关键词： 地中海贫血   缺铁性贫血   血常规检查   早期诊断  

摘要： 目的:对地中海贫血与缺铁性贫血患者早期诊断中血常规检查的效果及鉴别准确性进行探究,以期为其后续治疗提供相应的理论依据。方法:按照抽样原则对我院2018年9月至2020年1月期间收治的地中海贫血、缺铁性贫血患者开展研究,以地中海贫血患者为A组(45例),以缺铁性贫血患者为B组(46例),另外,选择同期进行健康体检的人群为C组(46例)。采集所有受检者的血标本,进行血常规检查,结合该检查的各项指标水平,判断血常规检查在地中海贫血与缺铁性贫血患者早期鉴别诊断准确性中的作用及价值。结果:A组、B组、C组受检者的Hb、RBC、RDW、MCV、MCH、MCHC水平对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在地中海贫血、缺铁性贫血早期诊断中应用血常规检查,可有效保证诊断结果的准确性,以明确地中海贫血、缺铁性贫血的鉴别,避免出现其他结果,值得优选。

关键词： 缺铁性贫血   地中海贫血   血常规检验   对比分析  

摘要： 目的:对比探究缺铁性贫血和地中海贫血患者的血常规检验。方法:随机抽取我院2019年下半年(6月-12月)血液科收治的100例贫血症状患者作为研究主体,回顾性分析其一般资料,根据患者的贫血性质进行分组,其中50例缺铁性贫血患者为甲组,另外50例地中海贫血患者为乙组,另取50名同期健康体检者作为丙组。3组患者同时进行血常规检查,并对比3组患者的检测结果。结果:甲、乙两组患者的红细胞体积分布(RDW)、血红蛋白(HB)以及红细胞(RBC)的检测结果较之丙组存在较大差异,具有统计学意义(P<0.05),同时甲组患者的血红细胞体积分布(RDW)检测结果明显高于乙组,而血红蛋白(HB)和红细胞(RBC)的检测结果明显低于乙组,组间比较差异具有统计学意义。结论:研究表明,通过对患者红细胞体积分布(RDW)、血红蛋白(HB)、红细胞(RBC)、白细胞(WBC)等方面的检测,能够准确判断患者是否患有贫血症状,而缺铁性贫血以及地中海贫血以红细胞体积分布(RDW)、血红蛋白(HB)、红细胞(RBC)作为主要的诊断标准。

关键词： 白消安   群体药代动力学   重型地中海贫血   造血干细胞移植  

摘要： 目的建立白消安在重型地中海贫血患儿中的群体药代动力学模型,为此类患儿白消安的个体化给药提供依据。方法收集静脉使用白消安的儿童地中海贫血患者306名共2142个血样,用LC-MS/MS测定白消安血药浓度,详细记录相关临床数据。使用Monolix软件建立白消安的群体药代动力学模型。结果静脉给药一室模型能很好地描述白消安的药代动力学特征,白消安的表观分布容积（V）、清除率（CL）的群体典型值分别为12.10 L,3.83 L·h;。体表面积和肌酐清除率对模型有显著影响。结论本研究成功建立的白消安群体药代动力学预测性能稳定良好,可为临床白消安的个体化给药提供参考。

关键词： 沙利度胺   地中海贫血   输血   胎儿血红蛋白   副作用  

摘要： 目的:评价沙利度胺治疗重型β地中海贫血(β thalassemia major,βTM)的疗效及安全性。方法:根据纳入标准,收集2017年6月到2019年12月在我院就诊的βTM患者中使用过沙利度胺治疗的病例并进行回顾性分析,沙利度胺服药时间需大于1个月。根据自身对照治疗前后各观察指标变化水平来评价沙利度胺疗效。观察指标主要有:输血需求(输血间隔天数及单次输血量)、红细胞参数、铁蛋白、胆红素和血红蛋白电泳结果。最后,记录治疗期间药物副作用。结果:共收集到使用过沙利度胺治疗的βTM患者17人,药物剂量为每晚睡前口服75mg或100mg。7人在治疗2.14±2.04个月(范围1～6个月)后脱离输血,总脱离输血率为41.18%;10人未脱离输血,但其中9人输血间隔时间均延长(90%),治疗 1～3月后延长4.83±4.53天(P=0.008),治疗4～6月后延长7.83±4.64天(P=0.043),输血间隔延长后没有引起Hb、RBC有统计学意义的降低,治疗前后单次输血量无差异(P值>0.05)。17人经沙利度胺治疗后Hb、RBC、MCV、MCH、MCHC、RDW-CV等均发生变化,但并不总有统计学意义,RBC变化比Hb变化更明显。治疗后12个月中,第9个月的Hb、RBC最高,Hb:107.67±12.86g/L,较治疗前升高20.28±7.83g/L(P=0.001);RBC:4.58±0.85×1012/L,较治疗前升高 1.35±0.60×1012/L(P=0.003)。MCV、MCH、MCHC 均较治疗前降低,而 RDW-CV升高。治疗后HbF比例升高49.25±35.02%(P=0.018)。治疗前后Hb差值与治疗前HbF比例正相关(r=0.722,P=0.005),与治疗前HbA比例负相关(r=-0.719,P=0.006),与治疗前HbA2比例(r=-0.495,P=0.086)不相关。治疗前后铁蛋白和胆红素的变化无统计学意义。治疗前后WBC、NEU、LYM、PLT、PT、APTT、Fg、DDI、ALT、AST、UA和CK-MB的变化无统计学意义,但血肌酐在治疗后降低了3.67±6.18μmol/L(P=0.037),具有统计学意义。药物副作用方面有4例患者用药后出现了不良反应,分别是血栓事件、转氨酶升高、皮疹和急性胃肠炎。其中发生血栓患者停药并抗凝治疗,另外3人给予相应治疗后继续服药可耐受。结论:沙利度胺(75mg/100mg qn)对βTM患者具有疗效,41.18%的患者可以脱离输血,90%的未脱离输血患者可以延长输血间隔时间。治疗后Hb、RBC、HbF升高。治疗前后Hb差值与治疗前HbF正相关,与治疗前HbA负相关。治疗后MCV、MCH、MCHC均降低,而RDW-CV升高。治疗后铁蛋白和胆红素无显着改善。药物副作用需注意血栓事件。

关键词： 全基因组甲基化测序(WGBS)   骨髓   ERF   RP11-196G18.23   表观遗传学   长链非编码RNA介导的转录失活  

摘要： 背景与目的β地中海贫血(β-thalassemia,简称β地贫)是一种由11号染色体上β-珠蛋白基因发生突变或大片段缺失而导致的单基因遗传性血液病,具有致死致残的特点,主要分布在热带和亚热带地区。有研究报道重新开放HbF(fetal hemoglobin,胎儿血红蛋白)的表达可以缓解β地贫患者的临床表型。然而,在HbF的调控研究领域,目前结合转录因子和表观遗传学修饰因素特别是甲基化的研究报道较少。本研究将集中关注表观遗传因素特别是甲基化修饰在HbF调控过程的作用。设计和方法一、研究对象本研究入组了 6例β0/β0地中海贫血患者,并根据HbF的水平分为高HbF组(3 例,HbFH;9.0±0.1 g/dL)和低 HbF 组(3 例,HbFL:0.3±0.1 g/dL);HbFH组病人均为中间型β地贫,而HbFL组均为重型地贫。采取患者髓细胞并用CD235a磁珠分离有核红细胞用于DNA和RNA的提取,然后进行全基因组甲基化测序(Whole genome bisulfite sequencing,WGBS)和 RNA 测序(RNA-seq)。随后本研究招募了 13例HbFH β0/β0患者和34例HbFL β0/β0患者作为验证队列,提取有核红细胞DNA用于焦磷酸测序检测甲基化水平。二、遗传和功能分析采用高效液相色谱检测血红蛋白;采用trizol法提取RNA;遗传变异的分析采用PCR测序方法进行。采用亚硫酸氢盐测序和DNA靶向甲基化方法进行DNA甲基化分析。通过CRISPR/Cas9系统在HUDEP-2和CD34+造血干细胞中敲除ERF,在顺式和反式沉默来研究ERF对γ-珠蛋白表达及其病理机制的影响。将敲除ERF后的CD34+造血干细胞移植到免疫缺陷小鼠实验在体内验证ERF调控γ-珠蛋白的表达。染色质免疫沉淀反应(ChIP),电泳迁移率实验(EMSA)和双荧光素酶报告实验被用来确定ERF结合在β-珠蛋白基因簇上。采用荧光原位杂交(FISH)和编码能力分析方法测定RP11-196G18.23的性质。采用RNA纯化分离染色质(ChIRP)、免疫印迹(immunoblotting)、RNA免疫沉淀(RIP)等方法验证DNMT3A、RP11-196G18.23与 ERF 的关系。三、生信分析和统计分析WGBS和RNA-seq的数据分析分别使用BSseq和NOIseq包进行。本研究采用SPSS v20软件进行数据分析。结果与讨论通过全基因组甲基化测序和RNA测序和分析,本研究发现了一个转录因子ERF可抑制HbF的表达。ERF缺失或失活可显著增加人红细胞内HbF的表达。ERF抑制γ-珠蛋白表达是独立于HbF调控因子BCL11A和ZBTB7A,通过直接结合到β-珠蛋白基因簇上来实现的。本研究进一步鉴定了一个与高HbF相关的长链非编码RNA-RP1l-196G18.23,其可与ERF启动子特异性结合并富集DNMT3A到ERF启动子上,驱动ERF启动子高甲基化介导低表达,进而解除ERF对γ-珠蛋白表达的抑制,提高HbF水平。基于表观遗传修饰介导的ERF失活可开放γ-珠蛋白基因表达,从而改善β-重型地贫的严重程度。本研究的发现提示ERF和RP11-196G18.23可能是血红蛋白病的治疗靶点。

关键词： 云南省漾濞地区   育龄人群   地中海贫血   基因分析  

摘要： 目的:调查云南省大理漾濞地区婚检、孕检、产检育龄人群地中海贫血的现状,了解云南省大理漾濞地区地中海贫血分型特点,为本地区的妇幼保健工作提供科学依据。方法:1.选用流行病学现状研究样本含量估计的公式,确定调查样本例数的范围,采取分层随机抽样的方法,对云南大理漾濞地区婚检,孕检,产检的育龄人群进行外周血采样;2.对1550例样本,进行醋酸纤维薄膜电泳方式筛查地中海贫血表型阳性样本;3.采用Gap-PCR和PCR-RBD方法对阳性样本进行ɑ或β地中海贫血的基因分型检测,确定国内常见的3种α-地贫缺失突变,3种α-地贫非缺失突变及17种β-地贫突变的类型及特征;4.对地贫阳性样本进行G6PD突变检测,调查地贫是否合并G6PD突变情况。结果:1.云南省大理漾濞地区婚检、孕检、产检的育龄人群1550例样本中,初筛表型阳性样本28例,其中表型为β地中海贫血27例,表型为α地中海贫血1例。2.云南省大理漾濞地区地中海贫血初筛总阳性携带率为1.81%,其中β地中海贫血初筛阳性携带率占1.74%,α地中海贫血初筛阳性携带性占0.07%;***-RBD方法对所有表型为β的阳性样本检测均提示基因突变在β位点(GAG→AAG);Gap-PCR方法对表型为ɑ的阳性样本检测为基因片段缺失,为Hb H(-α/--)。4.本地区地贫阳性样本存在1例G6PD突变情况。结论:1.云南省大理漾濞地区地贫以β地中海贫血为主,占1.74%;2.β地中海贫血基因突变位点在β位点(GAG→AAG),即CD26型;3.本地区存在地贫与G6PD合并突变情况。

关键词： 地中海贫血   毛细管电泳法   糖化血红蛋白   血红蛋白A2  

摘要： [目 的]探讨地中海贫血对毛细管电泳法(Capillarys 2 Flex Piercing,C2FP)糖化血红蛋白检测系统的影响;探讨毛细管电泳法糖化血红蛋白系统和毛细管电泳法血红蛋白电泳系统的血红蛋白A2(Hemoglobin A2,HbA2)的检测结果对于筛查地中海贫血的应用价值,选取适用于本实验室以这两种检测系统的HbA2结果为指标筛查α-和β-地中海贫血的最佳截断值。[方 法]收集昆明医科大学第二附属医院2019年8月1日至2020年1月17日进行常规地中海贫血基因检测(PCR+导流杂交法)的患者相关的临床资料和实验室检查结果,将78例基因检测结果正常的健康体检者作为对照组,将85例确诊为地中海贫血的患者作为地贫患者组(包括α-地中海贫血患者50例,以及β-地中海贫血患者35例)。使用C2FP糖化血红蛋白检测系统进行糖化血红蛋白(Glycosylated hemoglobin,HbAlc)的检测,比较对照组与α-地中海贫血患者组和β-地中海贫血患者组的HbAlc结果,分析地中海贫血对毛细管电泳HbAlc检测系统的影响;分析比较对照组与α-地中海贫血患者组及β-地中海贫血患者组在C2FP HbAl c检测系统和C2FP血红蛋白电泳检测系统的HbA2结果,分别绘制ROC曲线以选取两个系统适用于本实验室筛查α-和β-地中海贫血的HbA2最佳截断值,分析C2FP两个HbA2检测系统的HbA2值对筛查地中海贫血的价值。[结 果](1)在85例地中海贫血患者中,27例静止型α-地中海贫血和23例轻型α-地中海贫血的HbAlc结果与对照组的差异有统计学意义,35例轻型β-地中海贫血的HbAlc检测结果与对照组无统计学差异,静止型和轻型α-地中海贫血会使HbAlc的检测结果升高,轻型β-地中海贫血对C2FPHbAlc检测系统的HbAlc结果不产生影响。(2)使用C2FPHbAlc检测系统筛查静止型和轻型α-地中海贫血,经绘制ROC曲线分析,得到曲线下面积仅为0.387,小于0.5,所以认为该系统的HbA2结果对静止型和轻型α-地中海贫血患者的诊断意义不大;以HbA2结果作为筛查其余轻型β-地中海贫血的诊断指标,诊断准确性较高,曲线下面积为1.000,当HbA2>2.95%时,灵敏度为100.0%,特异性为100.0%,约登指数最大,C2FPHbAlc检测系统不仅能定量检测HbAlc,还可以同时提供HbA2的检测结果以筛查轻型β-地中海贫血。在C2FP血红蛋白电泳检测系统中,静止型和轻型α-地中海贫血,经ROC曲线分析显示曲线下面积仅为0.345,小于0.5,所以认为该系统的HbA2结果对静止型和轻型α-地中海贫血患者的诊断意义不大;以HbA2结果作为诊断指标进行β-地中海贫血的筛查,曲线下面积为0.988,诊断准确性较高,当HbA2>3.15%时,灵敏度是97.1%,特异性是100.0%,此时的约登指数最大。[结 论]通过C2FPHbAlc检测系统进行HbAlc值的检测,静止型和轻型α-地中海贫血会使HbAlc的检测结果升高,轻型β-地中海贫血对HbA1c结果没有影响。使用C2FPHbAlc系统的HbA2检测值作为筛查地中海贫血的指标,对于静止型和轻型α-地中海贫血的ROC分析得到的曲线下面积仅为0.387,小于0.5,诊断意义不大,对于筛查轻型β-地中海贫血的最佳截断值是HbA2>2.95%,诊断意义较高。以C2FP血红蛋白电泳系统的HbA2结果对地中海贫血进行筛查,静止型和轻型α-地中海贫血经ROC分析得到曲线下面积仅为0.345,诊断意义不高,以该指标筛查轻型β-地中海贫血的最佳截断值是HbA2>3.15%,有较高的诊断意义价值。

关键词： 地中海贫血   基因型   红细胞参数   铁蛋白   儿童  

摘要： 目的分析α-SEA型、IVS-Ⅱ-654型与CD-41/42型地中海贫血基因携带者红细胞参数与血清铁蛋白值的差异,针对性地采取各种临床预防与治疗措施。方法对厦门大学附属妇女儿童医院儿科收治的586例轻型地中海贫血患儿开展病例对照研究,检测其基因型、红细胞参数与血清铁蛋白值。结果轻型β地中海贫血组(IVS-Ⅱ-654型与CD-41/42型)患儿与α-SEA组比较,血红蛋白浓度(Hb)、红细胞比容(HCT)、红细胞平均体积(MCV)及平均红细胞血红蛋白含量(MCH)明显降低(P<0.05);红细胞计数(RBC)、血清铁蛋白(SF)明显升高(P<0.05);IVS-Ⅱ-654型与CD-41/42型患儿比较,两组间的各个红细胞参数与血清铁蛋白值均无显著性差异(P>0.05)。结论轻型β地中海贫血者与α-SEA型比较,"无效造血"现象更为严重,铁负荷明显增加。应对各种轻型地中海贫血患儿实施动态化个体化管理。