关键词： β-地中海贫血   HBB:c.-113A>G杂合   高通量测序   基因突变  

摘要： 目的对海口市人民医院血液科一例47岁男性经临床检查存在贫血、脾大等症状的疑似β地中海贫血的先证者进行病因确诊,并对其家系成员进一步研究分析。方法采用血常规、脾脏B超、血红蛋白电泳、跨越断点PCR(Gap-PCR)和高通量测序(next generation sequencing,NGS)技术对先证者和5名家系成员进行检测,评估他们贫血、脾脏肿大和基因突变等方面的情况,采用Sanger测序法对高通量测序所检测出的基因突变进行验证,并通过家系连锁分析确定所检测基因突变的遗传方式。结果先证者同时检测出HBB:c.2T>G和HBB:c.-113A>G两种突变,其中HBB:c.2T>G为常见β突变,HBB:c.-113A>G为新的突变,其母亲及儿子均检出HBB:c.-113A>G杂合突变,其女儿检出HBB:c.2T>G杂合突变,除先证者外其他家系成员并未表现出明显的地贫症状。结论HBB:c.2T>G杂合复合HBB:c.-113A>G杂合突变会加重β地贫的临床表现,进而表现出脾大症状,该基因突变的发现,丰富了地贫基因突变数据库。全面的检测技术应用于地贫常规检测对临床病人的病因确诊、治疗和遗传咨询都具有重要意义。

关键词： 地中海贫血   高通量测序   流行病学   基因突变  

摘要： 目的:调查重庆市渝中区育龄人群地中海贫血携带率,了解本地区地中海贫血基因的分布。方法:对重庆渝中区1000对孕前检查夫妇进行调查,抽取外周静脉血,采取高通量测序技术进行地中海贫血基因的筛查。结果:1000对孕前检查夫妇中,地中海贫血基因携带率为7.45%,α地中海贫血基因携带率为4.60%,β地中海贫血基因携带率为2.10%。其中α地中海贫血基因型主要为αα/-α3.7(53.26%)、αα/--SEA(23.91%)、αα/-α4.2(11.96%);β地中海贫血基因型主要为Codons17(A>T)(26.19%)、Condon41/42(-TTCT)(26.19%)、IVS-Ⅱ-654(C>T)(14.29%)。同时,检测出3例α、β复合型地中海贫血,3对同型地中海贫血基因夫妇,新发现基因5种12例。结论:重庆市渝中区为地中海贫血高发区,基因突变类型较为多样,在孕前对备孕夫妇进行地中海贫血筛查,对提高出生人口质量有重要的意义。

关键词： 液相芯片技术   地中海贫血   国家参考品   突变  

摘要： 目的采用基于液相芯片技术的地中海贫血(α/β型)基因检测试剂盒,对地中海贫血核酸检测国家参考品进行检测,评价该技术方法试剂盒的质量。方法对32例地中海贫血核酸国家参考品进行PCR扩增,将PCR产物杂交后,使用Luminex Magpix平台进行地中海贫血基因突变的检测,通过判断其检测结果与国家参考品是否一致来评估该方法检测国家参考品的准确性。结果 32例国家参考品检测结果准确,试剂盒检测范围内的国家阳性参考品均为相应基因型别,范围外的国家阳性参考品和国家阴性参考品均为野生型,检测限不高于25ng。结论基于液相芯片技术的地中海贫血(α/β型)基因检测试剂盒(PCR-流式荧光杂交法),完善了地中海贫血基因突变的检测方法,能够符合地中海贫血核酸检测国家参考品的要求。

关键词： α地中海贫血   成本效益   产前诊断   超声  

摘要： 目的是对一种α地中海贫血无创产前诊断方案的进行成本效益分析。方法是对α地中海贫血高危孕妇统计2种产前诊断方法(传统的侵入性有创产前诊断方法与无创产前诊断方案)的费用。结果是5年期间,1923名α地中海贫血纯合子高危的妊娠纳入了无创产前诊断研究。其中1452名孕妇由于超声检查结果正常而避免了侵入性检查。其余471人因胎儿超声异常而建议行侵入性检查。进行无创产前诊断的总成本是1160680元,而进行了有创检查的总费用是2763150元。在未受影响的妊娠中预计总节约1696700元,每例孕妇人均净节约1168元。结论为在α地中海贫血流行地区开展无创产前诊断项目是符合成本效益的,同时有效地避免了在未受影响的妊娠中进行有创检查。

关键词： αβ复合型地中海贫血   基因型   血液学  

摘要： 目的探讨广州北部地区αβ复合型地中海贫血人群基因突变类型和血液学特征。方法选择2018年1月至2019年12月在广州市花都区妇幼保健院进行地中海贫血基因检测的门诊、住院和体检的广州北部地区14600例受检者,采用血常规联合血红蛋白电泳分析对受检者进行地中海贫血血液学筛查,对于初筛阳性者采用跨越断裂点聚合酶链式反应(Gap-PCR)+导流杂交法检测常见α和β-地中海贫血基因型,对于少见型则采用三联体电泳或基因测序法进一步检测,在αβ复合型地中海贫血组(n=254)患者中选择临床表现为β-地中海贫血的患者(n=250),与采用随机数字表法选取的单纯β-地中海贫血组(n=250)进行血液学指标比较。结果在14600例受检者中检测出254例αβ复合型地中海贫血基因携带者,群体发生率为1.74%(254/14600);共检出41种αβ复合型地中海贫血基因型,以--SEA/αα复合βIVS-Ⅱ-654/βN最多(40例),其次是--SEA/αα复合βCD41-42/βN(32例),-α3.7/αα复合βCD41-42/βN(25例)居第三位;在254例αβ复合型地中海贫血患者中,有250例患者表现为β-地中海贫血,对其红细胞(RBC)[(5.62±0.74)×1012/L]、平均红细胞体积(MCV)[(67.64±5.52)fl]、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)[(21.68±1.73)pg]与单纯β-地中海贫血组[(6.10±0.85)×1012/L,(63.61±5.01)fl,(20.49±1.89)pg]比较,均差异有统计学意义(t=4.86,-6.14,-5.24;均P<0.01);而血红蛋白(HGB)[(121.52±14.67)g/L]和血红蛋白A2(HbA2)[(5.23±0.51)%]与单纯β-地中海贫血组[(124.42±15.20)g/L,(5.29±0.55)%]比较,均差异无统计学意义(t=1.55,0.79;均P>0.05)。结论广州北部地区αβ复合型地中海贫血基因型复杂多样,发病率高,具有高度的遗传异质性和多样性,缺乏特异性的血液学指标。血液学表型与基因检测结果不相符时,要考虑存在罕见型地中海贫血的可能,αβ复合型地中海贫血基因型的确诊还需依靠分子诊断的方法。

关键词： 地中海贫血   β-珠蛋白基因   Gap-PCR   Sanger测序  

摘要： 目的对常规基因检测结果与表型不符的β-地中海贫血(简称β-地贫)高风险患者(MCV<80fl、MCH<27pg,HbA2>3.5%)行β-珠蛋白基因分析,降低β-地贫的漏检率及误诊率,同时了解江西地区罕见β-地贫的基因突变类型及频率,丰富江西地区β-地贫基因突变谱。方法采用跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)与Sanger测序技术对24例表型与基因型不符的β-地贫高危患者行β-珠蛋白基因大片段缺失与点突变分析。结果 24例患者均检出罕见β-珠蛋白基因突变,共9种突变类型。其中缺失型突变4例,β-台湾型缺失地贫(Taiwan Residents)及β-东南亚缺失地贫(SEA-HPFH)各2例。罕见点突变型20例,共7种突变类型。点突变CD54-58(-TATGGGCAACCCT)β0杂合突变人次共计8例,检出率高达33.3%(8/24),-31 (A>G)β+杂合突变人次共计3例,检出率高达12.5%(3/24)。结论江西地区罕见β-地贫基因突变类型中,CD54-58(-TATGGGCAACCCT)β0突变与-31(A>G))β+突变频率较高;对表型与基因型不符的β-地贫高危患者行进一步基因分析可发现罕见β-地贫基因突变,为β-地贫携带者家系的遗传咨询与产前诊断提供重要支持。

关键词： 网织红细胞血红蛋白含量   地中海贫血   孕妇   缺铁性贫血   补铁治疗  

摘要： 目的探讨网织红细胞血红蛋白含量(Ret-He)对轻型地中海贫血孕妇铁缺乏的诊断及疗效评价。方法选取2017年1月—2019年10月绵阳市第三人民医院和绵阳市中心医院门诊产科建卡孕妇550例作为研究对象,其中铁缺乏孕妇200例(ID组)、缺铁性贫血孕妇105例(IDA组),轻型地中海贫血合并缺铁孕妇81例(TT1组),轻型地中海贫血未合并缺铁孕妇32例(TT0组)及同期健康孕妇132例(对照组),对各组进行Ret-He、Hb、MCV、MCH、MCHC、Ret%等血液学指标及SF水平检测,对所得数据应用ROC曲线进行诊断轻型地中海贫血孕妇铁缺乏的价值评价,同时从ID组、IDA组、TT1组选取参与铁剂治疗的缺铁孕妇,比较铁剂治疗前后各观察指标的变化。结果TT1组的Hb、MCHC及Ret-He均低于其他四组,差异有统计学意义(P<0.05),SF水平低于ID、TT0、对照三组(P<0.05),而与IDA组差异无统计学意义(P>0.05);ID组的Hb、MCH、MCHC及Ret-He均高于IDA、TT1、TT0三组(P<0.05);TT0组的SF水平与对照组差异无统计学意义(P>0.05);ROC分析显示,在临界值为22.9 pg时,Ret-He对地中海贫血孕妇铁缺乏的诊断灵敏度和特异度分别为99.0%和79.0%;参与铁剂治疗的轻型地中海贫血合并缺铁孕妇、ID孕妇及IDA孕妇在补铁治疗后Ret-He、Hb及SF均增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论轻型地中海贫血孕妇铁缺乏时Ret-He含量低于普通孕妇,Ret-He相较其他血液学指标,对轻型地中海贫血孕妇铁缺乏的诊断准确性更高。Ret-He不仅可作为轻型地中海贫血孕妇铁缺乏的筛查诊断指标,还可用于轻型地中海贫血孕妇铁剂治疗的监测。

关键词： 地中海贫血   产前筛查   产前诊断   地中海贫血患儿  

摘要： 目的探讨地中海贫血产前筛查模式对重型地中海贫血患儿的诊断价值。方法8258例产检孕妇,对1042例血常规平均红细胞体积(MCV)和平均红细胞血红蛋白含量(MCH)指标异常的孕妇行血红蛋白电泳筛查,889例血红蛋白电泳异常的孕妇行地中海贫血基因检测,同时对筛查阳性的孕妇丈夫行地中海贫血筛查和基因诊断,统计产前诊断结果。结果1024例血常规MCV降低和MCH降低的筛查患者中,889例血红蛋白电泳异常行地中海贫血基因检测,与基因检测结果比对,符合率分别为:α地中海贫血55.59%,β地中海贫血97.25%。155例孕妇行产前诊断,实施羊膜腔穿刺术145例,确诊重型地中海贫血25例;实施脐血穿刺术5例,确诊重型地中海贫血巴氏水肿胎5例;实施绒毛活检5例,确诊重型地中海贫血巴氏水肿胎2例。结论在地中海贫血的高发区,规范的地中海贫血产前筛查模式可有效检出存在地中海贫血高危因素夫妇并进行遗传咨询和实施产前诊断,从而阻断重型地中海贫血患儿的出生。

关键词： 地中海贫血   毛细管电泳   基因诊断  

摘要： 目的探讨基于毛细管电泳技术检测的HbA2值在各类型地中海贫血(简称地贫)人群中的分布情况,评价其临床应用价值,并寻找最佳的截断值。方法对11122例毛细管电泳结果进行回顾性分析,观察HbA2在各组人群中的分布,并用统计学方法进行多重对比和多组间两两成对比较;通过参数评估毛细管电泳技术的筛查性能;根据受试者工作曲线,确定HbA2的最佳截断值。结果HbA2中位数在各组的分布情况多重比较,差异具有统计学意义(P<0.01);两两成对比较中,除β地贫与αβ复合型地贫分布情况差异无统计学意义(P=1.000)外,其余各组之间两两比较,差异均具有统计学意义(P<0.01)。HbA2对β地贫的诊断效率明显优于α地贫。HbA2在α、β地贫中的最佳cut-off值分别为2.55%和3.35%。结论HbA2值在α、β地贫和阴性对照组中分布情况存在明显差异,适用于地贫筛查,尤其对β地贫的筛查效率较高。

关键词： 毛细管离心法   定期输血地贫患者   RhCcEe血型   混合视野  

摘要： 目的分析比较不同血型鉴定方法对定期输血地贫患者RhCcEe表型检出率,探讨毛细管离心法鉴定地贫患者血型混合视野的可行性。方法 PCR-SSP法对随机收集的100例地贫患者外周血进行RhCcEe基因分型,再分别采用微柱凝胶卡直接离心法、毛细管离心结合微柱凝胶卡法及毛细管离心改良法对定期输血的地中海贫血患者外周血进行RhCcEe血型鉴定,三种方法检测RhCcEe血型的结果与PCR-SSP法检测结果比较,分析各种方法鉴定RhCcEe血型的检出率。结果 100例地贫定期输血患者外周血样本,微柱凝胶卡直接离心法可鉴定出18例RhCcEe表型,82例呈混合视野或分层,检出率为18%(18/100);对82例呈混合视野样本,毛细管离心结合微柱凝胶卡法可鉴定出RhCcEe血型28例,54例仍存在不同程度的混合视野或分层现象,检出率为34.2%(28/82);从82例呈混合视野的地贫患者中,毛细管离心改良法可鉴定出53例,29例呈不同程度的混合视野,检出率为64.6%(53/82),统计分析3种方法的检出率,差别有统计学意义(P<0.05)。分层统计分析改良法对不同输血间隔期患者RhCcEe血型检出率,发现随着输血间隔期延长,地贫患者RhCcEe血型的检出逐渐升高(P<0.05)。结论 PCR-SSP法鉴定地贫定期输血患者外周血RhCcEe血型基因可行但需具备一定实验条件;毛细管离心结合微柱凝胶卡法简便且快速,但检出率较低;毛细管离心改良法检出率随着输血间隔期延长而提高,但临床应用仍需探索改良。