关键词： 缺铁性贫血   地中海贫血   血常规检测   鉴别  

摘要： 目的探讨血常规检测鉴别缺铁性贫血与地中海贫血的效果,评价其应用价值。方法将2017年9月至2018年9月本院收治的27例缺铁性贫血患者纳入对照组,另选取同期本院收治的27例地中海贫血患者纳入观察组。所有患者均给予血常规检测,比较分析两组各项血常规检验指标差异。结果观察组Hh、MCH、MCHC指标均高于对照组,RDW、RBC、MCV均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论血常规检测有助于帮助临床鉴别缺铁性贫血与地中海贫血,且可提高贫血的鉴别符合率,具有较高的临床应用价值。

关键词： 血红蛋白电泳   地中海贫血   玉林地区   检出率  

摘要： 对玉林地区231例血红蛋白电泳结果进行分析,了解该地区地中海贫血人群的检出率。方法:选取本院门诊妇科,妇女保健科,妇科等科室231例育龄期人群为研究对象,用北京金桑特SH2040型全自动琼脂糖凝胶电泳系统进行血红蛋白电泳,得出初步判断结果,以地中海贫血基因检测为金标准。结果:基因诊断显示,126 例正常,电泳符合率高达88.89%,34例α-地中海贫血(静止型),电泳符合率为8.82%,38例α-地中海贫血(轻型-东南亚型),电泳符合率为71.05%。2例α-地中海贫血(中间型),电泳符合率为50%,29例β-地中海贫血(轻型),电泳符合率高达93.10%,2例β-地中海贫血(中/重型),电泳符合率达100%。结论:血红蛋白电泳方法简便,可接受程度高,在正常人群、α-地中海贫血(轻型-东南亚型)、β-地中海贫血中检出率较高,能快速有效筛查出地贫基因携带人群,为产前诊断及遗传咨询提供可靠依据。

关键词： 血常规   地中海贫血   缺铁性贫血   诊断  

摘要： 目的 评价血常规检验在鉴别地中海贫血、缺铁性贫血中的效果.方法 回顾性分析2018年3月～2021年3月期间巨野县中医医院接诊的110例贫血患者,其中观察组55例缺铁性贫血患者,对照组55例地中海贫血患者,以上参与研究的对象均接受血常规检验,对比两组贫血患者的红细胞计数(red blood cell count,RBC)、红细胞平均体积(mean corpuscular volume,MCV)、血红蛋白(hemoglobin,Hb)、红细胞平均血红蛋白量(mean corpuscular hemoglobin,MCH)、红细胞计数/红细胞平均体积(RBC/MCV)、红细胞比容(hematocrit,HCT)、红细胞分布宽度(red blood cell distribution width,RDW)、红细胞平均血红蛋白浓度(mean corpuscular hemoglobin concentration,MCHC).结果 对照组的RBC、MCV、MCH大于观察组,对照组的Hb小于观察组,差异具有统计学意义(P<0.05).对照组的RBC/MCV、HCT大于观察组,对照组的RDW和MCHC均小于观察组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 血常规检验在贫血筛查中效果突出,通过RBC、MCV、Hb、MCH、RBC/MCV、HCT、RDW和MCHC等均可以作为鉴别诊断(地中海贫血、缺铁性贫血)的重要依据.

关键词： 缺铁性贫血   地中海贫血   红细胞参数  

摘要： 目的探讨血液检验红细胞参数对贫血的鉴别诊断价值。方法回顾性分析2018年6月至2019年8月本院收治的100例贫血患者临床资料,按照贫血类型不同分为缺铁性贫血组和地中海贫血组,每组50例。比较两组血常规检验结果及血清铁蛋白(SF)检验结果。结果两组平均血红蛋白量(MCH)比较差异无统计学意义;与缺铁性贫血组比较,地中海贫血组平均红细胞红蛋白含量(MCHC)、血红蛋白(Hb)值较高,平均红细胞体积(MCV)、红细胞分布宽度(RDW)、红细胞(RBC)值较低,差异有统计学意义(P<0.05);缺铁性贫血组SF明显低于地中海贫血组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论血液检验红细胞参数应用于贫血鉴别诊断中价值较高,能够辅助诊断不同的贫血类型。

关键词： 地中海贫血   肺部磨玻璃影   肺部感染   CT   影像表现   白细胞   髓外造血  

摘要： 目的:探讨地中海贫血患者肺部CT表现,以减少误诊。方法:回顾性分析1例地中海贫血患者连续三年随访胸部CT的肺部影像表现及血象变化结果,结合文献分析其病因、影像学特点,讨论其鉴别诊断。结果:患者每次入院后经抗感染等对症治疗后,其胸部CT所示肺部磨玻璃影几乎无明显变化且白细胞数降低亦不明显。结论:患者肺部磨玻璃样变,及白细胞数明显升高,单用感染因素来解释可能并不充分,因该地中海贫血患者已出现了全身多处髓外造血情况,尤其是脊柱及肋骨周围;故考虑肺部磨玻璃样表现,可能多系髓外造血所至胸廓变形,肺组织受压,体积缩小,肺通气功能降低所致。

关键词： SUFU   单核苷酸多态性   造血干细胞移植   移植物抗宿主病  

摘要： 目的:探索患者SUFU(rs17114808)单个核苷酸多态性位点(SNP)的不同基因型对地中海贫血患儿异基因造血干细胞移植后GVHD(Graft-versus-host Disease,移植物抗宿主病)的影响。方法:对2018年10月至2020年11月在厦门大学附属中山医院血液科进行异基因造血干细胞移植的44例地中海贫血患儿进行基因型检测,在预处理前采集外周血标本,送检提取外周血基因组DNA,采用Taqman探针法检测该位点SNP基因型,并结合临床资料应用SPSS软件分析比较不同基因型组在移植后植入成功率、血细胞植活时间、急性GVHD总发生率及其受累器官、慢性GVHD及其受累器官、巨细胞病毒及EB病毒血症、尿BK病毒感染、细菌/真菌感染及总生存率等之间是否存在差异。结果:研究共纳入地中海贫血患儿44例,随访截止时间为2021年02月28日,无患儿资料缺失,中位随访时间15月(83天～29月),所有患者中位移植年龄为4岁(2岁～11岁),平均移植年龄为(4.8±2.4)岁。1年总生存率是95.4%,总共死亡2例,移植相关死亡率为4.55%。所有44例患儿的SUFU基因型中CC型有13例(29.55%),CT型23例(52.27%),TT型8例(18.18%),与欧洲个体的基因型频率分布差异较大。CC组、CT/TT两组1年生存率分别92.31%、96.77%。多因素Logistic分析提示,在移植后,CC组II-IV度急性GVHD的发生率为46.15%,显著高于CT/TT组(19.35%),且差异存在统计学意义(p<0.05)。两组在植入成功率、血细胞植活时间、急性GVHD总发生率及其受累器官、慢性GVHD及其受累器官、巨细胞病毒及EB病毒血症、尿BK病毒感染、细菌/真菌感染等方面均无显著差异(p>0.05)。结论:1、异基因造血干细胞移植是目前唯一可治愈输血依赖性地中海贫血的方法,干细胞移植后长期生存率达90%以上。2、在地中海贫血儿童患者中,SUFU(rs17114808)位点基因型的频率分布与欧洲个体差异较大,这可能与种族相关。3、患儿SUFU(rs17114808)单核苷酸多态性位点(SNP)基因型的差异对于地中海贫血患儿造血干细胞移植后GVHD总发生率无显著影响;多因素分析显示该位点基因多态性为CC可能是增加地中海贫血患儿移植后发生II-IV度a GVHD的不利因素。4、a GVHD发生及其严重程度是使尿BKV复制增加的危险因素。

关键词： 地中海贫血   异基因造血干细胞移植   嵌合体   移植物抗宿主病  

摘要： 研究背景及目的：　　地中海贫血是一组因一个或多个珠蛋白基因发生致病变异而打乱了正常的α珠蛋白和β珠蛋白生成比例的遗传性血红蛋白病。这种α/β链比例异常可导致未配对的链沉淀，并破坏骨髓中的红细胞前体（无效红细胞生成）以及血液循环中的红细胞（溶血）。因此患者有不同程度的贫血和髓外造血，进而导致骨骼变化、生长受损和铁过载。血红蛋白疾病是世界上最常见的单基因疾病，每年有33万受影响的婴儿出生，其中有17％患有地中海贫血。而优化红细胞输注和铁螯合疗法可显著改善地中海贫血患者的生存及生活质量。但是，与铁超负荷有关的并发症不能通过铁螯合疗法完全解决，还需要维持长期输血。　　异基因造血干细胞移植是指预先通过放疗、化疗和免疫抑制等预处理方案后，输注健康个体（供者）收集的造血干细胞，使之重新建立正常造血及免疫功能的一种治疗方法。目前，异基因造血干细胞移植是地中海贫血的治愈性疗法之一，该方法已在世界内广泛使用。但是，由于缺乏相合的供体，许多患者无法使用该选项，并且发生危及生命的并发症和移植失败的风险很高。只有妥善解决多种潜在的移植后风险和并发症，才能确保最佳预后。早发型混合嵌合体具有大量残留的宿主细胞，被认为是接受异基因造血干细胞移植治疗地中海贫血患者的移植排斥反应的信号。　　本研究旨在探究基于预处理方案WZ-14-TM的地中海贫血患者，在异基因造血干细胞移植后建立基于嵌合分析的分级管理，防止移植物排斥并最大限度地降低与治疗相关的移植物抗宿主病的风险，改善其预后。　　对象与方法：　　本研究入组了2015年10月至2020年6月期间于温州医科大学附属第一医院血液内科的96例接受异基因造血干细胞移植治疗的地中海贫血患者，并对其进行了一项回顾性研究。通过卡方检验或Fisher精确检验比较分类变量，并将结果报告为频率和百分比。通过Kaplan-Meier方法估算OS和DFS。使用IBMSPSS统计版本26.0.0和GraphPadPrism8.0.1进行分析。　　结果：　　96位年龄2-15岁的地中海贫血患者接受了异基因造血干细胞移植。所有移植的患者均达到了供体植入。Ⅱ-Ⅳ级急性和慢性GVHD的发生率分别为8.3％和8.3％。有12位（12.5％）在移植后的某个时间点患有MC，中位随访时间为14个月（6-58个月）。首次嵌合体评估时（移植后+14天），所有患者均已达到完全嵌合体（CC）。随后，有6例患者在1至6个月内出现MC，4例患者在6个月至1年之间出现MC，其余86例CC患者在移植后13个月时出现MC。在移植后发生MC的6例患者中，没有一个移植失败或具有大于95％的供体嵌合体，但在整个随访过程中所有患者均保持为持续性MC。总体生存率（OS）和无地中海贫血5年生存率（DFS）均为100％。这一结果表明，WZ-14-TM方案对于接受非同胞异基因HSCT的地中海贫血患者是一种可行且安全的预处理方案。　　结论：　　基于同一种预处理方案WZ-14-TM的异基因HSCT地中海贫血的患者，通过嵌合体分析的干预措施可有效预防移植后混合嵌合地中海贫血患者的移植物排斥反应，并且不会增加与治疗相关的移植物抗宿主病。

关键词： β-地中海贫血   显性突变   移码突变   延长的β-链  

摘要： 研究背景与目的地中海贫血是最常见的单基因遗传病之一,主要分为两类:α-地中海贫血和β-地中海贫血。通常来说,β-地中海贫血是常染色体隐性遗传病,在携带者中仅表现出血液学异常,而纯合子以及复合杂合子的患者表现的最为严重并依赖定期输血。少数情况下会出现罕见的显性β-地中海贫血,这一类患者的α-珠蛋白基因正常,在仅携带一个突变的β-珠蛋白基因的情况下,其在临床上表现为中度至重度的溶血性贫血。这引起了我们的对显性β-地中海贫血的思考和重视。在本研究中,我们收集到一例由HBB基因上的新发突变导致的显性重型β-地中海贫血表型的案例,并对其进行分子学研究分析。材料与方法1.材料:我们的先证者是一名来自中国浙江台州三岁的男童,其表现为不明原因的严重贫血和脾肿大。2.实验方法:采集先证者及其家系成员的血液完成血型学表型分析、异丙醇实验和包涵体试验。通过靶向捕获二代测序技术检测到新突变位点,再设计引物扩增该片段,Sanger测序验证突变位点。对先证者与其父母之间进行亲子鉴定。收集先证者的毛囊、口腔拭子样本及其父亲的精液,提取DNA扩增β-珠蛋白基因验证先证者及其父亲是否存在嵌合。对突变位点进行物种保守性分析以及进行蛋白二级结构和三维结构的预测。构建HBB基因野生型和HBB:c.399delA突变型的过表达载体转染293t细胞,同时进行荧光定量PCR分析被转染细胞的HBB表达量,另外再通过Western-Blot分析HBB的翻译有没有影响。研究结果经二代测序和Sanger测序验证发现先证者携带一个全新的点突变HBB:c.399delA。血红蛋白电泳并未检测到先证者有异常血红蛋白,异丙醇实验和包涵体阴性。父母和哥哥的分子诊断结果表明并未携带该新突变。亲子鉴定证实先证者遗传了分别来自父母的两套遗传物质。先证者毛囊和口腔拭子的HBB基因型与血液样本一致,先证者父亲的精液中未检测到该新突变。物种保守性分析提示序列高度保守,蛋白结构预测结果提示HBB:c.399delA的β-珠蛋白在羧基端延长了10个氨基酸。细胞实验证实HBB:c.399delA能影响β-珠蛋白基因翻译。结论本研究发现了一例在HBB基因3号外显子上的移码突变引起的重型β-地中海贫血。我们的研究表明了新突变报告的重要性并阐述了显性β-地中海贫血的潜在机制,扩展了β-地中海贫血的突变谱,进一步了解该疾病的异质性。

关键词： 地中海贫血   维生素D   干细胞移植   移植物抗宿主病   并发症  

摘要： 目的:维生素D参与人体内多种免疫细胞的增殖分化,维生素D水平对造血干细胞移植结果有一定影响。本文对64例重型地中海贫血患儿血清25羟维生素D3水平进行测定,分析维生素D水平不足对造血干细胞移植结果的影响,为预防造血干细胞移植后不良事件,改善地贫儿童移植后生存情况提供参考。方法:本实验在2018年8月1日至2020年12月31日之间,共检测了就诊于厦门大学附属中山医院血液科64例行造血干细胞移植的重型地中海贫血患儿、40例于厦门大学附属中山医院儿科进行健康体检儿童25羟维生素D水平。并将患病儿童测得的25羟维生素D水平以50nmol/l为界限分为<50nmol/l(不足组)、≥50nmol/l(非缺乏组)两组,应用SPSS数据统计分析软件比较两组在移植后植入情况、严重细菌及真菌感染、EMV感染、CMV感染、重度口腔黏膜炎、中枢神经损伤、血栓性相关疾病、OS、急慢性GVHD发生率以及严重程度及其他并发症等事件之间是否存在关系及差异,并比较了健康儿童与地中海贫血儿童维生素D不足的发生是否存在差异。结果:研究共纳入64例移植患儿,随访结束时间为2021年1月20日,其中无患儿随访及资料缺失。中位随访时间为19个月(100天至31月)。所有患儿移植前平均血清25羟维生素D水平为60.32±19.75 nmol/1。25羟维生素D不足为27例(42.19%)。总生存率和无地贫生存率分别为96.87%和100%。总共死亡病例为2例,移植相关死亡率为3.13%。维生素D非缺乏组与维生素D不足组的OS分别为100%、92.59%;两组在造血重建时间、植入不良/失败、真菌和细菌感染、CMV感染、重度口腔黏膜炎、OS等方面比较,P值均>0.05,无显著差异,在移植后aGVHD、重度aGVHD、cGVHD、EBV感染等比较,P值<0.05,有显著差异。研究并纳入了 40例健康体检儿童,其中25羟维生素D不足为8例(20.00%);患儿组25羟维生素D不足为27例(42.19%),P值小于0.05,有显著差异。结论:(1)地中海贫血患儿25羟维生素D不足的发生率显著高于健康儿童,具有统计学意义。(2)与维生素D非缺乏组相比,维生素D不足地中海贫血患儿行造血干细胞移植后aGVHD、重度aGVHD、cGVHD以及EBV感染的发生率更高。(3)25维生素D水平对地中海贫血儿童造血干细胞移植植入率、总生存率没有影响。(4)25羟维生素D对地中海贫血儿童造血干细胞移植后细菌、真菌的发生没有显著统计学意义。

关键词： 地中海贫血   诱导多能干细胞   诱导   分化   造血细胞  

摘要： 背景:在中国,地中海贫血(地贫)在广西、广东及海南地区高发,目前地贫的治疗方法主要依赖于输血治疗,但是输血治疗长期费用高,且患者医从性较差,导致地贫治疗效果不佳。此外,地贫也可以通过造血干细胞进行移植治疗,但是干细胞来源不足,且费用极高。地贫患者成熟红细胞中珠蛋白比例失衡,引起正常血红蛋白合成不足和过剩的珠蛋白肽链在红细胞内聚集形成不稳定产物,导致无效红细胞生成。但是,不同地贫基因缺陷类型的患者干细胞株在早期造血分化过程中是否具有差异,目前尚不清楚。因此,实验拟利用携带不同地贫基因缺陷程度且表型不同患者的i PSC进行造血诱导分化实验,研究不同地贫基因突变类型的干细胞株在早期造血分化中的差异,研究其相关机制,有望为地贫治疗的临床转化提供一定的理论依据。目的:探讨不同地贫基因突变类型的hiPSC在造血诱导分化过程中的差异,理清地贫不同基因突变的hiPSC在早期造血分化中的影响机制,为地贫诊断和治疗提供机制及理论依据。方法:本研究设置了实验组和对照组,实验组:轻型地贫及重型地贫患者羊水细胞来源的hiPSC。对照组:正常人羊水细胞来源的hiPSC。将不同基因突变的hiPSC进行全转录组测序,并分析其与造血相关的差异基因。同时,利用含有多种细胞因子的无饲养层无血清的单层培养进行hiPSC造血诱导分化。通过观察诱导过程中不同时期细胞形态、流式细胞仪检测及q-PCR实验比较在干性因子、造血相关因子及造血相关靶基因变化的差异。结果:首先,将来源于正常人、轻型地贫和重型地贫的hiPSC进行全转录组测序,分析筛选log2>2的基因进行与造血相关的文献检索,筛选出4个差异靶基因(CAT、EGR1、FOS、KLF4)与造血相关。与正常人hiPSC相比,CAT在轻型地贫和重型地贫的hiPSC表达上调,EGR1、FOS和KLF4在轻型地贫和重型地贫的hiPSC表达下调。本课题组对上述4个基因进行q-PCR验证,发现KLF4的表达同测序结果一致,CAT、EGR1和FOS与测序结果相反。同时,利用含有多种细胞因子的无饲养层无血清的单层培养进行hiPSC造血诱导分化。实验发现,与AF888细胞相比,AF076和AF091细胞在造血诱导分化过程中,细胞形态上未见明显差异。流式细胞术结果表明,CD34CD45、CD34CD31、CD34、CD31和CD45在三株细胞诱导的D10表达了类似百分比。q-PCR结果表明,干性因子OCT4、SOX2和NANOG的表达随着诱导进展逐渐下降,说明细胞明显发生分化。Brachyury在D0的表达没有统计学差异,在D3和D10均表达升高,尤其在D3,说明诱导分化到D3时,主要向中胚层分化,并随着时间的推移表达下降。RUNX1在D0表达下降,但在诱导的D3和D10表达逐渐升高,说明随着诱导的进行,造血不断增加。CD34和CD31在三株细胞诱导的D10均表达升高,且在重型地贫来源的hiPSC造血诱导分化的D10表达更多,说明造血诱导分化成功,并且较重的珠蛋白基因缺陷程度可能影响hiPSC的造血诱导分化过程,使造血能力增加。与AF888细胞诱导的D10相比,AF076细胞诱导D10的珠蛋白表达没有统计学差异,而AF091细胞诱导D10的ε-globin、Aγ-globin、Gγ-globin、α-globin、β-globin-N、β-globin-M表达均显著增加。在造血诱导的早期,重型地贫基因突变来源的细胞没有出现β-globin表达减少,反而增加;且胚胎期和胎儿期珠蛋白的表达均增加,说明重型地贫基因突变可能引起胚胎期和胎儿期的珠蛋白代偿性增加。实验发现在造血诱导的D10,重型地贫突变类型的细胞中的造血相关差异靶基因CAT、EGR1、FOS、KLF4均表达增加。结论:应用无饲养层无血清的造血诱导分化条件,在三株不同基因型的hiPSC中成功实现造血诱导分化。与正常人(αα/αα,βN/βN)的相比,重型地贫基因突变(αα/αα,β41-42M/β41-42M)的hiPSC造血诱导能力增加,而轻型地贫基因突变(αα/αα,β/β)的hiPSC未见明显差异。在重型地贫中,是什么因素导致KLF4的高表达尚有待进一步研究。