检测采用核酸自动提取仪提取DNA,αααanti-4.2及HKαα基因检测采用康为世纪及Qiαgen DNA提取试剂盒提取DNA;Gαp-PCR及RDB技术检测24种常见地贫突变;采用Primer 3对HKαα基因检测所需引物进行设计,由上海生工生物有限公司合成引物;对筛查结果为-α3.7缺失型地贫基因携带者进行αααanti-4.2基因分析,αααanti-4.2阳性者采用巢式PCR及多重连接探针依赖扩增(multiplex ligation-dependent probe amplification,MLPA)技术进行 HKαα 基因型检测。采用统计描述的方法描述常规地贫基因型分布、巢式PCR及MLPA技术检测 αααanti-4.2 及 HKαα 结果。结果:1.5488例四川受检者中,检出地贫携带者和患者共2544例,地贫基因型38种。其中,α-地贫1190例(46.78%,1190/2544)、β-地贫1286例(50.55%,1286/2544)、α复合β地贫 68 例(2.67%,68/2544)。其中,α-珠蛋白基因突变9种,以--SEA突变最为常见,占所有α-珠蛋白基因突变的69.77%;β-珠蛋白基因突变 13 种,以 CD17(A>T)、CD41-42(-TTCT)、IVS-2-654(C>T)突变等位基因为主,依次占所有β-珠蛋白基因突变的32.92%、28.88%、24.12%。1190 例 α-地贫中,检出 19 种基因型。以--SEA/ααα为主,占α-地贫2/3以上,为71.76%。1286例β-地贫中,检出18种基因型。以βcd17/βN(33.28%)、βd41-42/βN(28.46%)、βIVS-

关键词： 地中海贫血   基因诊断   育龄人群   少数民族  

摘要： 目的分析黔南州育龄人群地中海贫血（简称地贫）基因携带状况,以便为地贫筛查规划提供参考依据。方法对2015-2019年黔南州23 987名育龄人群采用红细胞指标检测（MCV和MCH）和血红蛋白电泳（Hb A2）分析进行地贫筛查,初筛阳性者行基因检测确诊,运用统计学方法分析育龄人群基因检出情况。结果 23 987名育龄人群中,地贫基因阳性1 037例,检出率4.32%（1 037/23 987）。其中男性地贫基因检出率3.80%（376/9 893）,女性为4.69%（661/14 094）。女性检出率高于男性（χ;=11.114,P=0.015）;汉族、布依族、苗族、水族、壮族、侗族、毛南族、土家族、瑶族、仡佬族、彝族、回族、其他民族地贫基因检出率分别为1.66%、5.95%、5.18%、7.24%、5.12%、2.95%、6.88%、2.43%、5.14%、1.34%、1.89%、2.81%、2.56%;黔南州地贫基因检出率排前三位分别是长顺县（4.69%）、惠水县（4.61%）和三都县（4.51%）,基因型主要以--SEA/αα、βCD41-42/βN、βCD17/βN为主,占60.95%。结论黔南州育龄人群地中海贫血基因携带率较高,具有性别、民族和县份分布特点。

关键词： 新生儿   地贫基因   新生儿筛查   地贫防控  

摘要： 目的统计分析云浮市地区新生儿α地中海贫血基因结果,对我院1031例新生儿地贫基因进行检测,并进行回顾统计分析结果。结果轻型地中海贫血检出383例最多,其中有17例合并β地中海贫血,轻型地中海贫血基因构成比及阳性率率分别是62.89%、37.15%。静止型地中海贫血172例(12例为合并β地中海贫血),基因构成比及突变频率分别是28.24%、16.68%。中间型地中海海贫血54例(7例合并β地中海贫血)基因构成比及突变频率分别是8.87%、5.24%。结论云浮市新生儿α地中海贫血以--SEA基因携带率最高,轻型地中海贫血为主,地中海贫血防控形势还比较严峻,仍要加强地贫防控降低地贫患儿的出生。

关键词： 地中海贫血   缺铁性贫血   ROC曲线   红细胞参数  

摘要： 在常见儿童贫血性疾病鉴别诊断中,通过方便快捷的血液学指标能对地中海贫血患者和缺铁性贫血患者进行有效的初筛。

关键词： 地中海贫血   造血干细胞移植   心理护理   作用  

摘要： 重型β-地中海贫血（Heavyβ-thalassemia）是由于先天性-珠蛋白基因缺失或突变从而导致血红蛋白的-珠蛋白肤链合成减少或完全停止正常的血红蛋白产量减少引起的一种遗传性慢性溶血性疾病。造血干细胞移植是目前唯一可治愈β-地中海贫血的方法。;然而,由于目前我国医护力量不足,而异基因造血干细胞移植治疗又往往由于受感染、移植物抗宿主病（GVHD）等因素影响,风险大,预后差。因此,在对其患儿进行医治过程中,家庭护理及心理护理的作用非常重要。本文通过对笔者选取的数例重型β-地中海贫血造血干细胞移植患儿受家庭护理及心理护理干预后的具体表现,对其进行研究与调查,综合评价家庭护理及心理护理的重要性,以供参考。

关键词： 地中海贫血   干细胞移植   生存   并发症   危险因素  

摘要： 目的探究基于同一预处理方案下,在重型地中海贫血儿童造血干细胞移植中,HLA不全相合供体移植能否达到全相合供体移植的生存情况及治疗效果,明确预后的相关危险因素。方法回顾分析2013年9月至2019年9月共257例在广东省广州市妇女儿童医疗中心血液移植中心同意并接受异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)的重型地中海贫血的患儿资料,采用Log-Rank及Cox回归分析影响患儿Allo-HSCT生存预后的危险因素。将移植前患儿的危险分级、脾脏大小、左心射血分数、性别、年龄、血清铁蛋白水平、肝脏大小、供患者之间的HLA相合程度、亲缘及无关、供者性别情况,移植中单个核细胞及CD34细胞输注量,移植后中性粒细胞及血小板植入时间,移植后并发症发生与否(急性移植物抗宿主、慢性移植物抗宿主、肝小静脉闭塞症、可逆性后部脑白质病变、出血性膀胱炎、AIHA、闭塞性细支气管炎、移植后淋巴增殖性疾病、巨细胞病毒感染、EB病毒感染)等纳入危险因素,分别分析各个危险因素对总生存率(OS)、无地中海贫血生存率(TFS)、移植相关死亡率(TRM)、移植排斥(GR)的影响,OS、TFS、TRM、GR均采用Kaplan-Meier法估计。结果纳入257例患者的260次干细胞移植中(3例患者进行了二次移植,其中2例为男性,1例为女性),男性172例,女性85例,移植时中位年龄为6岁。共死亡20例,237例存活,3例排斥,累计OS为92.08%,累计TFS90.89%,累计GR为1.24%,累计TRM为8.01%。HLA全相合与不全相合供体移植的OS分别为92.71%、90.23%,TFS分别为91.11%、90.23%,TRM分别为7.41%、9.77%,GR分别为1.64%、0,差异均无统计学意义(P>0.05)。HLA全相合亲缘供体移植、HLA全相合无关供体移植、HLA不全相合亲缘供体移植、HLA不全相合无关供体移植的OS分别为93.35%、91.93%、88.74%、91.23%,TFS分别为92.31%、89.67%、88.74%、91.23%,TRM分别为6.72%、8.26%、11.27%、8.77%,GR分别为1.11%、2.25%、0、0,差异无显著统计学意义(P>0.05)。Log-Rank分析显示患者危险分级、移植后闭塞性细支气管炎、急性移植物抗宿主病、巨细胞病毒感染与移植后OS及TFS显著相关;患者危险分度、急性移植物抗宿主病、巨细胞病毒感染、闭塞性细支气管炎与TRM显著相关;急性移植物抗宿主、闭塞性细支气管炎与GR相关。患者危险分级越高,其OS、TFS越低,且差异有统计学意义(OS:Ⅰ级:100%,Ⅱ级92.26%,Ⅲ级:83.33%,P=0.032)(TFS:Ⅰ级:100%,Ⅱ级90.79%,Ⅲ级:83.33%,P=0.047);移植后发生闭塞性细支气管炎比不发生闭塞性细支气管炎的患者OS及TFS显著降低(OS:67.50%VS 93.74%,P=0.0002;TFS:55.56%VS 93.33%,P<0.0001);移植后发生急性移植物抗宿主病比不发生移植物抗宿主病的患者OS及TFS显著降低(OS:86.79%VS 94.62%,P=0.023;TFS:83.09%VS 94.62%,P=0.002);移植后出现巨细胞病毒感染比不出现巨细胞病毒感染患者的OS及TFS显著降低(OS:83.80%VS 95.15%,P=0.004;TFS:82.44%VS 94.03%,P=0.005)。患者危险分度为Ⅰ级、Ⅱ级的TRM比Ⅲ级显著降低,分别为0、7.85%、16.67%(P=0.033);发生巨细胞病毒感染的比不发生巨细胞病毒感染的TRM显著增高(16.40%VS 4.91%,P=0.004);发生闭塞性细支气管炎的比不发生闭塞性细支气管炎的患者TRM显著增高(36.51%VS 6.29%,P<0.0001);移植后发生急性移植物抗宿主的比不发生移植物抗宿主的患者移植TRM显著增高(13.71%VS 5.38%,P=0.017)。移植后发生急性移植物抗宿主的比不发生移植物抗宿主的患者移植GR显著增高(3.92%VS 0,P=0.011);移植后发生闭塞性细支气管炎的患者比不发生闭塞性细支气管炎的患者的GR增高(14.77%VS0.41%,P<0.0001)。多因素分析显示患者危险分度(P=0.027,HR:3.002,95%CI:1.134-7.944)、闭塞性细支气管炎(P=0.008,HR:3.983,95%CI:1.432-11.079)和巨细胞病毒感染(P=0.008,HR:3.339,95%CI:1.361-8.190)是影响移植后OS的独立危险因素。急性移植物抗宿主病(P=0.019,HR:2.754,95%CI:1.178-6

关键词： 儿童患者   地中海贫血   基因检测   结果分析   反向斑点杂交技术  

摘要： 目的:探讨深圳地区儿童常见地中海贫血基因特点与构成情况,为本地区地中海贫血的防控提供信息?　　方法:选取2015.1-2017.12来我院就诊的6889例疑似地中海贫血患儿作为研究对象?对血液细胞检测中红细胞有关参数异常,即平均血细胞比容(MCV)和平均红细胞血红蛋白量(MCH)两项参数下降者,或家族中有地贫患者?携带者等,采用Gap-PCR法及反向斑点杂交技术(RDB)行中国人常见的地中海贫血基因检测分析?实验数据通过SPSS21.0统计学软件进行整理?　　结果:　　1?地中海贫血基因类型:6889例患者中共检测出确诊地中海贫血基因携带者为4990例,阳性率为72.4%,其中包括α-地贫2860例,占比为57.31%;β-地贫1990例,占比为39.88%;α-合并β-地贫140例,占比为2.8%?检出α-地贫阳性者与β-地贫阳性者比值约为1.44:1?　　2?α型地中海贫血:共检出21种基因类型?其中缺失型合计2563例,占比89.62%。主要亚型--SEA/αα?-α3.7/αα?--SEA/-α3.7?-α4.2/αα占比分别为80.3%?7.73%?6.67%?3.00%?检出非缺失型共297例?在所有α型地中海贫血中,以--SEA/αα基因型最为常见,达到所占比例的71.96%(2058/2860)?在6889例标本中,α突变型检出率共为4.4%,以αCS携带为主?　　3?β型地中海贫血:共检出40种基因类型?主要为βCD41-42/βN,βIVS-Ⅱ-654/βN,βCD17/βN,β-28/βN,βCD27-28/βN,βCD71-72/βN,分别占比34.72%?29.85%?13.22%?5.63%?2.36%?2.1%,这6类基因型病例总数为1749例,共占比为87.89%(1749/1990)?　　4?α+β复合型地中海贫血:共检出44种基因类型,合计140例?其中复合地中海贫血类型中α型地中海贫血基因以--SEA/αα较多,β型地中海贫血基因主要以βCD41-42/βN基因型为主;α-合并β-地贫以α3.7/αα复合βCD41-42/βN?--SEA/αα复合βCD41-42/βN?--SEA/αα复合βIVS-Ⅱ-654/βN?α3.7/αα复合βIVS-Ⅱ-654/βN基因型为主,分别占比为14.3%?12.9%?11.4%?7.9%?重型复合型则多表现为中间型地中海贫血?　　5?性别?年龄及血液学参数:在4990例阳性患者中,男女比值约为1.5:1?年龄分布1月-16岁,平均年龄分布在(2.3±2.2)岁,其中93%就诊患儿于学龄前明确检出地中海贫血?在--SEA/αα?-α3.7/αα?--SEA/-α3.7?-α4.2/αα四组血常规中,其RBC?Hb?MCV?MCH之间差异无统计学意义(P>0.05)?在βCD41-42/βN,　　βIVS-Ⅱ-654/βN,βCD17/βN,β-28/βN四组血常规中,其Hb?MCV?MCH之间差异具有统计学意义(P<0.05)?β-28/βN的RBC?Hb?MCV?及MCH较其他类型明显升高?β-地贫的MCV较α-地贫平均水平低,差异具有统计学意义(P<0.05)?　　结论:　　1?6889例疑似患者共检出地贫基因携带者4990例,阳性率为72.4%;以α-地贫为主,其次为β-地贫,少数为α-合并β-地贫?　　2?本组资料显示α-地贫最常见突变按照频率高低依次为--SEA/αα?-α3.7/αα?--SEA/-α3.7,与其他地区有所不同?其中缺失型以--SEA/αα为主,突变型以αCS携带为主,缺失型α-地贫比例明显高于突变型?　　3?β-地贫最常见突变按照频率高低依次为βCD41-42?βIVS-II-654?βCD17?β-28?β27-28?β71-72,与其他地区也存在差异?其中有相当数量的复合β-地贫(重型)患者,以βIVS-II-654/β41-42等为主?　　4?深圳地区儿童人群的地贫基因类型多,携带率高,存在较高比例的缺失型α-地贫基因--SEA/αα,以及一定数量的复合重型β-地贫患儿?需要进一步重视地贫基因筛查及优生优育工作,以提高新生人口的质量?

关键词： 重型β-地中海贫血(β-TM)   龋病   龋失补指数   变形链球菌   龋活跃性  

摘要： 目的:利用变形链球菌(Streptococcus mutans,***)16S rDNA PCR以及Cariostat龋病易感性检测试剂等途径评估学龄前患重型β-地中海贫血(Beta-thalassemia major,β-TM)儿童的龋病活跃性,探索学龄前儿童β-TM与龋病是否存在相关性,为β-TM儿童的龋病防控与诊治提供更多的理论依据,能够有针对性的对该人群实施预防保健措施,提高特殊人群的生活质量。方法:对32例就诊于遵义医科大学附属医院儿科3～6岁患β-TM儿童和30例年龄相匹配的健康儿童进行问卷调查及口腔基本检查,记录乳牙龋失补指数(decaded,missing and filled teeth,dmft)、龋严重度指数(Caries severity index,CSI)。收集菌斑,利用Cariostat龋态法检测牙菌斑中致龋菌的产酸能力,记录龋态值。并同时收集唾液样本,利用pH计测定唾液样本pH值。培养***标准菌株,提取标准菌株及唾液样本中的细菌组DNA,针对***的16S rDNA设计特异性引物,利用PCR检测唾液样本中***,计算唾液样本中的***检出率。比较3～6岁β-TM组和健康组dmft、CSI、Cariostat值、唾液pH值、***检出率有无差异,实验数据整理分析,数据采用IBM Statistic SPSS 18.0进行统计分析。结果:1、β-TM组与健康对照组的性别、年龄、睡前饮食习惯、刷牙次数等基本资料间差异无统计学意义(P>0.05)。2、β-TM的儿童较健康儿童Cariostat值处于中重度危险区分布人数要高,两组间统计学差异显著(P<0.05)。β-TM组的Cariostat值均值高于健康对照组Cariostat值均值(P<0.05),差异有统计学意义。3、β-TM组的平均dmft指数高于健康对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。4、β-TM组CSI指数高于健康对照组CSI指数,两组间CSI指数的差异无统计学意义(P>0.05)。5、β-TM儿童口腔中唾液的pH值低于正常儿童口腔中唾液pH值,两组间pH值的差异有统计学意义(P<0.05)。6、β-TM组的***检出率要高于健康对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。7、β-TM组的患龋率高于健康组,统计学差异显著(P<0.05),列联系数r=0.273,β-TM与龋病有一定相关性,但相关性较弱。结论:学龄前儿童β-TM与龋病有一定相关性,但相关性较弱。

关键词： 血红蛋白分析   地中海贫血基因检测   地中海贫血   诊断价值  

摘要： 目的:探究采用高效液相色谱法(HPLC)的全自动血红蛋白分析仪进行血红蛋白分析联合地中海贫血基因检测对地中海贫血患者的诊断价值.方法:选取我院2016年1月—2018年12月间在我院接受检查的7092例疑似地中海贫血患者作为研究对象,所有患者均给予血红蛋白分析联合地中海贫血基因检测,观察患者血红蛋白HbA、HbA2和HbF值和检出率,分析诊断价值.结果:经血红蛋白分析检测,α-地中海贫血患者HbF值明显较阴性患者高,HbA和HbA2值明显较阴性患者低(P<0.05);β-地中海贫血患者HbF和HbA2值明显较阴性患者高,HbA值明显较阴性患者低(P<0.05);血红蛋白分析检测和地中海贫血基因检测α-地中海贫血患者的检出率明显高于单纯血红蛋白分析检出率,且差异具有统计学意义(P<0.05),但检测β-地中海贫血患者的检出率未见统计学意义(P>0.05).结论:与单纯血红蛋白分析检测相比,血红蛋白分析联合地中海贫血基因检测具有更高的检出率,便于临床更好的诊断患者病情状况,值得临床大力推广应用.