关键词： 重型β-地中海贫血   儿童   甲状腺功能减退   铁过载  

摘要： 目的:观察重型β-地中海贫血(β-T M)儿童的甲状腺功能与铁过载的关系,改善患儿的甲状腺功能.方法:选取2018年1-12月在珠海市妇幼保健院治疗的44例β-TM儿童,用化学发光法检测其游离T3(FT3)、游离T4(FT4)、促甲状腺素(TSH)、血清铁蛋白(S F),了解儿童患者甲状腺功能减退发生率、分析S F与T S H之间的关系.结果:44例β-T M患儿中甲状腺功能减退(PH)0例,亚临床型甲状腺功能减退共6例(13.6％),SF与TSH之间正相关(r=0.399,P<0.05),亚临床甲状腺功能减退患儿的SF水平明显增高(t=3.174,P<0.05),不规范祛铁组患儿有较高的SF、TSH水平和亚临床型甲状腺功能减退发生率(t=6.186、2.678,χ2=8.273,均P<0.05).结论:β-TM患儿甲状腺功能与SF、不规范祛铁有关,需规范祛铁防止甲状腺功能障碍.

关键词： 铁过载   造血干细胞移植   去铁酮   疗效   不良反应  

摘要： 目的:本研究旨在探讨重型β地中海贫血(β-Thalassemia major,β-TM)患儿造血干细胞移植(hematopoietic stem cell trans plantation,HSCT)前后铁过载(iron overload,IO)的变化,及去铁酮(deferiprone,DFP)祛铁治疗的有效性及安全性,为临床提供参考。方法:收集2014年1月至2019年12月在我院儿科诊治行HSCT后存在IO的β-TM患儿40例,根据使用DFP治疗情况分为规范治疗组、不规范治疗组,及未接受任何祛铁治疗患儿为观察组。使用血清铁蛋白(Serum Ferritin,SF)值评价IO,回顾性分析HSCT前后IO状况、使用DFP治疗的疗效、不良反应(Adverse reactions,ADRs)及监测指标变化情况。结果:1.共收集到40例患儿分三组,其中规范治疗组14例,平均年龄为7.8±1.5岁,男女比例3.7:1,HSCT前输血时间为86±20个月,DFP用药剂量为53.3mg/kg.d。不规范治疗组16例,平均年龄为8.0±1.7,男女比例4.3:1,HSCT前输血时间为89±18个月,DFP用药剂量为34.2±9.7mg/kg.d。对照组10例,平均年龄为7.2±1.7岁,男女比例4:1;HSCT前输血时间为78±18个月,未接受任何祛铁治疗。三组患儿的年龄、性别构成、HSCT前输血时间均无统计学差异。规范治疗组与不规范治疗组DFP用药剂量存在统计学差异(P<0.05)。2.本研究40例患儿92.5%在HSCT前存在IO,其中60%为重度IO,SF的均值为2702±1087ng/ml;接受HSCT后1年100%患儿存在IO,其中87.5%为重度IO,SF的均值为3866±1119ng/ml。HSCT后1年的SF值及重度IO比例较HSCT前增加,差异有统计学意义。***治疗1年规范治疗组患儿SF值由治疗前4624±770ng/ml下降至2322±553ng/ml,平均下降2301±556ng/ml;不规范治疗组患儿SF值由治疗前3727±1107ng/ml下降至2494±980ng/ml,平均下降1232±421ng/ml;对照组患儿SF值由2671ng/ml下降至2333±830ng/ml,平均下降694±203ng/ml。DFP治疗组的SF下降值显著高于对照组,DFP治疗能更有效的降低SF值。规范治疗组重度IO比例由治疗前100%降至治疗后35.75%,差异具有统计学意义(P<0.05);不规范治疗组重度IO比例由治疗前81.25%降至治疗后50%,差异无统计学意义(P>0.05);对照组重度IO比例由80%降至观察1年的30%,差异无统计学意义(P>0.05)。4.30位患儿使用DFP治疗1年期间共记录到14例ADRs,常见ADRs为胃肠道反应(恶心、呕吐、食欲增强、腹痛),均为可逆转事件,未出现中性粒细胞减少症及中性粒细胞缺乏症,未发生说明书以外ADRs。规范治疗组与不规范治疗组各ADRs的发生率无统计学差异。***治疗1年规范治疗组患儿天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)由治疗前48.4±18.8U/L降至36.8±17.4U/L,丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)由治疗前49.9±13.8U/L降至32.2±9.7U/L,差异均具有统计学意义(P<0.05);不规范治疗患儿AST由治疗前45.0±18.3U/L降至29.0±5.3U/L,ALT由治疗前46.9±16.4U/L降至26.2±9.5U/L,差异同样具有统计学意义(P<0.05);而对照组患儿ALT、AST的差异无统计学意义。结论:1.通过监测SF变化情况,发现HSCT后IO状况较移植前明显加重,同样需要祛铁治疗。***后IO患儿使用DFP治疗能有效的降低SF值,规范的DFP治疗能更有效的控制儿童重度IO。***是治疗儿童HSCT后IO的一种安全的铁螯合剂。HSCT后使用DFP治疗IO不会增加ADRs发生率。***后IO患儿使用DFP治疗可以降低异常升高的AST、ALT值。

关键词： 地中海贫血   非平衡数据   集成学习   AdaBoost   融合模型  

摘要： 地中海贫血病(简称地贫)是一种严重的遗传性血红蛋白病,常见于我国南方地区。中、重型地中海贫血患者,因目前尚无根治方法,常见的治疗方法不仅会使患者遭受巨大身心折磨,且治疗费用也不是一般家庭所能承担的,对自身、家庭乃至社会都是一种沉重的负担。若能及早发现地中海贫血的携带者并实施相应对策,有效降低地贫血患儿的出生率尤为重要。本文主要基于地中海贫血病的数据并构建预警模型,主要研究成果如下:因数据存在不平衡的特性,本文提出了一种新的混合采样的数据处理方法,并根据多次仿真实验的结果总结出生成新的样本点的数目,并用AdaBoost算法对处理结果进行仿真验证。对数据集特征的冗余性,采用熵权法和随机森林算法进行风险因子选择,并进行对比,将二者都认为重要的因子作为最终的输入特征。考虑到过采样会引入噪声数据,欠采样会丢失大量数据等缺点,构建了基于混合采样下AdaBoost的地中海贫血预警模型,并对模型进行仿真验证,且与逻辑回归、KNN等算法进行对比,结果显示混合采样下AdaBoost预警模型的F值相对于其他算法达到了最高53.65%,G值达到91.55%,整体评价指标优于其他机器学习算法。由于Adaboost算法的基分类器为决策树,缺乏基分类器多样性,因此在已有机器学习的基础上构建了融合模型,通过实验,验证了该模型的Recall值,不仅比单个机器学习的性能高,且相对于混合采样下AdaBoost模型在Pre上提高了3.7个百分点,在F值上提高了3.5个百分点,可为地中海贫血初筛提供一定的参考价值。

关键词： Genetics   Public health  

摘要： There are several large endogamous communities in the city of Pune, India that have a high prevalence of β-thalassemia major, which has led to local efforts to address the medical and psychosocial burden of the disease. Essential medical management of β-thalassemia major includes periodic blood transfusions, iron chelation therapy, and routine tests to monitor for secondary complications. Adherence to essential medical management, is an important aspect of tertiary prevention as it can significantly reduce morbidity and mortality. and improve quality of life of affected individuals. Multidimensional and multilevel conceptualizations of adherence posit that apart from patient-related factors, adherence behavior is influenced by opportunities and constraints at various ecological levels and additional dimensions. Also, the World Health Organization posits that links between organizations across sectors is an essential health system building block for tertiary prevention of chronic conditions. With this in mind, the overall aim of this dissertation was to establish initial data that can contribute towards the improvement of adherence to essential management through strategic cross-sector collaboration, for the thalassemia community in Pune. Specific aims include: 1) Identifying contextual multidimensional and multilevel factors that influence adherence to essential management, 2) Determining the degree of connectivity between cross-sector stakeholder organizations that influence adherence to essential management, identifying key players in the network, and characterizing perceptions regarding interorganizational collaboration, and 3) Assessing the feasibility of using the Collective Impact approach to foster structured cross-sector collaboration to improve adherence to essential management. Specific aim 1 was achieved through in-depth interviews with 49 patients, caregivers, and key informants. Specific aim 2 was achieved through administration of a network survey to r

关键词： 地中海贫血   实验室诊断技术   筛查方法   基因诊断  

摘要： 地中海贫血疾病分为输血依赖型地中海贫血和非输血依赖型地中海贫血.该分类基于患者的临床严重程度,确定他们是否确实需要定期输血才能生存.地中海贫血可大致分为α或β地中海贫血,这取决于珠蛋白链的缺陷和潜在的分子缺陷,目前尚无有效的治疗方法 .目前的实验室诊断技术主要包括地中海贫血的筛查方法 和基因诊断技术.正确的实验室诊断技术对于鉴别不同形式表征的地中海贫血至关重要,对预防和治疗具有重要意义,本文就地中海贫血实验室诊断技术最新进展进行综述.

关键词： 血常规检验   鉴别诊断   地中海贫血   缺铁性贫血  

摘要： 目的研讨利用血常规检验鉴别诊断地中海贫血和缺铁性贫血的价值。方法采用回顾性分析方式,对本院2018年7月～2019年6月接受诊疗的21例地中海贫血患者临床资料进行分析,纳入A组;同期选择21例缺铁性贫血患者,纳入B组;同期选择21例普通贫血患者,纳入对照组。3组患者均开展血常规检验。结果对比对照组,A组及B组的RBC、Hb、MCV、MCH、MCHC水平均显著更低,RBC/Hb、RDW水平均显著更高,差异显著(P<0.05);对比A组及B组,A组的RBC、Hb、RDW水平均明显更高,差异显著(P<0.05)。结论利用血常规检验鉴别诊断地中海贫血和缺铁性贫血,有效性较高,尤其是RBC、Hb、RDW。

关键词： 地中海贫血   血红蛋白H病   β-珠蛋白   siRNA  

摘要： 目的:血红蛋白H病（hemoglobin H disease,Hb H病）是由α-基因缺陷所导致的α-珠蛋白与β-珠蛋白失衡所引来的,减少相对过剩的β-珠蛋白的生成是治疗Hb H病的关键。我们通过研究靶向β-珠蛋白链m RNAR的siRNA对体外定向分化培养的红系细胞β-珠蛋白的调控作用,为Hb H病的基因治疗提供新的理论支持。方法:1.建立红系细胞的体外分化培养体系,我们通过磁珠分选方法分选人的CD34+造血干细胞,通过流式细胞术检测细胞分选纯度,在二阶段培养体系中对其进行扩增及向红系定向分化培养,培养过程中定期在显微镜下进行形态学观察及通过流式细胞术检测红系细胞表面标记物CD71与CD253a的表达情况。2.筛选最佳的靶向β-珠蛋白链m RNA的siRNA,将100 pmol的siRNA1、siRNA2、siRNA3通过电穿孔技术分别转染至3组细胞内作为实验组,0 pmol作为空白对照组,100 pmol siRNA-nge作为阴性对照组,RT-PCR（Real time-PCR）检测红系细胞β珠蛋白基因的表达水平,筛选出对β-珠蛋白基因表达下调作用最佳的组。3.筛选siRNA最佳剂量,将0 pmol、50 pmol、100 pmol、150 pmol、200 pmol的最佳siRNA序列别作用于红系细胞,利用RT-PCR检测红系细胞β-珠蛋白基因的表达水平,筛选出最佳剂量,通过Western bloting实验检测最佳siRNA序列对β-珠蛋白的调控作用。并通过流式细胞术检测siRNA对细胞的毒性。4.将筛选出来的最佳siRNA序列以有效浓度作用于血红蛋白H病红系细胞,检测siRNA对细胞β-珠蛋白基因调控作用,比较正常红系细胞与Hb H病红系细胞内活性氧（reactive oxygen species,ROS）的水平,以及转染siRNA后这两种细胞内ROS水平的变化,并检测细胞的凋亡率,综合评估转染siRNA对Hb H病红系细胞的影响。结果:1.经磁珠分选的CD34+造血干细胞具有高纯度,在二阶段培养体系中CD34+造血干细胞逐步可分化为成熟红细胞。***2是抑制红系细胞β-珠蛋白基因表达的最佳序列（P<0.05）。3.在48小时内,不同浓度的siRNA2均可下调红系细胞β-珠蛋白基因的表达水平（P<0.05）,但对α-珠蛋白m RNA无明显调控作用（P>0.05）,高剂量组的沉默效应更显著,沉默效应持续的时间也更长,200 pmol的siRNA2在转染后96小时内均可下调人红系细胞β-珠蛋白（P<0.05）,且无明显增加细胞的凋亡率。***2对Hb H病红系细胞β-珠蛋白的m RNA有调控作用（P<0.05）。5.正常红系细胞内的ROS明显少于Hb H病红系细胞（P<0.01）,转染siRNA2后正常红系细胞内的ROS增加（P<0.01）,与之相反,Hb H病红系细胞内的ROS减少（P<0.01）。6.转染siRNA2可减轻Hb H病红系细胞的凋亡率,其中转染后72小时的早期凋亡率与总凋亡率下降有统计学意义（P<0.05）。结论:1.本研究证明靶向β-珠蛋白链RNA的siRNA对体外定向分化培养的人红系细胞β-珠蛋白有调控作用,siRNA的基因沉默效应和效应持续时间均与作用剂量有关。2.靶向性siRNA可下调Hb H病红系细胞内β-珠蛋白m RNA的表达水平并可以减少细胞内ROS的产生和细胞凋亡率,这将有助于减轻Hb H病红细胞溶血,改善临床贫血症状,可成为Hb H病的临床治疗新途径。

关键词： 轻型地中海贫血   甲状腺功能   血清铁蛋白   围产儿结局  

摘要： 目的:研究轻型地中海贫血患者的甲状腺功能状态、铁负荷状态及围产儿结局,为轻型地中海贫血孕妇妊娠期的健康状况及胎儿发育提供参考。方法:本研究回顾性收集2018年6月至2018年12月在广西医科大学第一附属医院产检的2053例孕妇临床资料,经纳入标准及排除标准,共筛选出符合条件的105例轻型地中海贫血孕妇作为研究对象,收集早、中、晚孕期测定静脉血甲状腺功能,SF并收集分娩后新生儿Apgar评分、体重相关临床资料。选取同时期241例正常孕妇为对照组,通过数据分析,了解轻型地中海贫血孕妇甲状腺功能、铁负荷状态及围产儿结局。结果:（1）孕早期TSH、FT4、FT3水平及甲状腺功能异常率地贫组与正常对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）,SF地贫组高于正常对照组且差异有统计学意义（P<0.05）。（2）孕中期TSH、FT4、FT3水平及甲状腺功能异常率地贫组与正常对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）,SF地贫组高于正常对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。（3）孕晚期TSH、FT4、FT3水平及甲状腺功能异常率、SF地贫组与正常对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。（4）孕中期铁负荷正常孕妇（SF≥20ng/ml）TSH低于孕中期铁缺乏孕妇（SF<20ng/ml）,两组比较差异有统计学意义（P<0.05）。（5）二元Logistic回归分析显示年龄是孕中期发生低甲状腺素血症的危险因素（OR:1.075,CI:1.014-1.139）。（6）地贫组新生儿体重与正常对照组新生儿体重比较,差异无统计学意义（P>0.05）,地贫组新生儿Apgar评分与正常对照组比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论:（1）轻型地中海贫血不影响孕妇孕期甲状腺功能水平;年龄是妊娠中期低甲状腺素血症的危险因素。（2）轻型地中海贫血孕妇孕期血清铁蛋白在早孕、中孕期比正常孕妇升高,在晚孕期升高不明显。（3）轻型地中海贫血孕妇对新生儿的出生体重及新生儿1分钟Apgar评分无明显影响。（4）妊娠中期血清铁蛋白与TSH水平相关,铁缺乏使TSH水平升高,对FT4无明显影响。

关键词： 地中海贫血症   产前诊断   外显子测序   红细胞发育   造血调控   造血干细胞  

摘要： 地中海贫血症是世界上最常见和发生率最高的一种单基因遗传病。目前临床上地中海贫血症没有可以普遍推广的根治方法。产前诊断在地中海贫血症的预防上有重要贡献。由于产前诊断技术的局限,导致地中海贫血症稀有突变类型不能被检测,不能完全避免地中海贫血症患儿出生。而外显子测序技术有可能弥补这一缺点,因此我们运用外显子测序技术对地中海贫血症基因携带者羊水样本进行检测,既能验证临床产前诊断结果,同时也是为了发现新的变异位点。我们通过外显子测序筛选出1344个共有变异位点。通过对这些共有变异位点进行GO富集分析筛选了26个term,涵盖膜的整体成分、跨膜信号受体活性、细胞外基质结构成分、钙离子结合等;通过KEGG富集分析筛选了13条信号通路,包括糖酵解/糖异生、ECM受体相互作用、补体与凝血级联反应等。这些基因和信号通路可能与地中海贫血症的发病机制密切相关,其结果需要进一步验证。另一方面,珠蛋白基因缺陷影响红细胞发育过程。红细胞的发育起源于造血干细胞,对造血干细胞的机理研究是根治地中海贫血症等一系列血液疾病的潜在突破口。我们利用磁珠分选和流式分选的方法从脐带血样本分离纯化CD34阳性细胞,在体外运用多种细胞因子成功对造血干细胞进行诱导分化,为体外培养造血干细胞模拟体内的造血过程奠定基础。

关键词： 地中海贫血   诊断相关多肽峰   基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱  

摘要： 目的利用临床基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪Clin-Tof-II构建多肽模型,研究地中海贫血胎儿羊水的多肽质谱变化规律。方法选取2015年6月-2016年6月来深圳市龙岗区妇幼保健院进行介入性产前诊断的同型地中海贫血基因携带孕妇83例为研究对象,留取羊水标本5 mL并分组。根据α、β基因缺失情况分为轻型地中海贫血(地贫1组)50例,重型地中海贫血(地贫2组)33例,同时以50例正常羊水标本为对照组,进行多肽组学测序分析。结果通过对正常对照与地贫1和地贫2羊水多肽质谱数据分析,得到134(P<0.05)个差异多肽峰,其中显著性差异多肽峰(P<0.01)32个,极显著性差异多肽峰(P<0.001)102个。其中89号(M/Z 3239.9)和14号(M/Z 1173.9)差异峰的重现性较好。根据极显著差异多肽峰14号(M/Z 1172.4)和89号(M/Z 3239.9),建立K-近邻模型KNN和径向基函数网络RBF,为评估高危地贫胎儿提供临床价值。结论羊水多肽质谱模型能够准确区分正常对照与地中海贫血患者,但尚需更进一步研究证实。